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RORα拮抗剂T0901317通过RORα/β-catenin信号促进人胃癌MGC803细胞上皮间质转化

中国药理学通报 2023年第4期39卷 631-637页

作者：张翼臻裴大兵苏坚刘芳夏红苏琦南华大学肿瘤研究所湖南省肿瘤细胞与分子病理学重点实验室湖南衡阳421001 井冈山大学附属医院病理科江西吉安343000 湖南省胃癌防治临床研究中心南华大学附属第二医院病理科湖南衡阳421001

目的探讨RORα拮抗剂T0901317通过RORα/β-catenin信号对促进人胃癌MGC803细胞上皮-间质转化(epithelial–mesenchymal transition, EMT)的影响。方法 MTT检测细胞增殖;细胞划痕和Transwell实验分别检测细胞迁移与侵袭。Western blot与免疫荧光检测RORα/β-catenin信号相关分子,免疫共沉淀检测RORα蛋白与β-catenin蛋白结合。结果 MTT检测显示,T0901317处理组较MGC803细胞增殖能力呈时间依赖性增加(P<0.05)。细胞划痕和Transwell实验显示,T0901317处理组细胞迁移与侵袭能力较MGC803细胞明显增强(P<0.05)。Western blot检测显示,T0901317处理后较未处理组RORα蛋白明显下调(P<0.05),并且可上调MGC803细胞β-catenin总蛋白与核内β-catenin(P<0.05)。T0901317处理后较对照组RORα蛋白与β-catenin蛋白结合分别明显减少(P<0.05)。T0901317处理的细胞较未处理MGC803细胞的长梭形细胞增加,异型性更为明显。T0901317可明显上调MGC803细胞Rac1、TGF-β1、Vimentin的表达(P<0.05),并抑制E-cadherin的表达(P<0.05)。结论 T0901317可通过RORα/β-catenin信号促进人胃癌MGC803细胞增殖、迁移侵袭与EMT。

关键词： RORα T0901317 人胃癌MGC803细胞 RORα/β-catenin信号增殖上皮-间质转化

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沉默RORα通过活化Wnt/β-catenin通路靶基因促进人胃癌细胞增殖

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中国老年学杂志 2023年第6期43卷 1408-1413页

作者：裴大兵张翼臻刘芳苏坚夏红苏琦南华大学衡阳医学院肿瘤研究所、湖南省肿瘤细胞与分子病理学重点实验室、湖南省胃癌研究中心湖南衡阳421001 井冈山大学附属医院普外科南华大学衡阳医学院附属第二医院病理科

目的探讨人胃癌细胞中维甲酸相关孤核受体(ROR)α与Wnt/β-连环素(catenin)通路的相互作用。方法噻唑蓝(MTT)实验验证沉默RORα对胃癌细胞系MGC803的增殖作用;实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹与免疫共沉淀检测敲低RORα对Wnt... 详细信息

目的探讨人胃癌细胞中维甲酸相关孤核受体(ROR)α与Wnt/β-连环素(catenin)通路的相互作用。方法噻唑蓝(MTT)实验验证沉默RORα对胃癌细胞系MGC803的增殖作用;实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹与免疫共沉淀检测敲低RORα对Wnt/β-catenin通路相关分子与靶基因表达;荧光素酶报告检测c-Myc基因启动子活性。结果敲低RORα可显著促进胃癌细胞增殖(P<0.05)。当RORα被敲低时可显著上调Wnt1 mRNA和蛋白表达(P<0.05);但对β-catenin无明显影响(P>0.05)。免疫共沉淀提示敲低RORα可显著降低RORα与β-catenin的结合效率(P<0.05)。RORα敲低后,核内β-catenin与转录因子(TCF)-4表达水平明显升高(P<0.05)。Wnt通路下游基因Axin、c-Myc、c-Jun和基质金属蛋白酶(MMP)-9的mRNA和蛋白水平显著上调(P<0.05)。荧光素酶报告提示,敲低RORα可显著增强c-Myc启动子活性(P<0.05)。结论敲低RORα可活化Wnt/β-catenin信号通路从而促进胃癌细胞增殖。

关键词：维甲酸相关孤核受体(ROR)α 沉默人胃癌MGC803细胞增殖 Wnt/β-catenin通路靶基因

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DADS与SR1078通过RORα/β-catenin/TGF-β1/Rac1轴抑制胃癌细胞侵袭与EMT作用的比较

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中国老年学杂志 2024年第24期44卷 5973-5980页

作者：张翼臻裴大兵夏红刘芳苏坚苏琦井冈山大学附属医院江西吉安343000 南华大学肿瘤研究所湖南省肿瘤细胞与分子病理学重点实验室南华大学附属第二医院病理科湖南省胃癌防治临床研究中心

目的探讨维甲酸相关孤核受体(ROR)α/β-catenin/转化生长因子(TGF)-β1/Rac1轴在二烯丙基二硫(DADS)与SR1078作用下对人胃癌细胞的迁移侵袭与上皮间质转化(EMT)的影响。方法实验分为MGC803组、DADS组与SR1078组。噻唑蓝(MTT)、划痕实... 详细信息

目的探讨维甲酸相关孤核受体(ROR)α/β-catenin/转化生长因子(TGF)-β1/Rac1轴在二烯丙基二硫(DADS)与SR1078作用下对人胃癌细胞的迁移侵袭与上皮间质转化(EMT)的影响。方法实验分为MGC803组、DADS组与SR1078组。噻唑蓝(MTT)、划痕实验和迁移侵袭实验分别检测细胞增殖、迁移与侵袭。Western印迹与免疫荧光检测RORα/β-catenin/TGF-β1/Rac1轴相关分子表达,相差显微镜观察形态改变。结果SR1078与DADS作用24、48、72、96 h后,增殖活性均较MGC803组明显降低(P<0.01),而SR1078组与DADS组比较无明显差异(P>0.05)。24 h后划痕距离,SR1078组和DADS组较MGC803组明显缩短(P<0.05),而SR1078组与DADS组无显著差异(P>0.05)。DADS组与S1078组迁移及侵袭细胞较MGC803组显著减少(P<0.05),而SR1078组与DADS组无显著差异(P>0.05)。与MGC803组比较,DADS组和SR1078组RORα蛋白明显上调(P<0.05)。SR1078组与DADS组核内β-catenin蛋白表达较MGC803组显著降低(P<0.05),两者作用效果相当。与MGC803组比较,DADS组与SR1078组细胞异形性明显降低,TGF-β1、Rac1、Vimentin表达明显下调,而E-cadherin明显上调(P<0.0001)。结论DADS与SR1078作用于人胃癌MGC803细胞后,可抑制其增殖、迁移、侵袭与EMT的能力,可能是通过RORα/β-catenin/TGF-β1/Rac1轴起作用的,因此,提示DADS与SR1078作用相似,可能是一种新型RORα激动剂。

关键词：维甲酸相关孤核受体(ROR)α 二烯丙基二硫 SR1078 人胃癌MGC803细胞迁移侵袭上皮间质转化 RORα/β-catenin/转化生长因子(TGF)-β1/Rac1轴

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RORα激动剂SR1078抑制人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭的作用

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肿瘤学杂志 2020年第8期26卷 674-678页

作者：裴大兵张翼臻苏坚刘芳夏红苏琦井冈山大学附属医院江西吉安343000 南华大学肿瘤研究所湖南省肿瘤细胞与分子病理学重点实验室湖南省胃癌研究中心湖南衡阳421001 南华大学附属第二医院湖南衡阳421001

[目的]观察RORα激动剂SR1078对人胃癌MGC803细胞增殖、迁移与侵袭的影响。[方法]实验分为10μmol/L SR1078处理MGC803细胞组与MGC803细胞组。Western blot与免疫荧光检测RORα表达,MTT检测细胞增殖;细胞划痕和Transwell实验分别检测细... 详细信息

[目的]观察RORα激动剂SR1078对人胃癌MGC803细胞增殖、迁移与侵袭的影响。[方法]实验分为10μmol/L SR1078处理MGC803细胞组与MGC803细胞组。Western blot与免疫荧光检测RORα表达,MTT检测细胞增殖;细胞划痕和Transwell实验分别检测细胞迁移与侵袭。[结果]Western blot检测显示,10μmol/L SR1078处理组较对照组RORα蛋白明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光显示,SR1078处理MGC803细胞RORα表达增强。MTT检测显示,10μmol/L SR1078作用MGC803细胞24h、48h、72h、96h后,增殖抑制率分别为37.2%、46.9%、52.7%、68.6%,SR1078可呈时间依赖性抑制MGC803细胞增殖(P<0.05)。划痕实验显示,10μmol/L SR1078处理组迁移距离(5.74±0.078μm)明显低于对照组(9.37±0.098μm),差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell迁移实验显示,10μmol/L SR1078处理组迁移细胞(80±1.155个)较对照组(103±1.155个)明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。侵袭实验显示,10μmol/L SR1078处理组细胞穿膜细胞(19.67±1.764个)较MGC803细胞(40.67±1.202个)明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]SR1078可通过上调RORα抑制MGC803细胞增殖与迁移侵袭。

关键词： RORα SR1078 人胃癌MGC803细胞增殖迁移侵袭

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脂肪型脂肪酸结合蛋白参与糖尿病肾病内质网应激介导的系膜细胞凋亡

脂肪型脂肪酸结合蛋白参与糖尿病肾病内质网应激介导的系膜细胞凋...

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第二届中国女医师大会

作者：张连珊李贞杨林江原孝史冯路路史永红段惠军河北医科大学病理教研室 050017 河北医科大学病理教研室 050017 湘潭市第一人民医院病理科河北医科大学附属第二医院肾内科日本信州大学医学部组织病理学讲座

目的：检测糖尿病肾病(DN)肾小球中脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)和内质网应激(ERS)相关蛋白的表达变化，同时检测抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，探讨FABP4在ERS介导的细胞凋亡中的作用。方法：采用免疫组化方法检测45例DN和10例微小病变型肾病... 详细信息

目的：检测糖尿病肾病(DN)肾小球中脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)和内质网应激(ERS)相关蛋白的表达变化，同时检测抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，探讨FABP4在ERS介导的细胞凋亡中的作用。方法：采用免疫组化方法检测45例DN和10例微小病变型肾病(MCGN)肾活检组织中FABP4、GRP78、Caspase-12和Bcl-2的表达，应用Image-Pro-Plus5.0软件进行肾小球上述指标定量分析。取统一放大倍数下DN组和McGN组所有切片的肾小球进行定量。结果：组织学观察：45例DN组肾活检组织中，可见典型的DN病理改变。免疫组织化学结果：FABP4、GRP78、Caspase-12和Bcl-2在DN组肾小球系膜细胞均有表达，定量分析显示DN组。肾小球FABP4、GRP78和Caspase-12的表达均高于McGN组(P<0.05)，而Bcl-2的表达低于MCGN组(P<0.05)。结论：DN肾小球系膜细胞FABP4的表达上调;DN存在ERS，持续的ERS抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，促进系膜细胞的凋亡;我们的结果为DN肾小球硬化性病变提供了实验依据。

关键词：糖尿病肾病肾活检脂肪型脂肪酸结合蛋白细胞凋亡

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SLE模型小鼠高IgG血症易感基因-Fcgr2b基因突变及对其表达的影响

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中国免疫学杂志 2005年第5期21卷 381-384页

作者：米小轶宋敏韩昱晨姜奕宋继谒广濑幸子中国医科大学基础医学院病理学教研室沈阳110001 中国医科大学附属第一医院实验中心沈阳110001 日本顺天堂大学医学部第二病理教室

目的:测定系统性红斑狼疮(SLE)小鼠模型 (NZB×NZW)F1双亲NZB ,NZW小鼠Fcgr2b基因启动子区核酸序列及其表达的改变,明确Fcgr2b基因的突变性质、对该基因表达的影响及与高IgG血症的关系。方法:采用核酸序列分析测定NZB ,NZW小鼠Fcgr2... 详细信息

目的:测定系统性红斑狼疮(SLE)小鼠模型 (NZB×NZW)F1双亲NZB ,NZW小鼠Fcgr2b基因启动子区核酸序列及其表达的改变,明确Fcgr2b基因的突变性质、对该基因表达的影响及与高IgG血症的关系。方法:采用核酸序列分析测定NZB ,NZW小鼠Fcgr2b基因启动子区突变性质;RT PCR检测Fcgr2b基因表达的改变;ELISA法测定比较(NZB×NZW)F1,NZB和NZW小鼠及(NZB×NZW)F1×NZW回交小鼠Fcgr2b基因B/W型与W /W型组间血清总IgG水平。结果:NZB小鼠Fcgr2b基因启动子区与正常鼠BALB/c相比存在2个部位碱基缺失,分别为13bp及3bp。NZW小鼠除有3个碱基置换外,与BALB/c鼠该基因启动子区序列相同;NZB小鼠Fcgr2b基因mRNA的表达较正常鼠BALB/c降低;NZB小鼠血清总IgG水平明显高于NZW小鼠(P <0 0 5 ) ,回交小鼠Fcgr2b基因B/W型组血清总IgG水平明显高于W/W型组(P <0 0 0 0 1)。结论:NZB小鼠Fcgr2b基因启动子区存在碱基缺失。

关键词：系统性红斑狼疮高IgG血症 Fcgr2b基因核酸序列

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Fcgr2b基因及H-2复合体对SLE模型小鼠IgG抗体产生的调节作用

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中国免疫学杂志 2005年第8期21卷 567-570页

作者：米小轶李柏林王妍姜奕宋继谒广濑幸子中国医科大学基础医学院病理学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院化学教研室沈阳110001 中国医科大学第一临床学院中心检验室沈阳110001 日本顺天堂大学医学部第二病理教室

目的:分析Fcgr2b基因对SLE小鼠血清总IgG抗体产生的影响;Fcgr2b基因单独及Fcgr2b基因与H-2复合体共同作用对SLE小鼠血清IgG抗DNA抗体产生的调控。方法:建立(NZB×NZW)F1×NZW回交小鼠模型,用特异性荧光抗体染色,流式细胞术检测... 详细信息

目的:分析Fcgr2b基因对SLE小鼠血清总IgG抗体产生的影响;Fcgr2b基因单独及Fcgr2b基因与H-2复合体共同作用对SLE小鼠血清IgG抗DNA抗体产生的调控。方法:建立(NZB×NZW)F1×NZW回交小鼠模型,用特异性荧光抗体染色,流式细胞术检测及PCR技术进行基因分型,以ELISA法测定血清总IgG及抗DNA抗体水平进行分析比较。采用扩增片段长度多态性(AmpFLP)分析NZB,NZW小鼠Fcgr2b基因启动子区是否有多态性。结果:(NZB×NZW)F1×NZW回交小鼠Fc-gr2b基因B/W型组血清总IgG水平明显高于W/W型组(P<0.0001)。Fcgr2b基因独作用时,回交小鼠Fcgr2b基因B/W型组与W/W型组间血清IgG抗DNA抗体水平差异不显著(P>0.05)。Fcgr2b基因与H-2复合体共同作用时,H-2复合体为d/z型时,无论Fcgr2b基因是B/W型或W/W型,其血清IgG抗DNA抗体水平明显高于含H-2复合体Z/Z型组(P<0.01);H-2复合体为d/z型时,含Fcgr2b基因B/W型组血清IgG抗DNA抗体水平明显高于W/W型组(P<0.01)。NZB小鼠Fcgr2b基因启动子区扩增片段长度短于非自身免疫病小鼠NZW,C57BL/6及BALB/c小鼠,提示可能存在碱基缺失。结论:血清总IgG水平由Fcgr2b基因调控;IgG抗DNA抗体产生主要由H-2复合体调控,Fcgr2b基因单独作用对该抗体产生的影响不明显,但与H-2复合体具有协同作用。

关键词：系统性红斑狼疮 IgG抗体 Fegr2b基因 H-2复合体

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NK/T细胞淋巴瘤p53和β-catenin基因突变的探讨

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中国肿瘤临床 2004年第24期31卷 1385-1388页

作者：何艳姣贾心善青世克之莲井和久中国医科大学病理学教研室沈阳市110001 日本大阪大学医学部病理学教室日本鹿儿岛大学医学部解剖学第二讲座

目的:探讨p53和β-catenin基因在鼻型NK/T细胞淋巴瘤的突变情况。方法:用PCR-SSCP和基因测序的方法检测20例鼻型NK/T细胞淋巴瘤p53基因外显子4～8,β-catenin外显子3的突变情况。结果:8例p53基因发生突变,突变方式主要为错义突变,G:C→... 详细信息

目的:探讨p53和β-catenin基因在鼻型NK/T细胞淋巴瘤的突变情况。方法:用PCR-SSCP和基因测序的方法检测20例鼻型NK/T细胞淋巴瘤p53基因外显子4～8,β-catenin外显子3的突变情况。结果:8例p53基因发生突变,突变方式主要为错义突变,G:C→A:T转换多见;6例β-catenin基因发生突变,均为错义突变。结论:p53基因突变可能是鼻型NK/T细胞淋巴瘤发生的生物学机制之一,但突变位点并不集中,无明显的突变热点;错义突变是鼻型NK/T细胞淋巴瘤p53和β-catenin基因突变的主要方式。

关键词： NK/T细胞淋巴瘤p53 β-catenin突变

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乳腺交界性病变不典型囊性导管的临床病理学特征

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中华病理学杂志 2004年第3期33卷 221-224页

作者：付丽付笑影草间律松山郁生刘彤华土屋真一日本长野癌症研究中心病理部日本国立信州大学医学部第二外科中国医学科学院北京协和医院病理科日本医科大学附属医院病理学部

目的　探讨乳腺的一种新的交界性病变 ,即不典型囊性导管 (ACD)的临床病理学特征及其意义。方法　对 2 0 0例术前没有做活检取材 (仅经细胞学或细针穿刺活检诊断 )的乳腺癌乳房切除材料作全乳腺切片检查 ,观察ACD的临床病理学特征和免... 详细信息

目的　探讨乳腺的一种新的交界性病变 ,即不典型囊性导管 (ACD)的临床病理学特征及其意义。方法　对 2 0 0例术前没有做活检取材 (仅经细胞学或细针穿刺活检诊断 )的乳腺癌乳房切除材料作全乳腺切片检查 ,观察ACD的临床病理学特征和免疫组织化学特性。结果　ACD的发生率为 2 2 % (4 4 / 2 0 0 ) ,多发于绝经前女性 (P =0 0 0 1) ,存在部位以乳腺癌巢周边多见 ;连续切片 (间隔 5 0张切片 ,15 0 μm距离 )可观察到ACD向非浸润性导管癌的移行 ;36 % (16 / 4 4 )伴有ACD的乳腺癌病例 ,癌组织p5 3染色阳性 ,其中 12 / 16伴有的ACD也同时呈现阳性改变 (P =0 0 0 1) ;α 平滑肌肌动蛋白染色显示ACD的肌上皮与非浸润性导管癌的肌上皮相似呈明显的受压变薄 ;伴有ACD的乳腺癌和不伴有ACD的乳腺癌两组在雌激素受体 (ER) ,雄激素受体 (PR) ,p5 3、c erbB 2和Ki 6 7蛋白 ,肿瘤大小以及淋巴结转移方面没有明显的区别 ;4 4例ACDc erbB 2染色呈阴性 ,Ki6 7标记指数也明显低于其所伴有的乳腺癌。结论　鉴于ACD与癌巢间的连续性及与癌组织p5 3蛋白的共同表达特性。

关键词：乳腺交界性病变不典型囊性导管病理学特征乳腺癌免疫组织化学诊断

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SLE小鼠高IgG血症Fcgr2b基因序列分析

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中国医科大学学报 2004年第1期33卷 1-3页

作者：米小轶韩昱晨李春秀宋敏姜奕宋继谒广濑幸子中国医科大学基础医学院病理学教研室辽宁沈阳110001 沈阳市肛肠医院病理科中国医科大学附属第一医院实验中心日本顺天堂大学医学部第二病理教室

目的 :测定系统性红斑狼疮 (SLE)小鼠模型 NZB/WF1双亲NZB ,NZW小鼠Fcgr2b基因启动子区核酸序列 ,明确Fcgr2b基因启动子区的突变性质。方法 :扩增NZB ,NZW小鼠Fcgr2b基因启动子DNA进行核酸序列分析。采用ELISA法测定、比较 (NZB×N... 详细信息

目的 :测定系统性红斑狼疮 (SLE)小鼠模型 NZB/WF1双亲NZB ,NZW小鼠Fcgr2b基因启动子区核酸序列 ,明确Fcgr2b基因启动子区的突变性质。方法 :扩增NZB ,NZW小鼠Fcgr2b基因启动子DNA进行核酸序列分析。采用ELISA法测定、比较 (NZB×NZW )F1×NZW回交小鼠Fcgr2b基因B/W型与W /W型组间血清总IgG水平。结果 :NZB小鼠Fcgr2b基因启动子区与正常鼠Balb/C相比存在 2个部位碱基缺失 ,分别为 13bp及 3bp。NZW小鼠除有 3个碱基置换外 ,与Balb/C鼠该基因启动子区序列相同。回交小鼠Fcgr2b基因B/W型组血清总IgG水平明显高于W /W型组 (P <0 .0 0 0 1)。结论 :NZB小鼠Fcgr2b基因启动子区存在碱基缺失。

关键词：系统性红斑狼疮高IgG血症 Fcgr2b基因核酸序列

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