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中国比较医学杂志 2021年第1期31卷 22-26页

作者：孙晓峰刘涛曾贵荣陈勇超伍参荣乔江湖南中医药大学医学院组织学与胚胎学教研室长沙410208 湖南中医药大学医学院长沙410208 湖南省药物安全评价研究中心&新药药效与安全性评价湖南省重点实验室长沙410331 湖南中医药大学医学院免疫学教研室长沙410208 湖南中医药大学附属第一医院妇产科长沙410007

目的探讨磷酰胺氮芥(phosphoramide mustard,PM)诱导卵巢颗粒细胞损伤的机制及左归丸含药血清对受损颗粒细胞自噬与凋亡的影响。方法制备左归丸含药血清,体外培养原代大鼠卵巢颗粒细胞,待细胞生长至底壁的75%-80%时随机分为4组:①对照组... 详细信息

目的探讨磷酰胺氮芥(phosphoramide mustard,PM)诱导卵巢颗粒细胞损伤的机制及左归丸含药血清对受损颗粒细胞自噬与凋亡的影响。方法制备左归丸含药血清,体外培养原代大鼠卵巢颗粒细胞,待细胞生长至底壁的75%-80%时随机分为4组:①对照组(Control);②模型组(M);③左归丸含药血清组(10%ZGW);④模型+左归丸含药血清组(M+10%ZGW)、以PM处理②④组24 h建立化疗源性颗粒细胞损伤模型后,①②组中加入10%正常大鼠血清,③④组中加入10%左归丸含药血清,37℃,5%CO2条件下培养24 h。流式细胞术检测各组颗粒细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢自噬启动因子Beclin-1、微管结合蛋白轻链3(LC3B)、自噬受体蛋白P62、凋亡蛋白Bax、Caspase3的表达。结果与对照组相比:模型组细胞凋亡率明显上升,Beclin-1、LC3B、Bax及Caspase3蛋白表达量增高,P62蛋白表达量下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。10%左归丸含药血清可显著降低模型组颗粒细胞凋亡率,下调受损颗粒细胞中Beclin-1、LC3B、Bax及Caspase3蛋白的表达,上调受损颗粒细胞中P62蛋白的表达,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 PM诱导了卵巢颗粒细胞损伤,促进了颗粒细胞凋亡,激活了颗粒细胞自噬/溶酶体降解途径;10%左归丸含药血清可降低化疗损伤性颗粒细胞凋亡率,与自噬相关蛋白的表达相关。

关键词：左归丸含药血清磷酰胺氮芥颗粒细胞自噬凋亡

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左归丸对化疗源性卵巢早衰小鼠卵母细胞影响的实验研究

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时珍国医国药 2022年第4期33卷 787-790页

作者：孙晓峰黄欣怡曾文卓曾贵荣伍参荣乔江湖南中医药大学医学院组织学与胚胎学教研室湖南长沙410208 湖南中医药大学医学院湖南长沙410208 湖南省药物安全评价研究中心&新药药效与安全性评价湖南省重点实验室湖南长沙410331 湖南中医药大学医学院免疫学教研室湖南长沙410208 湖南中医药大学附属第一医院湖南长沙410007

目的研究左归丸对化疗源性卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)小鼠卵母细胞以及其体外成熟培养(in vitro maturation,IVM)和体外受精实验(In vitro fertilization,IVF)结局的影响。方法以环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)建立化疗源性POF小鼠动物模型。提取各组生发泡(germinal vesicle,GV)期未成熟裸卵(denuded oocytes,DOs)及MII期卵母细胞分别进行IVM和IVF实验。观察左归丸对模型组小鼠DOs和MII期卵母细胞数量的影响、对IVM实验时生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)和第一极体(the first polar body,PB1)排出的影响及对IVF实验时2-细胞率和囊胚率的影响。使用激光扫描共聚焦显微镜观察各组IVM14h时MII期卵母细胞纺锤体和染色体形态。结果左归丸能增加化疗源性POF小鼠GV期DOs和MII期卵母细胞数量、显著提高模型组IVM实验的GVBD率和PB1排出率、显著提升模型组IVF实验的2-细胞率和囊胚率及纠正CTX引起的MII期卵母细胞纺锤体形成异常。结论左归丸可改善卵母细胞数量和质量,从而促进体外胚胎发育,对化疗源性POF小鼠起到一定治疗作用。

关键词：左归丸化疗源性卵巢早衰卵母细胞体外成熟体外受精

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茶组植物新资源元宝山茶的毒理学安全性评价

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南方农业学报 2022年第2期53卷 299-313页

作者：陈涛林陈美丽葛智文廖寅平杨雪梅王熙富曾宏亮李明丹张征罗军武贵州大学茶学院贵阳550025 湖南农业大学茶学教育部重点实验室长沙410128 柳州市绿化建设发展中心广西柳州545001 柳州市农业技术推广中心广西柳州545003 融水县农业农村局广西柳州545300 柳州市林业科学研究所广西柳州545300 湖南省中医药研究院中药研究所长沙410006 湖南省药物安全评价研究中心/新药药效与安全性评价湖南省重点实验室湖南浏阳410331

【目的】评价茶组植物新资源元宝山茶(Camellia yungkiangensis ***)的饮用安全性,为该资源的高效开发利用提供科学依据。【方法】以元宝山茶资源的鲜叶固定样和红茶工艺样为材料,参照食品毒理学安全性评价程序,通过经口急性毒性试验、... 详细信息

【目的】评价茶组植物新资源元宝山茶(Camellia yungkiangensis ***)的饮用安全性,为该资源的高效开发利用提供科学依据。【方法】以元宝山茶资源的鲜叶固定样和红茶工艺样为材料,参照食品毒理学安全性评价程序,通过经口急性毒性试验、小鼠骨髓细胞微核试验、Ames试验和慢性喂养(30 d)亚急性毒性试验对其毒理学安全性进行评价。【结果】元宝山茶具有较高的茶多酚、可溶性糖及可可碱含量,但咖啡碱和游离氨基酸含量相对较低。元宝山茶鲜叶固定样提取物对ICR小鼠的半数致死剂量(LD_(50))为5.123 g/kg,其红茶工艺样提取物对小鼠的LD_(50)为7.573 g/kg;元宝山茶(红茶工艺样提取物)各剂量组在添加S_(9)与不加S_(9)时均未导致测试菌株(TA97a、TA98、TA100和TA102)出现致突变作用,即Ames试验结果呈阴性;在5.00 g/kg剂量(相当于人体推荐食用量的144倍)条件下,元宝山茶(红茶工艺样提取物)对小鼠骨髓细胞无明显毒性作用,表明小鼠骨髓细胞微核试验结果呈阴性。按0.87、1.74和3.47 g/kg的剂量经口灌胃红茶工艺样提取物给SD大鼠30 d,试验期间各剂量组大鼠的精神状态、行为活动、摄水、粪便、尿液及各腔道分泌物等均未见异常,也无大鼠死亡;其体重增重、摄食量、食物利用率、血液指标、血清生化指标、脏器湿重及脏/体比值等除个别指标与阴性对照组相比差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)外,绝大部分指标均无明显的剂量—反应关系,且均在正常范围内波动;剖检观察及组织病理学检查也未发现元宝山茶对大鼠产生明显毒性意义的病理变化。【结论】元宝山茶属于典型的高茶多酚、高可溶性糖、高可可碱及低咖啡碱的特异性资源,且具有很高的饮用安全性,按食品毒理学安全性评价标准属于无毒级食品,作为代茶饮料植物具有广阔的应用前景。

关键词：元宝山茶茶组植物毒理学安全性评价茶多酚半数致死剂量(LD )

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参附注射液对大鼠慢性心力衰竭的保护作用研究

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中南药学 2017年第12期15卷 1717-1721页

作者：李庆利曾贵荣谭志超王小青曾宏亮新药药效与安全性评价湖南省重点实验室长沙410331 浙江爱福泉药业有限公司浙江丽水373200 湖南方盛制药股份有限公司博士后工作站长沙410205

目的探讨参附注射液对阿霉素致大鼠慢性心力衰竭心脏功能的保护作用。方法腹腔注射阿霉素构建大鼠慢性心力衰竭模型,检测参附注射液静脉给药4周后动物心功能参数、心脏系数、血清脑钠肽(BNP)含量变化以及比较心室肌组织病理学改变。结... 详细信息

目的探讨参附注射液对阿霉素致大鼠慢性心力衰竭心脏功能的保护作用。方法腹腔注射阿霉素构建大鼠慢性心力衰竭模型,检测参附注射液静脉给药4周后动物心功能参数、心脏系数、血清脑钠肽(BNP)含量变化以及比较心室肌组织病理学改变。结果参附注射液可明显改善慢性心力衰竭模型大鼠的心脏系数和心室肌组织病理学形态,增加心率(HR)、左心室收缩压(LVSP)、左心室内压力上升最大速度(+dp/dt_(max))及左心室内压力下降最大速度(-dp/dt_(max)),降低左心室舒张末压(LVEDP)及血清BNP含量。结论参附注射液对阿霉素诱导的慢性心力衰竭具有明显保护作用。

关键词：参附注射液阿霉素慢性心力衰竭心功能参数

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菊苣酸对HL-60诱导的白血病小鼠的治疗作用及机制研究

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中国药理学与毒理学杂志 2016年第10期30卷 1065-1065页

作者：信红亚张宗利唐娅辉罗桂芳曾贵荣姜德建中南大学湘雅医院血液科湖南长沙410008 新药药效与安全性评价湖南省重点实验室湖南长沙410331 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地湖南长沙410208

目的菊苣酸是菊苣和紫锥菊中重要的活性成分,具有抗炎、调节免疫、抑制肿瘤等生物活性。前期体外实验发现,菊苣酸具有抑制人急性髓系白血病细胞株HL-60增殖活性和诱导其凋亡作用。本研究在联合免疫缺陷(SCID)小鼠,进一步观察菊苣酸对HL... 详细信息

目的菊苣酸是菊苣和紫锥菊中重要的活性成分,具有抗炎、调节免疫、抑制肿瘤等生物活性。前期体外实验发现,菊苣酸具有抑制人急性髓系白血病细胞株HL-60增殖活性和诱导其凋亡作用。本研究在联合免疫缺陷(SCID)小鼠,进一步观察菊苣酸对HL-60诱导的白血病小鼠的治疗作用及机制研究。方法选取5周龄的联合免疫缺陷(SCID)小鼠,鼠尾静脉注射对数生长期的HL-60细胞1×107个,建立HL-60/SCID小鼠人白血病模型。分别口服给予不同剂量的菊苣酸(25,50和100 mg·kg-1),共28 d。每周检查血常规,进行白细胞计数及骨髓涂片,记录生存时间。取濒死小鼠的脑、肝、脾、肾、骨髓及淋巴结肿块,进行组织病理学检测检测,免疫组化检测胱天蛋白酶3和p27的表达。结果 SCID小鼠动物接种HL-60后14 d外周血涂片可见HL-60细胞,白细胞计数第14、21和28天WBC分别为(3.5±1.1)×109L-1,(5.3±1.0)×109L-1和(15.1±3.7)×109L-1。濒死动物解剖后,可见肝、脾、肾、外周淋巴结均肿大,病理组织切片和细胞涂片显示有大量白细胞浸润,菊苣酸中高剂量组能显著减少上述器官肿大以及白细胞浸润。对照组生存期为(27.0±2.5)d,菊苣酸低中高剂量组分别为34.6±3.5,50.8±3.1和(70.8±4.1)d。免疫组化结果显示,组织中胱天蛋白酶3和p27蛋白表达显著增加。结论菊苣酸剂量依赖性延长白血病小鼠的生存时间,减少HL-60细胞浸润,其作用与增加胱天蛋白酶3和p27表达,诱导白血病细胞凋亡有关。

关键词：菊苣酸白血病模型胱天蛋白酶3

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蓝金口服液治疗上呼吸道感染(风热表证)的作用研究

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湖南中医药大学学报 2022年第9期42卷 1457-1464页

作者：刘学武张乐佳宋军吴颖邹振兴徐康平陈静张宗利新药药效与安全性评价湖南省重点实验室湖南长沙410331 湖南普瑞玛药物研究中心有限公司湖南长沙410331 湖南中嘉生物医药有限公司湖南长沙410336 中南大学湘雅药学院湖南长沙410013

目的探讨蓝金口服液治疗上呼吸道感染(风热表证)的药效学作用。方法分别采用体内、体外实验考察蓝金口服液的抗菌和抗病毒药效作用。采用小鼠乙酸扭体实验、小鼠热板法镇痛实验、酵母致大鼠发热实验、大鼠足趾汗液分泌实验分别考察蓝金... 详细信息

目的探讨蓝金口服液治疗上呼吸道感染(风热表证)的药效学作用。方法分别采用体内、体外实验考察蓝金口服液的抗菌和抗病毒药效作用。采用小鼠乙酸扭体实验、小鼠热板法镇痛实验、酵母致大鼠发热实验、大鼠足趾汗液分泌实验分别考察蓝金口服液的镇痛、解热和发汗作用。结果蓝金口服液对多种临床分离菌均有体外抑制作用。乙型溶血性链球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和白假丝酵母菌的MIC为25~200 mg/mL;蓝金口服液体外抑制呼吸道合胞病毒和甲型流感病毒感染细胞的IC_(50)分别为3.50、6.58 mg/mL,安全指数SI分别为194和147。体内研究显示,蓝金口服液能显著降低小鼠感染细菌(金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、乙型溶血性链球菌)或甲型流感病毒后的死亡率,显著延长生存天数,并显著减小感染甲型流感病毒后的肺指数。蓝金口服液具有显著的镇痛、解热和发汗作用。结论蓝金口服液对上呼吸道感染(风热表证)具有显著治疗效果。

关键词：上呼吸道感染风热表证蓝金口服液抗菌抗病毒镇痛解热发汗

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超长效氨氯地平皮下埋植制剂对自发性高血压大鼠肝、肾功能的影响

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医学临床研究 2022年第1期39卷 33-36页

作者：王文峰罗玉梅曾贵荣卢丽娟张秀婷罗玉君广东省深圳市龙岗区人民医院心内科广东深圳518172 湖南省药物安全评价研究中心(新药药效与安全性评价湖南省重点实验室) 湖南长沙410331 广东医科大学研究生院广东湛江524023

【目的】探讨超长效氨氯地平皮下埋植制剂对自发性高血压大鼠(SHR)肝、肾功能的影响。【方法】将有机高分子聚合物聚己内酯合成缓释载体,加入氨氯地平原料药制成可皮下埋植的氨氯地平缓释制剂。将SHR随机分成模型对照组(MC组)、空白载... 详细信息

【目的】探讨超长效氨氯地平皮下埋植制剂对自发性高血压大鼠(SHR)肝、肾功能的影响。【方法】将有机高分子聚合物聚己内酯合成缓释载体,加入氨氯地平原料药制成可皮下埋植的氨氯地平缓释制剂。将SHR随机分成模型对照组(MC组)、空白载体埋植组(BCE组)、氨氯地平溶液灌胃组(ASG组)、氨氯地平缓释制剂埋植组(ARI组),每组8只;正常对照组(NC组)为8只WKY大鼠。NC组及MC组SHR不予干预,将空白载体、氨氯地平缓释剂分别植入BCE及ARI组SHR的颈部背皮下,ASG组SHR予以氨氯地平溶液(0.45mg/kg)灌胃,干预12周。实验期间,定期测定大鼠体重、尾动脉血压,采集静脉血检测肝、肾功能。【结果】干预12周后,ASG组及ARI组SHR收缩压、舒张压及平均动脉压均低于MC组(P<0.01),与NC组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与MC组及ASG组比较,ARI组SHR血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)降低,但差异无统计学意义(P=0.054);各组SHR血清血肌酐(Cr)均有所升高,但与NC组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】皮下埋植超长效氨氯地平缓释制剂在平稳降低SHR血压的同时,对肝功能可能存在一定的保护作用,对肾功能的影响与口服药物无明显差别。

关键词：高血压大鼠疾病模型,动物氨氯地平/药理学肾功能试验肝功能试验

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杞丹方对糖尿病小鼠降血糖作用及机制研究

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南京中医药大学学报 2022年第6期38卷 504-510页

作者：冯一帆吴励萍张祎盈钱大玮段金廒宋孝雄吕高虹朱悦许惠琴南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏省方剂高技术研究重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023 江苏省中药药效与安全性评价重点实验室江苏南京210023

目的研究杞丹方对糖尿病小鼠降血糖作用并探讨相关机制。方法取SPF级ICR雄性小鼠,禁食16 h后腹腔注射四氧嘧啶120 mg·kg^(-1),5 d后禁食12 h测血糖,血糖值在10~25 mmol·L^(-1)为糖尿病造模成功。将造模成功的ICR雄性糖尿病小... 详细信息

目的研究杞丹方对糖尿病小鼠降血糖作用并探讨相关机制。方法取SPF级ICR雄性小鼠,禁食16 h后腹腔注射四氧嘧啶120 mg·kg^(-1),5 d后禁食12 h测血糖,血糖值在10~25 mmol·L^(-1)为糖尿病造模成功。将造模成功的ICR雄性糖尿病小鼠,分为模型组,二甲双胍组,杞丹方低、中、高剂量组(0.34、0.67、1.34 g·kg^(-1)·d^(-1)),正常ICR雄性小鼠为空白组,给药30 d。每10 d记录体质量和空腹血糖(FBG)1次,30 d后进行葡萄糖耐量试验(OGTT);ELISA法检测血清胰岛素水平并摘取胰腺、肝脏组织,进行HE染色,观察其病理改变;采用Western blot和qPCR检测肝脏组织IRS-1、PI3K、AKT和GLUT4的表达水平。结果与模型组相比,杞丹方中、高剂量组小鼠FBG水平、糖耐量显著降低(P<0.01),血清胰岛素水平显著升高(P<0.01)。杞丹方各剂量组胰腺和肝脏组织结构有明显改善,胰岛形态得到一定程度恢复,少见肝脏组织异常与血管充血。杞丹方高剂量组能显著上调肝脏组织中的p-IRS-1/IRS-1、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和GLUT4蛋白表达水平(P<0.01);显著上调肝脏组织中的IRS-1、PI3Kp85α、AKT1和GLUT4 mRNA水平(P<0.01)。结论杞丹方对糖尿病小鼠具有降血糖作用,其作用机制是通过调控IRS-1/PI3K/AKT信号通路来实现的。

关键词：糖尿病杞丹方 IRS-1 PI3K AKT

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生物类似药研发法规与评价技术策略

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中南药学 2016年第8期14卷 785-787页

作者：姜德建王全军杨威廖明阳军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室国家北京药物安全评价研究中心北京100850 湖南省药物安全评价研究中心新药药效与安全性评价湖南省重点实验室长沙410331 广东省生物资源应用研究所药物非临床评价研究中心广州511300

生物类似药是与已批准上市的生物制品在质量、安全、有效等方面相似的一类药物。随着原研的生物技术药物专利的陆续到期，巨大的市场容量使得开发生物类似药已经成为国内外生物医药行业的热点之一。2015年CFDA发布的《生物类似药研发与... 详细信息

生物类似药是与已批准上市的生物制品在质量、安全、有效等方面相似的一类药物。随着原研的生物技术药物专利的陆续到期，巨大的市场容量使得开发生物类似药已经成为国内外生物医药行业的热点之一。2015年CFDA发布的《生物类似药研发与评价技术指导原则（试行）》，对生物药的研制流程、内容和技术进行了规定。在此背昔下，本专栏邀请了国家CDE高级审评专家以及国内从事生物类似药评价的资深学者从多角度介绍生物类似药研发与评价，旨在为国内从事生物类似药研发的企业和技术人员搭建一个学术交流平台。

关键词：生物类似药研发指导原则非临床研究法规

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