检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖科学进展 2012年第5期18卷 423-426页

作者：伍思琪张玉英吴婷王丽京韩哲杨雪松广东药学院组织胚胎学教研室广东广州510006 广东药学院血管生物学研究所广东广州510006 暨南大学再生医学教育部重点实验室组织胚胎学系广东广州510006

目的观察神经生长导向因子Slit2在鸡胚神经管和脊髓不同发育时期的表达变化。方法用免疫组织化学方法检测Slit2蛋白在鸡胚原肠期(HH6-HH10)神经管和第3d-17d(E3-E17期)脊髓中的表达和分布情况。结果 Slit2蛋白在鸡胚神经管和脊髓... 详细信息

目的观察神经生长导向因子Slit2在鸡胚神经管和脊髓不同发育时期的表达变化。方法用免疫组织化学方法检测Slit2蛋白在鸡胚原肠期(HH6-HH10)神经管和第3d-17d(E3-E17期)脊髓中的表达和分布情况。结果 Slit2蛋白在鸡胚神经管和脊髓不同发育时期均有阳性表达,在脊髓中线结构区呈优势表达,在第9d(E9期)脊髓中线底板处表达最明显,第11d后Slit2蛋白阳性表达逐渐减弱并呈散在分布。结论神经生长导向因子Slit2在鸡胚各发育时期神经管和脊髓的阳性表达呈动态变化。Slit2蛋白在脊髓发育过程起着重要作用。

关键词：神经生长导向因子鸡胚脊髓免疫组织化学

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PTEN抑制胚胎原肠胚形成期EMT的过程

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遗传 2011年第6期33卷 613-619页

作者：李艳王晓钰王丽京徐涛卢晓晔蔡冬青耿建国杨雪松暨南大学再生医学教育部重点实验室医学院组织与胚胎学系广州510632 广东药学院血管生物学实验室广州510224

PTEN(Phosphatase and tensin homolog)是一种重要的抑癌基因,具有非常广泛的生物学活性,例如在细胞的生长发育、迁移、凋亡和信号传导等均发挥重要作用。PTEN基因表达始于在胚胎早期的上胚层,而后主要出现在神经外胚层和胚胎中胚层结构... 详细信息

PTEN(Phosphatase and tensin homolog)是一种重要的抑癌基因,具有非常广泛的生物学活性,例如在细胞的生长发育、迁移、凋亡和信号传导等均发挥重要作用。PTEN基因表达始于在胚胎早期的上胚层,而后主要出现在神经外胚层和胚胎中胚层结构,表明PTEN可能参与胚胎早期发育过程的细胞迁移、增殖和分化。文章主要应用在体改变早期胚胎PTEN的表达水平来观察其对上胚层至中胚层细胞转换—EMT(Epithe-lial-mesenchymal transition)的作用。首先,原位杂交结果提示,内源性PTEN表达在原条以及之后的中胚层细胞结构如体节等。在体PTEN转染实验,体外培养至HH3期的鸡胚胎,转染Wt PTEN-GFP或移植Wt PTEN-GFP原条组织至未转染的同时期的宿主胚胎相同部位后,观察到PTEN转染细胞大都由上胚层迁移至原条并滞留于原条,不再参与中胚层细胞形成。移植实验也得到相似结果,发现在Wt PTEN-GFP阳性原条组织移植后很少细胞迁移出原条。另外在原肠胚期PTEN siRNA降调胚胎一侧PTEN基因后,降调侧中胚层细胞数明显少于正常侧。上述研究结果均提示PTEN基因在胚胎原肠胚期三胚层形成过程中可能具有抑制EMT的作用。

关键词： EMT PTEN 基因表达细胞迁移原肠胚形成

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鸡胚早期发育过程中细胞迁移的基因调控

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中国细胞生物学学报 2011年第10期33卷 1069-1077页

作者：王广李艳杨雪松暨南大学医学院组织与胚胎教研室再生医学教育部重点实验室广州510632

鸡胚是发育生物学研究的经典动物模型,通过基因导入技术调节胚胎发育的基因功能,研究鸡胚早期发育过程中的细胞迁移,有助于更好地诠释相关先天性疾病的发生发展过程。在早期胚胎发育的过程中,原肠胚期三胚层的形成、心管的发生及神经嵴... 详细信息

鸡胚是发育生物学研究的经典动物模型,通过基因导入技术调节胚胎发育的基因功能,研究鸡胚早期发育过程中的细胞迁移,有助于更好地诠释相关先天性疾病的发生发展过程。在早期胚胎发育的过程中,原肠胚期三胚层的形成、心管的发生及神经嵴的发育都伴随着显著的细胞迁移过程。该文将结合近年来国内外对该过程的研究进展,介绍这三个不同时期细胞的迁移及相关基因调控。

关键词：细胞迁移基因调控原条心管神经嵴

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神经管过表达BRE基因促进体节形成和分化

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基础医学与临床 2011年第12期31卷 1309-1313页

作者：雷健王广李艳常青 Kenneth KH Lee John YH Chan 杨雪松暨南大学医学院组织与胚胎学教研室再生医学教育部重点实验室广东广州510632 香港中文大学解剖系

目的探讨BRE基因对鸡胚胎早期体节发育的作用。方法显微注射法将含有BRE基因的质粒注射入HH10期鸡胚神经管,活体胚胎细胞电穿孔方法转染半侧神经管,以另一侧为正常对照侧,原位杂交及免疫荧光法观察过表达BRE基因后体节的发育。结果 BRE... 详细信息

目的探讨BRE基因对鸡胚胎早期体节发育的作用。方法显微注射法将含有BRE基因的质粒注射入HH10期鸡胚神经管,活体胚胎细胞电穿孔方法转染半侧神经管,以另一侧为正常对照侧,原位杂交及免疫荧光法观察过表达BRE基因后体节的发育。结果 BRE基因在鸡胚表达始于神经板,而后高表达在脑泡、神经管及体节。过表达BRE基因后,神经管形态及PAX7和FGF8表达与对照侧相比无明显异常,而实验侧体节PAX7标记发现生皮肌节较大,FGF8表达与对照侧相比无明显异常。结论过表达BRE基因对体节的形成和分化有促进作用,其机制可能与PAX7相关。

关键词：神经管体节 BRE PAX7 FGF8

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PTEN在胚胎早期心脏发育过程中的作用

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广东医学 2011年第2期32卷 137-140页

作者：马征来常青夏潮勇王丽京吴婷李艳杨雪松暨南大学医学院组织学与胚胎学教研室再生医学教育部重点实验室广州510632 广东药学院血管生物学实验室广州510224

目的通过过表达PTEN,探讨胚胎早期原肠胚形成期PTEN表达及在早期心脏发生发育过程的作用和意义。方法用改良滤纸鸡胚胎整体培养法取胚,37℃孵箱孵育待其发育到HH4期,对鸡胚心肌干细胞(Cardiac Stem Cell)进行PTEN电转染,转染成功后一部... 详细信息

目的通过过表达PTEN,探讨胚胎早期原肠胚形成期PTEN表达及在早期心脏发生发育过程的作用和意义。方法用改良滤纸鸡胚胎整体培养法取胚,37℃孵箱孵育待其发育到HH4期,对鸡胚心肌干细胞(Cardiac Stem Cell)进行PTEN电转染,转染成功后一部分鸡胚37℃孵箱继续培养30 h,待其发育形成心管,观察过表达PTEN对心管发生的影响;另一部分鸡胚在超净台内完成心肌干细胞的离体,体外培养使其分化发育成心肌组织,主要研究PTEN在细胞增殖、分化和凋亡过程中的作用。结果 30 h后鸡胚整体的免疫组织化学(N-cadherin)结果显示,PTEN-WT组和PTEN-G129E组鸡胚心管出现了反向环化、多囊化等畸形,GFP组和PTEN-C124S组心管发育受到的影响较小;转染后离体培养得到的心肌组织的跳动频率与GFP组下降的速度加快,且维持时间缩短,GFP组与PTEN-WT组差异有显著性(P<0.05),PTEN-WT组与PTEN-C124S组、PTEN-G129E组差异无显著性(P>0.05)。结论 PTEN蛋白酯酶可能参与早期胚胎心肌干细胞之间黏附分子的表达从而调节细胞迁移、分化发育,并加速了心肌组织的衰老。

关键词： PTEN 原肠胚心肌干细胞 N-cadherin 心肌分化

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鸡胚原肠胚期原条细胞命运决定于其所处的局部微环境

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中国细胞生物学学报 2011年第8期33卷 861-866页

作者：王晓钰李艳马征来王丽京耿建国杨雪松暨南大学再生医学教育部重点实验室医学院组织学与胚胎学教研室广州510632 广东药学院血管生物学研究所广州510224

在果蝇、斑马鱼、鸡等三胚层动物胚胎早期发育的原肠胚期,原条两侧的上胚层细胞进入原条经历上皮-间充质转化(EMT),迁移进入囊胚腔,形成松散的中胚层细胞,位于原条不同部位的细胞其迁移路线和分化命运不同,如前部原条细胞贡献于体节和... 详细信息

在果蝇、斑马鱼、鸡等三胚层动物胚胎早期发育的原肠胚期,原条两侧的上胚层细胞进入原条经历上皮-间充质转化(EMT),迁移进入囊胚腔,形成松散的中胚层细胞,位于原条不同部位的细胞其迁移路线和分化命运不同,如前部原条细胞贡献于体节和心脏等,而后部原条细胞则迁移至胚外形成血岛。为了研究细胞的迁移途径及分化命运是否会随着细胞所处不同部位微环境的改变而改变,利用传统的移植技术,将宿主鸡胚原条前部的一部分细胞用GFP阳性的相同时期鸡胚原条组织替换,培养一段时间后,用荧光体视显微镜追踪GFP阳性细胞的迁移途径。结果发现,从供体原条后部移植到宿主原条前部的细胞遵循原条前部细胞迁移的路线,反之亦然;原位杂交结果显示移植后的GFP阳性细胞分化为所处部位的细胞类型。上述结果表明:鸡胚原肠胚期原条细胞迁移和分化的命运决定于细胞所处的微环境或者说局部基因表达的时空性。

关键词：原肠胚期细胞迁移局部微环境原条移植

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Slit2/Robo1信号在鸡胚早期神经管和体节发育中的作用

Slit2/Robo1信号在鸡胚早期神经管和体节发育中的作用

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：王广李艳马征来雷健王丽京耿建国杨雪松暨南大学再生医学教育部重点实验室医学院组织与胚胎学系广东药学院血管生物学实验室

原肠胚的末期,中线两侧的神经褶在背部中线处合并形成中枢神经系统的原基——神经管;在神经管两侧分节排列的中胚层组织团块我们称之为体节,是骨骼、肌肉、皮肤和尿殖器官(泌尿、生殖器官)的发生来源;在由神经褶愈合为神经管的过程中,... 详细信息

原肠胚的末期,中线两侧的神经褶在背部中线处合并形成中枢神经系统的原基——神经管;在神经管两侧分节排列的中胚层组织团块我们称之为体节,是骨骼、肌肉、皮肤和尿殖器官(泌尿、生殖器官)的发生来源;在由神经褶愈合为神经管的过程中,神经褶边缘与表面外胚层相延续的部分神经外胚层细胞游离出来,形成左右两条与神经管平行的细胞索即为神经嵴,我们推测神经嵴细胞的迁移会影响体节的分化(生皮肌节和生骨节)。Robol作为Slit2的受体最早在果蝇体内发现具有轴突导向作用,Robol在鸡胚早期神经管闭合之前就已经有了表达,因此Slit2/Robol对鸡胚早期神经管闭合、神经嵴细胞迁移及体节分化方面的作用是值得我们深入研究的。我们采用显微注射法将pEGFP-N1或者Robol-shRNA-GFP质粒注射入HH10期胚胎神经管内,活体胚胎细胞电穿孔方法转染胚胎半侧神经管,以另一侧神经管为正常对照侧,原位杂交及免疫荧光方法观察转染10h后神经管的发育和神经嵴绌胞迁移至体节的情况。我们发现降调Robol侧神经管发育较正常对照侧异常,同时发现Slug表达和神经嵴细胞迁移至体节路线发生改变,随后我们进一步观察了N-Cadherin在神经管上的表达情况,发现降调Robol后N-Cadherin的表达增强了。我们推测Slit2/Robol信号直接或间接的调节Slug或N-Cadherin的表达来影响上皮细胞向间充质绌胞转化(EMT)过程,从而抑制神经嵴细胞背侧的迁移,其具体机制我们还在继续研究之中。

关键词： Slit2/Robo1 神经管体节神经嵴

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PTEN抑制胚胎原肠胚形成期EMT的过程

PTEN抑制胚胎原肠胚形成期EMT的过程

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：李艳王晓钰王丽京徐涛卢晓晔蔡冬青耿建国杨雪松暨南大学医学院组织与胚胎学系再生医学教育部重点实验室广东药学院血管生物学实验室

PTEN(Phosphatase and tensin homolog)是一种重要的抑癌基因,具有非常广泛的生物学活性,例如在绌胞的生长发育、迁移、凋亡和信号传导等均发挥重要作用。PTEN基因表达始于在胚胎早期的上胚层,而后主要出现在神经外胚层和胚胎中胚层结构... 详细信息

PTEN(Phosphatase and tensin homolog)是一种重要的抑癌基因,具有非常广泛的生物学活性,例如在绌胞的生长发育、迁移、凋亡和信号传导等均发挥重要作用。PTEN基因表达始于在胚胎早期的上胚层,而后主要出现在神经外胚层和胚胎中胚层结构,表明PTEN可能参与胚胎早期发育过程的细胞迁移、增殖和分化。应用在体改变早期胚胎PTEN的表达水平可以观察其对上胚层至中胚层细胞转换-EMT(Epithelial-mesenchymal transition)的作用。首先,整体胚胎的原位杂交结果提示,内源性PTEN表达在原条以及之后的中胚层绌胞结构如体节等。在体PTEN转染实验,体外培养至HH3期的鸡胚胎,转染Wt PTEN-GFP或移植Wt PTEN-GFP原条组织至未转染的同时期的宿主胚胎相同部位后,观察到PTEN转染细胞大都由上胚层迁移至原条并滞留于原条,不冉参与中胚层细胞形成。移植实验也得到相似结果,发现在Wt PTEN-GFP阳性原条组织移植后很少细胞迁移山原条。另外在原肠胚期PTEN siRNA降调胚胎一侧PTEN基因后,降调侧中胚层细胞数明显少于正常侧。上述研究结果均提示PTEN基因在胚胎原肠胚期三胚层形成过程中可能具有抑制EMT的作用。

关键词： EMT PTEN 基因表达细胞迁移原肠胚形成

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肾纤维囊作为载体培养角膜基质细胞的研究

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广东医学 2009年第1期30卷 23-25页

作者：唐光霞陈建苏徐锦堂夏潮涌丁勇暨南大学附属第一医院眼科广州510630 暨南大学医学院眼科研究室再生医学教育部重点实验室广州510632 暨南大学医学院组织学与胚胎学教研室广州510632

目的探索以脱细胞的肾纤维囊作为载体培养角膜基质细胞并研究培养角膜基质细胞特性。方法将培养扩增的兔角膜基质细胞分别接种到培养板和肾纤维囊上进行体外培养,采用倒置显微镜、免疫组化(波形蛋白)和免疫荧光(AO、PI和Hoechst)的方法... 详细信息

目的探索以脱细胞的肾纤维囊作为载体培养角膜基质细胞并研究培养角膜基质细胞特性。方法将培养扩增的兔角膜基质细胞分别接种到培养板和肾纤维囊上进行体外培养,采用倒置显微镜、免疫组化(波形蛋白)和免疫荧光(AO、PI和Hoechst)的方法进行检测,观察兔角膜基质细胞在培养板和肾纤维囊上的生长情况。结果倒置显微镜和免疫荧光显微镜观察结果显示角膜基质细胞在肾纤维囊上快速贴壁生长并增殖,细胞形态呈多角形树枝状,多次传代后细胞仍维持原有的形态和功能,细胞能长期培养。在培养板上培养的细胞呈长梭形,细胞贴壁生长和增殖情况稍差。在肾纤维囊上的活细胞较在培养板上培养的细胞多。结论角膜基质细胞在脱细胞的肾纤维囊载体上生长良好,细胞形态结构明显。本研究为角膜基质细胞的体外培养,提供了简单和高效的方法。

关键词：肾纤维囊角膜基质细胞细胞培养

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