检索结果-内蒙古大学图书馆

新发与再发传染病研究论坛

作者：邓辉雄喻顺王革非汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室汕头大学医学院广东省感染病与分子免疫病理重点实验室

手足口病主要由EV-A71和CV-A16肠病毒引起,而近年来由CV-A10、CV-A6、CV-B3等肠道病毒引起的病例越来越多。手足口病暴发疫情日益复杂,往往伴随着多种肠道病毒的流行,对人类健康和经济造成巨大威胁。尽管目前已上市了EV-A71和CV-A16疫苗... 详细信息

手足口病主要由EV-A71和CV-A16肠病毒引起,而近年来由CV-A10、CV-A6、CV-B3等肠道病毒引起的病例越来越多。手足口病暴发疫情日益复杂,往往伴随着多种肠道病毒的流行,对人类健康和经济造成巨大威胁。尽管目前已上市了EV-A71和CV-A16疫苗,并且一些多价肠道病毒疫苗也正在开发,但消除肠道病毒对人类生命健康的威胁仍然是一个巨大的挑战,如灭活EV-A71疫苗对其他肠道病毒的感染没有保护力。我们根据合成肽疫苗的原理,利用免疫信息学设计了一种针对EVA71、CV-A16、CV-A10、CV-A6、CVB3高效、安全的多价抗原表位疫苗。通过分析五种肠病毒株的蛋白质序列,筛选出高度保守且免疫原性强,对宿主无毒性作用的B细胞、HTL、CTL细胞抗原表位,进一步的分析确认了可以诱导IFN-γ以及IL-4非诱导型的HTL细胞抗原表位和T细胞表位相关MHC分子等位基因对应的人口覆盖率。多价肠道病毒疫苗的构建以通过合适的连接子将50s核糖体蛋白L7/L12佐剂和候选抗原表位按顺序连接,接着评估分析了构建疫苗的抗原性、过敏原性和物理学特性。对蛋白质疫苗二级结构分析及三级结构同源建模、二硫键设计、重修和验证后分析确定了蛋白质疫苗的构象B细胞表位。与TLR4分子对接检验了配体和受体的稳定性。最后,计算机模拟克隆将疫苗的基因序列用p ET28a(+)构建表达载体以保证疫苗高效表达。本研究提供了一种经济、省时的方法来设计一种基于多价抗原表位的肠道病毒疫苗,该疫苗可以同时诱导多个级别的免疫反应,并对多种肠道病毒病原体提供保护。

关键词：手足口病多价抗原表位亚单位疫苗计算机克隆

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乙型肝炎病毒拉米夫定YVDD耐药株及YMDD野生株稳定表达细胞系建立及鉴定

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国际免疫学杂志 2019年第4期42卷 347-352页

作者：徐维祯谷鸿喜郝美丽马延秀李皓乐汪颖楠哈尔滨医科大学微生物学教研室 150081 哈尔滨医科大学细胞生物学教研室 150081 杭州师范大学医学院病原和免疫学教研室 311121 加州大学圣地亚哥分校圣地亚哥92092

目的建立乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)拉米夫定YVDD耐药株及YMDD野生株稳定表达细胞系。方法利用携带有HBV拉米夫定YVDD耐药株或YMDD野生株的全基因真核表达重组质粒分别稳定转染HepG2细胞,G418筛选后建立稳定表达细胞株;酶联... 详细信息

目的建立乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)拉米夫定YVDD耐药株及YMDD野生株稳定表达细胞系。方法利用携带有HBV拉米夫定YVDD耐药株或YMDD野生株的全基因真核表达重组质粒分别稳定转染HepG2细胞,G418筛选后建立稳定表达细胞株;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测HBV抗原表达情况;FT-PCR检测HBV DNA载量;FH-PCR-MC验证细胞株拉米夫定耐药变异类型;测序分析细胞株内HBV的基因变异情况。结果成功建立HBV拉米夫定YVDD耐药株和YMDD野生株稳定表达细胞系;第1、10、30代细胞株HBsAg和HBeAg表达稳定;第30代细胞内及上清中HBV DNA载量高于10^4copies/mL;耐药株变异类型为YVDD;测序显示,细胞基因组携带的HBV耐药株基因存在A1762T/G1764A/rtM204V/rtL180M/rtV173L的多位点联合变异。结论成功建立HBV拉米夫定YVDD耐药株和YMDD野生株稳定表达细胞系,即HepG2-HBV/CV和HepG2-HBV/CM细胞,为筛选抗HBV拉米夫定耐药株的有效药物提供了理想的细胞模型。

关键词：乙型肝炎病毒 YMDD YVDD 稳定表达细胞系

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抗缪勒氏管激素的结构、功能、临床应用与检测技术

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国际检验医学杂志 2019年第24期40卷 3061-3066,3072页

作者：林丽淑龙韵洪徐丽惠冯振通陈睿(综述) 王革非(审校) 深圳市福田区第二人民医院检验科广东深圳518049 汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东汕头515041

抗缪勒氏管激素(AMH)又称缪勒氏管抑制物(MIS),发现于上世纪50年代,是两个相对分子质量为140×10^3组成的糖蛋白二聚体,属于转化生长因子β超家庭。它在胚胎性别分化中起着非常重要作用,参与早期性器官定向分化。出生后主要功能为... 详细信息

抗缪勒氏管激素(AMH)又称缪勒氏管抑制物(MIS),发现于上世纪50年代,是两个相对分子质量为140×10^3组成的糖蛋白二聚体,属于转化生长因子β超家庭。它在胚胎性别分化中起着非常重要作用,参与早期性器官定向分化。出生后主要功能为调节男性睾丸间质细胞的功能及参与女性卵泡的规律生成。AMH的检测由早期的放射免疫分析技术发展为现在的化学发光技术,在检测灵敏度等方面都有了很大的飞跃。其常见临床应用为评估女性的卵巢储备功能、诊断早衰、多囊卵巢综合征及卵巢颗粒细胞瘤、应用于辅助生殖技术等。

关键词：抗缪勒氏管激素结构功能临床应用检测技术

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中医学专业《组织胚胎学》教学改革思考

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中国继续医学教育 2019年第12期11卷 6-8页

作者：孙晓峰许晓源刘涛伍参荣刘梦琳刘畅湖南中医药大学医学院组织胚胎学教研室湖南长沙410208 九江学院基础医学院组织胚胎学与医学遗传学教研室江西九江332000 湖南中医药大学医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学医学院免疫微生物学教研室湖南长沙410208

组织胚胎学是重要的西医学基础课程,起着承上启下的作用,组织胚胎学为生理学及病理学等后续基础课程甚至临床课程的学习奠定坚实的基础。中医学专业学生在学习组织胚胎学等西医课程时往往因课时不足、中西医思维碰撞而存在兴趣缺乏、一... 详细信息

组织胚胎学是重要的西医学基础课程,起着承上启下的作用,组织胚胎学为生理学及病理学等后续基础课程甚至临床课程的学习奠定坚实的基础。中医学专业学生在学习组织胚胎学等西医课程时往往因课时不足、中西医思维碰撞而存在兴趣缺乏、一知半解、记忆困难等问题,而中医现代化的趋势要求中医专业学生掌握中西医结合思维。笔者在湖南中医药大学2017级中医学专业学生中尝试推行了基于蓝墨云班课的组织学课程改革和基于选修课制度的胚胎学课程改革,效果显著,口碑良好。深入分析后也提出了更好的改进措施,以期提高中医学专业组织胚胎学课程的教学效果。

关键词：组织胚胎学中医学专业学改革蓝墨云班课效果分析

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重组人抗缪勒氏管激素对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

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现代肿瘤医学 2019年第17期27卷 2992-2995页

作者：林丽淑龙韵洪陈睿谢陈莹黄萍萍王革非深圳市福田区第二人民医院检验科广东深圳518049 汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东汕头515041

目的:探讨重组人抗缪勒氏管激素(AMH)对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制作用。方法:采用浓度为25、50、100、200、400 nmol/L重组人AMH处理对数生长期的SKOV3细胞,并设阿霉素(DOX)组为阳性对照组,同时设3个阴性对照孔(DOX和AMH浓度0 nmol/... 详细信息

目的:探讨重组人抗缪勒氏管激素(AMH)对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制作用。方法:采用浓度为25、50、100、200、400 nmol/L重组人AMH处理对数生长期的SKOV3细胞,并设阿霉素(DOX)组为阳性对照组,同时设3个阴性对照孔(DOX和AMH浓度0 nmol/L),作用72小时后通过CCK-8法检测SKOV3细胞增殖抑制率;采用重组人AMH 100 nmol/L作用于SKOV3细胞48小时后使用Annexin-V和PI染色,并设1 nmol/L DOX为阳性对照组,同时设3个阴性对照孔(DOX和AMH浓度0 nmol/L),通过流式细胞仪检测AMH对SKOV3细胞的促凋亡作用。结果:浓度100、200、400 nmol/L的AMH对SKOV3细胞增殖抑制率分别为50.6%、64.5%、78.3%,与阴性对照组相比有统计学差异(P<0.01),且随AMH浓度加大,抑制效果明显提高;流式细胞仪检测AMH组SKOV3细胞总凋亡率为(30.6±2.82)%,与阴性对照组比较,细胞凋亡率明显升高,有统计学差异(P<0.01)。结论:重组人AMH在体外能够明显抑制人卵巢癌SKOV3细胞的增殖,促进其凋亡。

关键词：抗缪勒氏管激素卵巢癌SKOV3细胞系凋亡

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细菌溶血素毒性和致病机制研究进展

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中国人兽共患病学报 2018年第2期34卷 175-181页

作者：马碧书马丽娜林旭瑷严杰昆明医科大学海源学院微生物学和免疫学教研室昆明650106 甘肃中医药大学医学技术学院兰州743000 浙江大学医学院病原生物学系杭州310058

许多病原菌能产生溶血素溶解红细胞,但近年发现细菌溶血素还能损伤或致死多种有核细胞和血小板。根据分子结构、结合细胞方式、膜孔道形成机制等不同,可将大多数细菌溶血素分类为重复子毒素家族(repeats in toxin family,RTX)和胆固醇... 详细信息

许多病原菌能产生溶血素溶解红细胞,但近年发现细菌溶血素还能损伤或致死多种有核细胞和血小板。根据分子结构、结合细胞方式、膜孔道形成机制等不同,可将大多数细菌溶血素分类为重复子毒素家族(repeats in toxin family,RTX)和胆固醇依赖细胞溶素家族(cholesterol-dependent cytolysin family,CDC)毒素。细菌溶血素可通过膜损伤、细胞溶解或裂解、离子失衡相关病变、细胞凋亡或坏死性凋亡以及TLR2/4介导的NF-κB、p38MAPK、JNK信号传导通路和NLRs介导的NLRP3炎症小体引发强烈的炎症反应并导致炎症性组织损伤,从而在细菌感染过程中发挥重要致病作用。

关键词：细菌溶血素膜损伤细胞裂解细胞凋亡炎症反应

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原核表达家蝇抗菌肽Phormicin A,B蛋白对大肠杆菌标准株的影响

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生物加工过程 2019年第6期17卷 623-629页

作者：王兵杜兵王代琴覃海韦鹏威姚杨万珊王涛吴建伟贵州医科大学生物与工程学院生物技术教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学医药生物技术工程研究中心贵州贵阳550025 贵州医科大学第一附属医院微生物免疫科贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院病原生物学教研室贵州贵阳550025

抗菌肽是近年来新型的抗菌剂药物候选者。以家蝇防御素家族Phormicin A、B抗菌肽为研究对象,探究了其对大肠杆菌的作用效果。采用原核表达法获得二者蛋白,将其作用于大肠杆菌标准株,通过微量液体稀释法测定其最小抑菌浓度分别为20和7.5 ... 详细信息

抗菌肽是近年来新型的抗菌剂药物候选者。以家蝇防御素家族Phormicin A、B抗菌肽为研究对象,探究了其对大肠杆菌的作用效果。采用原核表达法获得二者蛋白,将其作用于大肠杆菌标准株,通过微量液体稀释法测定其最小抑菌浓度分别为20和7.5 mmol/L,并绘制了二者作用于大肠杆菌标准株的时间生长曲线。结果显示:家蝇Phormicin A、B原核表达蛋白对于大肠杆菌标准株的生长具有一定的抑制作用,此研究为应用于抗临床大肠杆菌感染药物的研发提供了一定的参考。

关键词： Phormicin 家蝇抗菌肽

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华支睾吸虫钙结合蛋白Cs16的重组表达及血清诊断应用的初步评价

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2018年第3期36卷 275-279,285页

作者：濮珏彪唐莉莉殷岑楠杜新月吴健桦赵蔚刘登宇王兆军吴琛耘上海交通大学医学院免疫学与微生物学系上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025 广西医科大学基础医学院寄生虫学教研室南宁530021

目的以原核和真核表达系统克隆、表达华支睾吸虫含有EF手型结构域的钙结合蛋白(Cs16),纯化并初步评价其在华支睾吸虫病免疫诊断中的作用。方法以华支睾吸虫成虫c DNA为模板,PCR扩增含有EF手型结构域的Cs16基因,分别构建原核重组质粒p GE... 详细信息

目的以原核和真核表达系统克隆、表达华支睾吸虫含有EF手型结构域的钙结合蛋白(Cs16),纯化并初步评价其在华支睾吸虫病免疫诊断中的作用。方法以华支睾吸虫成虫c DNA为模板,PCR扩增含有EF手型结构域的Cs16基因,分别构建原核重组质粒p GEX-4T-1-Cs16和真核重组质粒p PIC9K-Cs16,将酶切和测序鉴定正确的重组质粒分别转入大肠埃希菌BL21和毕赤酵母GS115后,表达并纯化目的蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)验证其纯度及免疫原性。以华支睾吸虫重组蛋白Cs16为包被抗原,采用ELISA检测24例华支睾吸虫病患者血清中相应抗体的反应性及其与日本血吸虫病患者血清的交叉反应性。结果PCR扩增获得Cs16基因片段,大小为515 bp。构建的重组质粒p GEX-4T-1-Cs16和p PIC9K-Cs16经酶切和测序鉴定正确。SDS-PAGE结果显示,2个重组质粒在大肠埃希菌BL21和毕赤酵母GS115中均为可溶性表达,重组蛋白Cs16相对分子质量约为16 000。Western blotting结果显示,2个重组蛋白能分别被抗GST抗体和抗His抗体特异性识别。ELISA检测结果显示,原核表达和真核表达重组蛋白Cs16的敏感性分别为70.8%(17/24)和54.2%(13/24),特异性分别为95.2%(20/21)和100%(21/21),差异均有统计学意义(P<0.05)。与日本血吸虫病患者血清的交叉反应为1/10。结论获得了原核和真核Cs16重组抗原,其在华支睾吸虫病的诊断上具有潜在的应用价值。

关键词：华支睾吸虫钙结合蛋白原核表达真核表达免疫诊断

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母体基础状态和伴随疾病与B群链球菌感染的相关性研究

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国际检验医学杂志 2019年第15期40卷 1865-1867页

作者：欧阳惠君李康生廖奔兵靖吉芳黄雪霞惠州卫生职业技术学院广东惠州516025 汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东汕头515041 惠州市妇幼保健计划生育服务中心广东惠州516025

目的研究妊娠母体的基础状态及伴随疾病与B群链球菌感染的相关性。方法选择某院213例经传统培养法鉴定为GBS感染患者,作为GBS(+)组;从GBS培养鉴定结果为阴性的所有患者中,随机抽取213例GBS阴性者为GBS(-)组。对两组对象的年龄、产次、... 详细信息

目的研究妊娠母体的基础状态及伴随疾病与B群链球菌感染的相关性。方法选择某院213例经传统培养法鉴定为GBS感染患者,作为GBS(+)组;从GBS培养鉴定结果为阴性的所有患者中,随机抽取213例GBS阴性者为GBS(-)组。对两组对象的年龄、产次、孕次、体质量指数(BMI)及妊娠期糖尿病、妊娠期高血压病、子宫平滑肌瘤、贫血的发生率进行统计分析。结果GBS(+)组孕妇的BMI明显高于GBS(-)组,差异具有统计学意义(P<0.05)。GBS(+)组、GBS(-)组的孕妇年龄、产次、孕次及伴随疾病之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论B群链球菌感染与妊娠母体的BMI有明显的相关性。体质量监测对控制孕妇B群链球菌感染有积极意义。

关键词：基础状态体质量指数伴随疾病 B群链球菌

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原发性痛风性关节炎患者外周血中辅助性T细胞1/辅助性T细胞2的表达变化及其临床意义

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中华风湿病学杂志 2018年第11期22卷 731-736页

作者：杨虹杨小红青玉凤周京国成都中医药大学医学与生命科学学院 611137 川北医学院微生物学与免疫学教研室川北医学院附属医院风湿免疫科成都医学院第一附属医院风湿免疫科

目的探讨原发性痛风性关节炎患者(GA)外周血辅助性T细胞(Th)1/Th2的表达变化及其临床意义。方法收集21例急性期痛风(AG)患者、20例间歇期痛风(IG)患者和20名健康对照组的临床资料及实验室检查指标;运用流式细胞术(FCM)检测外周血中Th1... 详细信息

目的探讨原发性痛风性关节炎患者(GA)外周血辅助性T细胞(Th)1/Th2的表达变化及其临床意义。方法收集21例急性期痛风(AG)患者、20例间歇期痛风(IG)患者和20名健康对照组的临床资料及实验室检查指标;运用流式细胞术(FCM)检测外周血中Th1细胞和Th2细胞的比例。实时荧光定量PCR检测T细胞转录因子(T-bet)、GATA联合蛋白-3(GATA-3)、IL-4、IFN-γ的mRNA表达。ELISA法检测血清中IL-4、IFN-γ的蛋白表达水平。计量资料组间比较采用单因素方差分析,变量间的相关关系采用Spearman相关性分析。结果①外周血中Th1细胞比例在AG组[(23.2±8.3)%]和IG组[(20.5±9.3)%]较健康对照组[(14.8±3.8)%]增高(F=6.520,P=0.003),但AG组与IG组的差异无统计学意义。外周血的Th2细胞比例在AG组[(1.9±0.7)%]低于IG组[(3.3±1.2)%]和健康对照组[(3.4±1.8)%](F=8.267,P=0.001),IG组与健康对照组间差异无统计学意义。AG组Th1/Th2细胞比例较IG组和健康对照组增高(F=10.406,P<0.01)。②T-bet、IFN-γmRNA表达水平在AG组及IG组与健康对照组比较均显著升高(F=4.942,P=0.010;F=4.458,P=0.016),且AG组与IG组差异无统计学意义。GATA-3、IL-4mRNA表达水平在AG组与IG组、健康对照组比较均显著降低(F=3.564,P=0.035;F=5.385,P=0.007),且健康对照组与IG组比较差异无统计学意义。③IFN-γ在AG组、IG组的表达水平与健康对照组比较均显著升高(F=7.659,P=0.001),IL-4表达水平在AG组与IG组、健康对照组比较均显著降低(F=7.099,P=0.002)。结论GA患者外周血中Th1细胞增多且伴随Th2细胞减少。提示Th1/Th2细胞比例失衡可能参与GA的炎症和免疫反应,在痛风免疫炎症反应中发挥作用。

关键词：关节炎痛风性 Th1细胞 Th2细胞 GATA-3 T-bet

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