检索结果-内蒙古大学图书馆

汕头大学医学院学报 2010年第2期23卷 78-80,F0003页

作者：王革非李璐李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东省高校免疫病理重点实验室汕头大学医学院细胞衰老实验室广东汕头515041

目的:分析人癌症高表达蛋白1(HEC1)在有丝分裂期和分裂间期的定位和表达调控相关蛋白基序。方法:用逆转录聚合酶链反应法从HeLa细胞中克隆HEC1基因cDNA,并构建其真核表达载体;对HEC1 cDNA测序序列进行生物信息学分析;HEC1真核表达载体转... 详细信息

目的:分析人癌症高表达蛋白1(HEC1)在有丝分裂期和分裂间期的定位和表达调控相关蛋白基序。方法:用逆转录聚合酶链反应法从HeLa细胞中克隆HEC1基因cDNA,并构建其真核表达载体;对HEC1 cDNA测序序列进行生物信息学分析;HEC1真核表达载体转染293T细胞后,用Western blot进行表达分析;并用有丝分裂抑制剂(nocodazole)对细胞进行同步化和释放,观察有丝分裂期和分裂间期时HEC1定位。结果:电泳和酶切鉴定,得到含有HEC1的真核表达载体,Westernblot证实表达载体可在转染细胞中表达重组HEC1蛋白;HEC1测序序列分析发现多个与定位和调控相关基序,提示HEC1可能受APC/C蛋白酶体调控;HEC1在有丝分裂期定位于染色体,在分裂间期定位于细胞质靠近细胞核部位。结论:获得HEC1基因cDNA及表达载体,HEC1定位随不同细胞周期而变化。

关键词：人癌症高表达蛋白细胞周期定位

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SDF-1、CXCR4和hs-CRP在儿童急性白血病中的表达

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现代肿瘤医学 2010年第4期18卷 793-795页

作者：李婉丽杨惠军郑敏翠邹爱军宋国才蒋小梅杨海霞张本山吴攀湖南省儿童医院血液科湖南长沙410007 湖南师范大学医学院微生物学和免疫学教研室湖南长沙410007

目的:检测儿童急性白血病骨髓中CXCR4、血清中SDF-1和hs-CRP的表达情况,探讨其临床意义,以积累临床经验,指导临床工作。方法:选取我院诊治的85例儿童急性白血病作为实验组,留取治疗前的骨髓穿刺标本,应用流式细胞术对其进行CXCR4的检测... 详细信息

目的:检测儿童急性白血病骨髓中CXCR4、血清中SDF-1和hs-CRP的表达情况,探讨其临床意义,以积累临床经验,指导临床工作。方法:选取我院诊治的85例儿童急性白血病作为实验组,留取治疗前的骨髓穿刺标本,应用流式细胞术对其进行CXCR4的检测;留取治疗前的血清,对其进行SDF-1和hs-CRP的表达量的检测。选取同期20例非恶性血液病儿童的骨髓及血清作为对照组,检测骨髓中CXCR4和血清中SDF-1、hs-CRP的含量。比较二组中CXCR4、SDF-1和hs-CRP的表达及不同临床特征的意义。结果:实验组CXCR4、SDF-1和hs-CRP的表达量显著高于对照组,CXCR4、SDF-1和hs-CRP在急性淋巴细胞性白血病患儿和髓外侵润的患儿表达明显增高。在实验组中CXCR4和SDF-1的表达具有正相关性。CXCR4和hs-CRP、SDF-1和hs-CRP的表达未见明显相关性。结论:CXCR4、SDF-1和hs-CRP在白血病患儿血清中高表达,其在疾病发生发展中可能具有重要意义,CXCR4和SDF-1在白血病的发生发展中具有协同作用。

关键词：白血病 SDF-1 CXCR4 超敏C反应蛋白病理

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A549和MDCK细胞外源性表达人APOBEC-3F和APOBEC-3G对流感病毒复制和突变的影响

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癌变．畸变．突变 2010年第5期22卷 346-351页

作者：王革非彭程曾祥兴张驰李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东高校免疫病理重点实验广东汕头515041 华中科技大学同济医学院附属协和医院感染科湖北武汉430030

目的:研究人载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽-3F(human apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic-polypeptide 3F,hA3F)和hA3G对流感病毒的复制和突变的影响。方法:外源性hA3F和hA3G通过脂质体转染至A549和MDCK细胞中,经Western blotting和间接免疫荧光鉴定后,用流感病毒进行感染,通过检测半数组织培养感染剂量(50% tissue culture infective dose,TCID50)和空斑实验确定病毒滴度;使用不同初始感染剂量,绘制动态的病毒生长曲线,以确认hA3F和hA3G对流感病毒复制的影响。Western blotting检测流感病毒感染后转染细胞表达外源性hA3F和hA3G的情况。病毒在转染细胞和对照细胞中连续传代,RT-PCR和测序分析其血凝素HA基因的突变频率。结果:TCID50检测和空斑实验结果表明在hA3F和hA3G表达细胞中,流感病毒的滴度与对照细胞间差异无统计学意义(P>0.05);病毒生长曲线表明,不同初始感染剂量、不同感染时相,转染hA3F和hA3G的细胞对人流感病毒的抑制作用与对照细胞间的差异无统计学意义(P>0.05)。Western blotting结果表明感染后48h仍能够在MDCK细胞中检测到hA3F和hA3G的重组蛋白。病毒HA片段的测序分析表明,转染hA3F和hA3G的细胞对流感病毒基因组的致突变频率与对照细胞间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本研究表明hA3F和hA3G这两个重要的APOBEC成员,对人流感病毒的复制效率及突变频率无明显作用。

关键词： APOBEC-3F APOBEC-3G 流感病毒复制突变 A549

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鸡流感病毒SAα-2,3 Gal和α-2,6 Gal受体分布特点及其在流感病毒生态系统中的作用

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广西医科大学学报 2010年第4期27卷 497-501页

作者：张增峰罗殿中陈日荣魏丹儿王嘉广西医科大学微生物学教研室南宁530021 广西医科大学病理学教研室南宁530021 汕头大学医学院国际感染与免疫研究所汕头515031

目的:探讨鸡流感病毒受体分布特点及其在流感病毒生态系统中的位置和作用。方法:应用凝集素组织化学染色技术检测鸡呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布,用荧光素Alexa 488标记的禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1分别与鸡呼吸道、消化道... 详细信息

目的:探讨鸡流感病毒受体分布特点及其在流感病毒生态系统中的位置和作用。方法:应用凝集素组织化学染色技术检测鸡呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布,用荧光素Alexa 488标记的禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1分别与鸡呼吸道、消化道各解剖部位结合。结果:鸡呼吸道均表达SA-α2,3Gal和-α2,6Gal受体,SA-α2,6Gal受体在气管、支气管和次级支气管呈高密度分布,而SA-α2,3Gal受体在呼吸道的分布以副支气管上皮细胞为主;消化道结肠上皮细胞SA-α2,3Gal受体呈弥漫分布,但SA-α2,6Gal受体仅少量分布。同时,禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1均可与呼吸道和消化道上皮细胞结合。结论:鸡同时表达SA-α2,3Gal和-α2,6Gal受体,能与禽流感病毒和人流感病毒结合,有助于病毒基因重配,可充当产生人类流感大流行潜在的中间宿主。

关键词：甲型流感病毒受体唾液酸 SA-α2,3Gal受体 SA-α2,6Gal受体鸡

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人免疫缺陷病毒TAT蛋白转导肽与人载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白质3F/3G串联锌结合域的融合表达

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汕头大学医学院学报 2010年第2期23卷 84-88页

作者：王革非彭程张驰曾祥兴李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东省高校免疫病理学重点实验室广东汕头515041 华中科技大学同济医学院附属协和医院感染科湖北武汉430030

目的:分析载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白质3F和3G(APOBEC3F/3G)的蛋白基序,获得具有细胞转导潜力的抗病毒基序融合蛋白。方法:用MotifScan软件对APOBEC3F/3G进行生物信息学分析,找出APOBEC3F/3G中的锌结合域(ZBRs)。通过PCR及多... 详细信息

目的:分析载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白质3F和3G(APOBEC3F/3G)的蛋白基序,获得具有细胞转导潜力的抗病毒基序融合蛋白。方法:用MotifScan软件对APOBEC3F/3G进行生物信息学分析,找出APOBEC3F/3G中的锌结合域(ZBRs)。通过PCR及多步酶切克隆得到APOBEC3F/3G的3个串联ZBRs基因片段,并将其与人免疫缺陷病毒(HIV)的TAT蛋白转导域基因克隆至原核表达载体(pET32a),转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达。结果:酶切和测序鉴定,得到含有HIV-TAT和3个ZBRs基因的重组质粒;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测分析,融合蛋白在BL21(DE3)中获得表达,占菌体总蛋白的20%。结论:获得含HIV-TAT和3个ZBRs的融合表达重组蛋白,为进一步研究APOBEC3F/3G抗病毒机制,也为其在抗病毒治疗中的应用打下基础。

关键词：载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白质3F/3G 锌结合域蛋白转导

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蛋白激酶C在脂多糖诱导内皮细胞β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ表达中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第3期29卷 198-203页

作者：贲志云程纯孙晓雷钱佶肖锋张冬梅季玉红南通大学医学院免疫学与微生物学教研室 226001

目的研究蛋白激酶C（PKC）对脂多糖（LPS）诱导内皮细胞β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ（β-1，4-galactosyltransferase-Ⅰ，β-1，4-GaIT-Ⅰ）表达的调节作用，以及对内皮细胞骨架结构改变及其黏附能力的影响。方法分别用PKC激动剂或几种... 详细信息

目的研究蛋白激酶C（PKC）对脂多糖（LPS）诱导内皮细胞β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ（β-1，4-galactosyltransferase-Ⅰ，β-1，4-GaIT-Ⅰ）表达的调节作用，以及对内皮细胞骨架结构改变及其黏附能力的影响。方法分别用PKC激动剂或几种不同类型的PKC抑制剂预处理人脐静脉内皮细胞（HUVECs）30rain，LPS刺激HUVECs4h后，RT-PCR、Western blot方法检测β-1，4-GaIT-Ⅰ表达变化，细胞荧光染色观察β-1，4-GaIT-Ⅰ催化的糖链表达变化及细胞骨架结构的改变，通过内皮-单核细胞黏附试验观察HUVECs黏附能力的改变。结果儿种不同类型的PKC抑制剂均能不同程度地抑制LPS刺激HUVECs引起的β-1，4-GaIT-Ⅰ表达的上调，PKC激动剂能够使上调的β-1，4-GAIT-Ⅰ的表达进-步增加；在HUVECs中β-1，4-GaIT-Ⅰ与细胞骨架有共同定位，PKC抑制剂显著抑制LPS诱导的内皮细胞骨架蛋白的重构和β-1，4-GaIT-Ⅰ细胞内的再分布；PKC抑制剂显著抑制LPS诱导的内皮-单核细胞黏附能力的上调。结论PKC可能参与调节LPS诱导的HUVECs β-1，4-GaIT-Ⅰ的表达，可能多种类型的PKC参与了这一调节过程；PKC可能通过对β-1，4-GaIT-Ⅰ的调节进而影响炎症过程中内皮细胞骨架蛋白的重构及内皮细胞与单核细胞的黏附能力。

关键词： β-1 4-半乳糖基转移酶-Ⅰ 蛋白激酶C 内皮细胞脂多糖

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关于留学生医学微生物学教学的思考

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科技信息 2010年第28期 10-10页

作者：贲志云孙晓雷季玉红汪晓莺苏丽南通大学医学院免疫学与微生物学教研室

医学微生物学是一门重要的基础医学课程,面对留学生教学这一新的挑战,医学高校教师需要在教学实践中不断探索,注重提高教学质量,提升对医学专业留学生的吸引力。

关键词：留学生微生物学教学

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肿瘤微环境体外模拟在鼻咽癌研究中的初步应用

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国际病理科学与临床杂志 2010年第6期30卷 476-479页

作者：吕冬左建宏李金成邵阳医学高等专科学校临床护理教研室湖南邵阳422000 中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室长沙410008 南华大学医学院微生物学与免疫学教研室湖南衡阳421001 邵阳医学高等专科学校内科学教研室湖南邵阳422000 中南大学湘雅医院感染科长沙410008

目的:探讨肿瘤微环境对鼻咽癌细胞转移和侵袭的影响。方法:在鼻咽癌患者癌旁组织中分离成纤维细胞,在体外应用TGF-β1诱导形成癌相关成纤维细胞(carcinoma associated fibroblasts,CAFs),在体外模拟肿瘤微环境。对比研究未用TGF-β1和应... 详细信息

目的:探讨肿瘤微环境对鼻咽癌细胞转移和侵袭的影响。方法:在鼻咽癌患者癌旁组织中分离成纤维细胞,在体外应用TGF-β1诱导形成癌相关成纤维细胞(carcinoma associated fibroblasts,CAFs),在体外模拟肿瘤微环境。对比研究未用TGF-β1和应用TGF-β1处理的成纤维细胞对鼻咽癌细胞5-8F转移与侵袭的影响。结果:成功地在体外模拟肿瘤微环境。CAFs明显能促进鼻咽癌细胞5-8F的迁移,约为对照组的4倍(P<0.05);同时,促进鼻咽癌细胞的侵袭,约为对照组的2倍(P<0.05)。结论:CAFs能促进鼻咽癌细胞5-8F的转移与侵袭,为鼻咽癌致病机制研究和临床治疗奠定了一定的实验与理论基础。

关键词：肿瘤微环境鼻咽癌癌相关成纤维细胞转化生长因子β1 肿瘤转移

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新世纪流感大流行的思考

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生物化学与生物物理进展 2009年第8期36卷 945-949页

作者：王革非李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东高校免疫病理重点实验室汕头515041

2009年从墨西哥开始暴发了一场席卷全世界的流感疫情.此次大流行的毒株,甲型H1N1病毒,包含了猪源、禽源和人源流感病毒的基因片段.研究该毒株的基因重配、进化历程及其生物学特性,将对防控此次流行具有重要意义.目前,该毒株的遗传进化... 详细信息

2009年从墨西哥开始暴发了一场席卷全世界的流感疫情.此次大流行的毒株,甲型H1N1病毒,包含了猪源、禽源和人源流感病毒的基因片段.研究该毒株的基因重配、进化历程及其生物学特性,将对防控此次流行具有重要意义.目前,该毒株的遗传进化关系已明确,通过遗传性状分析可获知该毒株可能的生物学性状,但流感大流行动向、毒株遗传变化、毒力及致病性变化仍在密切监控中.流感病毒生态系统具有复杂性,其基因组易突变、易重配、易在自然宿主保存,使得流感大流行存在一定的必然性.正视流感大流行的威胁,积极提高流感病毒在生态系统中的监控,加强流行病学调查,发展疫苗与药物,建立有效公共卫生保障体系,才能降低流感大流行的破坏性.

关键词：流感病毒甲型H1N1 流感大流行基因重配

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甲氰咪呱对K562细胞诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响

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第三军医大学学报 2009年第17期31卷 1637-1640页

作者：田红霞林晨陈少华杨力建江振友高珂郜世隽李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广州510632

目的研究甲氰咪呱(cimetidine)对K562细胞体外诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响。方法体外分别将甲氰咪呱、K562细胞、甲氰咪呱+K562细胞与正常人的脐带血单个核细胞(mononuclear cells,MNC)混合培养2周,检测诱导增殖T细胞的特... 详细信息

目的研究甲氰咪呱(cimetidine)对K562细胞体外诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响。方法体外分别将甲氰咪呱、K562细胞、甲氰咪呱+K562细胞与正常人的脐带血单个核细胞(mononuclear cells,MNC)混合培养2周,检测诱导增殖T细胞的特异杀伤活性,同时利用RT-PCR基因扫描技术分析培养后T细胞的TCR Vβ亚家族谱系的选择性利用和克隆性增殖情况。结果经甲氰咪呱、K562细胞、甲氰咪呱+K562细胞诱导培养2周后,各组均不同程度诱导细胞增殖,其中甲氰咪呱联合K562细胞诱导组的T细胞对K562细胞的特异性杀伤作用显著增强(P<0.01)。3组均呈现不同程度的T细胞TCR Vβ亚家族选择性利用,均有TCR Vβ21亚家族呈克隆性增殖。结论甲氰咪呱可协助增强bcr-abl抗原刺激的特异性抗CML T细胞作用。

关键词：甲氰咪呱 T细胞受体Vβ基因慢性粒细胞白血病脐血

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