检索结果-内蒙古大学图书馆

NLRP3炎症小体在甲型流感病毒肺炎小鼠肺组织的表达水平及其介导的炎症反应

中国免疫学杂志 2021年第14期37卷 1677-1681页

作者：石云锋师小函梁晶晶陈健宁江振友吴本权中山大学附属第三医院广州510630 暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632

目的:探索NLRP3炎症小体在甲型流感病毒H1N1(甲流病毒H1N1)肺炎小鼠肺组织的表达水平及其介导的炎症反应。方法:以甲流病毒H1N1/FM1株滴鼻感染C57BL/6小鼠,建立甲流病毒肺炎模型。分别感染24 h及1周后,观察小鼠肺组织病理,用荧光定量PC... 详细信息

目的:探索NLRP3炎症小体在甲型流感病毒H1N1(甲流病毒H1N1)肺炎小鼠肺组织的表达水平及其介导的炎症反应。方法:以甲流病毒H1N1/FM1株滴鼻感染C57BL/6小鼠,建立甲流病毒肺炎模型。分别感染24 h及1周后,观察小鼠肺组织病理,用荧光定量PCR法检测各组小鼠肺组织NLRP3、caspase-1、IL-1β的mRNA表达水平,用蛋白免疫印迹法检测各组小鼠肺组织NLRP3、caspase-1的蛋白表达水平,用ELISA法检测血清IL-1β的浓度。结果:甲流病毒肺炎小鼠模型建立成功。24 h组小鼠肺组织病理呈炎症改变,肺组织NLRP3的mRNA表达水平及蛋白表达水平均高于空白对照组(P均<0.05),肺组织caspase-1的蛋白表达水平高于空白对照组(P<0.01),肺组织IL-1β的mRNA表达水平高于空白对照组(P<0.01),血清IL-1β浓度高于空白对照(P<0.01)。1周组小鼠肺组织病理示炎症反应加重,肺组织NLRP3、caspase-1的mRNA表达水平及蛋白表达水平均高于24 h组(P均<0.05),肺组织IL-1β的mRNA表达水平高于24 h组(P<0.01),血清IL-1β浓度高于24 h组(P<0.01)。结论:甲流病毒感染激活NLRP3炎症小体并引起小鼠病毒性肺炎,炎症反应强度与感染时间呈正相关。甲流病毒感染1周,NLRP3炎症小体表达明显增强,该效应可能是甲流病毒肺炎在感染1周时进展为重症病毒性肺炎的机制之一。

关键词： NLRP3炎症小体甲型流感病毒小鼠炎症重症肺炎

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Ⅰ型登革病毒感染前后血管内皮细胞长链非编码RNA表达谱分析

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中山大学学报（医学版） 2019年第2期40卷 228-236页

作者：郑宝嘉江振友司露露郭前方江丽芳周俊梅王辉暨南大学基础医学院微生物与免疫学系教研室广东广州510632 中山大学热带病防治研究教育部重点实验室//中山医学院微生物学教研室广东广州510080

【目的】运用高通量测序技术检测Ι型登革病毒(DENV-1)感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)后长链非编码RNA(lncRNA)的差异表达,分析以探讨导致血管内皮细胞功能改变或受损的可能分子机制。【方法】DENV-1感染人脐静脉内皮细胞24 h后,分别... 详细信息

【目的】运用高通量测序技术检测Ι型登革病毒(DENV-1)感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)后长链非编码RNA(lncRNA)的差异表达,分析以探讨导致血管内皮细胞功能改变或受损的可能分子机制。【方法】DENV-1感染人脐静脉内皮细胞24 h后,分别提取对照组和病毒感染组的RNA样本进行测序,筛选差异表达的lncRNA,进行GO和KEGG富集分析,构建共表达网络图。【结果】共筛查到2 623个显著差异表达的lncRNA,其中1 441个为表达上调,1 182个为表达下调。发现表达差异lncRNA及其预测靶基因主要富集于影响抗原提呈、干扰素合成、细胞凋亡、细胞粘附等生物过程。【结论】DENV-1感染HUVEC后,lncRNA表达谱发生明显变化,与登革出血热/登革休克综合征的发生发展密切相关。

关键词： Ⅰ型登革病毒人脐静脉血管内皮细胞长链非编码RNA

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广东省2911例涂阳肺结核病患者的耐药疫情分析

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广东医学 2018年第2期39卷 228-234页

作者：巫株华黎贞燕李宇轩赵皎魏文静黄新春郭卉欣李海成孙琦陈涛张晨晨钟球周琳暨南大学医学院微生物与免疫教研室广东广州510632 广东省结核病控制中心参比实验室广东广州510630 广州大学附属中学广东广州510050

目的获取广东省32个耐药监测点的活动性肺结核病例的药敏测试结果,了解广东省耐药结核病的疫情及相关的影响因素,为广东省结核病防治规划的修订和完善提供科学依据。方法对纳入耐药监测的涂阳痰标本进行分离培养并采用世界卫生组织和国... 详细信息

目的获取广东省32个耐药监测点的活动性肺结核病例的药敏测试结果,了解广东省耐药结核病的疫情及相关的影响因素,为广东省结核病防治规划的修订和完善提供科学依据。方法对纳入耐药监测的涂阳痰标本进行分离培养并采用世界卫生组织和国际防痨和肺部疾病联合会推荐的比例法对分离培养物进行利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、卡那霉素、氧氟沙星、卷曲霉素、丙硫异烟胺、对氨基水杨酸药物敏感试验。结果 2 911例纳入耐药分析的患者中,总体耐药率为23.05%,耐多药率为4.09%;8.4%的耐多药为广泛耐多药,广泛耐多药率为0.34%;发现了非结核分枝杆菌感染57例,占总涂阳患者的1.85%;耐药的发生与患者的性别、年龄、居住地、是否感染乙型肝炎或(及)糖尿病等没有相关关系。但耐药率在非常住人口、复治患者中高于常住人口及初治患者。所有的临床分离株中,链霉素的耐药率最高(14.84%),在复治患者的临床分离株中,异烟肼的耐药率最高(21.69%)。结论广东省的结核病尤其是耐药结核病的防控仍然面临较大的挑战,连续耐药监测系统的建立并扩大耐药监测的纳入范围对缓解这一疫情具有重大意义。

关键词：结核病耐药监测疫情

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广东省结核分枝杆菌MIRU和RD105缺失基因分型研究

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广东医学 2017年第12期38卷 1827-1832页

作者：黄新春魏文静李海成赵皎郭卉欣巫株华黎贞燕孙琦张晨晨陈涛周琳暨南大学医学院微生物与免疫教研室广东广州510632 广东省结核病控制中心参比实验室广东广州510630

目的了解广东省结核分枝杆菌(MTB)随时间、地区的动态流行分布特点。方法应用24位点MTB散在分布重复单位(MIRU)分析广东省2013年455例MTB,筛选适合广东省分型的最佳MIRU组合,然后应用该最佳MIRU组合分析广东省2009年的173例、2013年的45... 详细信息

目的了解广东省结核分枝杆菌(MTB)随时间、地区的动态流行分布特点。方法应用24位点MTB散在分布重复单位(MIRU)分析广东省2013年455例MTB,筛选适合广东省分型的最佳MIRU组合,然后应用该最佳MIRU组合分析广东省2009年的173例、2013年的455例及2015年的225例MTB,此外,结合RD105缺失基因法鉴定这些菌株中的北京家族菌株,比例法进行药物敏感性试验(DST),聚类分析采用Bio Numerics(7.6)。结果 2015年北京家族菌株比率(70.2%)高于2009年(59.5%)和2013年(59.3%),其中,中部地区比率最高(71.3%),东部地区最低(55.0%)。MIRU-24位点的多态性存在差异,MIRU-12(HGI=0.999 1)能达到MIRU-15(HGI=0.999 2)相近的分辨率,MIRU-8分辨率较好(HGI=0.998 5)。853例MTB的系统发生树(MST)主要包括1个北京家族和2个非北京家族复合群,可分为Ⅰ、Ⅱ两群,广东省MTB的主要流行群是Ⅱ群,Ⅰ群中2009、2013年菌株比率高于2015年,东部地区菌株比率高(43.069%),中部地区低(27.206%),Ⅱ群则与之相反,北京家族菌株的MST主要包括1个复合群,包含407个独特型和46个簇。非北京家族菌株的MST主要包括2个复合群,包含309个独特型和6个簇。另外,广东省不同年份多药耐药(MDR)(χ~2=2.176,P=0.337)和广泛耐药(XDR)(χ~2=1.468,P=0.480)耐药率差异无统计学意义(P>0.05)。结论北京家族菌株是广东省的主要流行株,且随时间存在上升趋势,中部地区比率最高,该省MDR和XDR耐药趋势相对稳定,MIRU分型用于广东省MTB的分子流行病学研究可取得满意结果。

关键词：分枝杆菌结核 RD105缺失多位点数目可变串联重复序列分析

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结核分枝杆菌Hsp65-Esat6与hGM-CSF联合DNA疫苗的构建与体外研究

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2016年第1期37卷 29-35页

作者：王森林张梦媛王学坤周曙光江振友暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632

目的:应用分子生物学技术,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并在真核细胞中表达.方法:以p EGHsp65Esat-6为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65-Esat6基因,同时从质粒p ORF-h GM-CSF中扩增出基因佐剂h GM-CSF,分别克隆到真核表达载体p I... 详细信息

目的:应用分子生物学技术,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并在真核细胞中表达.方法:以p EGHsp65Esat-6为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65-Esat6基因,同时从质粒p ORF-h GM-CSF中扩增出基因佐剂h GM-CSF,分别克隆到真核表达载体p IRES的多克隆位点A(MCSA)和B(MCSB)中,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并转染Hep G-2细胞中表达和检测.结果:酶切鉴定提示插入的基因片段大小分别为1.93 kb和0.47kb,测序分析表明克隆的Hsp65-Esat6和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(h GM-CSF)序列与Gen Bank上公布序列完全一致;Western-bolt检测到Hsp65-Esat6融合蛋白相对分子质量(Mr)为75 000 k Da;RT-PCR方法检测出p IGM,p IHsp65GM和p IHsp65-Esat6GM转染组细胞均有h GM-CSF mRNA表达,三组细胞中h GM-CSF基因mRNA的表达量差异无统计学意义(P>0.05).ELISA方法检测到p IHsp65-Esat6GM转染组细胞培养上清中h GM-CSF的表达,且与空载体对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:成功构建和表达了p IHsp65-Esat6GM质粒,为研制优于卡介苗(BCG)的新型抗结核病的DNA疫苗奠定了基础.

关键词：热休克蛋白65kd-早期分泌性抗原靶6kd 人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子双顺反子基因佐剂

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南海红树林底泥放线菌Streptomyces sp.H41-26的抗菌化学成分研究

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中国抗生素杂志 2017年第4期42卷 J0031-J0036页

作者：李聆莉许琳雅唐晓翠施珊珊蒲小明张英沈会芳江振友林壁润周光雄暨南大学药学院中药及天然药物研究所广东省高校中药药效物质基础与创新药物研究重点实验室广州510632 广东省农业科学院植物保护研究所广东省植物保护新技术重点实验室广州510110 暨南大学医学院微生物与免疫教研室广州510632

目的对分离自我国南海红树林底泥的链霉菌Streptomyces sp.H41-26菌株的发酵物抗菌活性成分进行分离和鉴定。方法对链霉菌Streptomyces sp.H41-26菌株的发酵菌丝体采用95%乙醇提取,醇提取物经乙酸乙酯萃取获得抗菌活性部位,通过ODS开放... 详细信息

目的对分离自我国南海红树林底泥的链霉菌Streptomyces sp.H41-26菌株的发酵物抗菌活性成分进行分离和鉴定。方法对链霉菌Streptomyces sp.H41-26菌株的发酵菌丝体采用95%乙醇提取,醇提取物经乙酸乙酯萃取获得抗菌活性部位,通过ODS开放柱层析分离和反相高效液相制备纯化。结果分离得到4个化合物,经NMR和MS等波谱学方法分别鉴定为:放线菌素D(1)、放线菌素X_2(2)、放线菌素X_β(3)和放线菌素X_a(4)。结论化合物1~4在0.1mg/mL时,对大肠埃希菌(ATCC8739)、金黄色葡萄球菌(ATCC6538P)、伤寒沙门菌(ATCC6539)、乙型副伤寒沙门菌(50094)和乙型溶血性链球菌(ATCC32204)具有明显的抗菌活性,其中化合物2在0.01mg/mL时,对除大肠埃希菌外的其他4种细菌抑制效果仍很明显。

关键词：红树林放线菌放线菌素抗菌活性

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小檗碱对甲型流感病毒FM1株感染小鼠肺中RLH信号通路的影响

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中山大学学报（医学科学版） 2016年第6期37卷 834-839页

作者：张梦媛颜宇琦秦洪琼王森林施珊珊吴莎江振友暨南大学医学院微生物与免疫学系//广东省分子免疫学与抗体工程重点实验室广东广州510632

【目的】研究小檗碱对甲型流感病毒FM1株感染小鼠肺组织中RLH信号通路的影响,探讨其抗病毒作用的机制。【方法】以50μL流感病毒FM1株LD50滴鼻感染RIG-I-/-小鼠和正常野生型C57BL/6小鼠,建立小鼠流感模型,分别用小檗碱和奥司他韦治疗。... 详细信息

【目的】研究小檗碱对甲型流感病毒FM1株感染小鼠肺组织中RLH信号通路的影响,探讨其抗病毒作用的机制。【方法】以50μL流感病毒FM1株LD50滴鼻感染RIG-I-/-小鼠和正常野生型C57BL/6小鼠,建立小鼠流感模型,分别用小檗碱和奥司他韦治疗。观察小鼠的生存率以及肺组织炎症损伤状况;RT-q PCR和Western-blot检测正常野生型C57BL/6小鼠RLH信号通路中RIG-I、NF-κB和MAVS的表达。【结果】正常野生型C57BL/6小鼠小檗碱组的生存率为80%,与病毒组50%相比明显提高,其肺组织病变局限,炎症明显减轻。通过RT-q PCR和Western-blot检测到小檗碱可下调正常野生型C57BL/6小鼠RLH信号通路中RIG-I、NF-κB和MAVS的表达。与病毒组相比,RIG-I、NF-κB和MAVS的m RNA表达量分别降低42.28%、33.12%和48.12%,同时,它们的蛋白表达量分别降低17.37%、13.83%和28.91%。【结论】小檗碱对于FM1株引起的小鼠流感具有较好的治疗作用,可通过影响RLH信号传导通路的活化来发挥抗流感病毒作用。

关键词：小檗碱 RLH信号通路流感病毒FM1株炎症反应

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结核菌及其耐药性不同检测方法的临床应用评价

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广东医学 2017年第2期38卷 190-193页

作者：余丽李海成黎贞燕郭卉欣王威赵梅桂孙琦黄新春林东子李国周周杰钟球陈涛周琳华南理工大学食品科学与工程学院广东广州510640 广东省结核病控制中心参比实验室广东广州510630 暨南大学医学院微生物与免疫教研室广东广州510632 佛山市第四人民医院检验科广东佛山528000 深圳市宝安区慢性病防治院结核病防治科广东深圳518101 东莞市慢性病防治院检验科广东东莞523008

目的对目前临床上用于检测结核分枝杆菌(MTB)及其耐药性的传统及分子生物学方法进行系统评价,为设计合理的诊断路径提供指导意义。方法对标准菌株(H37Rv)、敏感、单耐及耐多药MTB进行梯度浓度稀释后,作为评估的实验样本,从检测结果的准... 详细信息

目的对目前临床上用于检测结核分枝杆菌(MTB)及其耐药性的传统及分子生物学方法进行系统评价,为设计合理的诊断路径提供指导意义。方法对标准菌株(H37Rv)、敏感、单耐及耐多药MTB进行梯度浓度稀释后,作为评估的实验样本,从检测结果的准确性、检测周期、最低检出限方面对不同方法进行评价。结果MTB检测方面,XpertMTB/RIF检测MTB的检出下限(3×10~2cfu)与培养法相当,比基因芯片和GenoType~ MTBDRplus的检出下限低;耐药性检测方面,在MTB含量不足(≤3×10~2cfu)的情况下XpertMTB/RIF对利福平(RFP)的检测存在假阳性结果,GenoType~ MTBDRplus检测3×10~4cfu链霉素耐药MTB时出现RFP和异烟肼(INH)耐药的假阳性结果;检测周期方面,XpertMTB/RIF在2 h内可完成报告,基因芯片和GenoType~ MTBDRplus在当天8 h内可完成报告,培养及比例法药敏需4~8周可报告结果。结论目前不同的MTB及耐药检测方法各有优缺点,在临床应用方面应综合考虑患者的病情、经济状况等选取合理的诊断路径。

关键词：结核分枝杆菌罗氏培养法基因芯片 XpertMTB/RIF GenoType MTBDRplus

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水飞蓟宾通过上调 P15INK4B 和 P21WAF1／CIP1活化 JNK 诱导人胰腺癌细胞 G1期阻滞及细胞凋亡

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2015年第1期36卷 21-28页

作者：王莉张晓凯张鹏王娟娟吴志慧林晨蒋建伟广州市番禺区中心医院检验科广东广州511400 南阳市第一人民医院普外科河南南阳473000 暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632 暨南大学医学院微生物与免疫学教研室广东广州510632

目的:探讨水飞蓟宾对胰腺癌As PC-1细胞的增殖抑制作用及其作用机制.方法:MTT法和克隆形成抑制实验观察水飞蓟宾对人胰腺癌As PC-1细胞的增殖抑制作用,碘化丙锭(PI)单染色检测细胞周期改变,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋... 详细信息

目的:探讨水飞蓟宾对胰腺癌As PC-1细胞的增殖抑制作用及其作用机制.方法:MTT法和克隆形成抑制实验观察水飞蓟宾对人胰腺癌As PC-1细胞的增殖抑制作用,碘化丙锭(PI)单染色检测细胞周期改变,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡水平,Western blotting检测细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达.结果:不同浓度的水飞蓟宾对胰腺癌As PC-1细胞的生长均有抑制作用,且呈剂量-效应和时间-效应关系(P<0.05),水飞蓟宾作用于As PC-1细胞48、72 h的IC50浓度分别为224.20、87.25μmol/L;克隆形成抑制实验显示,随着水飞蓟宾浓度增加,As PC-1细胞克隆形成逐渐减少.细胞周期检测结果显示,随着水飞蓟宾浓度的增加,胰腺癌As PC-1细胞出现明显G1期阻滞;水飞蓟宾处理组细胞的周期蛋白Cyclin D1、Cyclin E2、Cyclin A、Cyclin B1表达下降,细胞周期蛋白激酶CDK4、CDK6表达不变,细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制蛋白P15INK4B、P21WAF1/CIP1表达升高,与流式检测的结果相一致.不同浓度水飞蓟宾作用48 h后,出现明显的凋亡细胞群;同时发现Caspase-9、Caspase-3活化降解,Caspase3下游效应蛋白PARP出现切割条带.JNK蛋白表达增加并磷酸化活化,Bcl-2蛋白家族中抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-x L、Mcl-1表达明显降低,促凋亡蛋白Bax表达基本不变,BH3-only蛋白Bclxs、Bid、Bim表达增加.结论:水飞蓟宾明显抑制胰腺癌细胞增殖,通过诱导P15INK4B、P21WAF1/CIP1表达阻滞细胞周期在G1期,并通过诱导JNK活化激活线粒体细胞凋亡途径,进而诱导胰腺癌As PC-1细胞凋亡.

关键词：水飞蓟宾胰腺癌 AsPC -1 细胞细胞周期凋亡

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携带脑组织特异性microRNA靶序列的重组日本脑炎病毒的构建与鉴定

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解放军医学杂志 2014年第6期39卷 429-432页

作者：曹文媛叶青李晓峰王洪江朱舜亚秦鄂德江振友秦成峰暨南大学医学院微生物学与免疫学系广州510632 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的构建携带脑组织特异性miRNA靶序列的重组日本脑炎病毒株。方法利用反向遗传学技术将脑组织特异性的miR-124和miR-125靶序列引入日本脑炎病毒cDNA全长感染性克隆,将重组质粒用XhoⅠ线性化后采用SP6转录试剂盒进行体外转录,以获得的RN... 详细信息

目的构建携带脑组织特异性miRNA靶序列的重组日本脑炎病毒株。方法利用反向遗传学技术将脑组织特异性的miR-124和miR-125靶序列引入日本脑炎病毒cDNA全长感染性克隆,将重组质粒用XhoⅠ线性化后采用SP6转录试剂盒进行体外转录,以获得的RNA转染BHK-21细胞,37℃、5%CO2孵箱培养3d后取上清盲传1代观察细胞病变,并通过RT-PCR、细胞蚀斑形成实验和病毒生长曲线等方法对恢复病毒的生物学特性进行鉴定。结果成功在BHK-21细胞中拯救获得了携带miRNA靶序列的重组病毒,与野生型病毒株具有相似的蚀斑形态和生长特性。结论通过反向遗传学技术获得了携带脑组织特异性miRNA靶序列的重组日本脑炎病毒,为miRNA介导的组织特异性减毒机制研究奠定了基础。

关键词：微RNAs 脑炎病毒,日本感染性克隆疫苗

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