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玉米特异启动子驱动下结核Hsp65与Esat-6融合基因表达载体的构建及鉴定

华北农学报 2009年第3期24卷 28-31页

作者：李君武王珊珊宋东刘艳黄清华暨南大学医学院微生物与免疫学教研室广东广州510632

利用转基因玉米研制新型结核口服疫苗。构建植物双元表达质粒pCAMBIA1300GHLE,并转化农杆菌LBA4404。以本实验室构建的pEGHLE为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65-Esat6基因,连接到含有玉米特异性启动子globulin-1的pCR2.1载体上;将gl... 详细信息

利用转基因玉米研制新型结核口服疫苗。构建植物双元表达质粒pCAMBIA1300GHLE,并转化农杆菌LBA4404。以本实验室构建的pEGHLE为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65-Esat6基因,连接到含有玉米特异性启动子globulin-1的pCR2.1载体上;将globulin1-HLE联合片断切下连到含有抗除草剂基因bar的pCAMBIA1300载体中;电击法将重组质粒转化到农杆菌LBA4404中。成功构建了pC1300GHLE质粒,酶切鉴定得到3.3 kb和8.6 kb 2条带,测序分析表明克隆的Hsp65和Esat6序列与NCBI上公布序列一致;成功转化到农杆菌中,酶切从农杆菌中所提的质粒,条带大小与预期结果相符合。成功构建和转化了pC1300GHLE表达载体,为成功研制利用转基因植物生产抗结核口服疫苗奠定了基础。

关键词：结核分支杆菌热休克蛋白65 Esat-6 globulin-1

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融合蛋白FADDdel-GFP对死亡受体介导的胰岛细胞凋亡的影响

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中国免疫学杂志 2007年第4期23卷 296-299,305页

作者：胡萍李君武叶嗣颖林绍强李小兰韦静暨南大学医学院微生物和免疫学教研室广州510632

目的研究融合蛋白FADDdel-GFP对死亡受体介导的细胞凋亡信号的生物学效应,以探讨通过基因修饰靶细胞对1型糖尿病的影响。方法用脂质体将融合基因pFADDdel-GFP导入胰岛细胞株NIT,通过细胞RT-PCR和荧光显微镜检测其表达,采用FACS检测抗-Fa... 详细信息

目的研究融合蛋白FADDdel-GFP对死亡受体介导的细胞凋亡信号的生物学效应,以探讨通过基因修饰靶细胞对1型糖尿病的影响。方法用脂质体将融合基因pFADDdel-GFP导入胰岛细胞株NIT,通过细胞RT-PCR和荧光显微镜检测其表达,采用FACS检测抗-Fas抗体诱导的胰岛细胞株的细胞毒效应。结果转染重组子pFADDdel-GFP的NITf-g细胞可见绿色荧光蛋白表达;NITf-g细胞对抗-Fas诱导的细胞损伤率为10.16%,细胞内的Caspase-3的活性为12.33%,均明显低于对照组(P<0.05)。结论成功建立了稳定表达FADDdel-GFP的胰岛细胞株;FADDdel-GFP可有效抑制死亡受体介导的细胞内凋亡信号传导。

关键词： FADD Caspase-3 凋亡 1型糖尿病

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蛋白激酶C在脂多糖诱导内皮细胞β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ表达中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第3期29卷 198-203页

作者：贲志云程纯孙晓雷钱佶肖锋张冬梅季玉红南通大学医学院免疫学与微生物学教研室 226001

目的研究蛋白激酶C（PKC）对脂多糖（LPS）诱导内皮细胞β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ（β-1，4-galactosyltransferase-Ⅰ，β-1，4-GaIT-Ⅰ）表达的调节作用，以及对内皮细胞骨架结构改变及其黏附能力的影响。方法分别用PKC激动剂或几种... 详细信息

目的研究蛋白激酶C（PKC）对脂多糖（LPS）诱导内皮细胞β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ（β-1，4-galactosyltransferase-Ⅰ，β-1，4-GaIT-Ⅰ）表达的调节作用，以及对内皮细胞骨架结构改变及其黏附能力的影响。方法分别用PKC激动剂或几种不同类型的PKC抑制剂预处理人脐静脉内皮细胞（HUVECs）30rain，LPS刺激HUVECs4h后，RT-PCR、Western blot方法检测β-1，4-GaIT-Ⅰ表达变化，细胞荧光染色观察β-1，4-GaIT-Ⅰ催化的糖链表达变化及细胞骨架结构的改变，通过内皮-单核细胞黏附试验观察HUVECs黏附能力的改变。结果儿种不同类型的PKC抑制剂均能不同程度地抑制LPS刺激HUVECs引起的β-1，4-GaIT-Ⅰ表达的上调，PKC激动剂能够使上调的β-1，4-GAIT-Ⅰ的表达进-步增加；在HUVECs中β-1，4-GaIT-Ⅰ与细胞骨架有共同定位，PKC抑制剂显著抑制LPS诱导的内皮细胞骨架蛋白的重构和β-1，4-GaIT-Ⅰ细胞内的再分布；PKC抑制剂显著抑制LPS诱导的内皮-单核细胞黏附能力的上调。结论PKC可能参与调节LPS诱导的HUVECs β-1，4-GaIT-Ⅰ的表达，可能多种类型的PKC参与了这一调节过程；PKC可能通过对β-1，4-GaIT-Ⅰ的调节进而影响炎症过程中内皮细胞骨架蛋白的重构及内皮细胞与单核细胞的黏附能力。

关键词： β-1 4-半乳糖基转移酶-Ⅰ 蛋白激酶C 内皮细胞脂多糖

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钩端螺旋体L型感染与钩端螺旋体脑动脉炎的关系

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中国人兽共患病杂志 1999年第5期15卷 39-40页

作者：江振友林晨蒋惠荷罗伟中李英欣暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 蚌埠医学院临床微生物学与免疫学教研室

目的　探讨钩端螺旋体Ｌ型感染与钩体脑动脉炎发病的可能关系。方法　对７４例钩体脑动脉炎患者血液及脑脊液进行钩端螺旋体普通培养、Ｌ型培养，患者血清做显微镜凝集试验，用免疫荧光染色确定钩体Ｌ型及其原菌型。结果　钩... 详细信息

目的　探讨钩端螺旋体Ｌ型感染与钩体脑动脉炎发病的可能关系。方法　对７４例钩体脑动脉炎患者血液及脑脊液进行钩端螺旋体普通培养、Ｌ型培养，患者血清做显微镜凝集试验，用免疫荧光染色确定钩体Ｌ型及其原菌型。结果　钩体脑动脉炎患者钩体Ｌ型培养、普通培养、钩体ＭＡＴ的阳性率分别为：４７３％、１８９％、７０３％。分离出的钩体Ｌ型呈多形性。结论　钩端螺旋体Ｌ型感染与钩体脑动脉炎的发病关系密切。

关键词：钩端螺旋体病 L型脑动脉炎钩端螺旋体

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Plakoglobin基因在乳腺癌BRCA1基因突变的多态性

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中华医学遗传学杂志 1997年第6期14卷 347-350页

作者：黎国华梁志成暨南大学医学院微生物免疫教研室

为了探讨在携带乳腺癌易感基因（ＢＲＣＡ１）突变基因的乳腺癌家族中是否同时具有Ｐｌａｋｏｇｌｏｂｉｎ基因的改变，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和双向直接测序方法，对家族性乳腺癌中有乳腺癌易感基因ＢＲＣＡ１突变的两个德国家族... 详细信息

为了探讨在携带乳腺癌易感基因（ＢＲＣＡ１）突变基因的乳腺癌家族中是否同时具有Ｐｌａｋｏｇｌｏｂｉｎ基因的改变，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和双向直接测序方法，对家族性乳腺癌中有乳腺癌易感基因ＢＲＣＡ１突变的两个德国家族成员的Ｐｌａｋｏｇｌｏｂｉｎ基因多态性进行研究。结果表明，两个家族６７％（６／９）有Ｐｌａｋｏｇｌｏｂｉｎ基因多态性改变，且不同的ＢＲＣＡ１基因突变亦伴随不同形式的Ｐｌａｋｏｇｌｏｂｉｎ基因多态性。为研究乳腺癌的分子遗传学病因积累了资料。

关键词： Plakiogliobin 乳腺癌多态现象基因突变

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《医学微生物学图鉴》多媒体CAI课件的设计与应用

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微生物学通报 2004年第4期31卷 122-124页

作者：江振友暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632

计算机辅助教学 (CAI)是现代化教育技术的重要组成部分。我们利用多媒体形象、多样化表达及交互性强的特点 ,将文本、声音、图片、动画、录像等有机结合在一起 ,设计制作了卫生部CAI课件《医学微生物学图鉴》。教学实践表明 :本课件在... 详细信息

计算机辅助教学 (CAI)是现代化教育技术的重要组成部分。我们利用多媒体形象、多样化表达及交互性强的特点 ,将文本、声音、图片、动画、录像等有机结合在一起 ,设计制作了卫生部CAI课件《医学微生物学图鉴》。教学实践表明 :本课件在教学中的应用提高了微生物学的教学质量 ,促进教学的整体改革 ,优化教学过程 ,取得较好的教学效果。

关键词： CAI 微生物学图鉴医学

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联合免疫缺陷小鼠的发展及其人免疫重建的研究

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第三军医大学学报 2005年第13期27卷 1415-1417页

作者：谭玉波林晨李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632

多年来研究者致力于在联合免疫缺陷小鼠(severe combined immunodeficiency mice，SCID mice)体内重建有功能的人免疫系统，期以解决动物模型难以确切反映人体免疫系统的特点和研究人体免疫应答受限于体外实验的难题1988年Mosier等将人... 详细信息

多年来研究者致力于在联合免疫缺陷小鼠(severe combined immunodeficiency mice，SCID mice)体内重建有功能的人免疫系统，期以解决动物模型难以确切反映人体免疫系统的特点和研究人体免疫应答受限于体外实验的难题1988年Mosier等将人外周血淋巴细胞移植入C.B—17 SCID小鼠首次建立了人源化的SCID鼠模型。人类造血干／祖细胞移植给联合免疫缺陷鼠后可在其体内多系分化、增殖。

关键词：免疫缺陷鼠再植免疫重建

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丙型肝炎病毒非结构蛋白5A与干扰素的应答耐受

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新医学 2006年第1期37卷 64-67页

作者：王志鹏暨南大学医学院微生物与免疫学教研室 510632

丙型肝炎病毒是丙型病毒性肝炎的病原体,目前缺乏有效的疫苗。干扰素是其主要治疗药物,但普遍存在耐受。丙型肝炎病毒非结构蛋白5A在丙型肝炎病毒的干扰素耐受中发挥重要作用。涉及的可能机制包括非结构蛋白5A干扰素敏感决定区变异、抑... 详细信息

丙型肝炎病毒是丙型病毒性肝炎的病原体,目前缺乏有效的疫苗。干扰素是其主要治疗药物,但普遍存在耐受。丙型肝炎病毒非结构蛋白5A在丙型肝炎病毒的干扰素耐受中发挥重要作用。涉及的可能机制包括非结构蛋白5A干扰素敏感决定区变异、抑制双链核糖核酸依赖性蛋白激酶、抑制2',5'-寡腺苷酸合成酶、诱生白介素-8和作用于干扰素的蛋白酪氨酸激酶和转录激动子信号途径。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白5A 干扰素应答耐受

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肾综合征出血热病毒对人血管内皮细胞感染性的研究

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中国人兽共患病杂志 2003年第3期19卷 59-62,88页

作者：江振友温筱芸林晨韦静暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632

目的　研究肾综合征出血热 (HFRS)病毒在血管内皮细胞 (HEC)内的增殖 ,及病毒对HEC产生几种细胞因子的影响。方法　采用微量免疫酶斑法检测HFRS病毒A6 9株感染HEC后病毒繁殖动态变化 ,间接免疫荧光法检测HEC内HFRS病毒抗原。ELISA法检测... 详细信息

目的　研究肾综合征出血热 (HFRS)病毒在血管内皮细胞 (HEC)内的增殖 ,及病毒对HEC产生几种细胞因子的影响。方法　采用微量免疫酶斑法检测HFRS病毒A6 9株感染HEC后病毒繁殖动态变化 ,间接免疫荧光法检测HEC内HFRS病毒抗原。ELISA法检测HFRS病毒感染上清液中TNF -α、IL - 6和IFN - β的含量。结果　病毒感染后 1d即可在培养上清中用微量免疫酶斑法测出病毒 ,病毒滴度 5d达高峰 ,以后下降。在一定范围内病毒产量随病毒感染复数 (multiplicityofinfection ,M0I)的增加而增高。间接免疫荧光法证明感染的HEC胞浆及胞膜上携带肾综合征出血热病毒抗原。电镜和光镜下 ,感染细胞未见明显的形态和结构改变。病毒对HEC产生TNF -α无影响 ;产生IL - 6和IFN - β明显增高。结论　HFRS病毒可在原始靶细胞HEC内增殖。HFRS病毒感染后所出现的微血管损害可能不是病毒直接损害所致 ,而很可能与间接因素有关。

关键词：肾综合征出血热病毒人血管内皮细胞感染性研究微量免疫酶斑法

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不同T细胞亚群对超抗原SEA反应性的差异

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复旦学报（医学版） 2002年第6期29卷 437-439页

作者：张瑞华陈露秋储以微刘瑞梓王缨熊思东复旦大学医学院免疫学系上海200032 东京女子医科大学微生物学与免疫学教研室

目的　在体内和体外研究SEA再次刺激后Vβ3+ CD4+ 和Vβ3+ CD8+ T细胞亚群的免疫反应 ,探讨CD4+ 和CD8+ T细胞亚群对超抗原SEA反应性的差异。方法　分离小鼠超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)应答性Vβ3+ CD4+ 和Vβ3+ CD8+ 两个T细胞亚... 详细信息

目的　在体内和体外研究SEA再次刺激后Vβ3+ CD4+ 和Vβ3+ CD8+ T细胞亚群的免疫反应 ,探讨CD4+ 和CD8+ T细胞亚群对超抗原SEA反应性的差异。方法　分离小鼠超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)应答性Vβ3+ CD4+ 和Vβ3+ CD8+ 两个T细胞亚群 ,检测其对SEA再次刺激的增殖反应及产生IL 2活性。结果　Vβ3+ CD4+ 和Vβ3+ CD8+ T细胞亚群对SEA再次刺激所诱导的增殖反应以及产生IL 2活性的能力有显著差异 (P <0 .0 1)。结论　SEA单次刺激时Vβ3+ CD4+ 和Vβ3+ CD8+ T细胞亚群反应性相似 ,再次刺激时Vβ3+ CD8+ 呈显著低反应性。

关键词： T细胞亚群超抗原SEA 反应性差异

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