检索结果-内蒙古大学图书馆

广东医学 2017年第12期38卷 1827-1832页

作者：黄新春魏文静李海成赵皎郭卉欣巫株华黎贞燕孙琦张晨晨陈涛周琳暨南大学医学院微生物与免疫教研室广东广州510632 广东省结核病控制中心参比实验室广东广州510630

目的了解广东省结核分枝杆菌(MTB)随时间、地区的动态流行分布特点。方法应用24位点MTB散在分布重复单位(MIRU)分析广东省2013年455例MTB,筛选适合广东省分型的最佳MIRU组合,然后应用该最佳MIRU组合分析广东省2009年的173例、2013年的45... 详细信息

目的了解广东省结核分枝杆菌(MTB)随时间、地区的动态流行分布特点。方法应用24位点MTB散在分布重复单位(MIRU)分析广东省2013年455例MTB,筛选适合广东省分型的最佳MIRU组合,然后应用该最佳MIRU组合分析广东省2009年的173例、2013年的455例及2015年的225例MTB,此外,结合RD105缺失基因法鉴定这些菌株中的北京家族菌株,比例法进行药物敏感性试验(DST),聚类分析采用Bio Numerics(7.6)。结果 2015年北京家族菌株比率(70.2%)高于2009年(59.5%)和2013年(59.3%),其中,中部地区比率最高(71.3%),东部地区最低(55.0%)。MIRU-24位点的多态性存在差异,MIRU-12(HGI=0.999 1)能达到MIRU-15(HGI=0.999 2)相近的分辨率,MIRU-8分辨率较好(HGI=0.998 5)。853例MTB的系统发生树(MST)主要包括1个北京家族和2个非北京家族复合群,可分为Ⅰ、Ⅱ两群,广东省MTB的主要流行群是Ⅱ群,Ⅰ群中2009、2013年菌株比率高于2015年,东部地区菌株比率高(43.069%),中部地区低(27.206%),Ⅱ群则与之相反,北京家族菌株的MST主要包括1个复合群,包含407个独特型和46个簇。非北京家族菌株的MST主要包括2个复合群,包含309个独特型和6个簇。另外,广东省不同年份多药耐药(MDR)(χ~2=2.176,P=0.337)和广泛耐药(XDR)(χ~2=1.468,P=0.480)耐药率差异无统计学意义(P>0.05)。结论北京家族菌株是广东省的主要流行株,且随时间存在上升趋势,中部地区比率最高,该省MDR和XDR耐药趋势相对稳定,MIRU分型用于广东省MTB的分子流行病学研究可取得满意结果。

关键词：分枝杆菌结核 RD105缺失多位点数目可变串联重复序列分析

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广东省耐药监测点2015年结核分枝杆菌流行病学研究

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中华结核和呼吸杂志 2017年第5期40卷 334-338页

作者：黄新春郭卉欣巫株华郭炽星魏文静李海成孙琦张晨晨黎贞燕陈涛钟球周琳广东省结核病控制中心参比实验室广州510630 暨南大学医学院微生物与免疫教研室番禺区慢性病防治站

目的了解广东省MTB的流行病学特点，发现耐药相关的危险因素。方法收集广东省2015年5个耐药监测点225例MTB临床分离株，采用差异区域105（RD105）缺失基因法和15个位点MTB散在分布重复单位（MIRU－15）进行基因分型研究。采用BioNumeric... 详细信息

目的了解广东省MTB的流行病学特点，发现耐药相关的危险因素。方法收集广东省2015年5个耐药监测点225例MTB临床分离株，采用差异区域105（RD105）缺失基因法和15个位点MTB散在分布重复单位（MIRU－15）进行基因分型研究。采用BioNumerics7.6软件进行基因聚类分析，比例法进行药物敏感试验，统计学分析采用卡方检验和多因素logistics回归。结果225株MTB中，北京家族菌株158（70.2%），不同MIRU－15位点分辨率指数（HGI）存在差异，聚类分析广东省5个耐药监测点菌株可分为二大群，其中Ⅰ群菌株成簇率高于Ⅱ群（χ2＝9.331，P＝0.020）。多因素logistics回归分析发现，Qub11b位点与利福平（OR＝0.653，P＝0.013）、异烟肼（OR＝0.647，P＝0.012）耐药相关，ETR F位点与异烟肼（OR＝0.484，P＝0.039）、链霉素（OR＝0.511，P＝0.040）、乙胺丁醇（OR＝0.337，P＝0.023）、氧氟沙星（OR＝0.258，P＝0.003）耐药相关，Mtub21位点与卷曲霉素（OR＝0.466，P＝0.040）耐药相关，QUB26位点与丙硫异烟胺（OR＝0.555，P＝0.047）耐药相关。结核病的复发与患者自身情况及菌株特点无关。结论广东省MTB基因具有多态性，各地区菌株的分布较稳定。QUB11b、ETR F、Mtub21和QUB26位点可能与预测菌株耐药的标志物相关。

关键词：分枝杆菌结核基因缺失序列分析

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结核分枝杆菌Hsp65-Esat6与hGM-CSF联合DNA疫苗的构建与体外研究

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2016年第1期37卷 29-35页

作者：王森林张梦媛王学坤周曙光江振友暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632

目的:应用分子生物学技术,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并在真核细胞中表达.方法:以p EGHsp65Esat-6为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65-Esat6基因,同时从质粒p ORF-h GM-CSF中扩增出基因佐剂h GM-CSF,分别克隆到真核表达载体p I... 详细信息

目的:应用分子生物学技术,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并在真核细胞中表达.方法:以p EGHsp65Esat-6为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65-Esat6基因,同时从质粒p ORF-h GM-CSF中扩增出基因佐剂h GM-CSF,分别克隆到真核表达载体p IRES的多克隆位点A(MCSA)和B(MCSB)中,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并转染Hep G-2细胞中表达和检测.结果:酶切鉴定提示插入的基因片段大小分别为1.93 kb和0.47kb,测序分析表明克隆的Hsp65-Esat6和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(h GM-CSF)序列与Gen Bank上公布序列完全一致;Western-bolt检测到Hsp65-Esat6融合蛋白相对分子质量(Mr)为75 000 k Da;RT-PCR方法检测出p IGM,p IHsp65GM和p IHsp65-Esat6GM转染组细胞均有h GM-CSF mRNA表达,三组细胞中h GM-CSF基因mRNA的表达量差异无统计学意义(P>0.05).ELISA方法检测到p IHsp65-Esat6GM转染组细胞培养上清中h GM-CSF的表达,且与空载体对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:成功构建和表达了p IHsp65-Esat6GM质粒,为研制优于卡介苗(BCG)的新型抗结核病的DNA疫苗奠定了基础.

关键词：热休克蛋白65kd-早期分泌性抗原靶6kd 人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子双顺反子基因佐剂

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南海红树林底泥放线菌Streptomyces sp.H41-26的抗菌化学成分研究

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中国抗生素杂志 2017年第4期42卷 J0031-J0036页

作者：李聆莉许琳雅唐晓翠施珊珊蒲小明张英沈会芳江振友林壁润周光雄暨南大学药学院中药及天然药物研究所广东省高校中药药效物质基础与创新药物研究重点实验室广州510632 广东省农业科学院植物保护研究所广东省植物保护新技术重点实验室广州510110 暨南大学医学院微生物与免疫教研室广州510632

目的对分离自我国南海红树林底泥的链霉菌Streptomyces sp.H41-26菌株的发酵物抗菌活性成分进行分离和鉴定。方法对链霉菌Streptomyces sp.H41-26菌株的发酵菌丝体采用95%乙醇提取,醇提取物经乙酸乙酯萃取获得抗菌活性部位,通过ODS开放... 详细信息

目的对分离自我国南海红树林底泥的链霉菌Streptomyces sp.H41-26菌株的发酵物抗菌活性成分进行分离和鉴定。方法对链霉菌Streptomyces sp.H41-26菌株的发酵菌丝体采用95%乙醇提取,醇提取物经乙酸乙酯萃取获得抗菌活性部位,通过ODS开放柱层析分离和反相高效液相制备纯化。结果分离得到4个化合物,经NMR和MS等波谱学方法分别鉴定为:放线菌素D(1)、放线菌素X_2(2)、放线菌素X_β(3)和放线菌素X_a(4)。结论化合物1~4在0.1mg/mL时,对大肠埃希菌(ATCC8739)、金黄色葡萄球菌(ATCC6538P)、伤寒沙门菌(ATCC6539)、乙型副伤寒沙门菌(50094)和乙型溶血性链球菌(ATCC32204)具有明显的抗菌活性,其中化合物2在0.01mg/mL时,对除大肠埃希菌外的其他4种细菌抑制效果仍很明显。

关键词：红树林放线菌放线菌素抗菌活性

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结核菌及其耐药性不同检测方法的临床应用评价

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广东医学 2017年第2期38卷 190-193页

作者：余丽李海成黎贞燕郭卉欣王威赵梅桂孙琦黄新春林东子李国周周杰钟球陈涛周琳华南理工大学食品科学与工程学院广东广州510640 广东省结核病控制中心参比实验室广东广州510630 暨南大学医学院微生物与免疫教研室广东广州510632 佛山市第四人民医院检验科广东佛山528000 深圳市宝安区慢性病防治院结核病防治科广东深圳518101 东莞市慢性病防治院检验科广东东莞523008

目的对目前临床上用于检测结核分枝杆菌(MTB)及其耐药性的传统及分子生物学方法进行系统评价,为设计合理的诊断路径提供指导意义。方法对标准菌株(H37Rv)、敏感、单耐及耐多药MTB进行梯度浓度稀释后,作为评估的实验样本,从检测结果的准... 详细信息

目的对目前临床上用于检测结核分枝杆菌(MTB)及其耐药性的传统及分子生物学方法进行系统评价,为设计合理的诊断路径提供指导意义。方法对标准菌株(H37Rv)、敏感、单耐及耐多药MTB进行梯度浓度稀释后,作为评估的实验样本,从检测结果的准确性、检测周期、最低检出限方面对不同方法进行评价。结果MTB检测方面,XpertMTB/RIF检测MTB的检出下限(3×10~2cfu)与培养法相当,比基因芯片和GenoType~ MTBDRplus的检出下限低;耐药性检测方面,在MTB含量不足(≤3×10~2cfu)的情况下XpertMTB/RIF对利福平(RFP)的检测存在假阳性结果,GenoType~ MTBDRplus检测3×10~4cfu链霉素耐药MTB时出现RFP和异烟肼(INH)耐药的假阳性结果;检测周期方面,XpertMTB/RIF在2 h内可完成报告,基因芯片和GenoType~ MTBDRplus在当天8 h内可完成报告,培养及比例法药敏需4~8周可报告结果。结论目前不同的MTB及耐药检测方法各有优缺点,在临床应用方面应综合考虑患者的病情、经济状况等选取合理的诊断路径。

关键词：结核分枝杆菌罗氏培养法基因芯片 XpertMTB/RIF GenoType MTBDRplus

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间充质干细胞对系统性红斑狼疮T淋巴细胞的免疫调节作用

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免疫学杂志 2016年第8期32卷 681-686页

作者：罗利梅骆辑周晓泉蒋红梅陈琨安宇匡颖骆姝琳聂瑛洁刘泽星贵州省遵义市第一人民医院检验科 563002 贵州大学药学院贵阳550002 贵州省血液中心办公室贵阳550002 贵州医科大学检验系临床微生物学和免疫学教研室贵阳550000 贵州省人民医院中心实验室贵阳550000 贵州省人民医院中国际交流合作部贵阳550000 香港大学医学院内科 008000

目的研究正常健康捐献者骨髓来源的间充质干细胞(MSC)对系统性红斑狼疮(SLE)患者来源的T淋巴细胞的免疫调节作用。方法共培养MSC与正常对照或SLE患者来源的T淋巴细胞,检测MSC对T细胞的作用,包含T细胞增殖能力,细胞表型及其产生的细胞因... 详细信息

目的研究正常健康捐献者骨髓来源的间充质干细胞(MSC)对系统性红斑狼疮(SLE)患者来源的T淋巴细胞的免疫调节作用。方法共培养MSC与正常对照或SLE患者来源的T淋巴细胞,检测MSC对T细胞的作用,包含T细胞增殖能力,细胞表型及其产生的细胞因子等。实验分为健康对照组(C组)与SLE组(S组)。每一大组又分为T细胞组(C1组、S1组)、T细胞+植物血凝素组(C2组、S2组)、T细胞+植物血凝素+MSC组(C3组、S3组)。结果 MSC能抑制SLE患者来源的T淋巴细胞增殖[S2:(2 615.7±582.3)cpm;S3:(784.7±417.5)cpm;P<0.05],促使SLE T细胞向调节性CD4+CD25+Foxp3+T细胞转化增加(S2:11.85%±1.99%;S3:24.17%±5.82%,P<0.05)。MSC还能促使SLE T细胞分泌IFN-γ[S2:(14.13±11.16)pg/ml;S3:(39.68±26.73)pg/ml,P<0.05]与IL-10[S2:(5.09±2.96)pg/ml;S3:(17.15±3.61)pg/ml,P<0.05]。结论 MSC能抑制SLE患者来源的T细胞增殖,促进T细胞向调节性T细胞转化,诱导免疫耐受,有望成为治疗SLE的细胞疗法。

关键词：自身免疫性疾病系统性红斑狼疮间充质干细胞调节性T细胞

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水飞蓟宾通过上调 P15INK4B 和 P21WAF1／CIP1活化 JNK 诱导人胰腺癌细胞 G1期阻滞及细胞凋亡

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2015年第1期36卷 21-28页

作者：王莉张晓凯张鹏王娟娟吴志慧林晨蒋建伟广州市番禺区中心医院检验科广东广州511400 南阳市第一人民医院普外科河南南阳473000 暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632 暨南大学医学院微生物与免疫学教研室广东广州510632

目的:探讨水飞蓟宾对胰腺癌As PC-1细胞的增殖抑制作用及其作用机制.方法:MTT法和克隆形成抑制实验观察水飞蓟宾对人胰腺癌As PC-1细胞的增殖抑制作用,碘化丙锭(PI)单染色检测细胞周期改变,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋... 详细信息

目的:探讨水飞蓟宾对胰腺癌As PC-1细胞的增殖抑制作用及其作用机制.方法:MTT法和克隆形成抑制实验观察水飞蓟宾对人胰腺癌As PC-1细胞的增殖抑制作用,碘化丙锭(PI)单染色检测细胞周期改变,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡水平,Western blotting检测细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达.结果:不同浓度的水飞蓟宾对胰腺癌As PC-1细胞的生长均有抑制作用,且呈剂量-效应和时间-效应关系(P<0.05),水飞蓟宾作用于As PC-1细胞48、72 h的IC50浓度分别为224.20、87.25μmol/L;克隆形成抑制实验显示,随着水飞蓟宾浓度增加,As PC-1细胞克隆形成逐渐减少.细胞周期检测结果显示,随着水飞蓟宾浓度的增加,胰腺癌As PC-1细胞出现明显G1期阻滞;水飞蓟宾处理组细胞的周期蛋白Cyclin D1、Cyclin E2、Cyclin A、Cyclin B1表达下降,细胞周期蛋白激酶CDK4、CDK6表达不变,细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制蛋白P15INK4B、P21WAF1/CIP1表达升高,与流式检测的结果相一致.不同浓度水飞蓟宾作用48 h后,出现明显的凋亡细胞群;同时发现Caspase-9、Caspase-3活化降解,Caspase3下游效应蛋白PARP出现切割条带.JNK蛋白表达增加并磷酸化活化,Bcl-2蛋白家族中抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-x L、Mcl-1表达明显降低,促凋亡蛋白Bax表达基本不变,BH3-only蛋白Bclxs、Bid、Bim表达增加.结论:水飞蓟宾明显抑制胰腺癌细胞增殖,通过诱导P15INK4B、P21WAF1/CIP1表达阻滞细胞周期在G1期,并通过诱导JNK活化激活线粒体细胞凋亡途径,进而诱导胰腺癌As PC-1细胞凋亡.

关键词：水飞蓟宾胰腺癌 AsPC -1 细胞细胞周期凋亡

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肺结核患者体内结核病相关免疫细胞因子的动态变化

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中华结核和呼吸杂志 2015年第8期38卷 584-588页

作者：余美玲郭卉欣王云霞王威黄文焰李海成周忠敬黎贞燕余丽黄新春钟广智李国周陈涛赵梅桂钟球周琳广州市黄埔区中医医院检验科 510700 广东省结核病控制中心参比实验室深圳宝市安区慢性病防治院结核病防治科佛山市第四人民医院检验科暨南大学医学院微生物与免疫教研室华南理工大学轻工食品学院东莞市慢性病防治院检验科

目的研究肺结核患者体内结核病相关细胞因子的动态变化.方法从广州市黄埔区、深圳市宝安区、佛山市及东莞市结核病防治机构选取活动性结核病患者68例,男36例,女32例,年龄19～ 50岁,平均（30 ±9）岁.肺结核患者按门诊顺序纳入,采... 详细信息

目的研究肺结核患者体内结核病相关细胞因子的动态变化.方法从广州市黄埔区、深圳市宝安区、佛山市及东莞市结核病防治机构选取活动性结核病患者68例,男36例,女32例,年龄19～ 50岁,平均（30 ±9）岁.肺结核患者按门诊顺序纳入,采用我国抗结核标准化疗方案治疗,并根据疗程结束后病情转归情况分为完成治疗组（治愈或者临床治愈）38例,男17例,女21例,平均29岁和未完成治疗组（治疗失败或需延长治疗）30例,男19例,女11例,平均32岁.采集入院时、治疗后2个月末及6个月末的外周血清,采用ELISA方法检测血清中γ-干扰素（IFN-γ）、IL-4、IL-17、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β（TGF-β）及IL-10等细胞因子的含量,采用SPSS20.0统计软件,多组间均数比较采用配对t检验分析.结果所有纳入病例的IFN-γ在入院时、2个月末及6个月末的平均含量分别为23.2、22.2和22.3 ng/L;TGF-β的含量分别为169.1、142.3和123.2 ng/L;IL-4的含量分别为65.0、28.7和31.9 ng/L,3种细胞因子水平随疗程的延长而显著降低（t=2.67,2.35及3.41,均P＜0.05）;6个月末时,完成治疗组IL-10显著升高,达12.9 ng/L,未完成治疗组显著降低（P＜0.05）;完成治疗组的IL-4水平降低（5.4 ng/L,P＜0.05）,而未完成治疗组无变化;完成治疗组Th1/Th2（IFN--γ/IL-4）入院时为0.70,2个月末为1.21,6个月末为1.34（t=6.32,6.03和5.85,均P＜0.05）,而未完成治疗组分别为0.64和0.75（t =3.7,P＜0.05）,完成治疗组2个月末和6个月末的Th1/Th2比值显著高于未完成治疗组（t=7.11,P＜0.05）.结论 IFN-γ及TGF-β等Th1型细胞因子或Th1/Th2降低可能是影响患者预后的因素之一,可能对患者的预后产生不良影响.

关键词：分枝杆菌,结核细胞因子类动态变化

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汉族类风湿关节炎患者CD4+T细胞的全基因组DNA甲基化

汉族类风湿关节炎患者CD4+T细胞的全基因组DNA甲基化

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中华医学会第二十一次全国风湿病学学术会议

作者：何东仪陈广洁郭士成姜婷汪荣盛沈逸朱晓王岩白凤敏丁琴海亚美周晓东中国上海长宁区光华中西医结合医院风湿免疫科200052 中国上海中医药研究所关节炎中西医结合研究所上海200052 中国上海交通大学医学院微生物学与免疫学教研室200025 上海复旦大学江湾校区生命科学学院遗传学协同创新中心遗传工程和现代人类学教育部重点实验室 200438 中国上海长宁区光华中西医结合医院风湿免疫科200052 中国东莞广东医科大学东莞科学研究中心广东省医学分子诊断重点实验室523808 美国TX 77030 休斯顿MSB5.2706431 Fannin德克萨斯大学医学院

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结核抗原诱导的人外周血细胞因子调控网络在结核病诊断中的价值

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中国防痨杂志 2015年第8期37卷 827-835页

作者：陈涛陈亮李海成郭卉欣林东子王威李玉美余丽黎贞燕孙琦黄新春李国周周杰赵梅桂钟球周琳广东省结核病控制中心广州510630 深圳市宝市安区慢性病防治院结核病防治科佛山市第四人民医院检验科暨南大学医学院微生物与免疫教研室华南理工大学轻工食品学院东莞市慢性病防治院检验科

目的γ-干扰素（IFN-γ）释放试验（IGRA）是目前广泛运用的结核病筛查和诊断技术，但其无法区分活动性结核病和潜伏性结核感染（LTBI）。本研究旨在发现更加合适的血清标志物（细胞因子）可以替换IGRA，用于活动性结核病的诊断和LTBI... 详细信息

目的γ-干扰素（IFN-γ）释放试验（IGRA）是目前广泛运用的结核病筛查和诊断技术，但其无法区分活动性结核病和潜伏性结核感染（LTBI）。本研究旨在发现更加合适的血清标志物（细胞因子）可以替换IGRA，用于活动性结核病的诊断和LTBI者的筛查，以及这些细胞因子之间的相互调控网络关系。方法40份健康人（简称“健康组”）血液样本，40份确诊为活动性肺结核患者（简称“肺结核组”）的血液样本，40份LTBI者（简称“LTBI组”）的血液样本；通过结核分枝杆菌特异性抗原[早期分泌抗原靶6（ESAT6）和培养滤液蛋白10（CFP10）]进行刺激；通过人细胞因子芯片对刺激后的细胞因子表达变化进行检测；并筛选显著变化的因子，进行细胞因子调控网络构建。结果在肺结核组患者的外周血中嗜酸粒细胞趋化蛋白（CCI。）1（I-309）、趋化因子CXCLgE又称为Mig，即monokineinducedbyIFN-7（IFN-7诱导的单核因子）]、白细胞介素（IL）10、IL6、集落刺激因子（CSF）2、CSF3、IL8、IL1α、IL7、转化生长因子（TGF）-β1、CCL2、IL2、IL13、肿瘤坏死因子（TNF）α等因子在结核特异性抗原刺激后显著上调（2．06倍至3．18倍）；而在健康组和LTBI组当中却没有显著上调。在肺结核组和LTBI组患者的外周血中CCL3、IL1b、CCL8、IFN-γ、CXCL10因子在结核分枝杆菌特异性抗原刺激后明显上调（2．44倍至11．56倍）；而在健康组中这些因子没有明显的上调。趋化因子CCL4和巨噬细胞炎性蛋白（MIP）-1α因子在健康组、LTBI组和肺结核组外周血中，经过结核分枝杆菌特异性抗原刺激后，表达都明显上调。细胞因子调控网络显示，这些表达上调的因子，主要集中于IFNγ和IL1α因子调控网络中。结论CXCL10（IP10）、CCL3、CCL8和ILII？因子可能比IFNγ更适合用于结核病或LTBI者的筛查。

关键词：结核肺/诊断细胞因子类抗原细菌细菌蛋白质类生物学标记

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