检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2005年第13期27卷 1415-1417页

作者：谭玉波林晨李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632

多年来研究者致力于在联合免疫缺陷小鼠(severe combined immunodeficiency mice，SCID mice)体内重建有功能的人免疫系统，期以解决动物模型难以确切反映人体免疫系统的特点和研究人体免疫应答受限于体外实验的难题1988年Mosier等将人... 详细信息

多年来研究者致力于在联合免疫缺陷小鼠(severe combined immunodeficiency mice，SCID mice)体内重建有功能的人免疫系统，期以解决动物模型难以确切反映人体免疫系统的特点和研究人体免疫应答受限于体外实验的难题1988年Mosier等将人外周血淋巴细胞移植入C.B—17 SCID小鼠首次建立了人源化的SCID鼠模型。人类造血干／祖细胞移植给联合免疫缺陷鼠后可在其体内多系分化、增殖。

关键词：免疫缺陷鼠再植免疫重建

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《医学微生物学图鉴》多媒体CAI课件的设计与应用

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微生物学通报 2004年第4期31卷 122-124页

作者：江振友暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632

计算机辅助教学 (CAI)是现代化教育技术的重要组成部分。我们利用多媒体形象、多样化表达及交互性强的特点 ,将文本、声音、图片、动画、录像等有机结合在一起 ,设计制作了卫生部CAI课件《医学微生物学图鉴》。教学实践表明 :本课件在... 详细信息

计算机辅助教学 (CAI)是现代化教育技术的重要组成部分。我们利用多媒体形象、多样化表达及交互性强的特点 ,将文本、声音、图片、动画、录像等有机结合在一起 ,设计制作了卫生部CAI课件《医学微生物学图鉴》。教学实践表明 :本课件在教学中的应用提高了微生物学的教学质量 ,促进教学的整体改革 ,优化教学过程 ,取得较好的教学效果。

关键词： CAI 微生物学图鉴医学

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肾综合征出血热病毒对人血管内皮细胞感染性的研究

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中国人兽共患病杂志 2003年第3期19卷 59-62,88页

作者：江振友温筱芸林晨韦静暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632

目的　研究肾综合征出血热 (HFRS)病毒在血管内皮细胞 (HEC)内的增殖 ,及病毒对HEC产生几种细胞因子的影响。方法　采用微量免疫酶斑法检测HFRS病毒A6 9株感染HEC后病毒繁殖动态变化 ,间接免疫荧光法检测HEC内HFRS病毒抗原。ELISA法检测... 详细信息

目的　研究肾综合征出血热 (HFRS)病毒在血管内皮细胞 (HEC)内的增殖 ,及病毒对HEC产生几种细胞因子的影响。方法　采用微量免疫酶斑法检测HFRS病毒A6 9株感染HEC后病毒繁殖动态变化 ,间接免疫荧光法检测HEC内HFRS病毒抗原。ELISA法检测HFRS病毒感染上清液中TNF -α、IL - 6和IFN - β的含量。结果　病毒感染后 1d即可在培养上清中用微量免疫酶斑法测出病毒 ,病毒滴度 5d达高峰 ,以后下降。在一定范围内病毒产量随病毒感染复数 (multiplicityofinfection ,M0I)的增加而增高。间接免疫荧光法证明感染的HEC胞浆及胞膜上携带肾综合征出血热病毒抗原。电镜和光镜下 ,感染细胞未见明显的形态和结构改变。病毒对HEC产生TNF -α无影响 ;产生IL - 6和IFN - β明显增高。结论　HFRS病毒可在原始靶细胞HEC内增殖。HFRS病毒感染后所出现的微血管损害可能不是病毒直接损害所致 ,而很可能与间接因素有关。

关键词：肾综合征出血热病毒人血管内皮细胞感染性研究微量免疫酶斑法

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小鼠血浆TNF-α、NO、NOS水平与脑不对称的关系

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生理学报 2002年第6期54卷 513-518页

作者：付清玲李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室汕头515031

研究脑不对称对单核巨噬细胞 (Mo/MФ)的影响。选用雌性 4周龄Balb/c健康小鼠 ,用伸爪取食法根据右利分将小鼠区分为左利、右利和双利三组。细菌脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)腹腔注射两小时后取血浆检测肿瘤坏死因子 α(TNF α)... 详细信息

研究脑不对称对单核巨噬细胞 (Mo/MФ)的影响。选用雌性 4周龄Balb/c健康小鼠 ,用伸爪取食法根据右利分将小鼠区分为左利、右利和双利三组。细菌脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)腹腔注射两小时后取血浆检测肿瘤坏死因子 α(TNF α)、一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)水平。结果显示 :( 1)各组间血浆TNF α和NO、NOS水平的变化 :正常生理组NO水平为双利组高于左利组 (P <0 0 5 ) ;LPS刺激后双利组和右利组血浆TNF α水平高于左利组 (P <0 0 5 ) ,NO水平为双利组高于右利组 (P <0 0 1)和左利组 (P <0 0 5 ) ,NOS水平在三组小鼠间无明显差别。 ( 2 )血浆TNF α、NO、NOS与右利分有一定的相关关系 ,各项指标随右利分的变化趋势多为双利>右利和左利 ,形成一以双利分段 (右利分为 2 1～ 2 9)为高峰的弓形向上的曲线 ,随右利分的增加或减少曲线向两侧延伸和下降。上述结果提示 ,脑不对称小鼠单核 /巨噬细胞功能存在差异。脑不对称对免疫功能的影响程度与右利分有关。

关键词：小鼠血浆TNF-α NO NOS 脑不对称关系免疫调控肿瘤坏死因子α 一氧化氮一氧化氮合酶巨噬细胞

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HCMV pp150抗原基因在蚕豆中的遗传转化及鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第12期27卷 1150-1154页

作者：严华李国才焦红梅陈红菊扬州大学医学院微生物学和免疫学教研室 225001

目的研制人巨细胞病毒(HCMV)口服疫苗。方法根据HCMV基质磷蛋白PP150基因序列设计引物,PCR法从HCMV AD169株基因组DNA中扩增出编码PP150抗原决定簇区域的基因片段。将Kozak序列插入pp150基因的起始密码子的上游,3′端引入了内质网滞留信... 详细信息

目的研制人巨细胞病毒(HCMV)口服疫苗。方法根据HCMV基质磷蛋白PP150基因序列设计引物,PCR法从HCMV AD169株基因组DNA中扩增出编码PP150抗原决定簇区域的基因片段。将Kozak序列插入pp150基因的起始密码子的上游,3′端引入了内质网滞留信号KDEL序列,将修饰后的基因片段克隆进载体pBI121,构建了带潮霉素(Hyg)选择抗性基因的植物表达载体pCAM- BIA1300/pp150和根癌农杆菌工程菌EHA105;采用叶盘法转化蚕豆,获得了5株抗性植株,通过PCR、Southern blot和RNA dot blot分析鉴定,确认了3株为转基因植株。通过ELISA和Western blot对这3株的蛋白萃取物进行分析,以鉴定其免疫学活性。结果这3株转基因植株表达的PP150蛋白具有免疫原活性。结论这些转基因植株为HCMV口服疫苗的研究提供了条件。

关键词：人巨细胞病毒 pp150 口服疫苗转基因蚕豆

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第10期24卷 807-811页

作者：曾焱华吴移谋余敏君朱翠明曾铁兵刘安元南华大学医学院微生物学与免疫学教研室衡阳421001

目的　了解穿透支原体潜在的致病性和穿透支原体脂质相关膜蛋白诱导小鼠巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶 (iNOS)的分子机制。方法　用从穿透支原体提取的脂质相关膜蛋白刺激小鼠巨噬细胞 ,以RT PCR和Westernblot等方法分析诱导性一氧化... 详细信息

目的　了解穿透支原体潜在的致病性和穿透支原体脂质相关膜蛋白诱导小鼠巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶 (iNOS)的分子机制。方法　用从穿透支原体提取的脂质相关膜蛋白刺激小鼠巨噬细胞 ,以RT PCR和Westernblot等方法分析诱导性一氧化氮合酶的表达和NO的产生。用间接免疫荧光和Westernblot检测经穿透支原体脂质相关膜蛋白处理的小鼠巨噬细胞中NF κB的激活和NF κB抑制剂PDTC(吡咯啉烷二甲基硫脲 )对iNOS的表达和NO产生的影响。结果　穿透支原体脂质相关膜蛋白以时间和剂量依赖方式刺激小鼠巨噬细胞产生NO ,且能激活NF κB诱导巨噬细胞表达i NOS的mRNA和蛋白 ,其mRNA和蛋白的表达水平能被PDTC所抑制。结论　由于穿透支原体脂质相关膜蛋白能通过激活NF κB诱导巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶 ,因而可能是一个重要的致病因素。

关键词：巨噬细胞支原体脂质表达小鼠一氧化氮合酶膜蛋白 RNA 体脂 NF-κB

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应用抑制性消减杂交技术分析淋球菌染色体介导的耐药相关核苷酸序列

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第5期23卷 388-392页

作者：季明春陈红菊严华申厚凤扬州大学医学院微生物学及免疫学教研室 225001

目的　克隆耐药性淋病奈瑟球菌菌株与标准参考菌株之间的差异核苷酸序列。方法应用抑制性消减杂交技术构建耐药性淋球菌与标准参考菌株差异DNA消减文库。结果　成功地构建了高特异性的淋球菌耐药菌株DNA消减文库。经对消减文库初步筛选 ... 详细信息

目的　克隆耐药性淋病奈瑟球菌菌株与标准参考菌株之间的差异核苷酸序列。方法应用抑制性消减杂交技术构建耐药性淋球菌与标准参考菌株差异DNA消减文库。结果　成功地构建了高特异性的淋球菌耐药菌株DNA消减文库。经对消减文库初步筛选 ,对其中 5个克隆插入的DNA片段进行测序 ,经GenBank和淋球菌基因组序列库检索分析 ,证明 5个片段均为未知新序列。结论　淋球菌耐药性相关核苷酸序列的发现将为防治淋球菌感染和研究抗淋球菌抗生素提供新的实验工具。

关键词：淋球菌核苷酸序列耐药性抗生素抑制性消减杂交技术

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D3细胞的制备及其对几种病原体的敏感性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第4期26卷 343-347页

作者：严华李国才陈红菊龚卫娟季明春扬州大学医学院微生物学和免疫学教研室 225001

目的制备基因转染(D3)细胞并测定能引起先天性感染的几种病原体的敏感性。方法HEP-2细胞的DNA转染人胚肺细胞(HEL),得到基因转染细胞,命名为D3细胞。分析D3细胞的核型。研究丹参对D3细胞促增殖作用和丹参对病原体不同的促增殖作用。普... 详细信息

目的制备基因转染(D3)细胞并测定能引起先天性感染的几种病原体的敏感性。方法HEP-2细胞的DNA转染人胚肺细胞(HEL),得到基因转染细胞,命名为D3细胞。分析D3细胞的核型。研究丹参对D3细胞促增殖作用和丹参对病原体不同的促增殖作用。普通显微镜观察病原体感染D3细胞后的细胞病变。免疫荧光试验研究D3细胞对病原体的敏感性。电子显微镜观察由D3 细胞培养物纯化的病原体形态。在酶联免疫吸附试验(ELISA)中,分别纯化病原体制作抗原,检测 1196份孕妇血清特异性抗体(IgG、IgM)。结果传代5-100代的D3细胞的染色体数均是96。丹参 (SMB,100 μg／ml)对D3细胞和病原体有明显的促增殖作用。D3细胞感染病原体后72 h,均出现明显的细胞病变效应(CPE)和荧光阳性细胞。电镜下见到了病原体典型的形态。结论永生性的D3细胞可用于培养病原体,所培养的病原体可制备用于诊断的抗原。

关键词：先天性感染 DNA转染 HEL HEP-2 丹参

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人GM-CSF基因真核表达载体构建与表达

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中山大学学报（医学科学版） 2007年第5期28卷 590-593,597页

作者：卢燕茹江振友暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632

【目的】构建以基因佐剂hGM-CSF基因为基础的真核表达质粒pIGM-CSF,并在宫颈癌细胞HeLa中表达与鉴定。【方法】采用聚合酶链反应从载体pORF-hGM-CSF中,扩增出hGM-CSF基因,克隆到双顺反子真核表达载体pIRES的多克隆位点B(MCSB)中,构建pIG... 详细信息

【目的】构建以基因佐剂hGM-CSF基因为基础的真核表达质粒pIGM-CSF,并在宫颈癌细胞HeLa中表达与鉴定。【方法】采用聚合酶链反应从载体pORF-hGM-CSF中,扩增出hGM-CSF基因,克隆到双顺反子真核表达载体pIRES的多克隆位点B(MCSB)中,构建pIGM-CSF真核表达载体。然后采用脂质体转染法将其转染HeLa细胞,用RT-PCR在RNA水平和ELISA在蛋白水平检测其在真核细胞中的表达。【结果】所克隆hGM-CSF基因片段经测序完全正确;重组质粒转染Hela细胞后,检测有hGM-CSF表达。【结论】成功构建含基因佐剂真核表达载体pIGM-CSF,并在宫颈癌细胞中能有效表达,为继续克隆目的抗原从而构建双顺反子真核表达质粒奠定了基础。

关键词：真核表达载体 hGM-CSF 基因佐剂双顺反子

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ATP及其衍生物影响不死化人成纤维细胞增殖的实验研究

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中国病理生理杂志 2001年第2期17卷 150-153页

作者：李君武暨南大学医学院微生物学免疫学教研室广东广州510632

目的 :探讨ATP及其衍生物对不死化人成纤维细胞的增殖抑制作用 ,并通过P2 嘌呤能受体从而了解ATP发挥细胞毒性作用的途径。方法 :使用ATP及其衍生物ATP -Na2 ,ATP -Mg ,ADP ,MeATP ,BzATP ,ATPγS ,2 -MeSATP和UTP在不同条件培养KMST - ... 详细信息

目的 :探讨ATP及其衍生物对不死化人成纤维细胞的增殖抑制作用 ,并通过P2 嘌呤能受体从而了解ATP发挥细胞毒性作用的途径。方法 :使用ATP及其衍生物ATP -Na2 ,ATP -Mg ,ADP ,MeATP ,BzATP ,ATPγS ,2 -MeSATP和UTP在不同条件培养KMST - 6人不死化成纤维细胞 ,检测细胞增殖状况 ,Westernblot分析、流式细胞仪检测细胞增殖周期以及Hoechst 3 3 2 5 8特异性细胞染色和DNA电泳检测细胞凋亡。结果 :ATP及其衍生物对细胞增殖抑制作用的程度依次为 :ATP =ADP >ATPγS >MeATP =BzATP ;而 2 -MeSATP和UTP却未显示任何细胞毒性作用 ;0 4mmol/LATP培养 4 8h时P2 1表达未见增高 ,细胞增殖停止于G1/S期 ;1mmol/LATP培养 4 8h时未发现细胞凋亡。结论 :通过与P2X或P2Y嘌呤能受体相结合 ,ATP激活细胞内某些信号传导发挥细胞增殖的抑制作用 ;ATP引起增殖抑制不是通过细胞凋亡或者是周期素 /CDK激酶抑制剂P2 1所致。

关键词：腺苷三磷酸细胞受体嘌呤能

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