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药物分析杂志 2010年第6期30卷 1003-1006页

作者：李承花刘婧慧徐珍霞赵文张晓琦张婷婷马志国暨南大学生命科学技术学院药物载体实验室广州510632 暨南大学药学院广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广州510632

目的：建立RP-HPLC同时测定管花肉苁蓉药材中松果菊苷、管花苷A、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷含量的方法。方法：采用Megres-C18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,柱温30℃;流动相为甲醇（A）-0.1%甲酸（B）,梯度洗脱（0min,30%A;30min,40... 详细信息

目的：建立RP-HPLC同时测定管花肉苁蓉药材中松果菊苷、管花苷A、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷含量的方法。方法：采用Megres-C18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,柱温30℃;流动相为甲醇（A）-0.1%甲酸（B）,梯度洗脱（0min,30%A;30min,40%A;40min,45%A）,流速1.0mL·min-1;检测波长330nm。结果：在上述色谱条件下,松果菊苷、管花苷A、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷获得良好分离;进样量分别在0.732~11.7μg（r=0.9991）、0.216~3.45μg（r=0.9995）、0.209~3.35μg（r=0.9991）、0.151~2.42μg（r=0.9993）范围内呈良好的线性关系;平均加样回收率（n=9）分别为101.8%,98.8%,101.1%,99.9%;精密度试验的RSD小于0.65%;重复性试验的RSD小于2.4%。结论：该方法简便、准确,重复性好,为管花肉苁蓉药材的质量控制提供可借鉴的分析方法。

关键词： RP-HPLC 管花肉苁蓉苯乙醇苷含量测定

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HPLC-UVD法测定肿节风水提物及相关制剂中迷迭香酸及异嗪皮啶的含量

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沈阳药科大学学报 2010年第6期27卷 457-462页

作者：潘宇明姚志红戴毅张依段营辉姚新生暨南大学中药及天然药物研究所广东广州510632 中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632 沈阳药科大学中药学院辽宁沈阳110016

目的采用HPLC法测定肿节风水提取物及相关制剂中迷迭香酸和异嗪皮啶的含量,为肿节风提取物及制剂的质控方法奠定基础。方法采用C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈-水（分别含体积分数为0.1%甲酸）为流动相梯度洗脱,流速1.00 ... 详细信息

目的采用HPLC法测定肿节风水提取物及相关制剂中迷迭香酸和异嗪皮啶的含量,为肿节风提取物及制剂的质控方法奠定基础。方法采用C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈-水（分别含体积分数为0.1%甲酸）为流动相梯度洗脱,流速1.00 ***^-1,检测波长330 nm,柱温35℃。结果迷迭香酸的质量浓度在4.746-189.8 mg.L^-1内、异嗪皮啶的质量浓度在1.018-40.72 mg.L^-1内线性关系良好;仪器精密度试验、重复性试验、稳定性试验RSD均不大于2.0%。肿节风水提取物中迷迭香酸与异嗪皮啶的回收率分别为99.8%和99.2%,RSD分别为0.70%和0.63%（n=6）;迷迭香酸与异嗪皮啶在相关制剂中回收率分别为100.7%和98.4%,RSD分别为1.6%和0.44%（n=6）。12批肿节风水提取物供试品中迷迭香酸的含量在1.479-6.447 mg.g^-1内、异嗪皮啶的含量在1.912-3.540 mg.g^-1内;在以肿节风水提取物制成的相关制剂中,迷迭香酸的含量在0.847-15.946 mg.g^-1内、异嗪皮啶的含量在2.032-4.093 mg.g^-1内。结论作者建立的肿节风及制剂的定量分析方法简便、快速、专属性强、重现性好,为肿节风水提取物及相关制剂质量标准的提升奠定了基础。

关键词：肿节风迷迭香酸异嗪皮啶含量测定抗炎活性成分高效液相色谱-紫外检测法

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肿节风水提物及其市售制剂的HPLC特征图谱研究

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中草药 2010年第9期41卷 1457-1460页

作者：姚志红潘宇明戴毅顾利红刘明艳段营辉姚新生暨南大学中药及天然药物研究所广东广州510632 中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632 广州市药品检验所中药室广东广州510160 沈阳药科大学天然药物化学教研室辽宁沈阳110016

目的建立肿节风水提物的HPLC特征图谱并明确其特征色谱峰的化学成分,对肿节风水提物及其市售制剂的质量进行评价。方法以Ultimate XB-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,乙腈-水（各含0.1%甲酸）为流动相梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/... 详细信息

目的建立肿节风水提物的HPLC特征图谱并明确其特征色谱峰的化学成分,对肿节风水提物及其市售制剂的质量进行评价。方法以Ultimate XB-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,乙腈-水（各含0.1%甲酸）为流动相梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,柱温：30℃,检测波长为330 nm;以共有模式特征图谱为对照,对不同厂家的肿节风水提物及其市售制剂进行相似度评价。结果建立的肿节风水提物的HPLC特征图谱具有良好的稳定性、精密度、重现性。不同厂家生产的12批肿节风水提物及20批市售制剂与共有模式对照特征图谱的相似度分别在0.883-0.987和0.797-0.982。其中8个特征色谱峰经化学指认,分别为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、-βhydroxypropiovanillone、咖啡酸、异嗪皮啶、迷迭香酸-4-O-葡萄糖苷和迷迭香酸。结论本研究建立了涵盖肿节风中抗炎活性成分与特征成分的HPLC特征图谱,反映了肿节风水提物及相关制剂的多成分的整体面貌,为全面、有效控制肿节风及相关制剂的质量奠定了科学基础。

关键词：肿节风肿节风水提物肿节风制剂 HPLC特征图谱

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草珊瑚的化学成分研究

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中草药 2010年第1期41卷 29-32页

作者：段营辉戴毅高昊叶文才姚新生沈阳药科大学中药学院辽宁沈阳110016 暨南大学中药及天然药物研究所广东广州510630 广东省中药药效物质基础及创新药物研究重点实验室广东广州510630

目的研究草珊瑚Sarcandra glabra的化学成分。方法采用大孔树脂Diaion HP-20柱色谱、反相ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、反相HPLC等手段从草珊瑚的水提取物中分离得到10个化合物,利用波谱学方法鉴定其化学结构。结果分离得到的10个... 详细信息

目的研究草珊瑚Sarcandra glabra的化学成分。方法采用大孔树脂Diaion HP-20柱色谱、反相ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、反相HPLC等手段从草珊瑚的水提取物中分离得到10个化合物,利用波谱学方法鉴定其化学结构。结果分离得到的10个化合物,分别鉴定为嗪皮素(1)、异嗪皮啶(2)、槲皮素-3-氧-葡萄糖醛酸苷(3)、山柰酚-3-O-葡萄糖醛酸苷(4)、绿原酸(5)、咖啡酸(6)、迷迭香酸(7)、迷迭香酸-4-氧-葡萄糖苷(8)、异香草酸(9)、β-hydroxypropiovanillone(10)。结论化合物3、5、9、10为首次从该属植物中分离得到。

关键词：草珊瑚槲皮素-3-氧-葡萄糖醛酸苷山柰酚-3-O-葡萄糖醛酸苷

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了哥王细胞毒性和细胞毒性成分研究

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中药材 2010年第4期33卷 590-592页

作者：吴鹏黄伟欢王辉李药兰暨南大学药学院/中药及天然药物研究所广东广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省重点实验室广东广州510632 香港中文大学生物系暨南大学医学院广东广州510632

目的:研究有毒中药了哥王对肿瘤细胞的细胞毒性及其细胞毒性成分。方法:采用四甲基偶氮唑盐吸收减少实验(MTT法)测定了哥王乙醇提取物及其各溶剂萃取部位对肿瘤细胞HeLa和HEp-2的细胞毒性;采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对石油醚萃... 详细信息

目的:研究有毒中药了哥王对肿瘤细胞的细胞毒性及其细胞毒性成分。方法:采用四甲基偶氮唑盐吸收减少实验(MTT法)测定了哥王乙醇提取物及其各溶剂萃取部位对肿瘤细胞HeLa和HEp-2的细胞毒性;采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对石油醚萃取部位(毒性部位)的挥发性成分进行分析;并采用MTT法测定毒性部位中主要挥发性成分的细胞毒性。结果:了哥王乙醇提取物、乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位对HeLa和HEp-2细胞均未表现出明显的细胞毒性,CC50大于200μg/mL,但石油醚萃取部位对这2种肿瘤细胞均表现出一定的细胞毒性,CC50分别为(64.3±6.5)、(37.8±8.4)μg/mL。石油醚萃取部位的主要挥发性成分为脂肪酸及其甲酯(棕榈酸,油酸,硬脂酸,棕榈酸甲酯,油酸甲酯和硬脂酸甲酯),其中的不饱和脂肪酸油酸对HeLa和HEp-2细胞均表现出一定的细胞毒性,CC50分别为(74.3±4.0)、(36.9±1.9)μg/mL。结论:了哥王的低极性部位对肿瘤细胞有一定的细胞毒性,不饱和脂肪酸为了哥王的细胞毒性成分之一。

关键词：了哥王细胞毒性细胞毒性成分不饱和脂肪酸

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海洋细菌Bacillus sp.次生代谢产物的分离与鉴定

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沈阳药科大学学报 2010年第1期27卷 69-75页

作者：高昊陈国栋唐金山张树丹王乃利姚新生暨南大学药学院广东广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省重点高校实验室广东广州510632 沈阳药科大学中药学院辽宁沈阳110016

目的研究1株海洋细菌Bacillus sp.（***1979）的次生代谢产物。方法采用各种色谱手段进行分离和纯化,根据各种光谱技术对单体化合物进行结构鉴定。结果分得12个化合物,分别鉴定为2,2′-二硫代二苯并噻唑（2,2′-dibenzothiazolyl disulf... 详细信息

目的研究1株海洋细菌Bacillus sp.（***1979）的次生代谢产物。方法采用各种色谱手段进行分离和纯化,根据各种光谱技术对单体化合物进行结构鉴定。结果分得12个化合物,分别鉴定为2,2′-二硫代二苯并噻唑（2,2′-dibenzothiazolyl disulfide,1）、2（3H）-苯并噻唑酮（2（3H）-benzothiazolone,2）、环（甘-脯）二肽（cyclo（Gly-Pro）,3）、环（亮-脯）二肽（cyclo（Leu-Pro）,4）、环（甘-丙）二肽（cyclo（Gly-Ala）,5）、色氨酸（tryptophan,6）、1,2,3,4-四氢-3-羧基-2-卡波林（1,2,3,4-tetrahydro-3-carboxy-2-carboline,7）、胸腺嘧啶（thymine,8）、尿嘧啶（uracil,9）、苯乙酸（phenylace-tic acid,10）、邻苯二甲酸二异丁酯（1,2-benzenedicarboxylic acid diisobutyl ester,11）、邻苯二甲酸二正丁酯（1,2-benzenedicarboxylic acid dibutyl ester,12）。结论化合物1、2为含硫含氮的杂环类化合物,化合物1为细菌中首次分离,化合物2曾从另一株海洋细菌中分离得到;化合物3-9为含氮成分,其中化合物3-5为常见的细菌代谢产物环二肽,化合物6、7属氨基酸及其衍生物。

关键词：海洋细菌 Bacillus sp. 次生代谢产物杂环苯并噻唑含硫化合物含氮化合物

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小鼠锰超氧化物歧化酶在大肠杆菌中的表达和纯化

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华南农业大学学报 2010年第3期31卷 85-89页

作者：王峰黄璐圆暨南大学药学院广东广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632 中国科学院广州生物医药与健康研究院分子医学中心广东广州510633

为构建小鼠锰超氧化物歧化酶(SOD)的原核表达载体,在大肠杆菌中进行蛋白表达、纯化和功能检测,以小鼠肝脏cDNA为模板,利用PCR方法克隆小鼠锰SOD基因,PCR扩增了1个长600bp左右的基因片段,该片段编码由198个氨基酸组成的成熟的小鼠锰SOD蛋... 详细信息

为构建小鼠锰超氧化物歧化酶(SOD)的原核表达载体,在大肠杆菌中进行蛋白表达、纯化和功能检测,以小鼠肝脏cDNA为模板,利用PCR方法克隆小鼠锰SOD基因,PCR扩增了1个长600bp左右的基因片段,该片段编码由198个氨基酸组成的成熟的小鼠锰SOD蛋白.将其插入pET15b载体中,经测序鉴定正确后,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta-gami.含有pET15b-mMn-SOD质粒的工程菌经过IPTG诱导能表达出相对分子质量约25000的目的蛋白,超声破碎菌体,经Ni-NTA纯化后得到纯度约为95%的重组mMn-SOD蛋白.SOD活性检测表明经过诱导表达的mMn-SOD比活力为531.7U/mg.

关键词：锰超氧化物歧化酶表达纯化 SOD活性

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南药巴戟天的化学成分(英文)

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中国天然药物 2010年第3期8卷 192-195页

作者：张海龙张庆文张晓琦叶文才王一涛澳门大学中华医药研究院暨南大学中药及天然药物研究所广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省重点实验室广州510632 中国药科大学天然药物教研室南京210009

目的:研究南药巴戟天Morinda officinalis How的化学成分。方法:利用硅胶柱层析和凝胶柱层析对南药巴戟天的根茎进行分离纯化,利用光谱学手段鉴定其结构。结果:分离得到17个已知化合物:大黄素甲醚(1),1-羟基-2-甲基蒽醌(2),2-羟基-1-甲... 详细信息

目的:研究南药巴戟天Morinda officinalis How的化学成分。方法:利用硅胶柱层析和凝胶柱层析对南药巴戟天的根茎进行分离纯化,利用光谱学手段鉴定其结构。结果:分离得到17个已知化合物:大黄素甲醚(1),1-羟基-2-甲基蒽醌(2),2-羟基-1-甲氧基蒽醌(3),甲基异茜草素(4),甲基异茜草素1-甲醚(5),1,3-二羟基-2-甲氧基蒽醌(6),3-羟基-2-甲基蒽醌(7),Digiferruginol(8),1,2-二甲氧基-3-羟基蒽醌(9),1,3-二羟基-2-羟甲基蒽醌(10),光泽汀ω-乙醚(11),蒽醌-2-羧酸(12),7-羟基-6-甲氧基香豆素(13),反式丁烯二酸(14),豆甾醇(15),胡萝卜苷(16)和β-谷甾醇(17)。结论:化合物8-12,14-16首次从该植物中分离得到,并且化合物12和14首次从巴戟天属植物中分离。

关键词：巴戟天化学成分蒽醌

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臭灵丹中黄酮类化合物对人喉癌细胞Hep-2凋亡的影响及机制

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中国病理生理杂志 2010年第7期26卷 1362-1365页

作者：曹长姝沈伟哉李药兰王辉暨南大学医学院解剖学系广东广州510632 暨南大学药学院中药及天然产物研究所广东广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省重点实验室广东广州510632 暨南大学医学院微生物及免疫学系广东广州510632

目的:探讨中药臭灵丹中黄酮类化合物诱导人喉癌细胞Hep-2凋亡的机制。方法:MTT法检测分离自臭灵丹的黄酮类化合物3,5-二羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮(HTMF)对2种正常细胞的毒性和对3种肿瘤细胞株的增殖抑制作用;采用流式细胞仪... 详细信息

目的:探讨中药臭灵丹中黄酮类化合物诱导人喉癌细胞Hep-2凋亡的机制。方法:MTT法检测分离自臭灵丹的黄酮类化合物3,5-二羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮(HTMF)对2种正常细胞的毒性和对3种肿瘤细胞株的增殖抑制作用;采用流式细胞仪检测化合物对Hep-2细胞凋亡率的影响;Western blotting法检测凋亡蛋白caspase-3和caspase-9的变化。结果:HTMF显著抑制Hep-2细胞的增殖并呈浓度、时间双重依赖性关系,但对正常细胞Vero和EVC304的毒性较小,对A549和HepG2细胞抑制作用小。流式细胞仪检测结果显示HTMF对Hep-2细胞有促凋亡作用并呈明显的量效、时效关系。Western blotting结果显示HTMF可诱导Hep-2细胞中caspase-3和caspase-9蛋白的活化,并呈时间依赖性关系。结论:HTMF对人喉癌细胞Hep-2的生长有显著的抑制作用,其机制可能通过激活caspase-9进而活化caspase-3诱导Hep-2细胞凋亡。

关键词：黄酮类化合物 Hep-2细胞细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9

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RP-HPLC法测定牛大力药材中高丽槐素的含量

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药物分析杂志 2010年第9期30卷 1735-1737页

作者：王春华王勇王英叶文才中国药科大学天然药物化学教研室南京210009 暨南大学中药及天然药物研究所广州510632 江苏省食品药品检验所南京210008 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省重点实验室广州510632

目的:建立牛大力药材中高丽槐素的RP-HPLC含量测定方法。方法:采用Cosmosil5 C18-ms-Ⅱ色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温30℃;流动相为乙腈-0.1%醋酸水溶液(43∶57),流速***-1;检测波长为312nm;进样体积为20μL。结果:高丽槐素进样... 详细信息

目的:建立牛大力药材中高丽槐素的RP-HPLC含量测定方法。方法:采用Cosmosil5 C18-ms-Ⅱ色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温30℃;流动相为乙腈-0.1%醋酸水溶液(43∶57),流速***-1;检测波长为312nm;进样体积为20μL。结果:高丽槐素进样量与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.9999),线性范围为0.13～2.0μg;平均加样回收率(n=6)为99.3%,RSD=1.5%。结论:该方法准确、快速、简便,重复性好,可用于牛大力药材的质量控制。

关键词：牛大力高丽槐素反相高效液相色谱法含量测定

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