检索结果-内蒙古大学图书馆

暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第2期31卷 154-157页

作者：高永鹏林晨田红霞高珂郜世隽江振友陈少华沈琦李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632

目的:研究金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)对K562细胞体外诱导脐血T细胞活化TCRζ链基因表达情况。方法:常规分离4例脐带血单核细胞,分别与抗CD3单克隆抗体、单纯K562细胞、SEA以及SEA联合K562细胞共培养,诱导T细胞活化增殖,并设空白对照组... 详细信息

目的:研究金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)对K562细胞体外诱导脐血T细胞活化TCRζ链基因表达情况。方法:常规分离4例脐带血单核细胞,分别与抗CD3单克隆抗体、单纯K562细胞、SEA以及SEA联合K562细胞共培养,诱导T细胞活化增殖,并设空白对照组。刺激培养48 h后收集各组细胞提取mRNA并合成cD-NA,采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量检测TCRζ链在不同组别T淋巴细胞中的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,根据相对定量公式:2-ΔΔCt计算TCRζ链表达差异倍数。结果:抗CD3单抗组、K562细胞组、SEA组、SEA联合K562细胞组诱导培养T细胞中TCRζ链表达差异倍数分别是(4.52±0.96)、(1.65±0.26)、(1.43±0.44)、(3.41±0.30),表明各组均有活化T细胞的作用,但各组TCRζ链表达水平有差异,其中SEA联合k562细胞组的T细胞ζ链基因表达均明显高于单纯k562组及单纯SEA组(P<0.01)。结论:超抗原SEA有助于增强K562细胞体外诱导T细胞活化作用。

关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA) 脐带血 T细胞受体ζ链实时定量PCR BCR-ABL融合蛋白慢性粒细胞白血病

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胚胎心肌干细胞体外的分化

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广东医学 2010年第11期31卷 1376-1378页

作者：马征来常青夏潮勇王丽京吴婷李艳杨雪松暨南大学医学院组织学与胚胎学教研室广州510632 广东药学院血管生物学实验室广州510224

目的鸡胚原肠胚形成期含有心肌干细胞（cardiac stem cell,CSC）的生心区原条组织离体后体外培养,使其增殖分化成具有舒缩功能的心肌组织。方法改良滤纸鸡胚胎整体培养法取胚,37℃孵箱孵育,待胚胎发育到原肠胚的HH4期,无菌环境内选择性... 详细信息

目的鸡胚原肠胚形成期含有心肌干细胞（cardiac stem cell,CSC）的生心区原条组织离体后体外培养,使其增殖分化成具有舒缩功能的心肌组织。方法改良滤纸鸡胚胎整体培养法取胚,37℃孵箱孵育,待胚胎发育到原肠胚的HH4期,无菌环境内选择性离体胚胎生心区原条组织（原条组织的前25%~40%）于10%FBSDMEM-F12培养基中培养,2~5d后得到局部跳动的细胞组织,通过原位杂交、免疫组织化学、DiI示踪和细胞的超微结构鉴定是否分化为心肌组织。结果 FGF8特异性表达于心管和神经管;N-cadherin特异性表达于心管、神经管和体节;DiI标记的细胞迁移参与心管的形成;细胞的超微结构显示心肌组织特有的结构---闰盘。结论 CSC体外培养可以定向分化发育成心肌组织,为进一步研究心肌细胞的发育分化和生理药理学实验提供了良好的平台。

关键词：心肌干细胞原肠胚 FGF8 N-cadherin DiI 分化心肌细胞

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NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体的构建与表达

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第4期31卷 346-351页

作者：唐小龙江振友庞雪云蓝锴欧财文广东省中医院检验科广东广州510120 暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632

目的:运用pADxsi系统构建带人NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体。方法:采用基因克隆技术,将目的基因NGN3从pEGFP-N1-NGN3质粒上切下连到pShuttle-GFP-CMV上,替换GFP,得到pShuttle-CMV-NGN3;再将PAX4从pEGFP-N1-PAX4质粒上切下连到系统pShuttle-CMV-NGN3上,得到pShuttle-CMV-NGN3/CMV-PAX4穿梭质粒;最后将CMV-NGN3/CMV-PAX4从pShuttle-CMV-NGN3/CMV-PAX4转移到ADxsi骨架载体上,得到pADxsi-CMV-NGN3/CMV-PAX4病毒质粒,然后在293细胞中进行包装与扩增活性病毒,并进行病毒滴度测定。体外感染人脐带间充质干细胞。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与免疫印迹(Western blotting)检测目的基因在细胞内的表达情况,免疫细胞化学与间接荧光法检测目的分子在细胞内的定位。结果:酶切鉴定和PCR证明重组人NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体构建正确;RT-PCR与Western blotting结果显示目的基因在细胞持续稳定表达;间接荧光与免疫化学表明重组腺病毒可高效感染人脐带间充质干细胞,且目的基因特异性地定位于细胞核内。结论:应用重组技术成功构建人NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体,且在间充质干细胞内持续而稳定表达。

关键词：腺病毒神经元素3(NGN3) 成对盒基因4(PAX4) 间充质干细胞(MCS)

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干细胞迁移机理的近场扫描光学显微术研究

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分析测试学报 2010年第6期29卷 548-552页

作者：陈家楠潘运龙丁晖覃莉蔡继业暨南大学生命科学技术学院生物纳米技术实验室广东广州510632 暨南大学附属第一医院普外科广东广州510632 暨南大学医学院组织胚胎学教研室广东广州510632

将内皮细胞生长因子(VEGF)置于甲基纤维素碟中形成VEGF的浓度梯度分布,并将人脐带间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)于此浓度梯度中培养,观察VEGF能否诱导MSCs定向迁移。应用近场扫描光学显微术(Near-field scanning optical m... 详细信息

将内皮细胞生长因子(VEGF)置于甲基纤维素碟中形成VEGF的浓度梯度分布,并将人脐带间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)于此浓度梯度中培养,观察VEGF能否诱导MSCs定向迁移。应用近场扫描光学显微术(Near-field scanning optical microscopy,NSOM)同时获取了VEGF诱导前后的MSCs的形貌和光学信息。结果表明,近场光学图观测到形貌图上所没有的黑色斑点,分析认为这些黑斑为细胞的黏着斑。近场光学图显示经过VEGF诱导后细胞的黏着斑数量明显增加。同时,对诱导前后干细胞的骨架蛋白进行免疫荧光标记并用共聚焦显微镜进行观察,结果表明细胞骨架由诱导前的无序状态转变为诱导后的有序状态,说明诱导后的干细胞处于迁移状态。光学超微结构图则显示了诱导后干细胞表面的光学细节比诱导前细胞大量增加,出现了大量直径约200 nm的光斑,这是由于细胞表面大量分泌黏附分子等蛋白分子引起的,这些结果为VEGF能够诱导MSCs进行定向迁移提供了实验依据和可视化证明。也表明NSOM不但能提供高分辨的光学分辨率,还可提供生物细胞精细结构的更深层次的光学信息。

关键词：近场光学显微镜间充质干细胞黏着斑

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臭灵丹中HTMF诱导Hep-2细胞凋亡

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第4期31卷 369-373页

作者：曹长姝沈伟哉李药兰王辉暨南大学医学院解剖学教研室广东广州510632 暨南大学药学院中药及天然产物研究所广东广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省重点实验室广东广州510632 暨南大学医学院微生物学及免疫学教研室广东广州510632

目的:探讨中药臭灵丹中3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(HTMF)诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡的机制。方法:倒置显微镜观察细胞形态变化,Hoechst 33258染色,观察对Hep-2细胞的致凋亡能力;流式细胞仪检测HTMF对Hep-2细胞的凋亡率和线粒体... 详细信息

目的:探讨中药臭灵丹中3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(HTMF)诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡的机制。方法:倒置显微镜观察细胞形态变化,Hoechst 33258染色,观察对Hep-2细胞的致凋亡能力;流式细胞仪检测HTMF对Hep-2细胞的凋亡率和线粒体跨膜电位(Δφm)的改变;Western blotting法检测凋亡蛋白caspase-3和caspase-9的变化。结果:倒置显微镜下Hep-2细胞随HTMF浓度加大而变小变圆,细胞存活数随浓度增加而减少。Hoechst 33258染色后高浓度组Hep-2细胞核固缩并出现呈致密浓染蓝白色颗粒状荧光的凋亡小体。流式结果显示HTMF对Hep-2细胞有促凋亡作用并呈明显的量效关系,线粒体跨膜电位(Δφm)随HTMF浓度的增加而下降。Western blotting结果显示HTMF可诱导Hep-2细胞中caspase-3和caspase-9蛋白活化,并呈浓度依赖性关系。结论:HTMF可通过线粒体途径诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡。

关键词：细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9 3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(HTMF)

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荔枝核提取物对HepG-2细胞生长抑制及凋亡诱导机制的探讨

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第4期31卷 364-368页

作者：王辉沈伟哉黄雪松陶小红暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室甘肃兰州730000 暨南大学医学院人体解剖教研室甘肃兰州730000 暨南大学理工学院食品科学与工程系广东广州510632 甘肃省第二人民医院肾内科甘肃兰州730000

目的:探讨荔枝核提取物成分L2.3对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制作用及其分子机制。方法:MTT法测定样品对HepG-2细胞的增殖抑制,荧光染色观察细胞凋亡;比色法检测样品对HepG-2中caspase-3、caspase-8和caspase-9活性的影响,流式细胞仪检... 详细信息

目的:探讨荔枝核提取物成分L2.3对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制作用及其分子机制。方法:MTT法测定样品对HepG-2细胞的增殖抑制,荧光染色观察细胞凋亡;比色法检测样品对HepG-2中caspase-3、caspase-8和caspase-9活性的影响,流式细胞仪检测并分析Fas蛋白表达的变化。结果:L2.3对HepG-2细胞表现出时间及剂量依赖性增殖抑制活性(P<0.05),其半数抑制质量浓度为43.0μg/mL;处理组细胞中出现致密浓染亮蓝色凋亡小体。较高质量浓度的L2.3处理细胞后,caspase-3、8、9的活性均呈时间依赖性增高(P<0.01),且Fas蛋白的表达也明显上调(P<0.05)。结论:荔枝核提取物L2.3对HepG-2细胞有体外增殖抑制活性,并介导caspase-3、caspase-8、caspase-9活性改变及Fas蛋白表达的上调,以此诱导细胞凋亡的发生。

关键词：荔枝核提取物 HepG-2 细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 Fas蛋白

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鸡胚早期发育过程中细胞周期调控的研究进展

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广东药学院学报 2010年第6期26卷 648-652页

作者：林艳青耿建国杨雪松王丽京广东药学院血管生物学研究所广东广州510006 暨南大学医学院组织学与胚胎学教研室广东广州510632

鸡胚作为一种经典的胚胎生物学模型很久以来用于研究发育过程中重要基因的功能,这主要因为它具有在胚胎早期类似人胚胎、实验周期短、易于进行体外显微手术操作和成本经济等其他模式动物不具有的特点。本文对鸡胚早期(原肠胚期)发育情... 详细信息

鸡胚作为一种经典的胚胎生物学模型很久以来用于研究发育过程中重要基因的功能,这主要因为它具有在胚胎早期类似人胚胎、实验周期短、易于进行体外显微手术操作和成本经济等其他模式动物不具有的特点。本文对鸡胚早期(原肠胚期)发育情况进行介绍,并重点阐述鸡胚早期发育过程中细胞周期调控的研究进展。

关键词：鸡胚原肠胚期细胞周期调控

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钙依赖性钾通道在鼻咽癌细胞调节性容积回缩中起重要作用

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生理学报 2009年第5期61卷 485-492页

作者：和树同朱林燕杨林杰何斯纯毛建文王立伟陈丽新暨南大学医学院生理学系暨南大学医学院药理学系广东药学院生物学教研室

本研究采用膜片钳全细胞记录技术记录低渗诱发的人低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)钾电流,用图像分析技术测量细胞容积,探讨不同类型K+通道在调节性容积回缩(regulatory volume decrease,RVD)中的作用。结果显示,细胞外灌流160mOsm/L低渗液诱... 详细信息

本研究采用膜片钳全细胞记录技术记录低渗诱发的人低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)钾电流,用图像分析技术测量细胞容积,探讨不同类型K+通道在调节性容积回缩(regulatory volume decrease,RVD)中的作用。结果显示,细胞外灌流160mOsm/L低渗液诱发CNE-2Z细胞产生容积激活性钾电流和RVD,中等电导钙依赖性钾通道阻断剂clotrimazole(100μmol/L)几乎完全抑制低渗诱发的钾电流和RVD。去除细胞外液的Ca2+后,低渗刺激不能诱发钾电流,RVD显著减弱。电压依赖性钾通道阻断剂4-aminopyridine(4-AP,5mmol/L)部分抑制低渗诱发的钾电流。上述结果提示,钙依赖性钾通道是低分化鼻咽癌细胞容积激活性钾通道的主要类型;钙依赖性钾通道在鼻咽癌细胞RVD中发挥了关键性作用,而电压依赖性钾通道在其中起部分作用。

关键词：鼻咽肿瘤低渗溶液细胞大小钾离子通道

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MicroRNA与血液系统肿瘤发生、诊断和治疗

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中国病理生理杂志 2009年第11期25卷 2225-2229页

作者：李育敏费嘉暨南大学医学院生化与分子生物学教研室广东广州510632

MicroRNA (miRNA) is a family of 19-24 nucleotides small non-coding RNA in eukaryotic organisms,which can regulate genes at the post-transcriptional level. miRNA has been shown to be involved in a variety of cellular processes such as development,proliferation,differentiation,apoptosis etc,and is closely related to the oncogenesis. Recent study indicates that several miRNAs play an important role in initiation and progression of hematological malignancies. miRNA expression profiling has identified signatures associated with diagnoses,prognoses and therapy of hematological malignancies. The review discusses miRNA and its biogenesis,functional mechanisms and potential role in the diagnosis,prognoses and therapy of hematological malignancies.

关键词： MicroRNA 血液肿瘤

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甲氰咪呱对K562细胞诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响

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第三军医大学学报 2009年第17期31卷 1637-1640页

作者：田红霞林晨陈少华杨力建江振友高珂郜世隽李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广州510632

目的研究甲氰咪呱(cimetidine)对K562细胞体外诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响。方法体外分别将甲氰咪呱、K562细胞、甲氰咪呱+K562细胞与正常人的脐带血单个核细胞(mononuclear cells,MNC)混合培养2周,检测诱导增殖T细胞的特... 详细信息

目的研究甲氰咪呱(cimetidine)对K562细胞体外诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响。方法体外分别将甲氰咪呱、K562细胞、甲氰咪呱+K562细胞与正常人的脐带血单个核细胞(mononuclear cells,MNC)混合培养2周,检测诱导增殖T细胞的特异杀伤活性,同时利用RT-PCR基因扫描技术分析培养后T细胞的TCR Vβ亚家族谱系的选择性利用和克隆性增殖情况。结果经甲氰咪呱、K562细胞、甲氰咪呱+K562细胞诱导培养2周后,各组均不同程度诱导细胞增殖,其中甲氰咪呱联合K562细胞诱导组的T细胞对K562细胞的特异性杀伤作用显著增强(P<0.01)。3组均呈现不同程度的T细胞TCR Vβ亚家族选择性利用,均有TCR Vβ21亚家族呈克隆性增殖。结论甲氰咪呱可协助增强bcr-abl抗原刺激的特异性抗CML T细胞作用。

关键词：甲氰咪呱 T细胞受体Vβ基因慢性粒细胞白血病脐血

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