目的研究arcn1b基因对斑马鱼听觉功能的影响,为完善ARCN1相关综合征的临床表型谱提供参考。方法通过原位杂交技术,证实arcn1b基因在斑马鱼内耳及侧线神经丘中表达。利用吗啡啉(morpholino,Mo)技术构建arcn1b表达下调斑马鱼模型,运用斑马鱼行为轨迹跟踪系统检测arcn1b表达下调对斑马鱼听觉行为的影响。通过免疫荧光方法,记录arcn1b表达下调后斑马鱼内耳和侧线神经丘中的毛细胞与支持细胞的数量变化,并使用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-2-deoxyUridine,BrdU)标记增殖的支持细胞,探究支持细胞增殖情况,与对照组斑马鱼进行对比分析。通过原位杂交技术探究arcn1b表达下调对内质网应激相关基因表达的影响。结果arcn1b基因在斑马鱼内耳及侧线神经丘表达。利用Mo技术下调arcn1b表达后,斑马鱼对声音刺激的应激能力下降(P<0.01);斑马鱼的内耳和侧线神经丘中的毛细胞数量减少(P<0.01),体部毛细胞簇数量减少(P<0.01);头部神经丘支持细胞数量减少(P<0.05),头部神经丘中的增殖支持细胞数量减少(P<0.05);内质网应激相关基因热休克蛋白5(heat shock protein family a member 5,hspa5)在arcn1b表达下调斑马鱼的头部和神经丘中高表达。结论arcn1b的缺乏可能会诱导内质网应激,从而抑制支持细胞增殖,致使支持细胞和毛细胞数量减少,影响斑马鱼听觉功能。临床工作中应增加对ARCN1相关综合征患者听力状况的关注。
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