检索结果-内蒙古大学图书馆

暨南大学学报（自然科学与医学版） 2023年第2期44卷 124-136页

作者：梁春宝李立林蔡冬青暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学科技部广东省国际科技合作基地广东广州510632 暨南大学发育与再生生物学系广东广州510632

目的:利用单细胞核测序技术分析成年小鼠心脏构成细胞的分群,以及各群细胞所属类别、相对特异标记基因及各细胞群在心脏构成细胞的占比,旨在为阐明不同类型心脏构成细胞之间的相互作用奠定基础。方法:选择2月龄的C57BL/6J小鼠心脏用于... 详细信息

目的:利用单细胞核测序技术分析成年小鼠心脏构成细胞的分群,以及各群细胞所属类别、相对特异标记基因及各细胞群在心脏构成细胞的占比,旨在为阐明不同类型心脏构成细胞之间的相互作用奠定基础。方法:选择2月龄的C57BL/6J小鼠心脏用于心脏构成细胞的细胞核制备。使用10×Genomics单细胞测序技术对经制备的心脏细胞核进行测序。使用Cellranger将测序的原始数据解析为fastq文件,生成feature-barcoded定量矩阵进行数据整合及基因表达分析等。利用Seurat对经Cellranger分析处理的数据进行质控、标准化、降维、tSNE聚类、细胞类别注释及具体细胞分群可视化处理。结果:成年小鼠心脏细胞可分为19群,共10个细胞种类,占比较大的细胞分别为内皮细胞(39.46%)、心肌细胞(26.56%)和成纤维细胞(13.46%),合计占心脏细胞总数的79.48%。标记基因鉴定发现,内皮细胞前两位的特异性标记基因为Pecam1和Cdh5基因,心肌细胞的特异性标记基因为Actn2和Tnnc1基因,而成纤维细胞则为Col1a2和Col3a1基因。结论:成年小鼠心脏主要由10种细胞构成,其在心脏的占比不同,血管内皮细胞、心肌细胞及成纤维细胞是位列前3位的构成细胞。每种构成细胞均存在相对特异的标记基因。

关键词：单细胞核测序小鼠心脏心脏构成细胞

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BDNF参与保护葡萄糖饥饿引起的微血管内皮细胞凋亡

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2023年第3期44卷 238-247页

作者：姚悦纯蔡冬青陈夷林暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学科技部广东省国际科技合作基地广东广州510632 暨南大学发育与再生生物学系广东广州510632

目的:探讨脑源性神经营养因子(BDNF)是否参与葡萄糖缺乏状态下微血管内皮细胞的保护。方法:使用小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3细胞株构建葡萄糖饥饿模型,分别使用BDNF的siRNA及BDNF-TrkB通路阻断剂对经建模的微血管内皮细胞进行处理,使用... 详细信息

目的:探讨脑源性神经营养因子(BDNF)是否参与葡萄糖缺乏状态下微血管内皮细胞的保护。方法:使用小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3细胞株构建葡萄糖饥饿模型,分别使用BDNF的siRNA及BDNF-TrkB通路阻断剂对经建模的微血管内皮细胞进行处理,使用流式细胞技术检测细胞凋亡,使用Western blot和qRT-PCR分别对BDNF及其他调控基因的表达进行研究。结果:葡萄糖饥饿会导致微血管内皮细胞凋亡,晚期凋亡水平随着缺糖时间增加而升高,且微血管内皮细胞BDNF表达量上调。在葡萄糖饥饿状态下,使用BDNF受体TrkB的抑制剂K252a阻断BDNF-TrkB通路能增加微血管内皮细胞的早期凋亡;抑制BDNF表达使微血管内皮细胞的凋亡升高。结论:BDNF参与保护葡萄糖饥饿引起的微血管内皮细胞凋亡,并参与非葡萄糖饥饿和葡萄糖饥饿状态下糖酵解关键调控基因PFKM表达水平的维持,从而在维持血管内皮细胞的存活及通过糖酵解供能中发挥重要的调控作用。

关键词：微血管内皮细胞葡萄糖饥饿脑源性神经营养因子(BDNF) 凋亡

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基于CRISPR/Cas9系统的ANO1-EGFP载体构建

基于CRISPR/Cas9系统的ANO1-EGFP载体构建

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广东省医学会第6届细胞治疗学学术会议

作者：陈洪毅蔡冬青再生医学教育部重点实验室香港中文大学-暨南大学再生医学联合实验室科技部广东省国际科技合作基地(暨南大学) 暨南大学发育与再生生物学系 510000

为了研究ANO1基因在热带爪蛙(Xenopustropicalis)胚胎发育的时空表达.本研究构建了ANO1-EGFP载体，将ANO1最后一个外显子克隆到载体中，同时把终止密码子去掉，再在末端添加EGFP蛋白;在最后一个外显子前的内含子中设计sgRNA位点，利用... 详细信息

为了研究ANO1基因在热带爪蛙(Xenopustropicalis)胚胎发育的时空表达.本研究构建了ANO1-EGFP载体，将ANO1最后一个外显子克隆到载体中，同时把终止密码子去掉，再在末端添加EGFP蛋白;在最后一个外显子前的内含子中设计sgRNA位点，利用在线工具(***)设计序列中的sgRNA位点，共挑选了6个sgRNA候选位点;将ANO1-EGFP载体和sgRNA载体共转染293细胞，转染24小时后再利用流式细胞仪检测细胞的荧光，在体外验证sgRNA的切割效率.结果显示sgRNA5 具有最高的切割效率，可用于蛙卵显微注射.

关键词： CRISPR Cas9 ANO1热带爪蛙

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FoxO3通过上调抗氧化酶的表达保护心脏免受百草枯诱导的氧化损伤

FoxO3通过上调抗氧化酶的表达保护心脏免受百草枯诱导的氧化损伤

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广东省医学会第6届细胞治疗学学术会议

作者：常早上夏景波吴海燕江伏青周毅明彭文韬梁炽谦郭小芳齐绪峰再生医学教育部重点实验室香港中文大学-暨南大学再生医学联合实验室科技部广东省国际科技合作基地(暨南大学) 暨南大学发育与再生生物学系

百草枯可诱导脑组织细胞衰老,并且与帕金森病的神经病理改变有关。而且,百草枯可导致心力衰竭和氧化损伤,但是百草枯是否以及如何引起心脏衰老的机制尚不清楚。在此,我们发现百草枯可诱导体外心肌细胞衰老,以及心脏老化的相关表型,包括... 详细信息

百草枯可诱导脑组织细胞衰老,并且与帕金森病的神经病理改变有关。而且,百草枯可导致心力衰竭和氧化损伤,但是百草枯是否以及如何引起心脏衰老的机制尚不清楚。在此,我们发现百草枯可诱导体外心肌细胞衰老,以及心脏老化的相关表型,包括心脏重构和心功能障碍。同时,百草枯抑制FoxO3a转录因子的活化。我们发现,在敲降FoxO3a的心肌细胞中,百草枯处理后,抑制细胞增殖,促进凋亡,增强SA-β-gal活性和P16 的表达。更重要的是,通过FoxO3敲除小鼠,百草枯诱导的心肌肥大,纤维化,凋亡,氧化应激,DNA损伤和P16 的表达显著升高。此外,敲降FoxO3a的体内外实验,百草枯诱导后都显著的抑制了抗氧化酶(过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶 2(SOD2))的激活,同时小鼠心脏功能的衰减。染色质免疫沉淀验证进一步了FoxO3a与心肌细胞和心脏中CAT和SOD2 启动子的直接结合。在功能上,CAT或SOD2 的过表达降低了百草枯诱导细胞衰老表型。总的来说,这些结果表明,FoxO3a 至少部分地通过上调抗氧化酶SOD和CAT的表达以保护心脏免遭百草枯诱导的氧化损伤和衰老表型。

关键词：百草枯 FoxO3a 衰老心功能不全抗氧化酶

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BDNF及其受体TrkB在二倍体热带爪蛙早期发育中的表达

BDNF及其受体TrkB在二倍体热带爪蛙早期发育中的表达

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广东省医学会第6届细胞治疗学学术会议

作者：吕罗成蔡冬青再生医学教育部重点实验室香港中文大学-暨南大学再生医学联合实验室科技部广东省国际科技合作基地(暨南大学) 暨南大学发育与再生生物学系 510000

使用实时荧光定量PCR和整胚原位杂交,分别对BDNF及其受体TrkB在二倍体热带爪蛙早期胚胎发育的时空表达模式进行研究.RT-PCR结果证明：BDNF基因在热带爪蛙的卵母细胞阶段开始表达,并持续表达于整个早期胚胎发育过程中,而BDNF的特异性受体... 详细信息

使用实时荧光定量PCR和整胚原位杂交,分别对BDNF及其受体TrkB在二倍体热带爪蛙早期胚胎发育的时空表达模式进行研究.RT-PCR结果证明：BDNF基因在热带爪蛙的卵母细胞阶段开始表达,并持续表达于整个早期胚胎发育过程中,而BDNF的特异性受体TrkB在上述相同发育阶段均存在表达;WISH结果揭示了：BDNF和TrkB的空间表达模式基本一致,BDNF和TrkB在卵裂期的卵裂球的动物级表达,在原肠胚末期主要表达在胚孔附近和神经轴区域,在神经轴胚早期高表达于神经板等.提示：BDNF-TrkB 通路在整个早期胚胎正常发育过程中可能发挥着重要的调控作用.

关键词： BDNF TrkB 二倍体热带爪蛙早期胚胎

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心脏Telocytes随增龄衰老表型的初步观察

心脏Telocytes随增龄衰老表型的初步观察

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广东省医学会第6届细胞治疗学学术会议

作者：罗佳丽蔡冬青再生医学教育部重点实验室香港中文大学-暨南大学再生医学联合实验室科技部广东省国际科技合作基地(暨南大学) 暨南大学发育与再生生物学系 510000

心脏 Telocytes 是最近被发现,位于心肌层间质,呈纵横交错分布,在细胞间支撑、通讯连接及心脏再生和修复等发挥重要作用的心肌层间质细胞.我们采用实时荧光定量 PCR(Real-time PCR,RT-PCR)法、β-半乳糖苷酶检测、SOD活性过氧化氢酶检... 详细信息

心脏 Telocytes 是最近被发现,位于心肌层间质,呈纵横交错分布,在细胞间支撑、通讯连接及心脏再生和修复等发挥重要作用的心肌层间质细胞.我们采用实时荧光定量 PCR(Real-time PCR,RT-PCR)法、β-半乳糖苷酶检测、SOD活性过氧化氢酶检测、活性氧检测等,分别对年青、年老大鼠心脏 Telocytes 在经典细胞衰老的表型进行了研究,初步结果表明：年老心脏 Telocytes 和年青Telocytesβ-半乳糖苷酶染色强度较为接近.而 RT-PCR 结果发现：P21、P16、P53基因在高代数的Telocytes高于低代数Telocytes.年青Telocytes的过氧化氢酶活力高于年老Telocytes.上述结果提示：心脏Telocytes存在细胞复制性衰老.

关键词： Telocytes 衰老心脏

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BDNF对缺氧心脏微血管内皮细胞的保护

BDNF对缺氧心脏微血管内皮细胞的保护

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广东省医学会第6届细胞治疗学学术会议

作者：陈文生蔡冬青再生医学教育部重点实验室香港中文大学-暨南大学再生医学联合实验室广东省国际科技合作基地(暨南大学) 暨南大学发育与再生生物学系 510000

缺血缺氧情况下心脏微血管内皮细胞的存活对心肌梗死的修复与再生起着重要作用。我们初步研究表明：低氧缺血情况下BDNF处理的CMECs存活较对照组明显增高,且BDNF处理的CMECs凋亡率较对照组明显降低,上述发现提示：缺氧缺血条件下,BDNF对... 详细信息

缺血缺氧情况下心脏微血管内皮细胞的存活对心肌梗死的修复与再生起着重要作用。我们初步研究表明：低氧缺血情况下BDNF处理的CMECs存活较对照组明显增高,且BDNF处理的CMECs凋亡率较对照组明显降低,上述发现提示：缺氧缺血条件下,BDNF对CMECs的保护主要是通过抑制细胞凋亡而发挥相应的保护作用,对相关通路进行研究,将有助于研发有效保护血管内皮细胞存活,促进梗死心肌再生的新疗法。

关键词： BDNF 心脏微血管内皮细胞细胞死亡

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跑台运动对高龄大鼠运动机能的改善作用

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中国实验动物学报 2017年第1期25卷 48-53页

作者：孙华伟廖肇福赖炳林李艳梅沈晓涛郑馨冯珊珊齐绪峰蔡冬青暨南大学再生医学教育部重点实验室科技部广东省国际科技合作基地(暨南大学) 暨南大学发育与再生生物学系广州510632

目的探讨大鼠运动机能随增龄的变化规律,以及运动对高龄大鼠运动机能的改善作用。方法对26月龄、8月龄和2月龄SD大鼠进行为期2周的中等强度跑台运动干预,测定大鼠运动前后前肢拉力、耐力、躯体向上活动能力及极限速度4个机能指标,进行... 详细信息

目的探讨大鼠运动机能随增龄的变化规律,以及运动对高龄大鼠运动机能的改善作用。方法对26月龄、8月龄和2月龄SD大鼠进行为期2周的中等强度跑台运动干预,测定大鼠运动前后前肢拉力、耐力、躯体向上活动能力及极限速度4个机能指标,进行对比分析。结果 126月龄大鼠组的前肢拉力、耐力、躯体向上活动能力、极限速度均显著低于8月龄组和2月龄组,且后3个指标呈现增龄性下降;226月龄和8月龄组的前肢拉力运动后高于运动前,8月龄组和2月龄组的躯体向上活动能力运动后高于运动前;3运动干预前后4项指标的运动机能总评分进行比较,26月龄组运动后显著高于运动前。结论大鼠的前肢拉力、耐力、躯体向上活动能力及极限速度等4项运动机能指标呈增龄性下降,可作为大鼠运动机能的衰老指标。中等强度的跑台运动能显著改善高龄大鼠总运动机能的下降。

关键词：衰老运动机能跑台运动训练大鼠

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依据“ping-pong”循环机制预测piRNA靶基因的搜索方法

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基础医学与临床 2017年第3期37卷 399-401页

作者：许甘霖齐绪峰蔡冬青暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学科技部及广东省国际科技合作基地广东广州510632 暨南大学发育与再生生物学系广东广州510632

piRNA是指能与PIWI家族蛋白结合的小RNAs,其功能主要是稳定生殖细胞正常发育,在其他体细胞内也参与生理功能的调控[1]。相当一部分的piRNA通过被称作＂pingpong＂循环机制去识别与切割其靶基因的转录本mRNA（图1）,并通过该机制去实现初... 详细信息

piRNA是指能与PIWI家族蛋白结合的小RNAs,其功能主要是稳定生殖细胞正常发育,在其他体细胞内也参与生理功能的调控[1]。相当一部分的piRNA通过被称作＂pingpong＂循环机制去识别与切割其靶基因的转录本mRNA（图1）,并通过该机制去实现初级piRNA（primary piRNA）和次级piRNA（secondary piRNA）循环利用,piwil4或piwil2与相应的piRNA结合,通过piRNA的5＇端前10~11个碱基作为介导序列,依照碱基互补原则,对与之互补的靶mRNA进行切割,

关键词：循环机制 piRNA ping-pong 碱基互补转录本蛋白结合起始位点结果符合率循环利用大鼠

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心脏Telocytes在年老大鼠心脏的分布

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解剖学报 2016年第6期47卷 802-806页

作者：徐莎莎廖肇福蔡冬青暨南大学再生医学教育部重点实验室暨南大学科技部及广东省国际科技合作基地暨南大学发育与再生生物学系广州510632

目的探讨心脏Telocytes(CTs)在年老大鼠心脏的形态、分布及与年青心脏比较的异同。方法使用透射电子显微镜、生物测量、免疫荧光染色等技术,对24月龄年老大鼠心脏的心房部分、心室中间部分及心尖部分的代表性横切面中,CTs的形态、分布... 详细信息

目的探讨心脏Telocytes(CTs)在年老大鼠心脏的形态、分布及与年青心脏比较的异同。方法使用透射电子显微镜、生物测量、免疫荧光染色等技术,对24月龄年老大鼠心脏的心房部分、心室中间部分及心尖部分的代表性横切面中,CTs的形态、分布与细胞密度进行半定量分析。结果年老心脏3个代表性横切面的心肌细胞间隙和微血管周边均存在许多CTs,上述3个不同部位的CTs的形态指标的半定量分析值十分接近,差异没有统计学意义。经分离的年老心脏CTs与年青心脏一样表达c-Kit和CD34。对3个代表性横切面CTs细胞密度的半定量分析结果显示,年老大鼠心房部分的CTs密度[(47.65±4.01)个/mm^2]显著高于心尖部分[(33.68±2.53)个/mm2]和中间部分[(26.49±2.11)个/mm^2](P<0.05)。年老心脏CTs在上述区域分布的差异,与我们前期所观察到的年青大鼠心脏相应区域CTs的分布规律相一致[7],但年老心脏上述3个区域CTs的密度均显著性高于年青心脏对应区域(P<0.05)。结论年老心脏存在CTs,其心房部分的CTs密度显著高于心尖部分和心室中间部分,该分布规律与年青大鼠相一致,但年老心脏上述区域CTs的密度显著高于年青心脏。

关键词：心脏 Telocyte 心肌衰老免疫荧光大鼠

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