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广东省医学会第6届细胞治疗学学术会议

作者：陈文生蔡冬青再生医学教育部重点实验室香港中文大学-暨南大学再生医学联合实验室广东省国际科技合作基地(暨南大学) 暨南大学发育与再生生物学系 510000

缺血缺氧情况下心脏微血管内皮细胞的存活对心肌梗死的修复与再生起着重要作用。我们初步研究表明：低氧缺血情况下BDNF处理的CMECs存活较对照组明显增高,且BDNF处理的CMECs凋亡率较对照组明显降低,上述发现提示：缺氧缺血条件下,BDNF对... 详细信息

缺血缺氧情况下心脏微血管内皮细胞的存活对心肌梗死的修复与再生起着重要作用。我们初步研究表明：低氧缺血情况下BDNF处理的CMECs存活较对照组明显增高,且BDNF处理的CMECs凋亡率较对照组明显降低,上述发现提示：缺氧缺血条件下,BDNF对CMECs的保护主要是通过抑制细胞凋亡而发挥相应的保护作用,对相关通路进行研究,将有助于研发有效保护血管内皮细胞存活,促进梗死心肌再生的新疗法。

关键词： BDNF 心脏微血管内皮细胞细胞死亡

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基于CRISPR/Cas9系统的ANO1-EGFP载体构建

基于CRISPR/Cas9系统的ANO1-EGFP载体构建

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广东省医学会第6届细胞治疗学学术会议

作者：陈洪毅蔡冬青再生医学教育部重点实验室香港中文大学-暨南大学再生医学联合实验室科技部广东省国际科技合作基地(暨南大学) 暨南大学发育与再生生物学系 510000

为了研究ANO1基因在热带爪蛙(Xenopustropicalis)胚胎发育的时空表达.本研究构建了ANO1-EGFP载体，将ANO1最后一个外显子克隆到载体中，同时把终止密码子去掉，再在末端添加EGFP蛋白;在最后一个外显子前的内含子中设计sgRNA位点，利用... 详细信息

为了研究ANO1基因在热带爪蛙(Xenopustropicalis)胚胎发育的时空表达.本研究构建了ANO1-EGFP载体，将ANO1最后一个外显子克隆到载体中，同时把终止密码子去掉，再在末端添加EGFP蛋白;在最后一个外显子前的内含子中设计sgRNA位点，利用在线工具(***)设计序列中的sgRNA位点，共挑选了6个sgRNA候选位点;将ANO1-EGFP载体和sgRNA载体共转染293细胞，转染24小时后再利用流式细胞仪检测细胞的荧光，在体外验证sgRNA的切割效率.结果显示sgRNA5 具有最高的切割效率，可用于蛙卵显微注射.

关键词： CRISPR Cas9 ANO1热带爪蛙

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心脏Telocytes随增龄衰老表型的初步观察

心脏Telocytes随增龄衰老表型的初步观察

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广东省医学会第6届细胞治疗学学术会议

作者：罗佳丽蔡冬青再生医学教育部重点实验室香港中文大学-暨南大学再生医学联合实验室科技部广东省国际科技合作基地(暨南大学) 暨南大学发育与再生生物学系 510000

心脏 Telocytes 是最近被发现,位于心肌层间质,呈纵横交错分布,在细胞间支撑、通讯连接及心脏再生和修复等发挥重要作用的心肌层间质细胞.我们采用实时荧光定量 PCR(Real-time PCR,RT-PCR)法、β-半乳糖苷酶检测、SOD活性过氧化氢酶检... 详细信息

心脏 Telocytes 是最近被发现,位于心肌层间质,呈纵横交错分布,在细胞间支撑、通讯连接及心脏再生和修复等发挥重要作用的心肌层间质细胞.我们采用实时荧光定量 PCR(Real-time PCR,RT-PCR)法、β-半乳糖苷酶检测、SOD活性过氧化氢酶检测、活性氧检测等,分别对年青、年老大鼠心脏 Telocytes 在经典细胞衰老的表型进行了研究,初步结果表明：年老心脏 Telocytes 和年青Telocytesβ-半乳糖苷酶染色强度较为接近.而 RT-PCR 结果发现：P21、P16、P53基因在高代数的Telocytes高于低代数Telocytes.年青Telocytes的过氧化氢酶活力高于年老Telocytes.上述结果提示：心脏Telocytes存在细胞复制性衰老.

关键词： Telocytes 衰老心脏

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FoxO3通过上调抗氧化酶的表达保护心脏免受百草枯诱导的氧化损伤

FoxO3通过上调抗氧化酶的表达保护心脏免受百草枯诱导的氧化损伤

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广东省医学会第6届细胞治疗学学术会议

作者：常早上夏景波吴海燕江伏青周毅明彭文韬梁炽谦郭小芳齐绪峰再生医学教育部重点实验室香港中文大学-暨南大学再生医学联合实验室科技部广东省国际科技合作基地(暨南大学) 暨南大学发育与再生生物学系

百草枯可诱导脑组织细胞衰老,并且与帕金森病的神经病理改变有关。而且,百草枯可导致心力衰竭和氧化损伤,但是百草枯是否以及如何引起心脏衰老的机制尚不清楚。在此,我们发现百草枯可诱导体外心肌细胞衰老,以及心脏老化的相关表型,包括... 详细信息

百草枯可诱导脑组织细胞衰老,并且与帕金森病的神经病理改变有关。而且,百草枯可导致心力衰竭和氧化损伤,但是百草枯是否以及如何引起心脏衰老的机制尚不清楚。在此,我们发现百草枯可诱导体外心肌细胞衰老,以及心脏老化的相关表型,包括心脏重构和心功能障碍。同时,百草枯抑制FoxO3a转录因子的活化。我们发现,在敲降FoxO3a的心肌细胞中,百草枯处理后,抑制细胞增殖,促进凋亡,增强SA-β-gal活性和P16 的表达。更重要的是,通过FoxO3敲除小鼠,百草枯诱导的心肌肥大,纤维化,凋亡,氧化应激,DNA损伤和P16 的表达显著升高。此外,敲降FoxO3a的体内外实验,百草枯诱导后都显著的抑制了抗氧化酶(过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶 2(SOD2))的激活,同时小鼠心脏功能的衰减。染色质免疫沉淀验证进一步了FoxO3a与心肌细胞和心脏中CAT和SOD2 启动子的直接结合。在功能上,CAT或SOD2 的过表达降低了百草枯诱导细胞衰老表型。总的来说,这些结果表明,FoxO3a 至少部分地通过上调抗氧化酶SOD和CAT的表达以保护心脏免遭百草枯诱导的氧化损伤和衰老表型。

关键词：百草枯 FoxO3a 衰老心功能不全抗氧化酶

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BDNF及其受体TrkB在二倍体热带爪蛙早期发育中的表达

BDNF及其受体TrkB在二倍体热带爪蛙早期发育中的表达

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广东省医学会第6届细胞治疗学学术会议

作者：吕罗成蔡冬青再生医学教育部重点实验室香港中文大学-暨南大学再生医学联合实验室科技部广东省国际科技合作基地(暨南大学) 暨南大学发育与再生生物学系 510000

使用实时荧光定量PCR和整胚原位杂交,分别对BDNF及其受体TrkB在二倍体热带爪蛙早期胚胎发育的时空表达模式进行研究.RT-PCR结果证明：BDNF基因在热带爪蛙的卵母细胞阶段开始表达,并持续表达于整个早期胚胎发育过程中,而BDNF的特异性受体... 详细信息

使用实时荧光定量PCR和整胚原位杂交,分别对BDNF及其受体TrkB在二倍体热带爪蛙早期胚胎发育的时空表达模式进行研究.RT-PCR结果证明：BDNF基因在热带爪蛙的卵母细胞阶段开始表达,并持续表达于整个早期胚胎发育过程中,而BDNF的特异性受体TrkB在上述相同发育阶段均存在表达;WISH结果揭示了：BDNF和TrkB的空间表达模式基本一致,BDNF和TrkB在卵裂期的卵裂球的动物级表达,在原肠胚末期主要表达在胚孔附近和神经轴区域,在神经轴胚早期高表达于神经板等.提示：BDNF-TrkB 通路在整个早期胚胎正常发育过程中可能发挥着重要的调控作用.

关键词： BDNF TrkB 二倍体热带爪蛙早期胚胎

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心舒宝对大鼠心肌梗死的保护作用及其药理机制

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激光生物学报 2015年第5期24卷 448-454页

作者：李艳梅陈志亮赵明一彭忠禄陈志衡刘琳蔡骞齐绪峰暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 科技部及广东省科技厅"国际科技合作基地" 广东广州510632 再生医学联合实验室(暨南大学-香港中文大学) 广东广州510632 暨南大学发育与再生生物学系广东广州510632 漳州片仔癀药业股份有限公司福建漳州363000 中南大学湘雅三医院湖南长沙410006 湘南学院文学化生系湖南郴州423000

目的:探讨心舒宝对大鼠心肌梗死的保护作用及其药理机制,为临床用药提供理论依据。方法:0.25g/m L心舒宝灌胃二周后诱导大鼠心肌梗死模型,二周后进行大鼠心肌组织的Masson’s Trichrome染色实验;利用胰酶消化方法分离大鼠心脏原代内皮细... 详细信息

目的:探讨心舒宝对大鼠心肌梗死的保护作用及其药理机制,为临床用药提供理论依据。方法:0.25g/m L心舒宝灌胃二周后诱导大鼠心肌梗死模型,二周后进行大鼠心肌组织的Masson’s Trichrome染色实验;利用胰酶消化方法分离大鼠心脏原代内皮细胞,并培养于培养液。用0.005%,0.01%,0.05%的心舒宝处理细胞后,缺氧培养24 h、48 h,流式细胞仪分析其凋亡率。结果:心舒宝处理组的大鼠心肌梗死面积及其切面胶原明显小于对照组(P<0.01);0.005%心舒宝处理的大鼠心脏原代内皮细胞在缺氧48 h后,其凋亡明显降低(P<0.01)。结论:心舒宝可能通过降低大鼠心脏原代内皮细胞的凋亡而发挥保护大鼠心肌梗死的作用。

关键词：心舒宝心肌梗死细胞凋亡

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心舒宝对大鼠血糖血脂的调节作用

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时珍国医国药 2014年第11期25卷 2644-2646页

作者：李艳梅李英镇李昀健陈叙伟暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 科技部及广东省科技厅"国际科技合作基地" 广东广州510632 再生医学联合实验室(暨南大学-香港中文大学) 广东广州510632 暨南大学发育与再生生物学系广东广州510632

目的探究心舒宝对大鼠血糖、血脂的调节作用。方法正常雌、雄性SD大鼠分别灌喂不同剂量心舒宝药物,观察心舒宝对大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及血糖的影响;建立大鼠高... 详细信息

目的探究心舒宝对大鼠血糖、血脂的调节作用。方法正常雌、雄性SD大鼠分别灌喂不同剂量心舒宝药物,观察心舒宝对大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及血糖的影响;建立大鼠高血脂模型分3组:对照组(高脂饲料)、实验组1(普通饲料+心舒宝)、实验组2(高脂饲料+心舒宝),灌药4周后取血测定上述指标。结果心舒宝能明显上调正常雌性大鼠的HDL-C(P<0.05),对TC、TG和LDL-C没有明显下调作用(P﹥0.05),能够下调正常雄性大鼠TG、LDL-C(P<0.05);心舒宝能够明显下调高血脂大鼠的TC(P<0.01)、LDL-C含量(P<0.05)。结论心舒宝能够降低大鼠高血脂,能提升正常大鼠HDL-C含量,能够降血糖,具有潜在的保健作用。

关键词：心舒宝血糖血脂

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心舒宝对高血脂模型大鼠血脂水平的影响

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时珍国医国药 2014年第5期25卷 1084-1086页

作者：齐绪峰洪绯罗志毅李艳梅李英镇李昀键陈叙伟沈晓涛郑馨暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 科技部及广东省科技厅"国际科技合作基地" 广东广州510632 再生医学联合实验室(暨南大学-香港中文大学) 广东广州510632 暨南大学发育与再生生物学系广东广州510632 漳州片仔癀药业股份有限公司福建漳州363000

目的探讨心舒宝对高血脂模型大鼠血脂水平的影响。方法 SD大鼠通过高脂饲料喂养8周后建立高血脂模型,第9周起设对照组(高脂饲料)、实验组1(普通饲料+心舒宝)、实验组2(高脂饲料+心舒宝),直到14周,用试剂盒及血糖监测系统测量血清中甘油... 详细信息

目的探讨心舒宝对高血脂模型大鼠血脂水平的影响。方法 SD大鼠通过高脂饲料喂养8周后建立高血脂模型,第9周起设对照组(高脂饲料)、实验组1(普通饲料+心舒宝)、实验组2(高脂饲料+心舒宝),直到14周,用试剂盒及血糖监测系统测量血清中甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)及血糖浓度。结果①与对照组相比,心舒宝可有效降低高血脂模型大鼠血清中的TC及LDL水平;②心舒宝对高血脂大鼠模型血清中的TG、HDL及血糖的水平均无显著影响。结论心舒宝可有效降低高血脂模型大鼠血清中的TC与LDL水平。

关键词：心舒宝高血脂大鼠

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核转染对成体骨髓源性干细胞的影响

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中国组织工程研究与临床康复 2011年第1期15卷 1-6页

作者：李震沈晓涛曹亮毛颖玉陈斯韵郑馨蔡冬青暨南大学再生医学教育部重点实验室暨南大学再生医学香港中文大学-暨南大学联合实验室暨南大学科技部及广东省科技厅国际科技合作基地广东省广州市510632

背景:成体骨髓源性干细胞是实施细胞治疗的重要细胞来源。对成体骨髓源性干细胞的示踪,是研究其移行、分化的规律与机制并进一步阐明再生潜能、疗效的关键。目的:探讨经转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞,在细胞表型、增殖能力、心肌分化... 详细信息

背景:成体骨髓源性干细胞是实施细胞治疗的重要细胞来源。对成体骨髓源性干细胞的示踪,是研究其移行、分化的规律与机制并进一步阐明再生潜能、疗效的关键。目的:探讨经转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞,在细胞表型、增殖能力、心肌分化潜能是否存在的影响。方法:应用核转染技术利用U-23程序将编码maxGFP报告基因的载体对成体骨髓呈克隆样干细胞进行转染,应用MTT法对核转染前后的生长曲线进行测定,使用3μmol/L5-氮胞苷对核转染前后成体骨髓呈克隆样干细胞进行向心肌分化诱导,并利用RT-PCR对向心肌分化的特异性标记物GATA4与MLC-2v的表达进行测定。使用成年SD大鼠心肌梗死左前降支结扎模型,对使用经maxGFP转染的成体骨髓呈克隆样干细胞施心内注射并于注射后的第2天和第7天对经注射心脏行冰冻切片并观察maxGFP在体内的表达情况。结果与结论:经核转染24h后,第47代及第119代成体骨髓呈克隆样干细胞的转染率为49.4%和43.1%,转染后5h,开始出现呈绿色荧光阳性的细胞,经核转染后仍能保持小圆球形、可贴壁、呈克隆样生长。MTT检测结果显示:核转染前后第47代及第119代均具有相似的生长曲线。核转染前第47代及119代细胞平均群体倍增时间分别为8.57,10.28h;核转染后分别为9.42,10.42h,各代前后比较差异无显著性意义(P=0.551,P=0.774)。RT-PCR检测结果显示:核转染前5-氮胞苷处理前后均表达GATA4,处理后MLC-2v条带更强;核转染后5-氮胞苷处理前后均表达GATA4,处理后MLC-2v条带更强,上述2个向心肌分化指标于转染前后变化并不明显。体内实验结果:心内注射经核转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞,第2天及第7天可在经注射心肌中发现有少量绿色荧光阳性的细胞。提示,核转染可快速地将外源基因导入细胞,经核转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞仍能保持其细胞形态、增殖能力及向心肌分化潜能,然而,经maxGFP基因核转染的成体骨髓呈克隆样干细胞,移植入心肌后只有少数细胞能表达经转染基因。

关键词：成体骨髓呈克隆样干细胞核转染增殖分化示踪

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调节卵子发育成熟的信号转导通路

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生殖与避孕 2011年第7期31卷 495-500,F0003页

作者：罗峰谢琪璇秋山泰身秦俊文暨南大学生殖免疫研究所广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室再生医学香港中文大学-暨南大学联合实验室科技部及广东省科技厅国际科技合作基地广州510632 东京大学医科学研究所分子发癌分野日本东京108-8639

卵子是哺乳动物体内最大的一种细胞,承载着繁衍后代的使命,而卵子的发育成熟是其完成生殖过程的先决条件。对卵泡的生长、发育和卵子成熟调控机制的研究一直是发育生物学的研究热点之一。

关键词：信号通路卵子发生发育和成熟

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