检索结果-内蒙古大学图书馆

结核分枝杆菌Hsp65-Esat6与hGM-CSF联合DNA疫苗的构建与体外研究

暨南大学学报（自然科学与医学版） 2016年第1期37卷 29-35页

作者：王森林张梦媛王学坤周曙光江振友暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632

目的:应用分子生物学技术,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并在真核细胞中表达.方法:以p EGHsp65Esat-6为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65-Esat6基因,同时从质粒p ORF-h GM-CSF中扩增出基因佐剂h GM-CSF,分别克隆到真核表达载体p I... 详细信息

目的:应用分子生物学技术,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并在真核细胞中表达.方法:以p EGHsp65Esat-6为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65-Esat6基因,同时从质粒p ORF-h GM-CSF中扩增出基因佐剂h GM-CSF,分别克隆到真核表达载体p IRES的多克隆位点A(MCSA)和B(MCSB)中,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并转染Hep G-2细胞中表达和检测.结果:酶切鉴定提示插入的基因片段大小分别为1.93 kb和0.47kb,测序分析表明克隆的Hsp65-Esat6和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(h GM-CSF)序列与Gen Bank上公布序列完全一致;Western-bolt检测到Hsp65-Esat6融合蛋白相对分子质量(Mr)为75 000 k Da;RT-PCR方法检测出p IGM,p IHsp65GM和p IHsp65-Esat6GM转染组细胞均有h GM-CSF mRNA表达,三组细胞中h GM-CSF基因mRNA的表达量差异无统计学意义(P>0.05).ELISA方法检测到p IHsp65-Esat6GM转染组细胞培养上清中h GM-CSF的表达,且与空载体对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:成功构建和表达了p IHsp65-Esat6GM质粒,为研制优于卡介苗(BCG)的新型抗结核病的DNA疫苗奠定了基础.

关键词：热休克蛋白65kd-早期分泌性抗原靶6kd 人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子双顺反子基因佐剂

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

登革病毒对人树突状细胞感染性的研究

引用

微生物学报 2005年第4期45卷 598-600,i003页

作者：江振友史毓杰孙晗笑暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 暨南大学基因组药物研究所广州510632

探讨登革病毒对人树突状细胞(DC)的感染性。人外周新鲜血常规分离单核细胞,经细胞因子GMCSF、IL4诱导培养成DC,通过形态学特征、细胞表型和淋巴细胞刺激能力鉴定。用登革病毒2型(DV2)感染DC,于作用后6h、24h、48h、72h、96h分别收集上... 详细信息

探讨登革病毒对人树突状细胞(DC)的感染性。人外周新鲜血常规分离单核细胞,经细胞因子GMCSF、IL4诱导培养成DC,通过形态学特征、细胞表型和淋巴细胞刺激能力鉴定。用登革病毒2型(DV2)感染DC,于作用后6h、24h、48h、72h、96h分别收集上清液和细胞,甲基纤维素微量空斑试验测定病毒滴度,间接免疫荧光法检测细胞上病毒抗原表达,透射电镜观察病毒在细胞内的定位。病毒感染后6h即可在培养上清中测出病毒,病毒滴度在48h达到高峰,以后逐渐下降。间接免疫荧光法证明感染的DC胞浆及胞膜上携带病毒抗原。透射电镜下在病毒感染48h后DC胞浆内可见大量病毒颗粒。树突状细胞是登革病毒感染的靶细胞,病毒可感染DC并产生大量病毒颗粒,可能在其发病机制中起重要作用。

关键词：登革病毒,人树突状细胞,感染

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

融合基因FADDdel-GFP修饰在胰岛细胞自杀效应中的作用

引用

免疫学杂志 2007年第3期23卷 270-273页

作者：胡萍李君武叶嗣颖季煜华李小兰韦静暨南大学医学院微生物学和免疫学教研室暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

目的研究FADDdel-GFP在Fas/FasL介导的胰岛细胞自杀效应中的作用。方法采用DNA转染技术将重组体pFADDdel-GFP导入哺乳动物细胞NIT(鼠胰岛细胞瘤细胞);采用FACS检测细胞因子诱导后NIT细胞的Fas和FasL表达情况及细胞自杀效应;采用active c... 详细信息

目的研究FADDdel-GFP在Fas/FasL介导的胰岛细胞自杀效应中的作用。方法采用DNA转染技术将重组体pFADDdel-GFP导入哺乳动物细胞NIT(鼠胰岛细胞瘤细胞);采用FACS检测细胞因子诱导后NIT细胞的Fas和FasL表达情况及细胞自杀效应;采用active caspase3检测试剂盒检测细胞因子作用前后NIT细胞的caspase-3活性变化。结果NIT细胞表面无Fas和FasL表达,细胞因子可促其表达增加;细胞因子作用后,FADDdel-GFP修饰的NIT细胞的细胞损伤百分率和细胞内caspase3活性明显低于对照组。结论FADDdel-GFP修饰的NIT细胞具有一定的抵抗Fas/FasL途径介导细胞自杀效应的能力。

关键词： Fas相关死亡结构域 Fas FasL 细胞因子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Balb/c小鼠左右两侧大脑皮层IL-1β、IL-6含量的不对称性

引用

生理学报 2001年第2期53卷 152-154页

作者：付清玲李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室汕头515031

为探讨左右侧大脑皮层白细胞介素 1β (interleukine 1β,IL 1β)和白细胞介素 6 (interleukine 6 ,IL 6 )的含量状况及与左右侧大脑皮层免疫调控异质性的关系 ,分别取正常及细菌脂多糖 (lipopolysaccharide,LPS)刺激 2h后的Balb/c小鼠... 详细信息

为探讨左右侧大脑皮层白细胞介素 1β (interleukine 1β,IL 1β)和白细胞介素 6 (interleukine 6 ,IL 6 )的含量状况及与左右侧大脑皮层免疫调控异质性的关系 ,分别取正常及细菌脂多糖 (lipopolysaccharide,LPS)刺激 2h后的Balb/c小鼠的左右侧大脑皮层 ,制备匀浆液 ,用ELISA法检测匀浆液中IL 1β、IL 6的含量。结果显示 ,正常小鼠大脑皮层IL 1β、IL 6含量均为右侧显著高于左侧 ;LPS刺激后 ,左侧大脑皮层IL 6含量明显升高 ,右侧大脑皮层IL 6含量显著高于左侧大脑皮层 ,而左右侧大脑皮层IL 1β含量无明显差异。该实验结果表明 ,Balb/c小鼠在正常生理状态下两侧大脑皮层IL 1β、IL 6含量存在不对称性。

关键词：不对称性大脑皮层免疫调控白细胞介素1β 白细胞介素6 细胞因子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

解脲脲原体与不孕、早孕、生殖道炎症关系的探讨

引用

实用妇产科杂志 1997年第6期13卷 306-307页

作者：刘小澄林晨黄环珍袁桂秀罗伟中暨南大学医学院微生物免疫教研室

解脲脲原体与不孕、早孕、生殖道炎症关系的探讨刘小澄林晨黄环珍袁桂秀罗伟中解脲脲原体（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ，Ｕｕ）是正常人生殖道可以分离出的一种支原体。目前对Ｕｕ与原因不明的不孕症、流产、死胎、新... 详细信息

解脲脲原体与不孕、早孕、生殖道炎症关系的探讨刘小澄林晨黄环珍袁桂秀罗伟中解脲脲原体（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ，Ｕｕ）是正常人生殖道可以分离出的一种支原体。目前对Ｕｕ与原因不明的不孕症、流产、死胎、新生儿肺炎、女性生殖道炎症等疾病的关...

关键词：解脲脲原体女性不育妊娠生殖道炎症

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞表面β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ在免疫突触形成中的作用

引用

中国免疫学杂志 2011年第7期27卷 588-593页

作者：吴圆圆王滢薛琴张洁朱轶晴汪晓莺南通大学医学院微生物与免疫学教研室南通226001

目的:研究细胞表面β-1,4-半乳糖基转移酶-I(β-1,4-galactosyltransferase I,β-1,4-GalT-I)在免疫突触形成中的作用。方法:以抗CD3、CD28单克隆抗体活化Jurkat细胞,应用实时荧光定量PCR及流式细胞术检测分析β-1,4-GalT-I的表达变化,... 详细信息

目的:研究细胞表面β-1,4-半乳糖基转移酶-I(β-1,4-galactosyltransferase I,β-1,4-GalT-I)在免疫突触形成中的作用。方法:以抗CD3、CD28单克隆抗体活化Jurkat细胞,应用实时荧光定量PCR及流式细胞术检测分析β-1,4-GalT-I的表达变化,激光共聚焦显微镜观察β-1,4-GalT-I在Jurkat细胞活化前后的表达与定位;将Jurkat细胞与SEB负载的Raji细胞共培养以构建Jurkat-Raji细胞免疫突触,观察β-1,4-GalT-I在免疫突触中的定位。结果:β-1,4-GalT-I mRNA表达水平随着Jurkat细胞的活化逐渐增高,在细胞活化后36小时达到高峰;活化后细胞表面β-1,4-GalT-I分子的表达较静止状态高;共聚焦显微镜显示在活化的Jurkat细胞表面及Jurkat-Raji细胞免疫突触部位β-1,4-GalT-I表达信号增强且其分布发生重排和簇集,且与CD3分子共定位,与CD28分子部分共定位。结论:Jurkat细胞表面的β-1,4-GalT-I分子参与了免疫突触的形成。

关键词： β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ Jurkat细胞免疫突触

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

HCV非结构蛋白3真核表达载体pcDNA3.1(-)/NS3的构建

引用

中国病理生理杂志 2004年第11期20卷 2155-2157,2160页

作者：李君武江静王志鹏许小亮林绍强黄泽棋韦静李小兰暨南大学医学院微生物免疫教研室广东广州510632

目的 :构建HCVNS3基因真核表达载体 ,为进一步研究和解析HCVNS3基因诱发不死化人肝细胞癌化的机制准备了条件。方法 :将含HCV全长基因的pBRTM/HCV1- 30 11质粒转化感受态菌JM10 9并扩增 ;提取pBRTM/HCV1- 30 11质粒 ;从pBRTM/HCV1- 30 1... 详细信息

目的 :构建HCVNS3基因真核表达载体 ,为进一步研究和解析HCVNS3基因诱发不死化人肝细胞癌化的机制准备了条件。方法 :将含HCV全长基因的pBRTM/HCV1- 30 11质粒转化感受态菌JM10 9并扩增 ;提取pBRTM/HCV1- 30 11质粒 ;从pBRTM/HCV1- 30 11质粒中PCR扩增出HCVNS3片段 ;并将其插入到克隆载体pMD18-T中 ,再与表达载体pcDNA3 1(- )重组 ,以得到重组的真核表达载体pcDNA3 1(- ) /NS3;最后限制性酶切鉴定HCVNS3表达载体。结果 :从pBRTM/HCV1- 30 11质粒中扩增出的HCVNS3片段大小正确 ,经测序证明其碱基序列为编码目的基因的正确序列 ;凝胶电泳结果证明已将此片段克隆到pcDNA3 1/NS3内。结论 :成功地构建了HCVNS3基因的真核表达载体pcDNA3 1(- )

关键词：肝炎病毒丙型基因载体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

登革病毒促进人树突状细胞分泌TNF-α、IL-6、IFN-γ的动态观察

引用

中国病理生理杂志 2005年第6期21卷 1203-1206页

作者：史毓杰江振友暨南大学医学院微生物与免疫教研室广东广州510632

目的:研究登革病毒(DV)对人树突状细胞(DC)产生细胞因子的影响。方法:人外周新鲜血常规分离单核细胞,经细胞因子GM-CSF、IL-4诱导培养DC,形态学特征、细胞表型和淋巴细胞刺激能力鉴定。用登革病毒2型感染DC,于作用后6、12、24、48、72h... 详细信息

目的:研究登革病毒(DV)对人树突状细胞(DC)产生细胞因子的影响。方法:人外周新鲜血常规分离单核细胞,经细胞因子GM-CSF、IL-4诱导培养DC,形态学特征、细胞表型和淋巴细胞刺激能力鉴定。用登革病毒2型感染DC,于作用后6、12、24、48、72h分别收集上清液和细胞,间接免疫荧光法检测细胞上病毒抗原表达,ELISA法检测登革病毒感染后细胞因子TNF-α、IL-6、IFN-γ水平的动态变化。结果:人外周血经GM-CSF、IL-4诱导培养1周即可得到典型树突状细胞。间接免疫荧光法证明感染的DC胞浆和胞膜上携带登革病毒抗原,DV感染使DC分泌TNF-α、IL-6能力显著大于对照组(P<0.01),但其分泌IFN-γ的能力无明显改变。结论:树突状细胞是登革病毒的靶细胞,登革病毒感染可促进树突状细胞分泌TNF-α、IL-6。树突状细胞可能参与机体抗登革病毒感染的免疫防御机制。

关键词：登革热病毒树突细胞细胞因子类

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

ATP抑制不死化人成纤维细胞增殖信号转导机制的研究

引用

中国病理生理杂志 2001年第4期17卷 337-339页

作者：李君武暨南大学医学院免疫微生物教研室广东广州510632

目的 :探讨ATP抑制不死化人成纤维细胞增殖信号转导机制。方法 :观察 0 4mmol LATP与不死化人成纤维细胞共培养不同时间下 ,细胞内游离Ca2 + 浓度 ([Ca2 + ]i)和三磷酸肌醇 (IP3)浓度的变化特点和意义 ,以及分别应用Ca2 + 和K+ 通道拮... 详细信息

目的 :探讨ATP抑制不死化人成纤维细胞增殖信号转导机制。方法 :观察 0 4mmol LATP与不死化人成纤维细胞共培养不同时间下 ,细胞内游离Ca2 + 浓度 ([Ca2 + ]i)和三磷酸肌醇 (IP3)浓度的变化特点和意义 ,以及分别应用Ca2 + 和K+ 通道拮抗剂时 ,细胞增殖率的改变。结果 :ATP与不死化人成纤维细胞共培养时 ,[Ca2 + ]i明显升高 ,IP3浓度明显降低 (均P <0 0 1)。分别应用Ca2 + 和K+ 通道拮抗剂时 ,细胞增殖率都显著增高 (均P <0 0 1)。结论 :ATP抑制不死化人成纤维细胞增殖过程中有钙通道和钾通道以及IP3的参与。

关键词：三磷酸腺苷钙通道钾通道肌醇1,4,5-三磷酸成纤维细胞增殖信号转导

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

结核杆菌Esat6与hGM-CSF双顺反子表达载体的构建及鉴定

引用

广东医学 2007年第5期28卷 697-699页

作者：李君武黄泽棋姚翠婵林绍强周曙光李晓栋宋东黄清华王珊暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632

目的从质粒pVAE中克隆目的基因Esat6,与hGM-CSF一起构建双顺反子表达载体pIEG,并进行鉴定。方法以质粒pVAE为模板扩增出Esat6基因,与pIRES的MCS A进行重组,构建pIEsat6重组质粒。然后再以pORF-hGM-CSF为模板扩增出hGM-CSF基因,与pIRES... 详细信息

目的从质粒pVAE中克隆目的基因Esat6,与hGM-CSF一起构建双顺反子表达载体pIEG,并进行鉴定。方法以质粒pVAE为模板扩增出Esat6基因,与pIRES的MCS A进行重组,构建pIEsat6重组质粒。然后再以pORF-hGM-CSF为模板扩增出hGM-CSF基因,与pIRES载体的MCS B进行重组,构建pIGM重组质粒,上述两重组质粒经PCR、限制性内切酶图谱及DNA序列测定分析等多种方法进行鉴定后,再通过酶切、连接把hGM-CSF构建于pIEsat6质粒中,形成双顺反子真核表达载体pIEG。结果通过PCR可克隆得到相应大小的产物,酶切鉴定所切下的两片段大小约为0.29 kb和0.47 kb,与预计相符。测序结果与报道一致。结论成功构建结核杆菌Esat6基因与hGM-CSF双顺反子真核表达载体,为进一步研究其结核融合DNA疫苗及其转染DC疫苗原型的免疫保护效果奠定了基础。

关键词：结核分支杆菌 Esat6 hGM—CSF 双顺反子 DNA疫苗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：