检索结果-内蒙古大学图书馆

暨南大学学报（自然科学与医学版） 2005年第4期26卷 495-501页

作者：李君武江静许小亮暨南大学医学院微生物免疫学教研室广东广州510632

目的:进行丙型肝炎病毒非结构蛋白3基因真核表达载体的构建,并分析其在体外培养的人肝细胞中的表达。方法:从含有丙肝病毒全长基因的重组质粒pBRTM/HCV1-3011表达载体中PCR扩增出HCV NS3基因片段,将其与表达载体pcDNA3.1(-)重组,得到重... 详细信息

目的:进行丙型肝炎病毒非结构蛋白3基因真核表达载体的构建,并分析其在体外培养的人肝细胞中的表达。方法:从含有丙肝病毒全长基因的重组质粒pBRTM/HCV1-3011表达载体中PCR扩增出HCV NS3基因片段,将其与表达载体pcDNA3.1(-)重组,得到重组的真核表达载体pcDNA3.1(-)/NS3。然后采用阳离子多聚体将其转染人肝细胞QSG7701,以免疫组织化学SP法及Western Blotting检测HCV NS3蛋白的表达。结果:所得到的NS3片段正确,序列正确,所构建的真核质粒成功转染QSG7701细胞并表达蛋白,表达的NS3蛋白相对分子质量为70 000。结论:成功构建了丙型肝炎病毒非结构蛋白3基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)/NS3,并且该载体在体外培养的人肝细胞中能有效表达特异性HCV NS3蛋白。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白3 蛋白表达

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NOD/SCID小鼠抗原对脐血T细胞上TCRVβ亚家族基因克隆性的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第8期23卷 772-773,777页

作者：林晨白雪谭玉波杨力健陈少华李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632

目的:了解脐血单个核细胞(MNC)体外与NOD/SCID小鼠抗原共培养后,TCRVβ亚家族T细胞分布和克隆性增殖的特点。方法:将NOD/SCID小鼠外周血MNC、骨髓、胸腺及脾细胞反复冻融3次制成可溶性抗原,分别与Ficoll-Hypaque法分离的脐血MNC共培养。... 详细信息

目的:了解脐血单个核细胞(MNC)体外与NOD/SCID小鼠抗原共培养后,TCRVβ亚家族T细胞分布和克隆性增殖的特点。方法:将NOD/SCID小鼠外周血MNC、骨髓、胸腺及脾细胞反复冻融3次制成可溶性抗原,分别与Ficoll-Hypaque法分离的脐血MNC共培养。第15天和第20天,分别收集细胞提取RNA,用RT-PCR扩增人TCRVβ亚家族基因,并用基因扫描进行T细胞克隆性分析。结果:扩增前脐血T细胞表达大部分Vβ亚家族,经NOD/SCID小鼠抗原诱导后,TCRVβ亚家族T细胞呈限制性表达,某些Vβ亚家族基因(Vβ10、11)呈寡克隆性增殖,而某些Vβ亚家族基因(Vβ2、15、16、19)呈寡克隆表达的趋势。结论:NOD/SCID小鼠抗原可刺激脐血T细胞选择性增殖,提示在建立人源化NOD/SCID小鼠免疫模型时应考虑所存在的GVHR问题。

关键词：脐血 NOD/SCID小鼠 T细胞TCRVβ基因

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癫痫患者免疫状态的探讨

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中国病理生理杂志 1994年第5期10卷 493-497页

作者：李君武韦静赖祥青李鸿智广州暨南大学医学院微生物免疫学教研室暨南大学医学院神经内科学教研室

本文观察了７０例癫痫（ＥＰ）患者的免疫状态，首次检测了Ｂ淋巴细胞亚群，ｓＩＬ－２Ｒ及ＴＮＦ，对各项免疫学指标进行了对比研究，发现ＩｇＡ，ＩｇＭ含量明显降低，ＣＩＣ含量明显增高（Ｐ＜０．０１），Ｃ＿３明显降低（Ｐ＜０．... 详细信息

本文观察了７０例癫痫（ＥＰ）患者的免疫状态，首次检测了Ｂ淋巴细胞亚群，ｓＩＬ－２Ｒ及ＴＮＦ，对各项免疫学指标进行了对比研究，发现ＩｇＡ，ＩｇＭ含量明显降低，ＣＩＣ含量明显增高（Ｐ＜０．０１），Ｃ＿３明显降低（Ｐ＜０．０５），显示患者体液免疫功能低下；淋巴细胞亚群测定发现ＣＤ＿３￣＋，ＣＤ＿４￣＋明显降低，ＣＤ＿８￣＋明显增高，ＣＤ＿４￣＋／ＣＤ＿８￣＋比值明显低于对照组（Ｐ＜０．０１），表明细胞免疫功能低下，在Ｂ细胞亚群检测中发现ＣＤ＿（１０）￣＋，ＤＲ￣＋明显增高，ＣＤ＿（２０）￣＋明显降低（Ｐ＜０．０１），提示体液免疫功能低下与成熟Ｂ细胞免疫功能低下密切相关；同时血清中ｓＩＬ－２Ｒ水平明显增高（Ｐ＜０．０１）进一步表明ＥＰ患者的免疫功能受到抑制；ＴＮＦ水平与对照组相比差异无显著性（Ｐ＞０．０５），本资料表明，ＥＰ患者的免疫功能低下与不同发作类型，病史长短及服用抗癫痫药物与否无明显的相关（Ｐ＞０．０５），提示ＥＰ患者免疫功能的低下可能存在某些内在因素，而不是受临床表现和抗ＥＰ药物的影响，提示ＥＰ患者免疫调节网络处于失衡状态。

关键词：癫痫免疫肿瘤坏死因子

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玉米特异启动子驱动下结核hsp65基因植物表达载体构建及鉴定

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玉米科学 2009年第5期17卷 14-18页

作者：李君武黄清华王珊刘艳黄泽棋宋东暨南大学医学院微生物免疫学教研室广州510632

以本实验室构建的pEGHLE为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65基因,连接到含有玉米特异性启动子globulin-1的pCR2.1载体上;将globulin1-Hsp65联合片断切下连到含有抗除草剂基因bar的pCAMBIA1300载体中;电击法将重组质粒转化到农杆菌LBA... 详细信息

以本实验室构建的pEGHLE为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65基因,连接到含有玉米特异性启动子globulin-1的pCR2.1载体上;将globulin1-Hsp65联合片断切下连到含有抗除草剂基因bar的pCAMBIA1300载体中;电击法将重组质粒转化到农杆菌LBA4404中。结果表明:成功构建了pC1300GHsp65质粒,酶切鉴定得到3Kb和8.6Kb两条带,测序分析表明,克隆的Hsp65与NCBI上公布序列一致;成功转化到农杆菌中,酶切从农杆菌中所提的质粒条带大小与预期结果相符合。结果显示,已成功构建和转化了pC1300GHsp65质粒,为成功研制利用转基因植物生产抗结核口服疫苗奠定了基础。

关键词：玉米特异启动子基因表达载体构建

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脑不对称性对Balb/c小鼠海马IL-6水平的影响

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动物学报 2004年第5期50卷 765-769页

作者：罗燕玲李康生汕头大学医学院微生物学及免疫学教研室广东汕头515031

研究了Balb/c小鼠海马内细胞因子白细胞介素 6 (interleukin 6 ,IL 6 )含量与脑不对称的关系。实验采用伸爪取食法将小鼠区分为左利、右利和双利鼠 ,分别于腹腔注射细菌脂多糖 (Lipopolysaccharide,LPS)或无菌生理盐水 (Saline ,NS) ,2... 详细信息

研究了Balb/c小鼠海马内细胞因子白细胞介素 6 (interleukin 6 ,IL 6 )含量与脑不对称的关系。实验采用伸爪取食法将小鼠区分为左利、右利和双利鼠 ,分别于腹腔注射细菌脂多糖 (Lipopolysaccharide,LPS)或无菌生理盐水 (Saline ,NS) ,2h后快速断头 ,冰上快速分离两侧海马 ,制备海马脑组织匀浆 ,用ELISA法测定海马中IL 6蛋白含量。结果表明 :正常对照组中海马IL 6水平为右利鼠明显高于左利鼠 (P =0 0 0 1) ,左利鼠又明显高于双利鼠 (P =0 0 0 1) ,两侧海马之间无明显差别 ;注射LPS 2h后 ,海马IL 6总体水平没有变化 ,只在右利小鼠右侧海马IL 6含量明显升高 (P <0 0 5 ) ,明显高于左利 (P <0 0 0 1)和双利 (P <0 0 0 1) ,双利Balb/c小鼠两侧海马IL 6水平明显低于右利和左利小鼠。上述结果提示 ,在正常生理状态下及LPS刺激后引起的海马IL

关键词：海马 IL-6 LPS Balb/c小鼠正常脑不对称性含量动物学取食快速分离

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甲基-苯基四氢吡啶对脑不对称小鼠纹状体内多巴胺和白介素含量的影响

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生物化学与生物物理进展 2005年第1期32卷 53-59页

作者：申延琴李康生 E.MOZE P.J.NEVEU 汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室 Neurobiologie Intégrative CNRS FRE2723 Institut Francois Magendie Rue Camille Saint-Saêns 33077 Bordeaux Cedex France

为探讨甲基-苯基四氢吡啶(MPTP) 注射后脑不对称小鼠纹状体内多巴胺降低程度,及纹状体内细胞因子水平变化,C57BL/6J小鼠经过伸爪取食试验,筛选为反映脑不对称的左利鼠和右利鼠,并接受25 mg/kg MPTP腹腔注射连续5天,检测注射后的第1天,第... 详细信息

为探讨甲基-苯基四氢吡啶(MPTP) 注射后脑不对称小鼠纹状体内多巴胺降低程度,及纹状体内细胞因子水平变化,C57BL/6J小鼠经过伸爪取食试验,筛选为反映脑不对称的左利鼠和右利鼠,并接受25 mg/kg MPTP腹腔注射连续5天,检测注射后的第1天,第3天和第14天纹状体内多巴胺及代谢物含量和细胞因子IL-1茁、IL-6的动态水平. 结果表明,无论在左利鼠还是右利鼠,纹状体内多巴胺含量在MPTP注射后每个检测时间点都显著降低,纹状体内IL-1茁水平在第1天显著降低,纹状体内IL-6水平在MPTP注射后每个检测时间点也显著降低. 实验结果同时表明,左利鼠和右利鼠IL-1茁和IL-6的基础水平有显著不同. MPTP注射后,与右利小鼠相比,左利小鼠有较高的多巴胺翻转降低和较低的细胞因子表达,而且,纹状体内多巴胺水平与纹状体内IL-6水平呈正相关. 这些结果提示,MPTP诱导多巴胺丢失伴随着黑质纹状体系统内细胞因子水平的改变,而且,脑不对称有可能通过影响纹状体内细胞因子水平而进一步影响MPTP诱导的多巴胺降低的程度.

关键词：甲基-苯基四氢吡啶多巴胺纹状体白介素6(IL-6) 白介素1(IL-1) 脑不对称

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肾素-血管紧张素系统基因多态性与原发性高血压的相关性研究现状

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广东医学 2005年第9期26卷 1301-1302页

作者：王志鹏林绍强暨南大学医学院微生物免疫学教研室广州510632

原发性高血压（essential hypertension，EH）是一种与环境因素相互作用的多基因遗传病，遗传因素在EH发病中所起的作用占到30％．50％。肾素-血管紧张素系统（reninangiotensin system，RAS）是调节血压和血容量的激素系统，也是一个... 详细信息

原发性高血压（essential hypertension，EH）是一种与环境因素相互作用的多基因遗传病，遗传因素在EH发病中所起的作用占到30％．50％。肾素-血管紧张素系统（reninangiotensin system，RAS）是调节血压和血容量的激素系统，也是一个复杂的血压调节反馈系统，在EH发生、发展中起重要作用；其编码基因是EH候选易感基因之一，研究最为广泛。各国学者通过比较EH人群和正常血压人群RAS基因状态差异，发现个体间可因携带的RAS等位基因不一致而对EH易感程度不同。本文就其研究现状综述如下。[第一段]

关键词：肾素-血管紧张素系统基因多态性原发性高血压基因频率氨基酸

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丙型肝炎病毒NS3蛋白生物学功能研究进展

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广东医学 2005年第7期26卷 1006-1007页

作者：王志鹏暨南大学医学院微生物与免疫学教研室广州510632

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)是一种严重威胁人类生命健康的微生物，持续感染可导致慢性丙型肝炎，并可发展为肝硬化和肝细胞癌。HCV非结构蛋白NS3在HCV复制和宿主细胞负面调控中发挥重要作用。因其具有的生物学功能，已成为HC... 详细信息

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)是一种严重威胁人类生命健康的微生物，持续感染可导致慢性丙型肝炎，并可发展为肝硬化和肝细胞癌。HCV非结构蛋白NS3在HCV复制和宿主细胞负面调控中发挥重要作用。因其具有的生物学功能，已成为HCV研究热点。本文就。NS3主要生物学功能研究进展综述如下。

关键词：丙型肝炎病毒功能研究进展 NS3蛋白非结构蛋白NS3 慢性丙型肝炎 HCV复制生物学功能生命健康持续感染肝细胞癌宿主细胞研究热点进展综述微生物肝硬化

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Toll样受体在免疫学方面的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2002年第6期18卷 670-672页

作者：章晓联潘勤武汉大学医学院微生物学及免疫学教研室湖北武汉430071

天然免疫分子Ｔｏｌｌ样受体 (Ｔｏｌｌｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒｓ,ＴＬＲ) ,是一个广泛存在于昆虫、脊椎动物和植物中序列高度保守而古老的家族。目前 ,已克隆的人类的ＴＬＲ成员有 10个 (即ＴＬＲ1～ 10 ) ,它们在天然免疫中可发挥... 详细信息

天然免疫分子Ｔｏｌｌ样受体 (Ｔｏｌｌｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒｓ,ＴＬＲ) ,是一个广泛存在于昆虫、脊椎动物和植物中序列高度保守而古老的家族。目前 ,已克隆的人类的ＴＬＲ成员有 10个 (即ＴＬＲ1～ 10 ) ,它们在天然免疫中可发挥重要的抗感染免疫功能 ,并与免疫耐受、特异性抗感染免疫 ,以及一些疾病具有相关性。本综述介绍了有关它们在配体的识别、信号传导、免疫学方面的研究进展。1　ＴＬＲ家族的成员、组织分布及结构特点1997年 ,第一个与果蝇Ｔｏｌｌ蛋白同源的人ＴＬＲ(ＴＬＲ4 )首次得到证实。迄今 ,在人类已发现 10种ＴＬＲ(即ｈＴＬＲ1～ 10 )。这些Ｔｏｌｌ样蛋白代表了一类保守

关键词：研究进展 Toll样受体天然免疫细菌抗感染免疫

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结核分枝杆菌融合基因Hsp65-Esat6荧光表达载体的构建及表达(英文)

引用

中国组织工程研究与临床康复 2007年第29期11卷 5836-5839页

作者：李君武黄泽棋姚翠婵周曙光李晓栋宋东黄清华暨南大学医学院微生物免疫学教研室广东省广州市510632

背景:Hsp65和Esat6之间的Linker编码一段疏水性多肽,其具有良好的柔顺性和折叠性,有利于翻译成融合蛋白时融合蛋白之间的空间折叠,使融合蛋白保持与两个天然蛋白空间构象的一致性,从而形成正确的构型而提高它们的免疫原性。目的:从结核... 详细信息

背景:Hsp65和Esat6之间的Linker编码一段疏水性多肽,其具有良好的柔顺性和折叠性,有利于翻译成融合蛋白时融合蛋白之间的空间折叠,使融合蛋白保持与两个天然蛋白空间构象的一致性,从而形成正确的构型而提高它们的免疫原性。目的:从结核分枝杆菌(MTB)H37Rv株中克隆目的融合基因Hsp65-Esat6,与报告基因EGFP一起构建真核表达载体pEGHsp65-Esat6,通过免疫组织化学法分别检测细胞中Hsp65蛋白和ESAT-6蛋白的表达。设计:单一样本实验。单位:暨南大学医学院微生物免疫学教研室。材料:质粒pVAE由华南理工大学曹以诚教授惠赠,MTBH37Rv株、大肠杆菌DH5α、表达质粒pEGFP-C1为本实验室保存,Hela细胞由本教研室胡萍博士惠赠。方法:实验于2005-09/2006-06在暨南大学医学院微生物与免疫教研室和中心实验室完成。以MTB全基因组为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65基因(不含终止子),与pEGFP-C1载体进行重组,构建pEGHsp65(不含终止子)重组质粒。再以pVAE质粒为模板,经PCR扩增出Linker-Esat6基因,与pEGHsp65质粒(不含终止子)进行重组,构建真核表达载体pEGHsp65-Esat6。通过限制性内切酶图谱测定pEGHsp65-Esat6融合质粒大小;对质粒pEGFP-C1的多克隆位点内的DNA序列进行序列分析鉴定;将质粒转染Hela细胞,观察荧光的表达情况及转染效率,通过免疫组织化学法分别检测细胞中Hsp65蛋白和ESAT-6蛋白的表达。主要观察指标:①pEGHsp65-Esat6融合质粒大小。②pEGFP-C1DNA序列分析。③转染后Hela细胞的荧光表达情况。④细胞中Hsp65蛋白和ESAT-6蛋白的免疫组织化学结果。结果:①质粒pEGFP-C1的大小约为4.7kb,而pEGHsp65为6.4kb,融合质粒pEGHsp65-Esat6约为6.7kb,在琼脂糖凝胶电泳图上可以分辨出泳动速度的差异。②结果与结核分支杆菌H37Rv株的Hsp65和Esat6的基因序列完全相同。③转染融合质粒24h后,使用共聚焦显微镜可观察到有部分细胞表达荧光蛋白,说明融合质粒转染成功,转染率约为30%。未转染的Hela细胞则无荧光表达。④通过免疫组织化学法证实融合质粒在Hela细胞内能正确表达出具有生物学活性的Hsp65与ESAT-6蛋白。结论:采用Hsp65和Esat6搭配作为免疫原,成功克隆并构建了结核分枝杆菌融合基因Hsp65-Esat6荧光真核表达质粒。

关键词：结核分枝杆菌 Hsp65 Esat6 融合基因 DNA疫苗

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