检索结果-内蒙古大学图书馆

中国农业科学 2025年第2期58卷 291-306页

作者：孙蕊卿党海燕佘文婷王星舒褚宏欣王涛丁玉兰罗一诺徐隽峰李小涵王朝辉西北农林科技大学资源环境学院/农业农村部西北植物营养与农业环境重点实验室西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室

【目的】明确我国主要麦区小麦籽粒和面粉锌含量差异，研究作物与土壤因素对小麦籽粒和面粉锌含量的影响，为提升我国小麦籽粒锌营养提供依据。【方法】于2020—2021和2021—2022年两个小麦生长季，在我国17个小麦主产省/区采集421份小... 详细信息

【目的】明确我国主要麦区小麦籽粒和面粉锌含量差异，研究作物与土壤因素对小麦籽粒和面粉锌含量的影响，为提升我国小麦籽粒锌营养提供依据。【方法】于2020—2021和2021—2022年两个小麦生长季，在我国17个小麦主产省/区采集421份小麦植株和土壤样品，研究小麦籽粒、面粉和麸皮锌含量与小麦产量及产量构成的关系，以及与土壤pH、有机质、硝态氮、铵态氮、有效磷、速效钾、有效态微量元素含量和施肥量的关系。【结果】我国小麦籽粒、面粉和麸皮锌的平均含量分别为28.1、10.8和60.6 mg·kg-1,94.8%的籽粒和89.5%的面粉样本的锌含量未达到营养学家推荐含量(40和15 mg·kg-1)。麦区间小麦籽粒锌含量存在差异，稻麦区最高，麦玉区和旱作区次之，春麦区最低。稻麦区，较低的土壤pH促进了土壤锌活化，有效锌含量显著高于其他麦区，较低的施磷水平也有利于锌吸收和向地上部转移，小麦籽粒和面粉锌平均含量分别为31.5和12.2 mg·kg-1。麦玉区，土壤肥力较高，产量显著高于其他麦区，导致小麦籽粒与面粉锌含量相对降低，分别为27.1和10.3 mg·kg-1。旱作区，较高的土壤pH影响了土壤锌的有效性和小麦对锌的吸收，籽粒与面粉锌含量较低，分别为26.5和10.1 mg·kg-1。春麦区，土壤有效锌含量显著低于其他麦区，不利于小麦吸收累积锌，籽粒与面粉锌含量最低，分别为24.6和9.4 mg·kg-1，且随千粒重增加锌含量显著降低。【结论】提高小麦籽粒与面粉锌含量，不仅需要适宜的土壤pH、较高的有效锌水平及合理的氮磷肥调控，还需优化产量构成要素，协同提升小麦产量和籽粒、面粉锌含量。

关键词：小麦籽粒面粉麸皮锌含量土壤pH 土壤有效锌

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陕西关中禾谷缢管蚜田间种群对拟除虫菊酯杀虫剂的抗性监测及钠通道M918L突变检测

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昆虫学报 2025年

作者：张思茜张愉英高平周玉荣彭雄王康陈茂华西北农林科技大学植物保护学院农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室旱区作物逆境生物学国家重点实验室

【目的】明确陕西关中地区禾谷缢管蚜Rhopalosiphum padi田间种群对5种拟除虫菊酯杀虫剂的敏感性以及除虫菊酯靶标基因钠离子通道抗药性相关突变频率与抗药性水平间相关性。【方法】2023和2024年4-6月两年采集陕西关中9个地区禾谷缢管... 详细信息

【目的】明确陕西关中地区禾谷缢管蚜Rhopalosiphum padi田间种群对5种拟除虫菊酯杀虫剂的敏感性以及除虫菊酯靶标基因钠离子通道抗药性相关突变频率与抗药性水平间相关性。【方法】2023和2024年4-6月两年采集陕西关中9个地区禾谷缢管蚜田间种群，采用带虫浸叶法测定无翅成蚜对联苯菊酯、氯菊酯、高效氯氟氰菊酯、溴氰菊酯和氰戊菊酯等5种拟除虫菊酯类杀虫剂的敏感性；PCR检测各禾谷缢管蚜田间种群钠通道突变类型及频率，分析突变频率与抗性水平间相关性。【结果】生物测定结果表明，各禾谷缢管蚜田间种群无翅成蚜对5种拟除虫菊酯类杀虫剂已产生不同程度的抗性。XP-2023种群无翅成蚜对Ⅰ型拟除虫菊酯联苯菊酯和氯菊酯的抗性水平最高，分别为76.1和52.3倍；FF-2024， FF-2023和LQ-2023无翅成蚜对Ⅱ型拟除虫菊酯高效氯氟氰菊酯、溴氰菊酯和氰戊菊酯的抗性水平最高，分别为60.7， 97.5和42.6倍。钠通道突变检测发现，除WG-2023和QS-2023种群外，其他禾谷缢管蚜田间种群钠通道均存在M918L杂合突变，突变频率在5.0%～47.5%之间，M918L的突变频率与对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性水平存在显著的相关性。【结论】明确钠离子通道M918L突变与禾谷缢管蚜田间种群对拟除虫菊酯类杀虫剂抗性水平存在显著的相关性，靶标突变在禾谷缢管蚜田间种群对拟除虫菊酯的抗药性中具有重要作用。田间防治建议少用或不用该类杀虫剂，同时需要进一步加强抗性监测工作。

关键词：禾谷缢管蚜拟除虫菊酯抗药性监测靶标突变电压门控钠离子通道基因突变

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两种尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶抑制剂对全周期型禾谷缢管蚜生殖转换的影响

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昆虫学报 2025年

作者：王苏吉黄文婕李梦甜王妮彭雄陈茂华西北农林科技大学植物保护学院农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室旱区作物逆境生物学国家重点实验室湖南师范大学生命科学学院

【目的】尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶（uridine diphosphate-glycosyltransferases， UGTs）是昆虫体内重要解毒代谢酶，在多种生物学过程中都发挥着重要作用。我国禾谷缢管蚜Rhopalosiphum padi主要有全周期型和不全周期型两种生活史类... 详细信息

【目的】尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶（uridine diphosphate-glycosyltransferases， UGTs）是昆虫体内重要解毒代谢酶，在多种生物学过程中都发挥着重要作用。我国禾谷缢管蚜Rhopalosiphum padi主要有全周期型和不全周期型两种生活史类型。全周期型禾谷缢管蚜存在生殖转换现象，能够从孤雌生殖转换为有性生殖；而不全周期型禾谷缢管蚜不存在生殖转换现象，全年营孤雌生殖。本研究旨在利用UGTs抑制剂探究UGTs在全周期型禾谷缢管蚜生殖转换过程中的作用。【方法】对全周期型禾谷缢管蚜无翅成蚜显微注射两种UGTs酶抑制剂（5-硝基尿嘧啶和磺吡酮）后，检测禾谷缢管蚜体内UGTs酶含量变化；观察分析其产生后代中孤雌蚜、产雌性母和雄蚜的总数量、初产时间、终产时间以及产生总时间。【结果】注射5-硝基尿嘧啶和磺吡酮后，禾谷缢管蚜成蚜体内UGTs酶含量均显著低于对照组(ddH2O或丙酮)，分别显著降低35.06和33.98 ng/L。注射5-硝基尿嘧啶后导致全周期型禾谷缢管蚜成蚜产生孤雌蚜与产雌性母的总数量较对照组分别显著减少约21.00和20.00头，注射磺吡酮的禾谷缢管蚜成蚜产生孤雌蚜与雄蚜的总数量较对照组分别显著减少16.10和7.30头；经两种抑制剂处理后均使禾谷缢管蚜成蚜初产产雌性母的时间显著延迟，均较对照组延迟1.30 d；注射5-硝基尿嘧啶对禾谷缢管蚜成蚜初产雄蚜的时间无显著影响，而注射磺吡酮使得禾谷缢管蚜成蚜初产雄蚜的时间显著延迟2.10 d；对禾谷缢管蚜成蚜注射5-硝基尿嘧啶和磺吡酮分别使终产生孤雌蚜的时间显著提前2.10和3.20 d，并且均使终产产雌性母的时间显著推迟；两种UGTs抑制剂均能显著减少孤雌蚜产生的总时间但不显著影响雄蚜产生的总时间，5-硝基尿嘧啶不影响产雌性母产生的总时间，而磺吡酮显著增加了产雌性母产生的总时间。【结论】尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶可能在全周期型禾谷缢管蚜生殖转换过程中起重要作用。

关键词：禾谷缢管蚜尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶抑制剂 5-硝基尿嘧啶磺吡酮生殖转换

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猕猴桃软腐病菌早期侵染过程的转录组学分析

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食品科学 2025年第8期46卷 92-100页

作者：宋金黄谭红赵志博龙友华胡小平樊荣贵州大学农学院贵州贵阳550025 西北农林科技大学植物保护学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室陕西杨凌712100

基于RNA-Seq测序技术分析葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)在猕猴桃果实初侵染过程中的差异基因,旨在从转录调控水平上明确猕猴桃软腐病的发生机制,以期为该病害的科学防控提供新线索。结果表明,在侵染24 h和48 h分别有上调差异基因... 详细信息

基于RNA-Seq测序技术分析葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)在猕猴桃果实初侵染过程中的差异基因,旨在从转录调控水平上明确猕猴桃软腐病的发生机制,以期为该病害的科学防控提供新线索。结果表明,在侵染24 h和48 h分别有上调差异基因658个和921个,下调差异基因1951个和1979个;差异基因显著富集在病菌的核糖体、淀粉和蔗糖代谢、氨基糖和核苷酸糖代谢等途径中,参与碳源利用、有性繁殖和毒力等信号通路;将接种24 h和48 h持续上调表达的48个关键基因构建相关性网络,明确了处于网络节点的重要差异基因。本研究可为筛选猕猴桃软腐病菌重要致病基因提供科学依据。

关键词：猕猴桃软腐病葡萄座腔菌侵染机制致病基因

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结合基因关联和转录组分析鉴定小麦成株期抗条锈病位点YrZ501-2BL的候选基因

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中国农业科学 2023年第8期56卷 1429-1443页

作者：张旭韩金妤李晨晨张丹丹吴启蒙刘胜杰焦韩轩黄硕李春莲王长发曾庆东康振生韩德俊吴建辉西北农林科技大学农学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室西北农林科技大学植物保护学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室

【目的】小麦条锈病是小麦的主要病害之一，每年都会对小麦产量安全造成严重危害，挖掘小麦抗条锈病基因，为小麦抗条锈病种质创新和揭示小麦抗条锈病遗传机制奠定基础。【方法】利用多组学手段结合全基因关联分析（GWAS）开展对小麦成... 详细信息

【目的】小麦条锈病是小麦的主要病害之一，每年都会对小麦产量安全造成严重危害，挖掘小麦抗条锈病基因，为小麦抗条锈病种质创新和揭示小麦抗条锈病遗传机制奠定基础。【方法】利用多组学手段结合全基因关联分析（GWAS）开展对小麦成株期抗条锈病性状的解析。首先对411份来自CIMMYT和ICARDA的春小麦进行全基因组关联分析，在小麦2BL染色体上定位到一个主效的成株期抗条锈病位点，并利用含有该位点的抗病材料Z501及感病亲本晋麦79的双亲群体进行连锁作图，成功验证了该位点抗性的稳定性，暂命名为YrZ501-2BL。在此基础上，通过基因注释、比较基因组分析、转录组分析和候选基因的关联分析对目标区间筛选候选基因。【结果】综合GWAS和连锁作图结果，将YrZ501-2BL锁定在小麦2B染色体0.26 Mb(575.706—576.587 Mb)范围内，根据中国春参考基因组注释信息分析，该区间含有12个基因，其中，高可信基因6个；利用在线网站，将目标区间所在的中国春参考基因组与其他已公布的不同倍性小麦基因组进行比较，发现该区间的6个高可信小麦基因基本都能在其他小麦材料中找到同源基因，且基因排列顺序相同，说明该区间可能不存在较大片段的插入、缺失、倒位等现象，可以利用参考基因组信息进行候选基因预测；结合抗病亲本Z501和感病亲本晋麦79的成株期接种条锈菌后的转录组数据，发现只有TraesCS2B02G406400、TraesCS2B02G406500和TraesCS2B02G406600受诱导表达，且抗感病亲本存在表达差异。根据中国春基因组注释，三者分别编码GATA转录因子、SH3P2蛋白和锌指蛋白。通过进一步的候选基因关联分析，发现只有SH3P2蛋白中存在与条锈病表型显著性差异的SNP位点（G/A），虽然该位点（G1369A）在2个可变剪切的转录本中均未引起氨基酸编码变化（TCG和TCA均编码丝氨酸），但可能与可变剪切有关，同时该位点（G1369A）的不同单倍型表型之间也存在极显著差异，进一步分析发现，在G1369A位点下游还有2个引起氨基酸改变的变异位点G1377A和G1431A，分别引起缬氨酸（GTT）到异亮氨酸（ATT）和缬氨酸（GTG）到甲硫氨酸（ATG）的改变，但这两个位点在455份重测序材料中所占比例只有0.87%，属于稀有变异，因此，未进行显著性检验。综上，推测TraesCS2B02G406500为YrZ501的重要抗病候选基因；此外，针对YrZ501候选区间的差异SNP开发了相应的AQP标记，可用于辅助选择，为下一步小麦抗锈病分子育种应用提供了标记资源。【结论】利用多组学整合关联分析的方法，成功在小麦2B染色体上挖掘到1个抗条锈病候选基因TraesCS2B02G406500。

关键词：小麦条锈病抗性 YrZ501 多组学整合分析 SH3P2蛋白

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五种药剂对黏虫卵的室内触杀效果及胚胎发育的影响

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植物保护学报 2019年第5期46卷 1045-1056页

作者：赵士文李梅梅李伯辽仵均祥许向利西北农林科技大学植物保护学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室

为有效防控黏虫Mythimna separata,选用灭多威、苦参·印楝素、苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis、甲维盐和高效氯氟氰菊酯5种药剂对其卵进行室内触杀试验,比较这5种药剂对黏虫卵和初孵幼虫的触杀效果及对卵的毒力,测定不同药... 详细信息

为有效防控黏虫Mythimna separata,选用灭多威、苦参·印楝素、苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis、甲维盐和高效氯氟氰菊酯5种药剂对其卵进行室内触杀试验,比较这5种药剂对黏虫卵和初孵幼虫的触杀效果及对卵的毒力,测定不同药剂处理后黏虫卵初孵幼虫存活率、发育历期、化蛹率、蛹重和羽化率;并通过冷冻切片技术观察不同药剂处理后黏虫卵的外部形态和胚胎发育情况。室内触杀试验结果表明,苦参·印楝素浓度大于0.1 mg/L时,对产后不同时间黏虫卵的校正死亡率介于42.89%~97.34%之间,苏云金芽胞杆菌浓度为0.01 mg/L时对产后72 h黏虫卵的校正死亡率已达71.99%;各浓度苦参·印楝素和苏云金芽胞杆菌处理产后24、48和72 h黏虫卵后,其初孵幼虫校正死亡率介于39.02%~83.59%之间。苦参·印楝素对产后24、48 h黏虫卵的毒力最大,致死中浓度LC50分别为0.018、0.109 mg/L;苏云金芽胞杆菌对产后72 h黏虫卵的毒力最大,LC50为0.004 mg/L。黏虫卵经5种药剂处理后,幼虫化蛹率、蛹重和羽化率分别介于91.07%~93.64%、0.272~0.284 g和86.60%~87.78%之间,与对照差异不显著,幼虫存活率较对照显著下降43.02%~60.27%,幼虫发育历期较对照延长0.23~0.88 d,其中灭多威、苦参·印楝素、苏云金芽胞杆菌处理的幼虫发育历期较对照显著延长。苦参·印楝素、苏云金芽胞杆菌使胚胎无法形成正常胚带,同时会使已发育的虫体出现蜷缩、腹部皱缩;高效氯氟氰菊酯会延缓胚胎发育时间,使已形成的虫体畸形或使其肠道断裂;甲维盐影响虫体对营养物质的吸收,造成虫体萎缩,使其不能正常孵化。在黏虫卵防治中推荐使用苏云金芽胞杆菌和苦参·印楝素。

关键词：黏虫药剂触杀毒力胚胎发育

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基于KASP技术的小麦条锈菌SNP分子标记开发与评价

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植物保护学报 2020年第1期47卷 65-73页

作者：孟岩杨彩柏姜舒畅黄丽丽康振生詹刚明西北农林科技大学植物保护学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室

为开发用于小麦条锈菌Puccinia striiformis ***群体遗传研究的竞争性等位基因特异性PCR-单核苷酸多态性(kompetitive allele specific PCR-single nucleotide polymorphism,KASPSNP)标记,以中国小麦条锈菌流行小种CYR32的基因组为参考,与美国小麦条锈菌流行小种PST78和印度小麦条锈菌流行小种38S102的基因组进行比对,根据比对到的SNP位点设计KASP-SNP引物,用64个中国小麦条锈菌标样对其进行筛选,同时用13对多态性引物组成的简单重复序列(sim‐ple sequence repeat,SSR)分子标记分析这64个标样,并利用Powermarker 3.25和Structure 2.3软件通过多态性指数和群体遗传结构分析来评价KASP-SNP和SSR两种分子标记。结果显示,共比对到29929个SNP位点,设计出462对KASP-SNP引物,经64个中国小麦条锈菌标样筛选到43对多态性较好的引物,所开发的这43对KASP-SNP引物多态性信息含量指数平均为0.346,基因多样性指数平均为0.420,而SSR引物的2种指数分别为0.237和0.265,前者较后者分别高出46.0%和58.5%。2种标记结果的群体遗传结构分析可得到类似结果,最佳聚类数K值都为4,云南菌系是遗传结构相对最简单的菌系,湖北菌系是遗传结构相对最复杂的菌系,但个别菌株的遗传划分存在较大差异。表明本研究开发的KASP-SNP分子标记多态性较SSR分子标记更加丰富,具有较好的应用前景。

关键词：小麦条锈菌 SNP分子标记 SSR分子标记 KASP技术

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不同猕猴桃品种对溃疡病的抗性差异及其机制研究

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果树学报 2019年第11期36卷 1549-1557页

作者：张迪高小宁赵志博秦虎强黄丽丽西北农林科技大学植物保护学院·旱区作物逆境生物学国家重点实验室

【目的】由Pseudomonas syringae ***(Psa)引起的溃疡病是猕猴桃生产中威胁最大的病害,揭示抗病机制,为利用抗病品种防治病害提供理论依据。【方法】通过离体枝条定量接种试验,比对分析了9个常见猕猴桃栽培品种的抗病性,测定了接种前后... 详细信息

【目的】由Pseudomonas syringae ***(Psa)引起的溃疡病是猕猴桃生产中威胁最大的病害,揭示抗病机制,为利用抗病品种防治病害提供理论依据。【方法】通过离体枝条定量接种试验,比对分析了9个常见猕猴桃栽培品种的抗病性,测定了接种前后不同时间点6个抗病相关基因的表达量及防御酶中过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的变化。【结果】发现9个品种抗病性差异显著‘,徐香’(Actinidia deliciosa‘Xuxiang’)抗病性最强、病斑最小、显症晚(15 d),显著优于其他测试品种‘,红阳’(***‘Hongyang’)抗病性最弱、显症早(10 d)。抗性相关基因PR1和PR5基因在抗性品种‘徐香’中自接种Psa后至显症前显著上调表达,相对表达量最高上调了92.52倍和61.54倍;而感病品种‘红阳’接种后显著上调表达,上调表达量为‘徐香’的50%左右;POD和PAL基因在‘徐香’中显症前期显著上调表达,上调了5.02倍和10.21倍;在‘红阳’中显症后才显著上调表达,表达量2~3倍远低于‘徐香’。2品种的4个防御酶活性在接种前均没有显著差异,接种后‘徐香’中POD和PAL活性显著高于‘红阳’,显症前期达到峰值分别是接种前的1.66倍和2.31倍,与基因表达趋势一致;而在‘红阳’中峰值出现时间晚(20 d),分别是接种前的1.46倍和1.8倍。CAT和SOD活性及相关基因表达在抗、感病品种没有显著性差异。【结论】PR1、PR5和POD、PAL在‘徐香’抵御溃疡病侵染时发挥重要作用。

关键词：猕猴桃溃疡病防御酶基因表达

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小麦条锈菌效应蛋白Hasp83在条锈菌致病性中的功能分析

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中国农业科学 2023年第5期56卷 866-878页

作者：王建锋成嘉欣舒伟学张艳茹王晓杰康振生汤春蕾西北农林科技大学植物保护学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室

【背景】条锈病是小麦上的重大病害，由条形柄锈菌小麦专化型（Puccinia striiformis f. sp. tritici,Pst）侵染引起。条锈菌是活体营养型寄生真菌，在侵染过程中形成吸器，通过吸器从寄主植物汲取营养。同时，吸器分泌效应蛋白调控寄... 详细信息

【背景】条锈病是小麦上的重大病害，由条形柄锈菌小麦专化型（Puccinia striiformis f. sp. tritici,Pst）侵染引起。条锈菌是活体营养型寄生真菌，在侵染过程中形成吸器，通过吸器从寄主植物汲取营养。同时，吸器分泌效应蛋白调控寄主免疫，促进侵染过程。【目的】明确条锈菌效应蛋白的功能及其作用机理，为揭示条锈菌的致病机制打下基础。【方法】比较分析条锈菌夏孢子、芽管和吸器转录组，获得在吸器诱导表达的分泌蛋白基因Hasp83，在本氏烟叶片细胞中瞬时表达观察是否能抑制由BAX引起的细胞坏死；利用qRT-PCR分析该基因在条锈菌侵染小麦不同阶段的表达水平。借助荧光假单胞菌Ⅲ型分泌系统和寄主诱导的基因沉默（host-induced gene silencing,HIGS）分析Hasp83在条锈菌侵染过程中的功能。利用酵母双杂交系统筛选小麦中与Hasp83互作的蛋白，免疫共沉淀技术进一步在烟草细胞中共表达验证Hasp83及其候选靶标蛋白的互作。【结果】Hasp83开放阅读框全长522 bp，编码173个氨基酸，蛋白N端1—29位氨基酸为信号肽，无保守结构域，在本氏烟叶片细胞中瞬时表达能抑制由BAX引起的细胞坏死。qRT-PCR分析显示，Hasp83在条锈菌侵染时期上调表达；利用细菌Ⅲ型分泌系统在小麦水源11品种中瞬时表达Hasp83能够抑制荧光假单胞菌引起的胼胝质积累，在接种条锈菌无毒性小种CYR23后，瞬时表达Hasp83株系产生的活性氧积累面积和过敏性坏死面积相比对照减少19.35%—38.62%；利用HIGS技术在接种条锈菌毒性小种CYR31的小麦水源11中沉默Hasp83，发现条锈菌的产孢量、菌丝长度、菌丝扩展面积和吸器数目减少，致病力降低。酵母双杂交结果表明，效应蛋白Hasp83与其小麦中候选靶标过敏性坏死诱导蛋白Tahir1互作。免疫共沉淀进一步证明Hasp83及其候选靶标Tahir1存在互作。【结论】条锈菌效应蛋白Hasp83可抑制寄主由非致病细菌和无毒性条锈菌生理小种引起的小麦防卫反应，增强病原菌的致病力。

关键词：小麦条锈病吸器效应蛋白转录组分析靶标蛋白鉴定

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苹果黑腐皮壳菌CAP超家族蛋白VmPR1c的降解功能域和降解途径

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菌物学报 2019年第9期38卷 1470-1479页

作者：孟香尹志远聂嘉俊黄丽丽西北农林科技大学植物保护学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室

真菌与寄主互作过程中常分泌多种效应蛋白,但植物病原真菌CAP超家族蛋白是否参与致病过程尚不明确。基于苹果黑腐皮壳菌Valsamali基因组CAP同源基因研究发现VmPR1c敲除后突变体致病性明显下降,但VmPR1c蛋白在表达过程中被降解。本研究借... 详细信息

真菌与寄主互作过程中常分泌多种效应蛋白,但植物病原真菌CAP超家族蛋白是否参与致病过程尚不明确。基于苹果黑腐皮壳菌Valsamali基因组CAP同源基因研究发现VmPR1c敲除后突变体致病性明显下降,但VmPR1c蛋白在表达过程中被降解。本研究借助BLAST、NCBI CDD web server、SignalP 4.1、TMHMM 2.0等进行序列分析,利用缺失突变法及在蛋白表达过程中加蛋白酶抑制剂分别对该蛋白的降解功能域和降解途径进行了探索。C端区段缺失突变结果显示,突变涉及CAP结构域中的α-helix结构和CBM区域时,Western blot条带呈现明显加深;涉及CTE区域及CAP结构域中的半胱氨酸时,Western blot条带则呈现不同程度地减弱。替换VmPR1c的信号肽或突变其信号肽切割位点序列,Western blot条带均有不同程度地加深。分别对CTE和NTE中的脯氨酸进行点突变后,蛋白降解更加严重。在蛋白表达过程中加入蛋白酶体抑制剂MG132和溶酶体抑制剂chloroquine,与对照VmPR1c△SP-GFP相比,Western blot结果无明显变化,表明VmPR1c蛋白序列C端区域中的CTE、信号肽及其切割位点序列以及CAP结构域中的α-helix结构介导其降解,其中CTE和NTE中的脯氨酸对该蛋白具保护作用。此外,VmPR1c的降解不通过蛋白酶体和溶酶体途径。

关键词：苹果黑腐皮壳菌 CAP蛋白免疫印迹降解

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