检索结果-内蒙古大学图书馆

中华传染病杂志 2006年第2期24卷 91-94页

作者：唐小龙蔡淑玉江振友左建生张荣波周昕江丽芳暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州淮南510632 安徽理工大学医学院广州中山大学医学院微生物学教研室

目的观察登革2型病毒(DV2)对脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)表达组织因子(TF)、组织因子抑制物(TFPI)和血栓调节蛋白(TM)的影响。方法应用胰酶消化HUVECs并进行传代培养,用生长良好的第二、三代细胞进行试验。应用CCK-8测定DV2感染对细胞... 详细信息

目的观察登革2型病毒(DV2)对脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)表达组织因子(TF)、组织因子抑制物(TFPI)和血栓调节蛋白(TM)的影响。方法应用胰酶消化HUVECs并进行传代培养,用生长良好的第二、三代细胞进行试验。应用CCK-8测定DV2感染对细胞活性的影响;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内TF、TFPI和TMmRNA水平。结果DV2对细胞活力的影响与对照组相比差异无统计学意义。DV2感染HUVEC后6h,TFPI mRNA水平显著下调(P<0.05),48h恢复到正常水平。TF mRNA对照组不表达,DV2组各时相均有微量表达。而DV2组抗凝蛋白TMmRNA表达显著高于对照组(F=17.855,P=0.000),24h达到峰值(P<0.05),以后渐下降,72h正常表达。结论DV2急性下调TFPI mRNA和微量上调TF mRNA表达,启动外源性凝血途径,促进血液凝固;但DV2诱导高水平的TM可有效地增强抗凝活性,这有利于出血和血浆外渗。结果提示DV可诱导血管内皮细胞所调控的凝血系统失调,这可能在登革出血热/登革休克综合征(DHF/DSS)的出血机制中起重要作用。

关键词：登革热病毒凝血致活酶酶抑制剂血栓调节蛋白

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NOD/SCID小鼠抗原对脐血T细胞上TCRVβ亚家族基因克隆性的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第8期23卷 772-773,777页

作者：林晨白雪谭玉波杨力健陈少华李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632

目的:了解脐血单个核细胞(MNC)体外与NOD/SCID小鼠抗原共培养后,TCRVβ亚家族T细胞分布和克隆性增殖的特点。方法:将NOD/SCID小鼠外周血MNC、骨髓、胸腺及脾细胞反复冻融3次制成可溶性抗原,分别与Ficoll-Hypaque法分离的脐血MNC共培养。... 详细信息

目的:了解脐血单个核细胞(MNC)体外与NOD/SCID小鼠抗原共培养后,TCRVβ亚家族T细胞分布和克隆性增殖的特点。方法:将NOD/SCID小鼠外周血MNC、骨髓、胸腺及脾细胞反复冻融3次制成可溶性抗原,分别与Ficoll-Hypaque法分离的脐血MNC共培养。第15天和第20天,分别收集细胞提取RNA,用RT-PCR扩增人TCRVβ亚家族基因,并用基因扫描进行T细胞克隆性分析。结果:扩增前脐血T细胞表达大部分Vβ亚家族,经NOD/SCID小鼠抗原诱导后,TCRVβ亚家族T细胞呈限制性表达,某些Vβ亚家族基因(Vβ10、11)呈寡克隆性增殖,而某些Vβ亚家族基因(Vβ2、15、16、19)呈寡克隆表达的趋势。结论:NOD/SCID小鼠抗原可刺激脐血T细胞选择性增殖,提示在建立人源化NOD/SCID小鼠免疫模型时应考虑所存在的GVHR问题。

关键词：脐血 NOD/SCID小鼠 T细胞TCRVβ基因

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TNFα和IL-10在巨细胞病毒感染人胚肺成纤维细胞中的作用

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中国病理生理杂志 2002年第3期18卷 265-268页

作者：江振友曹艳英林晨暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632

目的 :研究TNFα和IL - 1 0对人巨细胞病毒 (HCMV)感染人胚肺成纤维细胞 (HEL)的影响 ,以及感染细胞产生TNFα的变化 ,探讨有关细胞因子在HCMV感染免疫中的作用。方法 :用不同浓度的TNFα和IL - 1 0作用于HEL ,2 4h后感染病毒 ,研究TNF... 详细信息

目的 :研究TNFα和IL - 1 0对人巨细胞病毒 (HCMV)感染人胚肺成纤维细胞 (HEL)的影响 ,以及感染细胞产生TNFα的变化 ,探讨有关细胞因子在HCMV感染免疫中的作用。方法 :用不同浓度的TNFα和IL - 1 0作用于HEL ,2 4h后感染病毒 ,研究TNFα和IL - 1 0对HCMV感染HEL的影响。用HCMV感染HEL ,感染后 (4、2 4、48、72、96h)分别收集培养上清液 ,用ELISA法检测TNFα含量。结果 :在病毒感染前 ,中、高浓度TNFα或低、中浓度IL - 1 0可抑制HCMV在HEL内的增殖。HCMV感染HEL后 ,细胞产生TNFα的量无明显改变。结论 :TNFα和IL - 1 0在HCMV感染免疫过程中起作用。

关键词：巨细胞病毒细胞活素类肺成纤维细胞 TNFα IL-10

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登革病毒感染对血管内皮细胞ICAM-1表达的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第12期27卷 1112-1116页

作者：江振友柏志全肖瑞卢业成暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 暨南大学医学院生理学教研室广州510632 广州医学院临床技能中心广州市第八人民医院

目的探讨登革病毒2型(DV2)体外感染对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule,ICAM-1)的影响。方法原代分离培养HUVEC,用生长良好的2、3代细胞进行实验。用CCK-8法测定DV2感染前后的细胞活性。流... 详细信息

目的探讨登革病毒2型(DV2)体外感染对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule,ICAM-1)的影响。方法原代分离培养HUVEC,用生长良好的2、3代细胞进行实验。用CCK-8法测定DV2感染前后的细胞活性。流式细胞仪测定DV2感染组和对照组细胞在不同实验时间点细胞表面ICAM-1蛋白表达的情况。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和图像定量分析技术分析DV2感染组和对照组在不同实验时间点HUVEC内ICAM-1 mRNA水平。结果病毒感染HUVEC对细胞活力的影响与对照组相比差异无统计学意义。DV2感染HUVEC促进ICAM-1 mRNA转录,DV2组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。其中,正常状态下HUVEC有一定水平ICAM-1 mRNA转录,但感染后显著增加(P<0.05),24～72 h维持于高水平,与其他时间表达差异有统计学意义(P<0.05)。DV2感染HUVEC,细胞表达ICAM-1蛋白在12～72 h显著升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论DV2感染上调HUVEC的ICAM-1 mRNA水平和蛋白表达,从而诱发并加重血管内皮局部的损伤,破坏血管的屏障功能,促进血管渗漏的形成与发展。这可能是DV2感染诱发患者血管通透性升高和血浆渗漏的重要分子机制之一。

关键词：登革病毒人脐静脉内皮细胞细胞间黏附分子

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六月雪的抑菌作用

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武汉大学学报（医学版） 2002年第2期23卷 167-168,176页

作者：刘敏邓兆群屈雪菊白瑞珍刘君炎武汉大学医学院微生物与免疫学教研室武汉430071

目的 :观察六月雪的抑菌作用及其急性毒性。方法 :用平板测定法检测六月雪的抑菌作用 ,并测定其最低抑菌浓度 (MIC)和最低杀菌浓度 (MBC)。急性毒性实验用小鼠以口服给药测定最大耐受量 (MTD)。结果 :六月雪对枯草杆菌、大肠杆菌均有较... 详细信息

目的 :观察六月雪的抑菌作用及其急性毒性。方法 :用平板测定法检测六月雪的抑菌作用 ,并测定其最低抑菌浓度 (MIC)和最低杀菌浓度 (MBC)。急性毒性实验用小鼠以口服给药测定最大耐受量 (MTD)。结果 :六月雪对枯草杆菌、大肠杆菌均有较强的抑制作用 ,最低抑菌浓度均为 1.2 5 % ,最低杀菌浓度分别为 2 .5 % ,1.2 5 %。急性毒性实验表明该物质的最大耐受量大于 4 0g/kg。结论 :六月雪有明显的抑菌作用。

关键词：六月雪抑菌作用急性毒性

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一氧化氮合酶在坐骨神经夹伤后腓肠肌中的表达变化

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解剖学杂志 2007年第4期30卷 456-460,F0004页

作者：陈梦玲程纯严美娟高尚锋沈爱国南通大学江苏省神经再生重点实验室南通大学医学院微生物与免疫学教研室南通226001 南通大学医学院微生物与免疫学教研室

目的:探讨外周神经损伤后同侧腓肠肌中3种一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的表达变化及定位。方法:采用H-E染色及Masson三色染色法分析大鼠坐骨神经夹伤后同侧腓肠肌的病理变化,NADPH-黄递酶组织化学研究其总NOS的改变,并利用W... 详细信息

目的:探讨外周神经损伤后同侧腓肠肌中3种一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的表达变化及定位。方法:采用H-E染色及Masson三色染色法分析大鼠坐骨神经夹伤后同侧腓肠肌的病理变化,NADPH-黄递酶组织化学研究其总NOS的改变,并利用Western印迹法、免疫荧光双标法,对3种NOS表达变化及定位进行分析。结果:神经夹伤后相应腓肠肌发生了明显的病理变化且总NOS发生改变,3种NOS变化不尽相同,其表达高峰均约在4周左右。nNOS与神经丝标记物NF-200有共定位,iNOS、eNOS则分别在巨噬细胞、血管内皮细胞中有表达。结论:3种NOS在坐骨神经夹伤后相应腓肠肌中表达变化不同,可能对肌肉损伤及再生修复发挥不同作用。

关键词：坐骨神经创伤和损伤肌,骨骼一氧化氮合酶

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ATP对人不死化成纤维细胞DNA的合成、膜蛋白表达及离子通道的影响

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中国免疫学杂志 2002年第5期18卷 314-317,337页

作者：李君武片山文二難波正義暨南大学医学院微生物免疫学教研室广州510632 日本冈山大学医学分子细胞研究所

目的：探讨ATP抑制不死化人成纤维细胞增殖过程中对其DNA合成、细胞膜蛋白的表达以及离子通道的影响。方法：将正常人TIG-7和OUMS-36细胞株，不死化人KMST-6和SUSM-1细胞株在不同浓度的ATP、ADP、AMP，条件下分别进行24和96 h的常规细... 详细信息

目的：探讨ATP抑制不死化人成纤维细胞增殖过程中对其DNA合成、细胞膜蛋白的表达以及离子通道的影响。方法：将正常人TIG-7和OUMS-36细胞株，不死化人KMST-6和SUSM-1细胞株在不同浓度的ATP、ADP、AMP，条件下分别进行24和96 h的常规细胞培养，观察存活细胞数目、DNA的合成、［32P］ATP标记膜蛋白的表达以及不死化KMST-6细胞分别在无钙离子培养基和应用Ca2+和K+通道桔抗剂时，细胞增殖率的改变。结果：培养96h后，0．4mmol/L ATP对不死化细胞KMST-6的抑制率为77％，且 DNA合成明显地被抑制，而正常 OUMS-36细胞抑制率为41％，且 DNA合成无明显改变。在 1mmol/L ATP时，多数KMST-6细胞发生死亡，而正常OUMS-36细胞的增殖无明显影响。当ADP、AMP，和腺苷或磷酸处理的细胞，仅有ADP处理的不死化细胞存活数目减少（P<0．01）。与正常细胞比较，不死化细胞30，31，33和40 kD的[32P]标记膜蛋白呈高表达。0．4 mmol/L ATP与 KMST-6细胞共培养时分别加入 Ca2+以及K+通道拮抗剂，这些药物在某种程度上可以降低 ATP的增殖抑制作用，当ATP处理的细胞液中无钙离子时，它们的增殖不受影响。结论：ATP对不死化人成纤维细胞的DNA合成有明显的抑制作用；并且使磷酸化细胞膜蛋白表达增高；其过程中有钙通道和钾通道的参与?

关键词：三磷酸腺苷膜蛋白质 DNA合成钙通道钾通道 ATP 癌症成纤维细胞

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人巨细胞病毒pp150抗原区的原核表达及初步应用

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病毒学报 2004年第2期20卷 169-171页

作者：李国才严华季明春申厚凤陈红菊焦红梅万兵扬州大学医学院微生物学免疫学教研室扬州225001

To make up an engineered *** strain for expression of antigenic determinants of pp150 of human cytomegalovirus,the gene encoding the 420-752 amino acid peptides of pp150 was amplified from human cytomegalovirus AD169 by RT-PCR and cloned into Nde I/BamHⅠ sites in *** recombinant plasmid was transformed into *** BL21(DE3)and a foreign protein about 35 kD were detected by SDS-PAGE and Western blotting *** antiserum prepared by using prokaryotic expressed product as antigen turned to be against pp150 specifically and had low neutralization effect to HCMV.

关键词：人巨细胞病毒 pp150 抗原原核表达疫苗 HCMV

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淋球菌NspA基因克隆及序列分析

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中华皮肤科杂志 2004年第5期37卷 299-300页

作者：季明春蒋桂花扬州大学医学院微生物学和免疫学教研室 225001

奈瑟菌表面蛋白A(Neisseria Surface Protein A,NspA)是新近发现的一个具有较强免疫原性和保守性的抗原,是淋球菌疫苗研究的理想侯选者之一[1].现克隆淋球菌NspA全长基因,为进一步的淋球菌基因疫苗研究奠定基础。

关键词：淋球菌 NspA 基因克隆序列分析奈瑟菌表面蛋白A

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耐药淋球菌差异DNA消减文库的构建及初步筛选

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中华皮肤科杂志 2003年第5期36卷 264-266页

作者：季明春严华陈红菊申厚凤扬州大学医学院微生物学及免疫学教研室225001

目的克隆和研究耐药性淋球菌相关基因.方法从耐药淋球菌株RSM292C4和淋球菌标准参考菌株WHO-A细胞中提取DNA,经Rsa Ⅰ酶切后,应用抑制性消减杂交技术构建耐药性淋球菌差异DNA消减文库并进行初步筛选.结果耐药淋球菌差异DNA消减文库经扩... 详细信息

目的克隆和研究耐药性淋球菌相关基因.方法从耐药淋球菌株RSM292C4和淋球菌标准参考菌株WHO-A细胞中提取DNA,经Rsa Ⅰ酶切后,应用抑制性消减杂交技术构建耐药性淋球菌差异DNA消减文库并进行初步筛选.结果耐药淋球菌差异DNA消减文库经扩增获得约2 500个白色克隆,随机挑取96个白色克隆,进行PCR扩增鉴定,发现克隆中插有100～600 bp大小的片段.分别以RsaI酶切样本和参照DNA为探针,与随机挑取的96个白色菌落质粒作点杂交,有5个克隆仅能与样本DNA探针杂交,而不能与参照DNA探针杂交,表明它们为RSM292C4基因组DNA所特有,可能代表某些淋球菌新基因.对这5个克隆插入的DNA片段进行测序,经送基因库和淋球菌基因组部分测序基因库检索分析,发现5个片段均为未知新序列.结论淋球菌耐药菌株DNA消减文库的构建为进一步筛选、克隆淋球菌耐药的新基因奠定了基础.

关键词：耐药淋球菌抑制性消减杂交基因文库药物耐受 DNA序列分析

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