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连接子蛋白43(Cx43)抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞自噬

细胞与分子免疫学杂志 2022年第6期38卷 501-506页

作者：秦叙青张爱梅刘鲁倩何文君杨瑞单莉娅李新芝马克涛石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832000 石河子大学医学院生理学教研室新疆石河子832000 石河子大学第一附属医院心内科新疆石河子832000 石河子大学病理生理学教研室新疆石河子832000

目的探讨连接子蛋白43(Cx43)在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)自噬中的作用。方法采用α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光细胞化学染色鉴定原代VSMC,ox-LDL处理后,采用油红O染色鉴定泡沫细胞;Western blo... 详细信息

目的探讨连接子蛋白43(Cx43)在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)自噬中的作用。方法采用α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光细胞化学染色鉴定原代VSMC,ox-LDL处理后,采用油红O染色鉴定泡沫细胞;Western blot法检测(0、40、80、160)μg/mL ox-LDL处理0、6、12、24 h,VSMC中微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白的表达以及80μg/mLox-LDL干预24 h,Cx43蛋白的表达;将VSMC随机分为对照组、ox-LDL组和ox-LDL联合Cx43特异性阻断剂Gap26组,Western blot法检测各组细胞LC3、beclin 1的表达。结果分离的细胞α-SMA阳性率达95%以上,与对照组相比,ox-LDL处理的细胞油红O阳性细胞明显增加,ox-LDL呈浓度依赖及时间依赖地降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值及beclin 1蛋白表达,Cx43蛋白的表达明显升高;给予Gap26后,可上调LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值及beclin 1蛋白表达。结论Cx43抑制ox-LDL引起的自噬。

关键词：动脉粥样硬化连接子蛋白43(Cx43) 氧化低密度脂蛋白(ox-LDL) 自噬

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敲低NLRX1可上调线粒体融合蛋白并减轻缺氧心肌细胞凋亡

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心脏杂志 2023年第4期35卷 373-379页

作者：王林一贺广祥梁郡史睿李慢裴建明杨彦玲李军延安大学医学院陕西延安716000 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室陕西西安710032

目的探究模式识别受体NOD样受体家族成员X1(NLRX1)对心肌细胞缺氧损伤的影响及其分子机制。方法分离培养SD大鼠乳鼠原代心肌细胞,转染NLRX1-siRNA 48 h后,给予不同时间的氧糖剥夺模拟心肌缺血。采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测... 详细信息

目的探究模式识别受体NOD样受体家族成员X1(NLRX1)对心肌细胞缺氧损伤的影响及其分子机制。方法分离培养SD大鼠乳鼠原代心肌细胞,转染NLRX1-siRNA 48 h后,给予不同时间的氧糖剥夺模拟心肌缺血。采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测NLRX1蛋白和线粒体融合相关蛋白(Opa1、Mfn1、Mfn2)表达水平,激光扫描共聚焦显微镜观察线粒体形态。结果NLRX1在心肌细胞中高表达,心肌细胞氧糖剥夺后NLRX1总蛋白水平不变,胞浆NLRX1上调(P<0.01)。与对照组相比,siRNA沉默NLRX1可上调线粒体融合蛋白Mfn2和Opa1的表达水平,促进缺氧心肌细胞线粒体融合,减轻缺氧诱导的心肌细胞凋亡(P<0.05)。结论免疫调节分子NLRX1可能具有调控线粒体融合蛋白的作用,阻抑NLRX1可上调融合分子Mfn2,Opa1蛋白表达,减轻缺氧心肌损伤。

关键词： NLRX1 线粒体融合心肌细胞凋亡

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色胺酮通过调控MAPK/ERK信号通路抑制胶质瘤细胞的演进

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临床与实验病理学杂志 2025年第5期41卷 618-626页

作者：魏静周涵焦方正袁子涵乔伊璠方艳陕西中医药大学基础医学院病理教研室延安大学医学院临床医学系

目的探讨TRYP是否可以抑制胶质瘤细胞的恶性行为能力，并阐明其作用的具体机制。方法 MTT实验检测TRYP对胶质瘤细胞增殖能力的影响。Transwell实验检测TRYP对胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响。AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡实验检测TRYP对... 详细信息

目的探讨TRYP是否可以抑制胶质瘤细胞的恶性行为能力，并阐明其作用的具体机制。方法 MTT实验检测TRYP对胶质瘤细胞增殖能力的影响。Transwell实验检测TRYP对胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响。AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡实验检测TRYP对胶质瘤细胞凋亡能力的影响。PI/RNase细胞周期实验检测TRYP对胶质瘤细胞周期分布的影响。Western blot实验检测TRYP对胶质瘤细胞p-ERK和c-Myc蛋白表达的影响。通过构建裸鼠皮下移植瘤模型，验证TRYP在体内对胶质瘤细胞增殖能力的影响。TUNEL实验检测TRYP对移植瘤中细胞凋亡能力的影响。免疫组化法检测TRYP对移植瘤组织中Ki67、BRAF、c-Myc、p-ERK蛋白表达的影响。结果 MTT实验结果显示：TRYP能有效抑制胶质瘤细胞的增殖能力（P<0.001）。Transwell实验结果显示：TRYP能够抑制胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力（P<0.001）。AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测结果显示：TRYP能够促进胶质瘤细胞发生凋亡（P<0.001）。PI/RNase细胞周期实验结果显示：TRYP能够促进胶质瘤细胞发生G2期周期阻滞（P<0.001）。Western blot结果显示：TRYP处理后胶质瘤细胞内c-Myc、p-ERK蛋白表达水平均显著降低（P<0.001）。裸鼠皮下移植瘤模型结果显示：TRYP能够有效抑制移植瘤的增长速度（P<0.01）和重量（P<0.05）。TUNEL实验表明：TRYP能够促进移植瘤中肿瘤细胞发生凋亡（P<0.001）。免疫组化结果显示：TRYP能够有效抑制移植瘤中Ki67的表达（P<0.01）,并抑制MAPK/ERK信号通路中BRAF、c-Myc和p-ERK的蛋白表达（P<0.001）。结论 TRYP可以抑制胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力，促进胶质瘤细胞的凋亡，使胶质瘤细胞周期发生阻滞。TRYP可能通过抑制MAPK/ERK信号通路中BRAF、c-Myc和p-ERK的蛋白表达，抑制胶质瘤的恶性进程。

关键词：胶质瘤色胺酮 MAPK/ERK信号通路

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双膦酸盐类不良反应监测之真实世界研究的挖掘与分析

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今日药学 2022年第1期32卷 72-80页

作者：张秋珍陈爽陈婉瑛陈美霓张述耀汕头大学医学院药理学教研室广东汕头515041 暨南大学附属广州红十字会医院广东广州510220

目的基于真实世界研究——FDA不良事件报告系统(FDA Adverse Event Reporting System,FAERS)数据库,对7种双膦酸盐类(bisphosphonates,BPs)相关不良反应(adverse drug reaction,ADR)进行挖掘分析,探索各BPs相关ADR发生的特点及与药物的关联强度,旨在提醒广大医务人员及患者充分了解其相关ADR尤其是严重的罕见的ADR的发生,促进BPs的不良反应监测及安全合理使用。方法通过FAERS数据库提取从2004~2020年共68个季度的7种BPs的ADR报告,并利用24.0版《国际医学用语词典》(Medical Dictionary for Regulatory Activities,MedDRA 24.0)对筛选后的ADR进行系统归纳,再通过报告比值比法(reporting odds ratio,ROR)对上述ADR进行信号挖掘及分析。结果纳入ADR报告:依替膦酸470份、氯膦酸343份、帕米膦酸8 057份、利塞膦酸13 622份、阿仑膦酸54 474份、唑来膦酸45 373份、伊班膦酸22 136份,共得到8 923个信号,信号累及了27个系统器官分类(system organ class,SOC),并以胃肠系统疾病、肌肉骨骼和结缔组织疾病、各类检验检查的异常为主,各BPs的前六SOC重叠较为一致。结论本文通过信号挖掘展现了各BPs间ADR的区别与联系,有助于广大医务人员及患者充分了解其相关ADR,促进不良反应监测,可及时发现严重的罕见的ADR,尽可能地降低ADR所造成的危害。

关键词：双膦酸盐类不良反应监测信号挖掘 FAERS数据库真实世界研究

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氯化两面针碱对胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭的影响

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中国实验诊断学 2023年第5期27卷 588-590页

作者：朱长吉李红红沈忠军玄延花严莉延边大学医学院吉林延边133000 吉林大学第二医院检验科延边大学医学院病理学教研室长春市中心血站

目的探讨氯化两面针碱(nitidine chloride,NC)对胶质瘤LN18细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法以胶质瘤LN18细胞为研究对象。实验分为:对照组和NC处理组。采用CCK-8法检测胶质瘤细胞的增殖情况;用划痕和Transwell小室实验检测胶质瘤... 详细信息

目的探讨氯化两面针碱(nitidine chloride,NC)对胶质瘤LN18细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法以胶质瘤LN18细胞为研究对象。实验分为:对照组和NC处理组。采用CCK-8法检测胶质瘤细胞的增殖情况;用划痕和Transwell小室实验检测胶质瘤细胞的迁移和侵袭能力。结果与对照组相比,NC处理组胶质瘤细胞增殖能力与对照组有显著差异(P<0.01),NC处理组胶质瘤细胞的迁移能力低于对照组胶质瘤细胞(P<0.01),NC处理组胶质瘤细胞的侵袭能力低于对照组胶质瘤细胞(P<0.01)。结论氯化两面针碱可以抑制胶质瘤细胞的增殖,降低其迁移及侵袭能力。

关键词：氯化两面针碱胶质瘤细胞增殖迁移侵袭

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M1型巨噬细胞对小鼠膀胱癌MB49细胞活力、迁移、侵袭及凋亡的影响

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中国病理生理杂志 2022年第1期38卷 1-10页

作者：张暑军李青青乔春林勾璇王新敏章乐石河子大学医学院病理生理学教研室/新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832000 石河子大学医学院第一附属医院泌尿外科新疆石河子832008

目的:探究共培养体系下M1型巨噬细胞对小鼠膀胱癌MB49细胞活力、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法:分别以0、50、100和200μg/L的脂多糖(LPS)刺激小鼠RAW264.7巨噬细胞24 h后,采用免疫荧光技术、Western blot及流式细胞术检测M1型巨噬细胞... 详细信息

目的:探究共培养体系下M1型巨噬细胞对小鼠膀胱癌MB49细胞活力、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法:分别以0、50、100和200μg/L的脂多糖(LPS)刺激小鼠RAW264.7巨噬细胞24 h后,采用免疫荧光技术、Western blot及流式细胞术检测M1型巨噬细胞标志物CD86和诱导型一氧化氮合酶的表达情况。建立RAW264.7-MB49细胞共培养体系,分为MB49组、M0+MB49组和M1+MB49组,12 h后收集MB49细胞,CCK-8法检测各组MB49细胞活力,划痕实验和Transwell实验检测各组MB49细胞的迁移和侵袭能力,Hoechst 33258染色检测各组MB49细胞的凋亡情况,ELISA检测培养上清液中白细胞介素6(IL-6)浓度。结果:筛选出了诱导RAW264.7巨噬细胞向M1亚型极化的最佳LPS浓度和作用时间分别为100μg/L和24 h。与MB49组及M0+MB49组相比,M1+MB49组中MB49细胞的活力及迁移和侵袭能力均显著下降(P<0.05),凋亡细胞显著增多(P<0.05),培养上清液中IL-6浓度显著升高(P<0.05)。结论:在共培养体系中M1型巨噬细胞可抑制小鼠膀胱癌MB49细胞的活力、迁移和侵袭,并促进其凋亡。

关键词：肿瘤微环境 M1型巨噬细胞膀胱癌细胞迁移细胞侵袭

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降尿酸类药物安全性分析及用药建议

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现代医院 2022年第4期22卷 643-649页

作者：张秋珍吴雪君许城城郑丹玲张述耀汕头大学医学院药理学教研室广东汕头515041 暨南大学附属广州红十字会医院广东广州510220

目的基于FDA不良事件上报系统(FDA Adverse Event Reporting System,FAERS),对4种降尿酸药相关不良事件(Adverse Drug Events,ADEs)进行安全性分析,探索四种降尿酸药相关ADEs的异同,旨在提醒广大医务工作者及患者充分了解各降尿酸药相关... 详细信息

目的基于FDA不良事件上报系统(FDA Adverse Event Reporting System,FAERS),对4种降尿酸药相关不良事件(Adverse Drug Events,ADEs)进行安全性分析,探索四种降尿酸药相关ADEs的异同,旨在提醒广大医务工作者及患者充分了解各降尿酸药相关ADEs尤其是严重ADEs,促进降尿酸药安全合理应用。方法通过提取FAERS数据库2004—2020年的苯溴马隆、丙磺舒、别嘌醇、非布司他的ADEs报告,并利用MedDRA 24.0对纳入的ADEs进行系统归纳,再通过比例报告比值比法(Proportional Reporting Ratio,PRR)和报告比值比法(Reporting Odds Ratio,ROR)对上述报告进行信号挖掘及分析。结果纳入苯溴马隆225份、丙磺舒613份、别嘌醇51202份、非布司他7272份ADEs报告。其中,苯溴马隆肝损方面的ADEs与我国不良反应监测网所报导的有一定的相似性,但均未见严重的致死性肝毒性的报导,并且,本研究发现非布司他在肝损方面的关联强度强于苯溴马隆;别嘌醇皮肤ADEs共3333例,涉及67种信号,频数前50的ADEs中仅多形红斑该皮肤ADE上榜,且在关联强度方面弱于苯溴马隆;非布司他心脏ADEs共928例,涉及35种信号,其中在与心力衰竭的关联强度方面较别嘌醇强,验证了FDA发布的“非布司他可能增加心因性和全因死亡风险”警示。结论本文通过信号挖掘展现了各降尿酸药ADEs间的异同,有助于医务人员结合患者自身特点选药,从而促进临床合理用药。

关键词：降尿酸药 FAERS数据库不良事件信号挖掘安全性分析用药建议

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中央杏仁核生长抑素阳性神经元参与小鼠急性痒和慢性痒的形态学研究

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神经解剖学杂志 2023年第3期39卷 255-261页

作者：梁怡饶茜荆雪金鑫米志宽延安大学医学院病理生理学教研室延安716000 空军军医大学基础医学院神经生物学教研室西安710032 空军军医大学基础医学院学员3大队9队西安710032

目的:观察急性痒和慢性痒小鼠中央杏仁核(CeA)内生长抑素(SST)阳性神经元的激活情况,为其参与痒觉信息的调控提供形态学证据。方法:在小鼠颈背部皮内注射组胺(His)或氯喹(CQ)建立急性痒模型;应用二苯基环丙烯酮(DCP)建立接触性皮炎慢性... 详细信息

目的:观察急性痒和慢性痒小鼠中央杏仁核(CeA)内生长抑素(SST)阳性神经元的激活情况,为其参与痒觉信息的调控提供形态学证据。方法:在小鼠颈背部皮内注射组胺(His)或氯喹(CQ)建立急性痒模型;应用二苯基环丙烯酮(DCP)建立接触性皮炎慢性痒模型。进一步结合免疫荧光染色技术分别观察急性和慢性痒小鼠CeA内SST阳性神经元的激活情况。结果:对照组小鼠30 min内抓挠次数为(16.33±5.13)次;His组小鼠30 min内抓挠次数为(110.66±22.00)次;CQ组小鼠30 min内抓挠次数为(120.33±19.50)次。急性痒模型组小鼠抓挠次数显著高于对照组(P<0.05);DCP模型组小鼠搔抓次数明显高于对照组搔抓次数(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示在急性痒状态下,对照组CeA内SST/FOS双标神经元占SST阳性神经元的(3.1±0.99)%;His组CeA内SST/FOS双标神经元占SST阳性神经元的(20.23±1.76)%;CQ组CeA内SST/FOS双标神经元占SST阳性神经元的(19.90±2.58)%;在慢性痒状态下,对照组CeA内SST/FOS双标神经元占SST阳性神经元的(3.73±2.05)%;DCP组CeA内SST/FOS双标神经元占SST阳性神经元的(23.93±4.02)%。结论:急性和慢性痒状态下,小鼠CeA内SST阳性神经元激活,为CeA内SST阳性神经元参与痒觉的信息传递提供了形态学依据。

关键词：中央杏仁核生长抑素急性痒慢性痒小鼠

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NOD-Scid小鼠播散性弥漫大B细胞淋巴瘤模型的构建

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临床与实验病理学杂志 2023年第7期39卷 793-796页

作者：闻照凤黄绮堂胡泉泉李雨李延莉安徽医科大学基础医学院病理学教研室合肥230032 浙江大学医学院附属第二医院病理科杭州310009 安徽医科大学附属安庆医院(安庆市立医院)病理科安庆246003 安徽医科大学第二临床医学院合肥230032 安徽医科大学第一附属医院病理科合肥230022

目的利用免疫缺陷的NOD-Scid小鼠建立播散性弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)小鼠模型,为动物模型的构建提供新思路。方法先将人源DLBCL细胞OCI-Ly8导入荧光素酶基因,使其长期稳定表达荧光素酶。再将OCI-Ly8-luc... 详细信息

目的利用免疫缺陷的NOD-Scid小鼠建立播散性弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)小鼠模型,为动物模型的构建提供新思路。方法先将人源DLBCL细胞OCI-Ly8导入荧光素酶基因,使其长期稳定表达荧光素酶。再将OCI-Ly8-luc^(+)细胞经尾静脉注射到NOD-Scid小鼠体内,利用生物发光成像系统每隔3天观察1次小鼠体内肿瘤细胞播散情况。结果实验第7天监测到OCI-Ly8-luc^(+)细胞在小鼠体内发生播散,并且进展迅速,20天时出现小鼠死亡。结论利用OCI-Ly8-luc^(+)细胞尾静脉注射成功构建了NOD-Scid小鼠DLBCL模型,为DLBCL的动物模型构建提供新方法。

关键词：淋巴瘤弥漫大B细胞淋巴瘤荧光素酶 NOD-Scid小鼠动物模型生物发光成像

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2,4-二硝基氟苯和粉尘螨诱导的特应性皮炎样小鼠模型皮损中固有淋巴样细胞的变化

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免疫学杂志 2022年第12期38卷 1038-1045页

作者：冯树晶王宇高翠娥刘文英宋志强陆军军医大学西南医院皮肤科重庆400038 陆军军医大学高原军事医学系病理生理学教研室重庆400038 西南大学医学研究院重庆400715

目的本研究以半抗原和过敏原建立特应性皮炎(AD)样小鼠模型,并初步观察固有淋巴样细胞的数量和表面标志。方法将2,4-二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene, DNFB)和粉尘螨(dermatophagoides farina, DfE)提取物交替涂擦于Balb/c小鼠... 详细信息

目的本研究以半抗原和过敏原建立特应性皮炎(AD)样小鼠模型,并初步观察固有淋巴样细胞的数量和表面标志。方法将2,4-二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene, DNFB)和粉尘螨(dermatophagoides farina, DfE)提取物交替涂擦于Balb/c小鼠的背部皮肤8周。记录小鼠皮损临床特征,观察固有淋巴样细胞的变化。结果致敏小鼠背部出现严重的红斑、糜烂和表皮剥落,Th2型免疫反应因子在皮损中升高,具有典型特应性皮炎临床特征。模型组皮损中总固有淋巴样细胞数量显著升高,分泌IL-10的类调节型固有淋巴细胞数量显著降低。II型固有淋巴细胞(typy two innate lymphoid cells, ILC2s)在模型小鼠皮肤中数量显著升高,激活的ILC2细胞数量增多。在模型组与对照组小鼠脾中,ILC2细胞数量、激活标志以及胞内炎症因子IL-12、IL-13无明显差异。结论 DNFB和粉尘螨提取物能够诱导特应性皮炎样皮损,总固有淋巴样细胞在皮损中显著增加,激活的ILC2细胞在皮损中显著增加。该研究对于深入了解半抗原和变应原同时致敏的AD样小鼠模型病理机制具有参考价值。

关键词：特应性皮炎 2 4-二硝基氟苯粉尘螨 Balb/c小鼠固有淋巴样细胞

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