miR-29家族包括miR-29a、miR-29b-1/b-2和miR-29c,其中miR-29a和miR-29b在多种恶性肿瘤中扮演着肿瘤抑制因子的角色,同时,在机体的适应性免疫应答中也发挥了重要作用。本研究目的在于分析miR-29a和miR-29b在髓性白血病中的表达情况。利用SYBR Green Ⅰ荧光染料法实时定量PCR,分别检测10例急性髓细胞白血病(AML)和15例慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-29a和miR-29b的相对表达量,以RNU6B(U6,一种在人和动物组织细胞中高度保守并恒定表达的snRNA)为内参对照,并分别以10例或15例健康人作为相应对照组。
在利用RNA干扰技术,下调T细胞白血病细胞株Molt-4和Jurkat细胞中PPP2R5C基因的表达后,可抑制明显细胞增殖的研究结果基础上,本研究进一步分析PPP2R5C基因对Jurkat细胞增殖抑制的相关分子机制.利用Affymetrix U133 plus 2.0基因表达谱芯...
在利用RNA干扰技术,下调T细胞白血病细胞株Molt-4和Jurkat细胞中PPP2R5C基因的表达后,可抑制明显细胞增殖的研究结果基础上,本研究进一步分析PPP2R5C基因对Jurkat细胞增殖抑制的相关分子机制.利用Affymetrix U133 plus 2.0基因表达谱芯片检测PPP2R5C-siRNA2和SC对照组处理Jurkat细胞mRNA.利用SBC分析系统分析差异基因相关信号通路变化情况.结果显示:PPP2R5C-siRNA2组转染Jurkat 48 h后,以变化2倍以上统计,有439个基因表达上调(上调>2倍有304个基因,>4倍有74个基因,>8倍以上的有61个基因),524个基因表达下调(下调>2两倍的有369个基因,>4倍的有86基因,>8倍以上的有69基因);差异表达基因涉及参与多个信号通路的改变,包括TCR信号传导通路、Wnt/ β-catenin、钙、MAPK和p53信号通路等.结果提示下调Jurkat细胞的PPP2R5C主要影响了p53和经典的Wnt/β-catenin信号通路,其中,GSK-3β,ATM和MDM2基因可能发挥主要作用.由于涉及多个信号通路的GSK-3β对p65/RelA具有直接的调节作用,后者直接靶向NF-κ B p50/52,提示GSK-3β表达降低是PPP2R5C下调所发挥抑制细胞增殖作用的一个关键因子.
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