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CRISPR/Cas9介导TKI对非小细胞肺癌基因靶向吉非替尼耐药敏感性的影响及其机制

吉林大学学报（医学版） 2019年第6期45卷 1288-1293,I0018页

作者：任爱华王大伟北华大学医学院解剖教研室吉林吉林132013 北华大学医学院病理教研室吉林吉林132013

目的:探讨CRISPR/Cas9介导酪氨酸激酶抑制剂(TKI)对非小细胞肺癌基因靶向吉非替尼耐药敏感性的影响,并阐明其机制。方法:利用CRISPR/Cas9系统建立酪氨酸激酶(TKs)敲除A549细胞株,按照TKI表达情况分为A549、A549TKs-/+和A549TKs-/-细胞株... 详细信息

目的:探讨CRISPR/Cas9介导酪氨酸激酶抑制剂(TKI)对非小细胞肺癌基因靶向吉非替尼耐药敏感性的影响,并阐明其机制。方法:利用CRISPR/Cas9系统建立酪氨酸激酶(TKs)敲除A549细胞株,按照TKI表达情况分为A549、A549TKs-/+和A549TKs-/-细胞株。Western blotting法检测细胞株中P53、MDM2、Bcl-2和Bax蛋白表达水平,CCK-8法检测A549、A549TKs-/+和A549TKs-/-细胞活性,细胞划痕实验检测A549、A549TKs-/+和A549TKs-/-细胞株的细胞迁移情况,流式细胞术检测A549、A549TKs-/+和A549TKs-/-细胞凋亡率,克隆形成实验检测细胞集落形成情况。结果:CRISPR/Cas9系统成功建立了TKs敲出A549细胞株,A549、A549TKs-/+和A549TKs-/-细胞活性比较差异无统计学意义(P>0.05);3种细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05),细胞迁移情况变化不大。经6 mol·L^-1吉非替尼干预72 h后,与A549细胞株比较,A549TKs-/+和A549TKs-/-细胞株的细胞活性降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞划痕愈合率明显降低(P<0.05),细胞迁移能力明显减弱;与A549细胞株比较,A549TKs-/+和A549TKs-/-细胞株中P53和Bax蛋白表达水平降低(P<0.05),MDM2和Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05),细胞集落生成率明显降低(P<0.05)。结论:采用吉非替尼对敲除A549细胞株进行干预可以降低细胞活性和迁移能力,升高细胞凋亡率和吉非替尼耐药的敏感性。

关键词： CRISPR/Cas9 酪氨酸激酶抑制剂癌,非小细胞肺吉非替尼耐药

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滴鼻感染甲型流感病毒对BALB/c和C57BL/6J小鼠自发行为学的比较研究

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中国免疫学杂志 2020年第16期36卷 1931-1934,1940页

作者：周艳琳谷李铭李康生王革非(指导) 新乡医学院三全学院病原生物学与免疫学教研室新乡453003 汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东省感染病与分子免疫病理重点实验室汕头515041

目的:比较滴鼻感染甲型流感病毒PR8的C57BL/6J和BALB/c两种品系小鼠旷场自发行为表现的差异,探讨流感病毒感染对两种品系小鼠抑郁焦虑情绪的影响。方法:健康C57BL/6J小鼠和BALB/c小鼠各20只,随机分为甲型流感病毒PR8感染组(PR8组)和生... 详细信息

目的:比较滴鼻感染甲型流感病毒PR8的C57BL/6J和BALB/c两种品系小鼠旷场自发行为表现的差异,探讨流感病毒感染对两种品系小鼠抑郁焦虑情绪的影响。方法:健康C57BL/6J小鼠和BALB/c小鼠各20只,随机分为甲型流感病毒PR8感染组(PR8组)和生理盐水对照组(CON组),每组10只。记录每组小鼠1周内的体质量、在旷场行为箱体内的行走总路程、周边区域运动路程、平均运动速度及粪便排泄情况,并检测感染后的第7天小鼠脑组织炎症因子(TNF-α、IL-1β、CXCL10、BDNF)转录水平。结果:滴鼻感染PR8后均引起小鼠体质量显著下降,且BALB/c小鼠较C57BL/6J小鼠体质量下降更明显。BALB/c小鼠较C57BL/6J小鼠在旷场试验中行走总路程、周边区域运动路程减少更明显。感染后第7天BALB/c小鼠中枢神经系统(CNS)炎症因子表达显著上调。结论:滴鼻感染PR8可引起小鼠体质量下降,活动性降低,出现一定程度的抑郁焦虑情绪,并伴随CNS炎症因子显著上调。且BALB/c小鼠对PR8的敏感度较C57BL/6J小鼠明显,更适宜做PR8感染的模型小鼠。本研究为研究流感病毒外周感染诱导小鼠空间记忆、学习认知、情绪等调控奠定基础,为进一步探究流感相关脑病的病理机制提供依据。

关键词：流感病毒小鼠旷场自发行为抑郁情绪

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活性维生素D3对UUO模型大鼠P38MAPK信号通路的影响

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中国老年学杂志 2020年第5期40卷 1036-1039页

作者：张国锐贾林杨晓萍赵瑾陶林石河子大学医学院第一附属医院肾病科新疆石河子832000 石河子大学医学院病理教研室新疆石河子832000

目的探讨活性维生素D 3对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响及其机制。方法54只雄性SD大鼠随机分为UUO模型组、假手术组、活性维生素D 3干预组,其中36只SD大鼠建立UUO模型,活性维生素D 3干预组在建模起给予活性维生素D 30.5μ... 详细信息

目的探讨活性维生素D 3对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响及其机制。方法54只雄性SD大鼠随机分为UUO模型组、假手术组、活性维生素D 3干预组,其中36只SD大鼠建立UUO模型,活性维生素D 3干预组在建模起给予活性维生素D 30.5μg/d灌胃,分别于术后3、7、14 d各处死6只大鼠,免疫组化观察肾小管间质损害程度;Western印迹法检测P38MAPK及磷酸化P38MAPK蛋白表达量。结果与假手术组相比,UUO模型组磷酸化P38MAPK蛋白表达量随时间延长显著增加(P<0.01);活性维生素D 3干预组7 d、14 d磷酸化P38MAPK蛋白表达量较UUO模型组表达显著减少(P<0.05);P38MAPK蛋白表达量各组差异无统计学意义。结论活性维生素D 3抑制UUO大鼠肾组织中P38MAPK信号通路的激活,延缓肾间质纤维化。

关键词：磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 活性维生素D 3 肾间质纤维化

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2017年珠海市某区恶性肿瘤发病与死亡分析

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癌症进展 2020年第7期18卷 677-680页

作者：马昕玥蒋静汤月芳何鑫鹏颜士钧陈青山暨南大学基础医学院流行病学教研室广州5106320

目的描述和分析2017年广东省珠海市恶性肿瘤的发病和死亡情况,为今后肿瘤防治工作提供科学依据。方法根据珠海市肿瘤登记处2017年登记的部分恶性肿瘤的发病及死亡资料,统计恶性肿瘤的发病及死亡情况,计算其发病率、死亡率、标准化率等... 详细信息

目的描述和分析2017年广东省珠海市恶性肿瘤的发病和死亡情况,为今后肿瘤防治工作提供科学依据。方法根据珠海市肿瘤登记处2017年登记的部分恶性肿瘤的发病及死亡资料,统计恶性肿瘤的发病及死亡情况,计算其发病率、死亡率、标准化率等相关指标。结果2017年,该地区新发肿瘤病例为178例,恶性肿瘤的粗发病率为278.30/10万,中国人口标化率(中标率)为183.71/10万,世界人口标化率(世标率)为181.68/10万,0~74岁累积发病率为21.81%,35~64岁世界人口截缩率为347.33/10万,男性恶性肿瘤的发病率高于女性;恶性肿瘤死亡病例113例,死亡率为176.67/10万,中标率为109.38/10万,世标率为107.05/10万,0~74岁累积死亡率为11.58%,35~64岁世界人口截缩调整死亡率为157.53/10万,男性的恶性肿瘤死亡率高于女性。恶性肿瘤年龄别发病率在﹤35岁处于较低水平,从35岁开始,恶性肿瘤的发病率随着年龄呈上升趋势,在80~84岁年龄组达到最高峰;恶性肿瘤年龄别死亡率在45~49岁年龄组迅速升高,在50~54岁年龄组有所回落;恶性肿瘤发病顺位前5位依次为肺癌、肝癌、结直肠癌、鼻咽癌、乳腺癌;恶性肿瘤死亡顺位前5位依次为肝癌、肺癌、结直肠癌、食管癌、胃癌和白血病。结论男性恶性肿瘤的发病率和死亡率相对较高。肺癌、肝癌、结直肠癌、鼻咽癌是肿瘤防治工作的重点癌种,同时需提高肿瘤登记工作的准确性。

关键词：肿瘤登记恶性肿瘤死亡率发病率珠海

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微血管张力测定技术在血管内皮去除中的应用

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中国药理学通报 2020年第1期36卷 104-109页

作者：张文文唐娜孙瑞霞钟华何芳新疆石河子大学第一附属医院重症医学科新疆石河子832002 新疆石河子大学医学院病理生理教研室新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832002

目的通过建立离体小动脉血管内皮去除的研究方法,提高微血管测量技术研究数据的可信度。方法选取♂自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠(WKY),测量血压后,获取肠系膜动脉环。采取机械(血管环围绕电极尖端旋转、推注气体)和药物(L-NAME... 详细信息

目的通过建立离体小动脉血管内皮去除的研究方法,提高微血管测量技术研究数据的可信度。方法选取♂自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠(WKY),测量血压后,获取肠系膜动脉环。采取机械(血管环围绕电极尖端旋转、推注气体)和药物(L-NAME和吲哚美辛)相结合的方式去除内皮。采用压力肌动图技术检测苯肾上腺素(PE)、乙酰胆碱(ACh)、硝普钠(SNP)对肠系膜动脉直径变化的影响。结果(1)SHR血压值高于WKY大鼠(P<0.01);(2)PE浓度依赖地收缩肠系膜动脉。内皮完整和内皮去除时,与WKY相比,SHR的收缩增强(P<0.05);(3)ACh、SNP能够浓度依赖地舒张肠系膜动脉。内皮完整时,与WKY相比,SHR的舒张减弱(P<0.01);内皮去除时,与WKY相比,SHR的舒张增强(P<0.01)。结论(1)成功建立离体微小动脉血管内皮去除的研究方法。(2)高血压大鼠存在明显的血管舒缩功能障碍。

关键词：高血压血管内皮肠系膜动脉血管收缩血管舒张压力肌动图技术

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依托咪酯影响感觉刺激诱发小脑皮层分子层场电位变化的机制

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中国药理学通报 2020年第2期36卷 295-296页

作者：申威邱德来初春平潘文金文哲延边大学附属医院疼痛科吉林延吉133000 延边大学医学部细胞功能研究中心生理学与病理生理学教研室吉林延吉133000

依托咪酯(etomidate,ET)是一种作用强、短效的非巴比妥类静脉麻醉药,在临床中被广泛使用。前期在体电生理学和神经药理学手段研究发现,ET降低在体小脑皮层浦肯野细胞的单纯峰电位放电频率并具有浓度依赖性,ET(300μM)完全抑制自发性单... 详细信息

依托咪酯(etomidate,ET)是一种作用强、短效的非巴比妥类静脉麻醉药,在临床中被广泛使用。前期在体电生理学和神经药理学手段研究发现,ET降低在体小脑皮层浦肯野细胞的单纯峰电位放电频率并具有浓度依赖性,ET(300μM)完全抑制自发性单纯性放电,但自发性复杂峰电位放电依然存在。ET(300μM)不仅完全抑制自发性单纯性放电,而且抑制自发性复杂峰电位放电小穗数量[1]。另有研究报道,ET通过激活GABAA和甘氨酸受体来抑制在体小鼠小脑浦肯野细胞(Purkinje cell,PC)活性[2],而目前为止ET影响在体动物小脑皮质分子层感觉信息处理的机制尚不清楚。因此,我们有必要深入研究ET对乌拉坦麻醉小鼠小脑分子层中感觉刺激诱发反应的影响,为探讨ET对小脑皮层功能的影响机制做好前期准备。

关键词：依托咪酯小脑皮层分子层感觉刺激场电位记录 GABA受体小鼠

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甲醛固定石蜡包埋食管鳞状细胞癌组织蛋白提取方法的比较

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解剖学报 2021年第1期52卷 141-145页

作者：焦叶林赵云岗刘其伟阮豪杰高社干齐义军河南科技大学医学院临床医学院第一附属医院肿瘤医院河南省肿瘤表观遗传重点实验室河南洛阳471003 洛阳市第一人民医院病理科河南洛阳471003 长治市妇幼保健院医学遗传科山西长治046011 许昌学院解剖学教研室河南许昌461000

目的探讨从甲醛固定石蜡包埋(FFPE)食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中高效率提取蛋白质的方法。方法6种裂解液和100℃、105℃两种条件分别提取8例甲醛固定石蜡包埋食管鳞状细胞癌组织蛋白,Bradford法测定蛋白浓度、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺... 详细信息

目的探讨从甲醛固定石蜡包埋(FFPE)食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中高效率提取蛋白质的方法。方法6种裂解液和100℃、105℃两种条件分别提取8例甲醛固定石蜡包埋食管鳞状细胞癌组织蛋白,Bradford法测定蛋白浓度、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western blotting和免疫组织化学评价各方法提取组织蛋白的效率和质量,不同蛋白沉淀方法纯化提取蛋白。结果Laemmli裂解液(4号)100℃处理提取癌组织蛋白效率最高,Western blotting检测癌组织中14-3-3σ蛋白表达与免疫组织化学检测结果一致;2倍体积乙腈(含0.1%三氟乙酸)沉淀FFPE提取蛋白能够降低蛋白电泳背景。结论Laemmli裂解液100℃处理可高效提取的甲醛固定石蜡包埋组织蛋白且适用于Western blotting检测蛋白标志物分子,乙腈蛋白沉淀法能够进一步去除残余的交联蛋白质分子。

关键词：甲醛固定石蜡包埋蛋白提取蛋白纯化免疫印迹法

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肿瘤标志物在肝细胞癌诊断及预后中的应用

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国际肿瘤学杂志 2022年第6期49卷 371-375页

作者：刘晓婷刘洋张换勤邢金良权志博陕西中医药大学医学技术学院咸阳712046 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室西安710032 陕西中医药大学附属医院检验科咸阳712021

肿瘤标志物具有无创性、可重复分析、实时监测等特征,其在肝细胞癌早期诊断及预后监测中具有重要的应用价值。近几年,肝细胞癌肿瘤标志物研究发展迅速,既有传统的血清学肿瘤标志物(如甲胎蛋白、异常凝血酶原、高尔基体糖蛋白73、磷脂酰... 详细信息

肿瘤标志物具有无创性、可重复分析、实时监测等特征,其在肝细胞癌早期诊断及预后监测中具有重要的应用价值。近几年,肝细胞癌肿瘤标志物研究发展迅速,既有传统的血清学肿瘤标志物(如甲胎蛋白、异常凝血酶原、高尔基体糖蛋白73、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3等),又有新型的"液体活检"肿瘤标志物(如循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA等)。进一步研究肿瘤标志物与肝细胞癌之间的相关性,可为肝细胞癌治疗及预后评估提供参考。

关键词：癌,肝细胞早期诊断预后肿瘤标志物

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PBL教育模式在公卫专业学位硕士实践阶段培养中的应用

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科技资讯 2021年第16期19卷 148-151页

作者：郜蕊刘超群孙鹏危敏刘序华邓特张敏深圳市南山区妇幼保健院广东深圳518000 暨南大学基础医学与公共卫生学院营养教研室广东广州510000

PBL(Problem-Based Lear ning)是以问题为基础,学习者为中心的教学方法。与传统教学相比,PBL更注重学生的主动性,要求自学与教师指导相结合。该模式自1969年创建,1997年首次在我国香港地区实施,近年来被广泛运用于国内高校医学教育领域... 详细信息

PBL(Problem-Based Lear ning)是以问题为基础,学习者为中心的教学方法。与传统教学相比,PBL更注重学生的主动性,要求自学与教师指导相结合。该模式自1969年创建,1997年首次在我国香港地区实施,近年来被广泛运用于国内高校医学教育领域。但将此方法糅合进公共卫生专业性硕士社会实践—课题研究阶段培养,形成培养模式尚在探索阶段。深圳市南山区妇幼保健院和中山大学公共卫生学院通过双导师制联合培养公共卫生专业学位硕士研究生。按照培养目标,笔者总结了近年来医院将PBL教学方法糅合进公共卫生专业学位硕士研究生社会实践—课题研究阶段培养中,形成PBL教育模式的过程,评价实施效果,进行经验总结与并展开讨论。

关键词： PBL 公共卫生专业学位硕士研究生培养

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翻转课堂模式在泌尿外科教学中的应用研究

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农垦医学 2021年第3期43卷 281-284页

作者：王新敏李晨刘志立章乐石河子大学医学院第一附属医院泌尿外科新疆石河子832008 石河子大学医学院病理生理教研室新疆石河子832002

目的:研究翻转课堂教学模式在泌尿外科教学中的应用价值,为进行泌尿外科教学改革提供进一步参考。方法:观察对象选自本学院2017级本科临床医学专业A班学生38名,B班学生36名(均为自然班级),根据不同教学方法将班级分为教改班、普通班,教... 详细信息

目的:研究翻转课堂教学模式在泌尿外科教学中的应用价值,为进行泌尿外科教学改革提供进一步参考。方法:观察对象选自本学院2017级本科临床医学专业A班学生38名,B班学生36名(均为自然班级),根据不同教学方法将班级分为教改班、普通班,教改班采用翻转课堂教学模式,普通班采用传统课堂教学模式。4个课时以后,对两个班均进行知识点测试,仅对教改班进行问卷调查了解学生对教改的感受,通过比较两个班的教学成绩以及教改班对教学的感受,评价该次教学改革,数据采用SPSS 25.0软件进行检验。结果:在考试测验中,教改班的平均成绩好于普通班,两班考试成绩差异有统计学意义(P<0.05);在教改班课后问卷调查中,学生认为翻转课堂教学模式不仅加深知识理解、提高学习积极性,还加强了教师与学生之间、学生与学生之间的沟通。结论:翻转课堂教学模式在泌尿外科的教学过程中取得的成绩明显优于传统教学模式,易被学生接受,值得推广。

关键词：翻转课堂传统教学泌尿外科教学改革教学模式

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