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广东省医学会第十九次血液病学学术会议

作者：王欣玉吴秀丽罗强金真伊刘思初陈少华杨力建李萡李文瑜李扬秋暨南大学血液病研究所暨南大学血液病研究所广东省人民医院肿瘤中心淋巴瘤科广东省人民医院肿瘤中心淋巴瘤科暨南大学血液病研究所暨南大学附属第一医院血液科暨南大学再生医学教育部重点实验室

目的弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)具有高度的异质性，是最常见的侵袭性非霍奇金淋巴瘤，容易出现难治复发。由于γ δ T细胞具有抗肿瘤的潜能，我们的前期研究分析了部分初发DLBCL患者外周血γ δ T细胞的T细胞受体(TCR)谱系特点，发现...

目的弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)具有高度的异质性，是最常见的侵袭性非霍奇金淋巴瘤，容易出现难治复发。由于γ δ T细胞具有抗肿瘤的潜能，我们的前期研究分析了部分初发DLBCL患者外周血γ δ T细胞的T细胞受体(TCR)谱系特点，发现TCRγδ部分亚家族出现优势表达。近年已发现趋化因子及其受体(特别是CCL21/CCR7、CXCL12/CXCR4以及CCL5等)在实体肿瘤如乳腺癌等的侵袭转移中可能发挥关键作用，但DLBCL中相关趋化因子及其受体的表达情况与γ δ T细胞优势表达亚家族的关系尚不明确。因此，我们初步探讨了初发初治、难治复发以及临床缓解的DLBCL患者外周血中TCR γ亚家族(TRGV Ⅰ～Ⅲ)基因和相关趋化因子及其受体基因的表达情况。

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弥漫性大B细胞淋巴瘤中TRGV亚家族和相关趋化因子及其受体基因的表达情况

弥漫性大B细胞淋巴瘤中TRGV亚家族和相关趋化因子及其受体基因的...

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中国免疫学会第十届全国免疫学学术大会

作者：王欣玉吴秀丽罗强金真伊刘思初陈少华杨力建李萡李文瑜李扬秋暨南大学血液病研究所暨南大学血液病研究所广东省人民医院肿瘤中心淋巴瘤科广东省人民医院肿瘤中心淋巴瘤科暨南大学血液病研究所暨南大学第一附属医院血液科暨南大学再生医学教育部重点实验室

目的：弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是最常见高度异质性、侵袭性非霍奇金淋巴瘤。γδ T细胞具有抗肿瘤潜能，前期发现部分DLBCL患者外周血γδ T细胞T细胞受体(TCR)的TCR γδ部分亚家族H现优势表达。趋化因子及其受体在实体肿瘤的侵袭... 详细信息

目的：弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是最常见高度异质性、侵袭性非霍奇金淋巴瘤。γδ T细胞具有抗肿瘤潜能，前期发现部分DLBCL患者外周血γδ T细胞T细胞受体(TCR)的TCR γδ部分亚家族H现优势表达。趋化因子及其受体在实体肿瘤的侵袭转移中可能发挥关键作用。本研究探讨不同病程的DLBCL患者外周血中TCRγ亚家族基因和相关趋化因子及其受体基因的表达情况。

关键词：弥漫性大B细胞淋巴瘤 T细胞受体趋化因子

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脂肪干细胞的三维球形培养

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中国组织工程研究 2014年第6期18卷 872-879页

作者：王婵戴应郭永龙杨艳刘庆陈建苏暨南大学再生医学教育部重点实验室广东省广州市510632 暨南大学医学院眼科研究所广东省广州市510632

背景:大多哺乳类细胞在正常生理状态下多以三维结构存在,为还原细胞本身在体内的自然状态,很多研究者开始尝试在体外对细胞进行三维培养,球形培养是一种常见的三维培养模式。目的:尝试用3种不同的方法在体外对人脂肪干细胞进行球形培养... 详细信息

背景:大多哺乳类细胞在正常生理状态下多以三维结构存在,为还原细胞本身在体内的自然状态,很多研究者开始尝试在体外对细胞进行三维培养,球形培养是一种常见的三维培养模式。目的:尝试用3种不同的方法在体外对人脂肪干细胞进行球形培养,并观察其生物学特征。方法:对提取的脂肪来源细胞进行表面Marker流式检测以及成脂成骨诱导鉴定后,证实为脂肪干细胞。先后用低黏附培养法、hanging-drop培养法和Eppendorf管培养法3种方法在体外对脂肪干细胞进行球形培养,对3种方法形成球形的特点进行比较分析,并通过Imagej软件计算出3组多细胞球体的平均面积,利用Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Live&Dead Cells试剂盒对3组多细胞球体进行活力检测。结果与结论:①通过流式细胞术鉴定细胞表型标志物,其中CD29,CD44,CD59完全阳性,同时成脂成骨诱导也为阳性,证实提取的细胞为脂肪干细胞。3代以内脂肪干细胞多呈长梭形,并克隆状生长。②低黏附培养法、hanging-drop培养法、Eppendorf管培养法均可使脂肪干细胞聚集成球形生长,但所成多细胞球形有所差异。低黏附培养法所形成的细胞球形大小不一,不易控制;而hanging-drop培养法和Eppendorf管培养法均可使脂肪干细胞形成大小均一的球形,但在大小和形成时间上有所不同。③3种不同方法所形成的球形细胞均保持较好的细胞活力。

关键词：干细胞脂肪干细胞诱导分化球形培养活力低黏附培养 hanging-drop培养 Eppendorf管培养国家自然科学基金

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心舒宝对大鼠血糖血脂的调节作用

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时珍国医国药 2014年第11期25卷 2644-2646页

作者：李艳梅李英镇李昀健陈叙伟暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 科技部及广东省科技厅"国际科技合作基地" 广东广州510632 再生医学联合实验室(暨南大学-香港中文大学) 广东广州510632 暨南大学发育与再生生物学系广东广州510632

目的探究心舒宝对大鼠血糖、血脂的调节作用。方法正常雌、雄性SD大鼠分别灌喂不同剂量心舒宝药物,观察心舒宝对大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及血糖的影响;建立大鼠高... 详细信息

目的探究心舒宝对大鼠血糖、血脂的调节作用。方法正常雌、雄性SD大鼠分别灌喂不同剂量心舒宝药物,观察心舒宝对大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及血糖的影响;建立大鼠高血脂模型分3组:对照组(高脂饲料)、实验组1(普通饲料+心舒宝)、实验组2(高脂饲料+心舒宝),灌药4周后取血测定上述指标。结果心舒宝能明显上调正常雌性大鼠的HDL-C(P<0.05),对TC、TG和LDL-C没有明显下调作用(P﹥0.05),能够下调正常雄性大鼠TG、LDL-C(P<0.05);心舒宝能够明显下调高血脂大鼠的TC(P<0.01)、LDL-C含量(P<0.05)。结论心舒宝能够降低大鼠高血脂,能提升正常大鼠HDL-C含量,能够降血糖,具有潜在的保健作用。

关键词：心舒宝血糖血脂

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兔角膜内皮细胞球形培养的活性和细胞表型

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中华实验眼科杂志 2014年第9期32卷 786-790页

作者：杨艳刘庆郭永龙王婵傅婷陈建苏暨南大学第一临床医学院眼科广州510632 暨南大学第一临床医学院再生医学教育部重点实验室广州510632 暨南大学第一临床医学院眼科研究所广州510632

背景组织工程角膜内皮层的构建和细胞注射疗法需要足够数量的角膜内皮细胞（CECs）,因此如何在体外培养大量高活性的角膜内皮种子细胞是当前亟需解决的问题. 目的建立兔CECs高活性三维（3D）球形培养方法,探索培养细胞的生物学特性. ... 详细信息

背景组织工程角膜内皮层的构建和细胞注射疗法需要足够数量的角膜内皮细胞（CECs）,因此如何在体外培养大量高活性的角膜内皮种子细胞是当前亟需解决的问题. 目的建立兔CECs高活性三维（3D）球形培养方法,探索培养细胞的生物学特性. 方法酶消化法分离和培养兔CECs并进行传代,经低黏附振动培养法产生兔CECs球,倒置相差显微镜下观察培养细胞的形态;采用扫描电子显微镜观察CECs球的表面超微结构;用吖啶橙染色法鉴定CECs球中细胞的活性;采用CCK-8试剂盒检测细胞的吸光度（A450）值,判断细胞的增生情况.将CECs球接种到6孔细胞培养板贴壁培养1周,球形培养的细胞为球形培养组,常规培养的细胞为常规培养组.采用免疫荧光法检测闭锁小带蛋白1（ZO-1）和Na＋/K＋-ATP酶在细胞中的表达.结果经球形培养的CECs呈聚集生长,培养1周细胞形态为六角形或多边形,融合成单层,呈铺路石状排列;扫描电子显微镜下可见兔CECs球体周围有细胞爬出,未长散的细胞球中细胞与细胞之间结合紧密,球体表面凹凸不平.吖啶橙染色表明,细胞球中90％细胞呈绿色荧光;球形培养组细胞平均A450值为1.524±0.013,常规培养组细胞平均A450值为1.265±0.021,球形培养组细胞增生值明显增加,2个组间差异有统计学意义（t=-3.436,P=0.010）.免疫荧光检测表明,培养的细胞中ZO-1和Na＋/K＋-ATP酶阳性细胞膜对FITC呈绿色荧光,细胞核DAPI染色呈蓝色荧光.结论 CECs的3D球形培养方法培养的细胞可保持细胞的高活性、高增生能力和细胞表型,为构建组织工程角膜内皮及细胞疗法提供了更好的角膜内皮种子细朐.

关键词：角膜内皮细胞球形培养三维细胞活性细胞表型

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实时定量PCR检测慢性粒细胞白血病患者Shh、Smo基因的表达水平

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第三军医大学学报 2014年第3期36卷 267-269页

作者：朱华民李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广州510632 广东医学院附属医院急救中心广东湛江524001 暨南大学再生医学教育部重点实验室广州510632

目的建立Hedgehog信号通路功能性基因Shh和功能性受体蛋白Smo基因的定量检测方法,并分析其在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者中的表达水平。方法利用实时定量PCR检测20例CML患者和作为正常对照(8例)的健康人外周血... 详细信息

目的建立Hedgehog信号通路功能性基因Shh和功能性受体蛋白Smo基因的定量检测方法,并分析其在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者中的表达水平。方法利用实时定量PCR检测20例CML患者和作为正常对照(8例)的健康人外周血细胞中Shh、Smo基因的表达水平,以β2微球蛋白(β2-M)基因作为内对照。结果 CML组Shh、Smo表达水平均明显高于正常对照组(P<0.05)。结论成功建立Shh、Smo基因的定量检测方法;Shh、Smo基因在CML中高表达。

关键词： Shh Smo基因慢性粒细胞白血病实时定量PCR 基因表达

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CARMA1-BCL10-MALT1调节T细胞增殖分化作用及其在T细胞肿瘤中的改变情况

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免疫学杂志 2014年第9期30卷 837-841页

作者：王旭胡峻岩李扬秋暨南大学再生医学教育部重点实验室广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广州510632 广州医学院第三附属医院急诊科 510150

由CARMA1、BCL10和MALT1 3种蛋白分子形成的CBM复合物,是活化NF-κB的信号转导通路中的重要信号分子,在调控淋巴细胞增殖和分化的过程中具有重要作用。本文主要综述了该信号通路分子的结构和主要在T细胞增殖和分化中的功能的研究新进展... 详细信息

由CARMA1、BCL10和MALT1 3种蛋白分子形成的CBM复合物,是活化NF-κB的信号转导通路中的重要信号分子,在调控淋巴细胞增殖和分化的过程中具有重要作用。本文主要综述了该信号通路分子的结构和主要在T细胞增殖和分化中的功能的研究新进展以及在T细胞肿瘤中的异常改变和相关分子机制。

关键词： CARMA1 BCL10 MALT1 分化 T细胞肿瘤

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RNA干扰下调PPP2R5C对T-ALL TCR Vβ亚家族分布和克隆增殖的影响

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2014年第4期35卷 361-366页

作者：徐艳陈宇周玲玲刘思初杨力建陈少华罗更新李扬秋暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学第一附属医院血液科广东广州510630

目的:基于前期利用靶向PPP2R5C基因的小干扰RNA(PPP2R5C-siRNA)抑制白血病T细胞增殖的结果,进一步了解PPP2R5C-siRNA对T-ALL样本中TCR Vβ亚家族基因谱系及其克隆性增殖情况.方法:利用PPP2R5C-siRNA转染2例初发未治疗T-ALL病人外周血单... 详细信息

目的:基于前期利用靶向PPP2R5C基因的小干扰RNA(PPP2R5C-siRNA)抑制白血病T细胞增殖的结果,进一步了解PPP2R5C-siRNA对T-ALL样本中TCR Vβ亚家族基因谱系及其克隆性增殖情况.方法:利用PPP2R5C-siRNA转染2例初发未治疗T-ALL病人外周血单个核细胞(PBMC),设无关序列对照组(SC)和空白对照组(NC);利用实时定量PCR检测PPP2R5C基因表达水平.利用RT-PCR扩增各组样本中24个TCR Vβ亚家族基因的互补决定区3(CDR3);阳性产物进一步经基因扫描分析CDR3长度,了解其Vβ亚家族T细胞克隆性.结果:PPP2R5C-siRNA处理后明显下调PBMC中PPP2R5C基因表达水平.2例初发T-ALL外周血中分别可检测到10和17个Vβ亚家族,多数Vβ亚家族T细胞为多克隆性,病例1中Vβ9和Vβ17为寡克隆性,而病例2中,Vβ14和Vβ16呈寡克隆性;经过RNA干扰处理后,TCR Vβ亚家族表达率降低,仅检测到3和4个Vβ亚家族,分别为Vβ2,Vβ3,Vβ16和Vβ17.其中2个Vβ家族的寡克隆性模式发生改变,病例1中,Vβ17转为多克隆,而病例2中,Vβ16也转变为多克隆.结论:RNA干扰下调白血病T细胞PPP2R5C基因表达抑制细胞增殖时,在一定程度上影响TCR Vβ亚家族T细胞增殖和克隆模式变化,对正常T细胞功能可能存在一定影响.

关键词： PPP2R5C基因 T细胞-急性淋巴细胞白血病 T细胞受体Vβ基因 T细胞克隆性

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心舒宝对高血脂模型大鼠血脂水平的影响

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时珍国医国药 2014年第5期25卷 1084-1086页

作者：齐绪峰洪绯罗志毅李艳梅李英镇李昀键陈叙伟沈晓涛郑馨暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 科技部及广东省科技厅"国际科技合作基地" 广东广州510632 再生医学联合实验室(暨南大学-香港中文大学) 广东广州510632 暨南大学发育与再生生物学系广东广州510632 漳州片仔癀药业股份有限公司福建漳州363000

目的探讨心舒宝对高血脂模型大鼠血脂水平的影响。方法 SD大鼠通过高脂饲料喂养8周后建立高血脂模型,第9周起设对照组(高脂饲料)、实验组1(普通饲料+心舒宝)、实验组2(高脂饲料+心舒宝),直到14周,用试剂盒及血糖监测系统测量血清中甘油... 详细信息

目的探讨心舒宝对高血脂模型大鼠血脂水平的影响。方法 SD大鼠通过高脂饲料喂养8周后建立高血脂模型,第9周起设对照组(高脂饲料)、实验组1(普通饲料+心舒宝)、实验组2(高脂饲料+心舒宝),直到14周,用试剂盒及血糖监测系统测量血清中甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)及血糖浓度。结果①与对照组相比,心舒宝可有效降低高血脂模型大鼠血清中的TC及LDL水平;②心舒宝对高血脂大鼠模型血清中的TG、HDL及血糖的水平均无显著影响。结论心舒宝可有效降低高血脂模型大鼠血清中的TC与LDL水平。

关键词：心舒宝高血脂大鼠

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TCRζ,Zap70和FcεRIγ在T和NK/T细胞淋巴瘤病人中的表达特点

TCRζ,Zap70和FcεRIγ在T和NK/T细胞淋巴瘤病人中的表达特点

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：廖紫薇王旭陈少华杨力建李萡李扬秋暨南大学血液病研究所再生医学教育部重点实验室暨南大学血液病研究所再生医学教育部重点实验室

背景及目的:T细胞免疫缺陷导致机体监测恶性转化细胞不力,是血液肿瘤发生发展的重要原因.非霍奇金淋巴瘤作为一类免疫系统的恶性肿瘤,其发生发展都与免疫缺陷密切相关.研究表明T细胞受体CD3-TCR相关信号通路的异常明显影响T细胞的活化功... 详细信息

背景及目的:T细胞免疫缺陷导致机体监测恶性转化细胞不力,是血液肿瘤发生发展的重要原因.非霍奇金淋巴瘤作为一类免疫系统的恶性肿瘤,其发生发展都与免疫缺陷密切相关.研究表明T细胞受体CD3-TCR相关信号通路的异常明显影响T细胞的活化功能,是造成T细胞免疫缺陷的重要原因.为了解T和NK/T细胞淋巴瘤病人外周血T细胞中TCR信号相关基因改变特点,本研究首先分析TCRζ以及与TCRζ存在互补关系的FcεRIγ基因及其下游ZAP-70基因的表达情况和相关性,并分析调控TCRζ基因相关的3'端非编码区(3,UTR)的可变型剪切体与TCRζ表达的相关性.

关键词： TCRζ3'-UTR TCRζ链 FcεRIγ基因 ZAP-70 T细胞淋巴瘤 NK/T细胞淋巴瘤

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