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姜黄素通过调控PI3K-Akt信号途径抑制三阴性乳腺癌Hs578T细胞的增殖

西南医科大学学报 2025年第2期48卷 184-191页

作者：陈泽李梦晗李雪灵张青卢品君何涛甘淋西南医科大学基础医学院肿瘤医学研究所泸州646000 昆明医科大学第一附属医院心血管内科昆明650000 西南医科大学儿科学系泸州646000 西南医科大学附属医院皮肤科泸州646000 西南医科大学附属医院护理部泸州646000 西南医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室泸州646000

目的本研究旨在运用RNA测序和生物信息学等预测姜黄素对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)Hs578T细胞的抗癌机制,并通过体外实验对潜在的分子机制进行验证。方法用姜黄素处理Hs578T细胞后,采用CCK-8法检测姜黄素对细胞... 详细信息

目的本研究旨在运用RNA测序和生物信息学等预测姜黄素对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)Hs578T细胞的抗癌机制,并通过体外实验对潜在的分子机制进行验证。方法用姜黄素处理Hs578T细胞后,采用CCK-8法检测姜黄素对细胞增殖能力的影响,使用流式细胞术检测姜黄素对细胞凋亡和周期的影响,再使用Transwell实验检测姜黄素对细胞运动能力的影响。然后进行转录组测序、构建PPI网络和富集分析对姜黄素的抗癌机制进行预测,最后使用蛋白免疫印迹技术检测姜黄素对Hs578T细胞增殖相关蛋白的影响。结果姜黄素作用于Hs578T细胞24 h后,CCK8检测结果提示姜黄素的IC50约为20μmol/L。使用20μmol/L姜黄素刺激的Hs578T细胞为实验组,未进行姜黄素刺激的细胞为对照组。较对照组,实验组结果显示姜黄素能显著抑制Hs578T细胞的增殖能力,具有时间和浓度依赖性;显著诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期于G2/M期;显著抑制细胞的迁移和侵袭能力,相较于对照组差异均具有统计学意义(P<0.05)。PPI网络分析的结果显示差异表达基因表达的蛋白质之间具有相互作用关系。转录组测序和生物信息学分析的结果显示,姜黄素通过参与多条信号通路发挥抗癌作用,如癌症中的信号通路、PI3K-Akt信号通路等。蛋白印迹结果显示姜黄素能在Hs578T细胞中显著抑制m TOR、p-Akt、Akt、p-S6、S6蛋白表达。结论姜黄素可能通过抑制PI3K-Akt信号通路相关蛋白的表达来发挥其抗增殖作用,为临床姜黄素治疗TNBC提供了理论依据和实验基础。

关键词：姜黄素三阴性乳腺癌生物信息学 PI3K-Akt

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人参皂干Rg1对NOX3致斯氏狸殖吸虫肝纤维化的影响

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中国病原生物学杂志 2017年第5期12卷 385-388,393页

作者：戚健君王文林李树德昆明医科大学基础医学院病原生物学教研室云南昆明650504 昆明医科大学基础医学院生物化学分子生物学教研室

目的探讨人参皂干Rg1对NOX3在斯氏狸殖吸虫引起肝纤维化中的影响,以期发现潜在的治疗肝纤维化药物。方法 50只SD大鼠随机分为5组,每组10只。除正常组外,其他组每只大鼠腹腔注射感染斯氏狸殖吸虫囊蚴15只。8周后分别用低、中、高剂量Rg1... 详细信息

目的探讨人参皂干Rg1对NOX3在斯氏狸殖吸虫引起肝纤维化中的影响,以期发现潜在的治疗肝纤维化药物。方法 50只SD大鼠随机分为5组,每组10只。除正常组外,其他组每只大鼠腹腔注射感染斯氏狸殖吸虫囊蚴15只。8周后分别用低、中、高剂量Rg1溶液罐胃治疗该虫引起的肝纤维化,1次/d,连续8周。处死大鼠,取各组肝脏组织,用Western blot检测NOX3蛋白,qPCR检测NOX3mRNA含量;制备肝组织石蜡切片,采用免疫组化法检测肝细胞中NOX3蛋白的表达,分析Rg1对斯氏狸殖吸虫引起肝纤维化的作用。结果Western blot检测模型组大鼠NOX3含量较正常组升高(t=18.7,P<0.055,F=5.019,R square=0.9832);Rg1罐胃治疗组NOX3含量降低(P<0.01),以高剂量组降低更显著。低组(t=67.84,P<0.01,F=26.48,R square=0.9832),中组(t=55.41,P<0.01,F=4.269,R square=0.9980),高组(t=70.55,P<0.01,F=4.017,R square=0.8269)。qPCR检测模型组NOX3mRNA含量相对正常组升高(t=7.447,P<0.01,R square=0.9739),治疗组含量降低。低组(t=3.648,P<0.01,F=11.07,R square=0.9269),中组(t=5.558,P<0.01,F=4.679,R square=0.9374),高组(t=6.924,P<0.01,F=12.96,R square=0.8888)。免疫组化检测模型组NOX3高表达,肝细胞结构紊乱,可见成纤维细胞浸润。Rg1低、中、高剂量组治疗后NOX3依次降低,肝细胞形态好转。结论 NOX3在斯氏狸殖吸虫引起的肝纤维化中高表达,且在斯氏狸殖吸虫引起的肝纤维化中起重要作用。Rg1能在蛋白和mRNA水平上降低NOX3的表达,可作为潜在治疗斯氏狸殖吸虫引起的纤维化药物。

关键词：斯氏狸殖吸虫人参皂干Rg1 肝纤维化 NOX3

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白细胞介素-32与疾病关系的研究进展

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中国病原生物学杂志 2017年第12期12卷 1228-1230页

作者：徐翠平柳爱华宝福凯王玲官文焕昆明卫生职业学院基础医学院病原生物学与免疫学教研室云南昆明650600 昆明医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系昆明医科大学基础医学院微生物学与免疫学系

白细胞介素-32(IL-32)是2005年发现的一种细胞因子,它有六种剪接变异体分别为IL-32α、IL-32β、IL-32γ、IL-32δ、IL-32ε和IL-32ζ。IL-32与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6等细胞因子一样在炎症及自身免疫性疾病中高表达。本文主要对... 详细信息

白细胞介素-32(IL-32)是2005年发现的一种细胞因子,它有六种剪接变异体分别为IL-32α、IL-32β、IL-32γ、IL-32δ、IL-32ε和IL-32ζ。IL-32与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6等细胞因子一样在炎症及自身免疫性疾病中高表达。本文主要对IL-32的生物学作用以及与结核病、肿瘤及自身免疫性疾病如炎性肠病、类风湿性关节炎(RA)等疾病关系进行了综述。

关键词：白细胞介素-32 生物学功能结核病自身免疫性疾病综述

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降落聚合酶链反应技术在低密度脂蛋白受体基因点突变研究中的应用

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中华检验医学杂志 2003年第7期26卷 403-406页

作者：王绿娅曹守春蔺洁潘晓冬杜兰平刘舒秦彦文陈保生北京市心肺血管疾病研究所首都医科大学附属北京安贞医院动脉粥样硬化研究室 100029 南华大学基础医学院生物化学分子生物学教研室中国医学科学院基础医学研究所国家医学分子生物学重点实验室

目的　建立降落 (TOUCHDOWN)聚合酶链反应 (PCR)方法 ,快速检测家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体 (LDL R)基因点突变。方法　设计LDL R基因 2 1对引物 ,根据TOUCHDOWN原理设计包括启动子和 18个外显子特异性片段在内的PCR程序 ,... 详细信息

目的　建立降落 (TOUCHDOWN)聚合酶链反应 (PCR)方法 ,快速检测家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体 (LDL R)基因点突变。方法　设计LDL R基因 2 1对引物 ,根据TOUCHDOWN原理设计包括启动子和 18个外显子特异性片段在内的PCR程序 ,通过试验选择PCR最佳反应条件 ,在同一程序中分别对 2 1个片段进行扩增 ,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物 ,纯化后DNA产物测序分析该方法的特异性。结果　编设退火温度范围从 6 8℃降至 5 4℃的PCR程序 ,优化PCR扩增条件 ,电泳检测采用同一程序同时分别扩增的LDL R基因 2 1个片段条带清晰 ,测序证实了此组片段的特异性。结论　成功建立降落PCR方法 ,提示此法为LDL R基因突变筛查提供了快速可靠的手段。

关键词：家族性高胆固醇血症低密度脂蛋白受体基因突变聚合酶链反应

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SERINC2通过激活TGF-β/Smad3信号通路促进脑胶质瘤细胞的迁移和侵袭

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中国现代医药杂志 2024年第11期26卷 33-38页

作者：许杨袁红平李晓全范耀东李得意马雪艳大理大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室云南大理671000 昆明医科大学第三附属医院神经外科云南昆明650000

目的探讨丝氨酸整合因子2(Serine incorporator 2,SERINC2)对脑胶质瘤细胞迁移和侵袭的影响及相关分子机制。方法利用GEPIA数据库在线分析脑胶质瘤组织和正常脑组织中SERINC2的表达差异;运用CGGA数据库检测SERINC2 mRNA的表达水平与脑... 详细信息

目的探讨丝氨酸整合因子2(Serine incorporator 2,SERINC2)对脑胶质瘤细胞迁移和侵袭的影响及相关分子机制。方法利用GEPIA数据库在线分析脑胶质瘤组织和正常脑组织中SERINC2的表达差异;运用CGGA数据库检测SERINC2 mRNA的表达水平与脑胶质瘤患者生存率的关系;利用shRNA构建敲低SERINC2的U251细胞株,qRTPCR和Western blot检测敲低效率;采用划痕实验、Transwell实验分别检测SERINC2对U251细胞迁移和侵袭能力的影响;Western blot检测上皮-间质转化(EMT)和转化生长因子-β(TGF-β)/Smad3通路相关蛋白的表达。结果SERINC2 mRNA在脑胶质瘤中的表达高于正常脑组织,且SERINC2 mRNA高表达患者的10年生存率明显低于低表达患者(P<0.05);与对照组相比,敲低SERINC2后U251细胞的迁移和侵袭能力下降(P<0.05),且E-cadherin蛋白表达水平上升,TGF-β、Smad2/Smad3、p-Smad3和N-cadherin蛋白表达水平下降。结论SERINC2在脑胶质瘤中高表达,并且通过激活TGF-β/Smad3信号通路影响脑胶质瘤细胞EMT,从而促进脑胶质瘤细胞的迁移和侵袭。

关键词：脑胶质瘤 SERINC2 TGF-β/Smad3 通路迁移侵袭

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shRNA沉默TXNDC12抑制脑胶质瘤细胞的增殖和迁移

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临床与实验病理学杂志 2023年第5期39卷 519-524页

作者：张路瑶袁红平王晓旋李晓全李泽艳王雨晴来明名马雪艳大理大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室大理671000 昆明医科大学第三附属医院神经外科昆明650000 山东省济南市第三人民医院病理科济南250000 大理大学第一附属医院输血科大理671000

目的探讨TXNDC12(thioredoxin domain-containing 12)在脑胶质瘤发生中的作用机制。方法采用生物信息学分析TXNDC12基因在脑胶质瘤中mRNA的表达及其与预后的相关性,并通过Western blot检测TXNDC12在脑胶质瘤组织和正常脑组织中蛋白表达... 详细信息

目的探讨TXNDC12(thioredoxin domain-containing 12)在脑胶质瘤发生中的作用机制。方法采用生物信息学分析TXNDC12基因在脑胶质瘤中mRNA的表达及其与预后的相关性,并通过Western blot检测TXNDC12在脑胶质瘤组织和正常脑组织中蛋白表达;构建沉默TXNDC12基因的shRNA慢病毒表达质粒,建立沉默TXNDC12的U251稳转细胞株。采用qRT-PCR和Western blot实验分别检测稳转细胞株中TXNDC12的mRNA及蛋白表达;用CCK-8实验、Transwell和划痕实验检测沉默TXNDC12对U251细胞增殖和迁移能力的影响。结果生物学信息分析显示TXNDC12在脑胶质瘤组织(1.885±0.902)中的蛋白表达比正常脑组织(1.0±0.545,P<0.05)高,且与不良预后相关(高表达组51.5%vs低表达组70.7%,P<0.0001);沉默TXNDC12后U251细胞增殖能力和迁移能力明显下降(P<0.05)。结论TXNDC12在脑胶质瘤中可能发挥促癌基因的作用,其高表达可能促进脑胶质瘤细胞的增殖和迁移,有望成为脑胶质瘤患者治疗及预后的重要生物学标志物。

关键词：脑胶质瘤 TXNDC12 U251细胞增殖迁移

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GATA-3小干扰RNA载体对变应性鼻炎小鼠外周血单个核细胞中辅助性T细胞亚群功能的体内调节机制

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中国耳鼻咽喉头颈外科 2023年第10期30卷 646-651页

作者：李玉晓贺铭王天蓉王雨昆明医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科云南昆明650032 中山大学附属第七医院(深圳)耳鼻咽喉科广东深圳517108 昆明医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室云南昆明650500

目的研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)介导的GATA-3小干扰RNA载体(si-GATA-3)对变应性鼻炎(AR)小鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中辅助性T细胞1(T-helper 1,Th1)和Th2功能的调节作用。方法构建si-GATA-3,用卵清蛋白构建BALB/c AR模型,si-GATA-3组、si-NC组(无目标基因小干扰RNA的空白对照组)分别用si-GATA-3和si-NC腹腔注射干预AR小鼠,AR组和正常对照组用等量的生理盐水干预。干预结束抽取其外周血,分离PBMCs和血浆。分别用荧光定量PCR和Western blot技术检测PBMCs中GATA-3和T-bet mRNA及其相应蛋白的表达量;用ELISA技术检测血浆中白细胞介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)的含量。结果 si-GATA-3滴度为5×10^(8)TU/ml。成功制备BALB/C小鼠AR模型。si-GATA-3能明显改善AR小鼠的症状。si-GATA-3组PBMCs中GATA-3 mRNA表达明显低于AR组和si-NC组(P<0.01),AR组和si-NC组明显高于正常对照组(P<0.01)。PBMCs中GATA-3蛋白和血浆中IL-4的表达量与GATA-3 mRNA表达相似。si-GATA-3组PBMCs中T-bet mRNA及其蛋白的相对表达均明显高于AR组和si-NC组(P<0.01),AR组和si-NC组二者均明显低于对照组(P<0.01)。si-GATA-3组血浆中IFN-γ的表达量高于正常对照组(P<0.05);AR组与si-NC组中IFN-γ的表达量均明显高于正常对照组和si-GATA-3组(P<0.01)。结论 si-GATA-3能有效改善AR小鼠症状,下调AR小鼠PBMCs中Th2细胞中GATA-3 mRNA、GATA-3蛋白和IL-4的表达,同时上调Th1细胞中T-bet mRNA和T-bet蛋白的表达,纠正Th2/Th1的免疫失衡。

关键词：鼻炎过敏 RNA干扰模型动物小鼠 GATA-3 T-bet 慢病毒载体

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Si-GATA-3对AR小鼠PBMCs中Th1/Th2细胞亚群功能的体外调节

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昆明医科大学学报 2022年第8期43卷 7-16页

作者：李玉晓贺铭王天蓉姚永刚王雨昆明医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科云南昆明650032 昆明医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室云南昆明650500 中国科学院昆明动物研究所动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223 中山大学附属第七医院耳鼻咽喉科广东深圳517108

目的研究RNAi介导的GATA-3基因慢病毒载体si-GATA-3在体外对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)小鼠PBMCs中Th2、Th1细胞亚群功能的调节作用。方法构建RNAi介导的GATA-3基因慢病毒载体siGATA-3,并进行包装、纯化和滴定。BALB/C小鼠随机分... 详细信息

目的研究RNAi介导的GATA-3基因慢病毒载体si-GATA-3在体外对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)小鼠PBMCs中Th2、Th1细胞亚群功能的调节作用。方法构建RNAi介导的GATA-3基因慢病毒载体siGATA-3,并进行包装、纯化和滴定。BALB/C小鼠随机分为AR组和正常对照组。用卵蛋白构建BALB/C小鼠变应性鼻炎模型,抽取其外周血并分离外周血中单个核细胞(PBMCs),随机分为3组,即si-GATA-3组、siNC组和AR组。进行细胞培养,然后分别用si-GATA-3、si-NC和生理盐水对3组变应性鼻炎小鼠的PBMCs进行干预72 h,用生理盐水代替si-GATA-3干预正常对照组小鼠的PBMCs。干预结束分离PBMCs和细胞培养上清液。分别用荧光定量qPCR和Western bloting方法检测PBMCs中GATA-3 mRNA、T-bet mRNA和GATA3、T-bet蛋白的相对表达量;用ELISA技术检测细胞培养上清液中IL-4和IFN-γ的含量。结果构建出RNAi介导的GATA-3基因慢病毒载体si-GATA-3,其滴度为5×10^(8) TU/mL。制备出BALB/C小鼠的AR模型。Si-GATA-3组PBMCs中GATA-3 mRNA、GATA-3蛋白的相对表达量和上清液中IL-4的含量均明显低于AR组和si-NC组的表达量(P<0.01),AR组和si-NC组中3者的表达量均明显高于正常对照组(P<0.01);AR组3者表达量和si-NC组无差异(P>0.05)。si-GATA-3组PBMCs中T-bet mRNA及其蛋白的相对表达量明显高于AR组和si-NC组的表达量(P<0.01),AR组和si-NC组中二者的表达量均明显低于对照组(P<0.01);AR组的二者表达量和si-NC组无差异(P>0.05)。但si-GATA-3组细胞培养上清液中IFN-γ的含量高于正常对照组(P<0.05),AR组与si-NC组中IFN-γ明显高于正常对照组和si-GATA-3组(P<0.01);AR组与si-NC组之间IFN-γ的表达,差异无统计学意义(P>0.05)。结论si-GATA-3能有效的下调Th2细胞中GATA-3 mRNA、GATA-3蛋白和IL-4的表达,并上调Th1细胞中T-bet mRNA和T-bet蛋白的表达,体外能有效地纠正小鼠AR模型中PBMCs中Th2/Th1的免疫失衡。

关键词：鼻炎变应性 RNA干扰 GATA-3 T-bet 慢病毒载体模型小鼠

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西双版纳地区傣族、哈尼族、基诺族ABO血型和G6PD基因频率调查

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热带医学杂志 2018年第5期18卷 578-581,633页

作者：唐佳贺铭方子水蒋成睿林晓莹王利黄尤光李树德蒋伟国杨荣高寂元段家镜韩璐好陈晓丹蒋玮莹中山大学中山医学院医学遗传学教研室广东广州510080 江门市妇幼保健院医学遗传中心广东江门529000 暨南大学附属第一医院医学影像中心广东广州510080 昆明医科大学基础医学院基础医学实验教学中心云南昆明650500 西双版纳州农垦医院云南景洪666100 昆明医科大学第三附属医院云南省肿瘤研究所云南昆明650118 昆明医科大学生物化学与分子生物学系云南昆明650500

目的调查西双版纳傣族、基诺族、哈尼族的ABO血型分布特点和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症情况。方法利用四氮唑蓝纸片法或G6PD/6PGD比值法对西双版纳傣族1 844人,哈尼族317人,基诺族880人进行G6PD缺乏症的筛查。利用ABO血型试剂盒... 详细信息

目的调查西双版纳傣族、基诺族、哈尼族的ABO血型分布特点和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症情况。方法利用四氮唑蓝纸片法或G6PD/6PGD比值法对西双版纳傣族1 844人,哈尼族317人,基诺族880人进行G6PD缺乏症的筛查。利用ABO血型试剂盒对傣族1 674人,哈尼族175人,基诺族1 060人进行ABO血型测定。结果傣族、基诺族、哈尼族ABO血型分布特征均为O>B>A>AB,基因频率为r>q>p,民族指数分别为0.74、0.76、0.49。傣族G6PD缺乏症发生率为8.79%(162/1 844),男性发生率为13.59%(95/699),女性发生率为5.85%(67/1 145),傣族的男、女性G6PD缺乏症发生率比较,差异有统计学意义(P<0.05);基诺族G6PD缺乏症发生率为4.66%(41/880),男性发生率为4.86%(18/370),女性发生率为4.51%(23/510);哈尼族G6PD缺乏症发生率为0(0/317)。G6PD基因频率傣族(0.135 9)>基诺族(0.048 6)。结论西双版纳傣族、基诺族、哈尼族的ABO血型分布一致,G6PD缺陷在傣族人群中高发,该调查研究为西双版纳州地区G6PD缺乏症遗传咨询、疟疾防治、少数民族群体遗传学研究提供了重要的基础资料。

关键词：少数民族 ABO血型 G6PD缺乏症西双版纳

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