检索结果-内蒙古大学图书馆

纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会

作者：赵飞骏吴移谋湖南省衡阳市常胜西路28号南华大学医学院微生物学与免疫学教研室 421001

本研究是在首次完成Tp单基因DNA疫苗筛选构建及免疫活性初步研究工作的基础上，将具有显著免疫佐剂效应的IL-2基因插入己真核表达重组体pcDNA3.1(+)/Gpd中，融合构建多价DNA疫苗，用壳聚糖(CS)纳米颗粒包被后导入新西兰兔体内，利用CS... 详细信息

本研究是在首次完成Tp单基因DNA疫苗筛选构建及免疫活性初步研究工作的基础上，将具有显著免疫佐剂效应的IL-2基因插入己真核表达重组体pcDNA3.1(+)/Gpd中，融合构建多价DNA疫苗，用壳聚糖(CS)纳米颗粒包被后导入新西兰兔体内，利用CS纳米颗粒高效的基因转导能力及IL-2的佐剂效应诱导动物细胞表达免疫原性更强的融合蛋白，强化免疫应答;同时采用核酸疫苗初免、含CpG序列的寡脱氧核苷酸(CpG ODN)-Tp膜蛋白黏膜免疫加强的疫苗接种策略，以期全面激发机体免疫系统，尤其黏膜免疫，建立高效抗Tp感染的动物模型，为研制人用的高效疫苗预防梅毒打下基础。

关键词：梅毒螺旋体膜蛋白 DNA疫苗免疫机制

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重症肌无力患者胸腺组织抑制性消减cDNA文库的构建及分析

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郑州大学学报（医学版） 2012年第3期47卷 295-299页

作者：杨俊红崔新征方华关兵峰赵国强张清勇高峰河南中医学院第一附属医院脑病1区郑州450003 郑州大学第二附属医院胸外科郑州450014 郑州大学生物医学工程研究所郑州450014 郑州大学医药科学研究院免疫学研究室神经免疫实验室郑州450052 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001

目的:构建重症肌无力(MG)患者胸腺组织抑制性消减cDNA文库,分析MG胸腺差异表达基因。方法:分别从6例正常和6例MG患者胸腺组织中分离出mRNA,逆转录合成cDNA,行抑制性消减杂交,将得到的差异表达基因进行T-A克隆,构建cDNA文库,并进行序列... 详细信息

目的:构建重症肌无力(MG)患者胸腺组织抑制性消减cDNA文库,分析MG胸腺差异表达基因。方法:分别从6例正常和6例MG患者胸腺组织中分离出mRNA,逆转录合成cDNA,行抑制性消减杂交,将得到的差异表达基因进行T-A克隆,构建cDNA文库,并进行序列分析。应用实时荧光定量PCR检测20例MG患者、10例正常对照胸腺组织中GSTM3和KPNA5 mRNA的表达。结果:共获得125个阳性克隆;Blast同源性检索共得到27个差异表达基因;MG患者GSTM3、KPNA5基因表达量(0.671±0.097和0.712±0.080)高于正常对照胸腺(0.582±0.047和0.571±0.018),差异有统计学意义(tGSTM3=5.458,P<0.001;tKPNA5=2.755,P=0.010),与消减文库结果一致。结论:成功建立了MG胸腺组织抑制性消减cDNA文库。

关键词：抑制性消减重症肌无力差异基因 cDNA文库胸腺

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重症肌无力患者胸腺组织中共刺激分子B7-H1的表达

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郑州大学学报（医学版） 2012年第3期47卷 287-291页

作者：高峰李立张俊杰方华刘素娜杜英关兵峰张清勇郑州大学医药科学研究院免疫学研究室神经免疫实验室郑州450052 河南省医学科学院郑州450003 周口市中医院胸外科周口466000 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001 郑州大学第二附属医院胸外科郑州450014 郑州大学生物医学工程研究所郑州450014

目的:检测重症肌无力(MG)患者胸腺组织中共刺激分子B7-H1的表达。方法:以正常胸腺组织为对照,采用RT-PCR法检测胸腺增生(14例)、胸腺萎缩(5例)和胸腺瘤(6例)组织中B7-H1mRNA的表达,流式细胞仪分析胸腺组织中B7-H1蛋白的表达情况,免疫组... 详细信息

目的:检测重症肌无力(MG)患者胸腺组织中共刺激分子B7-H1的表达。方法:以正常胸腺组织为对照,采用RT-PCR法检测胸腺增生(14例)、胸腺萎缩(5例)和胸腺瘤(6例)组织中B7-H1mRNA的表达,流式细胞仪分析胸腺组织中B7-H1蛋白的表达情况,免疫组化染色方法观察胸腺组织中B7-H1蛋白的分布。结果:不同类型胸腺组织中BH-H1mRNA和蛋白表达差异有统计学意义(FmRNA=5.152,P=0.005;F蛋白=116.049,P<0.001)。免疫组化染色结果显示,B7-H1蛋白阳性信号主要定位于胸腺组织的皮髓质交界处和髓质胸腺细胞膜上,胸腺增生组织中B7-H1蛋白阳性胸腺细胞数量较多,分布密集,信号强度高。结论:B7-H1mRNA和蛋白的高表达可能与MG胸腺组织异常增生有关。

关键词： B7-H1 胸腺组织重症肌无力

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变性高效液相色谱法在α-血红蛋白稳定蛋白基因检测中的应用

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色谱 2011年第4期29卷 335-341页

作者：王志鹏暨南大学医学院微生物与免疫学教研室广东广州510632

建立了采用变性高效液相色谱（DHPLC）对α-血红蛋白稳定蛋白（AHSP）基因进行基因分型和突变筛查的新方法。将AHSP基因序列分成6个片段,因第一、二、四、六个片段均含有1~2个常见单核苷酸多态性（single nu-cleotide polymorphism,SNP... 详细信息

建立了采用变性高效液相色谱（DHPLC）对α-血红蛋白稳定蛋白（AHSP）基因进行基因分型和突变筛查的新方法。将AHSP基因序列分成6个片段,因第一、二、四、六个片段均含有1~2个常见单核苷酸多态性（single nu-cleotide polymorphism,SNP）位点,需单个标本分别进行检测;第三、五个片段不含有常见SNP位点,采用DHPLC结合DNA（脱氧核糖核酸）池的方法进行检测。以基因测序为金标准对所建立的AHSP基因检测方法进行方法学评价,结果显示：40个样品的DHPLC检测结果与测序结果之间完全吻合,说明所建立的检测方法能对AHSP基因6种常见SNP进行准确基因分型。应用DHPLC对365个样品的AHSP基因进行检测,发现2个罕见SNP（11 810G〉A和12 802C〉T）;同时还发现2个错义突变（AHSP D29V和AHSP V56G）,AHSP D29V突变为新突变,AH-SP V56G为罕见突变。结果表明采用DHPLC法可有效地对AHSP基因进行基因分型和突变筛查。

关键词：变性高效液相色谱 α-血红蛋白稳定蛋白基因基因分型突变筛查

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PCPA对于外周血CD4^+T细胞Th1/Th2分化失衡影响的初步研究

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免疫学杂志 2011年第8期27卷 645-648,661页

作者：张洁周怡周晓荣孙晓蕾周鸣鸣印磊张迎娣汪晓莺南通大学医学院免疫学与微生物学教研室 226019

目的研究PCPA暴露对于外周血CD4+T细胞向Th1/Th2分化的影响及其分子机制。方法分离并培养人外周血CD4+T细胞。采用MTT、流式细胞术、QRT-PCR和酶联免疫吸附试验法(ELISA)对PCPA组和对照组细胞中Th1、Th2亚型的代表细胞因子IFN-γ、IL-4... 详细信息

目的研究PCPA暴露对于外周血CD4+T细胞向Th1/Th2分化的影响及其分子机制。方法分离并培养人外周血CD4+T细胞。采用MTT、流式细胞术、QRT-PCR和酶联免疫吸附试验法(ELISA)对PCPA组和对照组细胞中Th1、Th2亚型的代表细胞因子IFN-γ、IL-4进行检测。结果 PHA刺激48 h后,ELISA检测细胞培养上清显示,PCPA组上清中IFN-γ分泌水平明显高于对照组(P<0.05),而IL-4分泌量较对照组略有增加;RT-PCR检测显示,PCPA组IFN-γ基因表达高于对照组1.69倍,IL-4基因表达没有显著改变;流式细胞技术对胞内因子检测显示,PCPA组IFN-γ+T细胞比例(46.1%)明显高于对照组(32.6%),2组间有统计学意义(P<0.05),而IL-4+T细胞比例与对照组无显著变化(48.1%和46.5%)。PCPA组的IFN-γ+T细胞与IL-4+T细胞比值是对照组的1.53倍。结论 PCPA暴露(40μmol/L)导致CD4+T细胞LSD1的H3K4(2m)脱甲基化酶活性被抑制,引起Th1/Th2分化平衡向Th1方向的"漂移"。

关键词：反式环苯丙胺 LSD1 辅助T细胞 γ干扰素白介素4

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中药臭灵丹中3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮对人鼻咽癌CNE细胞凋亡的影响及机制

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生物化学与生物物理进展 2011年第3期38卷 254-261页

作者：曹长姝沈伟哉李药兰王辉高明雅暨南大学医学院解剖学教研室广州510632 暨南大学药学院中药及天然产物研究所广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究所广东省重点实验室广州510632 暨南大学医学院微生物及免疫学教研室广州510632

中药臭灵丹中黄酮类化合物3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(3,5-hydroxy-6,7,3′,4′-tetramethoxyflavone,HTMF)体外对多种肿瘤细胞有抑增殖作用,但机制尚未完全清楚.为探讨HTMF对人鼻咽癌CNE细胞凋亡的影响,用MTT法检测HTMF对CN... 详细信息

中药臭灵丹中黄酮类化合物3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(3,5-hydroxy-6,7,3′,4′-tetramethoxyflavone,HTMF)体外对多种肿瘤细胞有抑增殖作用,但机制尚未完全清楚.为探讨HTMF对人鼻咽癌CNE细胞凋亡的影响,用MTT法检测HTMF对CNE细胞株的增殖抑制率,倒置显微镜观察HTMF作用于CNE细胞后细胞形态变化,Hoechst 33258荧光染色观察细胞核形态的变化,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,Western blot法检测凋亡蛋白Caspase3和Caspase9的变化,流式细胞仪检测线粒体跨膜电位(△准m)值的改变,并用JC-1荧光染料染色,激光共聚焦显微镜观察线粒体膜电位变化.结果显示,分离自臭灵丹的HTMF呈浓度、时间双重依赖性显著抑制CNE细胞的增殖,诱导细胞凋亡,引起线粒体膜电位下降及凋亡蛋白Caspase3和Caspase9的活化.提示:3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮对人鼻咽癌CNE细胞的生长有显著的抑制作用,并可通过降低线粒体膜电位激活Caspase9,进而活化Caspase3诱导CNE细胞凋亡.

关键词： 3,5-二羟基-6 7 3’ 4’-四甲氧基黄酮(HTMT) CNE细胞细胞凋亡线粒体

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颗粒溶素对结核分枝杆菌感染小鼠的保护效应

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武汉大学学报（医学版） 2011年第3期32卷 292-295,F0002页

作者：刘斌波刘君炎刘胜武屈雪菊武汉大学医学院微生物学教研室湖北武汉430071 武汉大学医学院免疫学教研室湖北武汉430071

目的:构建颗粒溶素(GNLY)真核表达质粒,并将重组质粒肌肉注射结核分枝杆菌感染小鼠观察其保护效应。方法:将人颗粒溶素cDNA插入pcDNA3.1(-)构建真核表达质粒。18只感染结核分枝杆菌H37Rv株的BALB/c小鼠随机分为生理盐水组、pcDNA3.1(-)... 详细信息

目的:构建颗粒溶素(GNLY)真核表达质粒,并将重组质粒肌肉注射结核分枝杆菌感染小鼠观察其保护效应。方法:将人颗粒溶素cDNA插入pcDNA3.1(-)构建真核表达质粒。18只感染结核分枝杆菌H37Rv株的BALB/c小鼠随机分为生理盐水组、pcDNA3.1(-)质粒组和GNLY质粒组。感染第1天和第6天各组小鼠分别从后腿股四头肌注射生理盐水、pcDNA3.1(-)质粒、GNLY质粒,免疫2次。感染4周后,处死各组小鼠,检测器官活菌数[lgCFU/(***)],脾重指数(WI),并观察肺、脾组织病理情况及抗酸染色情况。结果:GNLY质粒组肺组织活菌数为6.688±0.003,显著低于生理盐水组(7.821±0.090,P<0.01)和pcDNA3.1(-)质粒组(7.848±0.017,P<0.01);GNLY质粒组脾组织活菌数为7.140±0.034,显著低于两对照组(7.805±0.080,7.858±0.043,P<0.01)。GNLY质粒组脾重指数(2.575±0.649)也显著低于生理盐水组(4.580±0.967,P<0.01)和pcDNA3.1(-)质粒组(3.885±0.228,P<0.01)。GNLY质粒组肺脏病理学损害明显轻于两对照组,组织抗酸染色细菌荷载数量明显较两对照组低。结论:GNLY对结核分枝杆菌感染小鼠具有一定的保护作用。

关键词：结核分枝杆菌颗粒溶素真核表达质粒治疗作用

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细胞表面β-1,4-GalT-Ⅰ在T淋巴细胞活化中的作用

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现代免疫学 2011年第2期31卷 151-155页

作者：王滢吴圆圆薛琴贲志云孙晓雷胡迎青周晓荣汪晓莺南通大学医学院微生物学与免疫学教研室南通226001

本文探讨细胞表面β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(β-1,4-galactosyltransferase-I,β-1,4-GalT-Ⅰ)在Jurkat细胞活化过程中的作用。采用植物凝集素(phytohemagglutinin,PHA)刺激Jurkat细胞,CCK-8法检测Jurkat细胞增殖;分别采用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)技术、Western blot技术及流式细胞术检测活化过程中的不同时间点β-1,4-GalT-Ⅰ在Jurkat细胞中的表达变化;采用免疫荧光细胞化学法和激光共聚焦技术观察Jurkat细胞表面β-1,4-GalT-Ⅰ的分布。Jurkat细胞经PHA刺激后增殖,在36 h达高峰;细胞表面β-1,4-GalT-Ⅰ的mRNA表达量、蛋白表达量以及平均荧光表达强度均较未活化状态增高;Jurkat细胞表面β-1,4-GalT-Ⅰ在未活化状态下的平均分布于细胞表面,活化后其发生重排和聚集。结果提示在T细胞活化过程中细胞表面β-1,4-GalT-Ⅰ分子的表达增高且发生了分布变化。

关键词： β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ 活化 T淋巴细胞

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超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A对活化T细胞端粒长度影响及其相关机制研究

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实用医学杂志 2011年第22期27卷 4015-4017页

作者：秦雅楠王冠明张鹏林晨高永鹏田红霞李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州市510632 暨南大学医学院血液病研究所广州市510632

目的:研究超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)对T细胞端粒长度的作用及机制。方法:SEA、K562细胞、SEA联合K562细胞以及抗CD3单克隆抗体分别刺激脐带血单核细胞,SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测端粒、hTERT及IL-7R表达。结果:SEA组、K562细... 详细信息

目的:研究超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)对T细胞端粒长度的作用及机制。方法:SEA、K562细胞、SEA联合K562细胞以及抗CD3单克隆抗体分别刺激脐带血单核细胞,SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测端粒、hTERT及IL-7R表达。结果:SEA组、K562细胞组、SEA联合K562细胞组及抗CD3单抗组活化T细胞的端粒相对长度比值为1.63±0.08、1.06±0.06、3.24±0.61、1.37±0.07;hTERT的表达差异倍数为1.88±0.07、1.95±0.05、3.93±0.23、1.30±0.06;IL-7R表达差异倍数为6.61±0.52、12.81±0.34、17.42±0.50、4.87±0.66;SEA联合K562细胞组均明显高于其他3组(P<0.01),SEA组对端粒长度影响大于单纯K562细胞组。结论:超抗原SEA可以直接刺激T细胞的端粒酶活性及上调表达IL-7R,联合特异性抗原K562细胞株诱导T细胞活化上调效果更明显。

关键词：白血病髓系慢性 BCR-ABLB阳性肠毒素类端粒长度 IL-7R hTERT

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结核分枝杆菌原核泛素样蛋白的研究进展

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中国人兽共患病学报 2011年第10期27卷 940-942页

作者：张娟袁俐新疆石河子大学医学院病原微生物学与免疫学教研室石河子832002

结核病是人类致死的主要感染性疾病之一。尽管人体内存在有效的控制结核杆菌生长的机理,大部分人感染结核分枝杆菌后,不会发展成结核病,但是结核杆菌在机体中很难被消灭[1]。近年来,

关键词：结核分枝杆菌感染性疾病蛋白泛素原核结核杆菌结核病

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