检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2014年第7期30卷 590-594页

作者：刘巍马艳朱新辉张洁崔志明南通市人民医院关节外科 226019 新疆医科大学公共卫生教研室乌鲁木齐226019 南通大学医学院微生物学免疫教研室 226019

目的探讨LSD1的脱甲基酶活性对人外周血CD4+T细胞Th1/Th2分化格局的影响及其分子机制。方法 anti-CD3/28刺激活化人外周血CD4+T细胞48 h后,shLSD1和反苯环丙胺(TCP)抑制LSD1的表达,流式细胞术检测细胞内细胞因子IFN-γ、IL-4的表达情况... 详细信息

目的探讨LSD1的脱甲基酶活性对人外周血CD4+T细胞Th1/Th2分化格局的影响及其分子机制。方法 anti-CD3/28刺激活化人外周血CD4+T细胞48 h后,shLSD1和反苯环丙胺(TCP)抑制LSD1的表达,流式细胞术检测细胞内细胞因子IFN-γ、IL-4的表达情况;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(RQ-PCR)检测不同浓度TCP对T细胞IFN-γ、IL-4、Tbet mRNA表达的影响;Western blot观察LSD1、T-bet、STAT1和pSTAT1蛋白表达情况。结果 shLSD1和TCP组细胞IFN-γ+T细胞比例[(26.13±1.89)%和(27.01±1.18)%]明显高于对照组[(14.67±0.65)%,(P<0.05)],而IL-4+T细胞比例与对照组无显著变化(P>0.05);RT-PCR检测显示,shLSD1和TCP组IFN-γmRNA表达明显高于对照组(P<0.05),IL-4基因表达则没有改变(P>0.05);转染shLSD1或TCP处理引起T-bet、pSTAT1表达明显高于对照组(P<0.05),而STAT1表达无明显变化(P<0.05)。结论下调LSD1表达可以促进人CD4+T细胞向Th1方向分化,对Th2方向细胞无影响。其分子机制涉及T-bet/STAT1信号通路。

关键词： LSD1 反式环苯丙胺辅助性T细胞 T—bet STAT1

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肠道微生物群与精神疾病的关系

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国际生物制品学杂志 2014年第5期37卷 232-237页

作者：蔡林彬付轶群李明阳林慧周润华上海交通大学医学院免疫学与微生物学教研室 200025

肠道微生物群种类繁多,对人类健康起至关重要作用.肠道微生物群可以影响人类的神经系统、内分泌系统、免疫系统.目前发现精神疾病中的抑郁症、焦虑症、孤独症均与肠道微生物群存在相关性,这将有望为治疗相关精神疾病提供新方法.此文就... 详细信息

肠道微生物群种类繁多,对人类健康起至关重要作用.肠道微生物群可以影响人类的神经系统、内分泌系统、免疫系统.目前发现精神疾病中的抑郁症、焦虑症、孤独症均与肠道微生物群存在相关性,这将有望为治疗相关精神疾病提供新方法.此文就肠道微生物群与这3类精神疾病相关机制的研究作一综述.

关键词：肠道微生物群抑郁症焦虑孤独障碍

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HeLa细胞中Zwint-1选择剪接亚型v7的表达鉴定

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癌变．畸变．突变 2014年第2期26卷 117-122页

作者：苏景华李蕊刘俊周艳琳陈小璇代剑平王革非李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东汕头515041

目的:验证在HeLa细胞系中是否存在Zwint-1 v7选择性剪切亚型的mRNA和蛋白产物。方法:在缺失片段两侧设计引物,利用PCR和克隆测序验证HeLa细胞中是否存在缺失片段的mRNA;构建Zwint-1 v7 3′端特异区段(Z7)的GST融合表达载体pGEXKG-GST-Z7... 详细信息

目的:验证在HeLa细胞系中是否存在Zwint-1 v7选择性剪切亚型的mRNA和蛋白产物。方法:在缺失片段两侧设计引物,利用PCR和克隆测序验证HeLa细胞中是否存在缺失片段的mRNA;构建Zwint-1 v7 3′端特异区段(Z7)的GST融合表达载体pGEXKG-GST-Z7,转化入BL21菌种诱导表达,菌体经超声破碎和2 mol/L尿素洗涤纯化,融合蛋白经SDS-PAGE电泳并切胶回收后作为抗原与佐剂混合乳化并免疫C57BL/6小鼠,收获多克隆抗血清Anti-Z7,采用Dot b lot检测多克隆抗体的效价,Western blot检测HeLa细胞全蛋白中的Z7蛋白产物。结果:PCR和测序结果表明存在缺失37 bp的核酸片段;SDS-PAGE电泳显示在30.7 kDa处出现明显的蛋白条带;Dot blot结果表明1∶5 000稀释的多克隆抗体能检出12 ng GST-Z7;Western blot结果表明,1∶200稀释的多克隆抗体可识别HeLa细胞中Zwint-1 v7蛋白。结论:本研究在核酸水平和蛋白水平初步验证了HeLa细胞中存在Zwint-1 v7。

关键词： HeLa细胞 Zwint-1v7蛋白原核表达多克隆抗体制备

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医学微生物学双语教学的实践与探讨

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西北医学教育 2014年第4期22卷 758-760页

作者：娄强河南大学医学院微生物学教研室/医学与分子免疫学实验室河南开封475004

开展医学微生物学双语教学是适应高等教育发展和使我国的医学科学尽快与国际接轨的需要。本文围绕医学微生物学双语教学目的、作用、授课模式及存在的问题与对策等一系列工作进行实践与探讨,以期为提高医学微生物学双语教学质量提供参考。

关键词：双语教学医学微生物学实践

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闪光的回忆

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中国免疫学杂志 2014年第7期30卷 I0025-I0025页

作者：李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室

2013年12月我收到了杨老师她老人家的一封信，信的内容是写在《中国免疫学杂志》2013年第9期杨老师写的特稿“感谢友情，品味幸福”单页上的空白处。杨老师在信中鼓励我要“不断前进”，信中还关心我的儿子——她老人家的孙辈是否已从... 详细信息

2013年12月我收到了杨老师她老人家的一封信，信的内容是写在《中国免疫学杂志》2013年第9期杨老师写的特稿“感谢友情，品味幸福”单页上的空白处。杨老师在信中鼓励我要“不断前进”，信中还关心我的儿子——她老人家的孙辈是否已从美国学习回来？并鼓励孙儿要做一个治病救人的好医生!

关键词：《中国免疫学杂志》回忆闪光老师好医生老人

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人天然免疫分子Tetherin基因的克隆表达及其对流感病毒增殖的影响

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汕头大学医学院学报 2014年第1期27卷 16-17,42,F0002页

作者：邓玉雪李蕊张驰代剑平陈小璇王革非李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东省高校免疫病理学重点实验室广东汕头515041

目的:研究人天然免疫分子Tetherin的抗流感病毒作用。方法:从人外周血单个核细胞(PBMC)中克隆Tetherin基因并构建真核表达质粒,经限制性内切酶酶切及DNA测序鉴定后,脂质体转染法将Tetherin导入犬肾上皮细胞(MDCK),间接免疫荧光检测Tethe... 详细信息

目的:研究人天然免疫分子Tetherin的抗流感病毒作用。方法:从人外周血单个核细胞(PBMC)中克隆Tetherin基因并构建真核表达质粒,经限制性内切酶酶切及DNA测序鉴定后,脂质体转染法将Tetherin导入犬肾上皮细胞(MDCK),间接免疫荧光检测Tetherin细胞中的定位。利用流感病毒H1N1(PR8)病毒空斑形成实验检测Tetherin与流感病毒增殖的关系。结果:RT-PCR扩增出543 bp片段,成功克隆Tetherin;免疫荧光结果表明Tetherin定位于细胞膜。PR8空斑形成实验提示在转染与未转染Tetherin的MDCK中,病毒空斑没有明显形状大小或数量的区别。结论:Tetherin不能有效抑制流感病毒增殖。

关键词：天然免疫 Tetherin 流感病毒抗病毒基因克隆

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流感病毒诱导小鼠肺泡巨噬细胞极化模式及其机制研究

流感病毒诱导小鼠肺泡巨噬细胞极化模式及其机制研究

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新发传染病防治热点研讨会

作者：李康生赵向峰王革非汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东省感染病与分子免疫病理重点实验室

1.流感病毒诱导的急性肺损伤与肺泡巨噬细胞目前,全球每年约10%0%的人群感染流感病毒,其中约300万00万人会产生严重症状,并可导致大约25万0万人的死亡。流感病毒作为RNA病毒其基因组易发生突变;流感病毒具有众多的宿主,在自然界中存在... 详细信息

1.流感病毒诱导的急性肺损伤与肺泡巨噬细胞目前,全球每年约10%0%的人群感染流感病毒,其中约300万00万人会产生严重症状,并可导致大约25万0万人的死亡。流感病毒作为RNA病毒其基因组易发生突变;流感病毒具有众多的宿主,在自然界中存在着极为广阔的生存空间,促使其种间融合形成新的变异型病毒,这些因素使得流感病毒家族的基因型和表型日益丰富。抗病毒药物的使用促使流感病毒在进化过程中产

关键词：病毒诱导巨噬细胞株极化模式小鼠肺泡巨噬细胞

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H7N9型禽流感病毒NS1蛋白抑制宿主细胞免疫反应并诱导A549细胞的凋亡

H7N9型禽流感病毒NS1蛋白抑制宿主细胞免疫反应并诱导A549细胞的...

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：闫银侠杜泳溟王革非李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东省感染病与分子免疫病理重点实验室

2013年3月以来在我国东部地区暴发的H7N9高致病性禽流感病毒是一种新型重配病毒,感染致死率接近30％.甲型流感病毒在感染细胞中能够诱导凋亡,进而引起器官功能紊乱.为了研究H7N9/NS1在对抗宿主免疫反应和影响细胞凋亡中的作用,我们分别... 详细信息

2013年3月以来在我国东部地区暴发的H7N9高致病性禽流感病毒是一种新型重配病毒,感染致死率接近30％.甲型流感病毒在感染细胞中能够诱导凋亡,进而引起器官功能紊乱.为了研究H7N9/NS1在对抗宿主免疫反应和影响细胞凋亡中的作用,我们分别克隆了禽流感病毒A/chicken/Zhejiang/DTD-ZJU01/2013 (H7N9)和A/chicken/Guangdong/1/05 (H5N1)的NS1基因并构建表达载体,瞬时转染A549细胞.

关键词：流感病毒 H7N9 NS1 免疫反应细胞凋亡

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H7N9型禽流感病毒NS1蛋白抑制宿主细胞免疫反应并诱导A549细胞的凋亡

H7N9型禽流感病毒NS1蛋白抑制宿主细胞免疫反应并诱导A549细胞的...

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第九届全国免疫学学术大会

作者：闫银侠杜泳溟王革非李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东省感染病与分子免疫病理重点实验室

2013年3月以来在我国东部地区暴发的H7N9高致病性禽流感病毒是一种新型重配病毒,感染致死率接近30%。甲型流感病毒在感染细胞中能够诱导凋亡,进而引起器官功能紊乱。为了研究H7N9/NS1在对抗宿主免疫反应和影响细胞凋亡中的作用,我们分... 详细信息

2013年3月以来在我国东部地区暴发的H7N9高致病性禽流感病毒是一种新型重配病毒,感染致死率接近30%。甲型流感病毒在感染细胞中能够诱导凋亡,进而引起器官功能紊乱。为了研究H7N9/NS1在对抗宿主免疫反应和影响细胞凋亡中的作用,我们分别克隆了禽流感病毒A/chicken/Zhejiang/DTD-ZJU01/2013(H7N9)和A/chicken/Guangdong/1/05(H5N1)的NS1基因并构建表达载体,瞬时转染A549细胞。定量PCR检测结果显示H7N9/NS1与H5N1/NS1均能抑制IFN-β介导的先天性免疫反应,导致STAT1表达下调,进而抑制促炎因子CXCL10和CCL5的表达,只是H7N9/NS1对宿主细胞免疫相关基因的抑制程度不及H5N1/NS1。定量PCR结果还显示与转染空载体的对照细胞相比,H7N9/NS1表达的细胞中促凋亡基因Bak、Bad和Bid表达显著增加,同时Caspase-Glo 3/7检测结果显示H7N9/NS1能够激活两个重要的凋亡相关酶caspase 3和caspase 7的活性,并引起PARP发生剪切,这提示H7N9/NS1能够引起A549细胞的凋亡。此外,我们还用免疫荧光的方法研究了H7N9/NS1在A549细胞中的定位,H7N9/NS1在细胞质中的表达量显著多于H5N1/NS1,这可能与NS1第103和106位氨基酸种类有关。本研究揭示了H7N9/NS1能够抑制宿主免疫反应并且可以促进A549细胞的凋亡。

关键词：流感病毒 H7N9 NS1 免疫反应细胞凋亡

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H3N2型流感病毒NS1蛋白通过与核仁素相互作用引起宿主细胞的凋亡

H3N2型流感病毒NS1蛋白通过与核仁素相互作用引起宿主细胞的凋亡

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第九届全国免疫学学术大会

作者：闫银侠杜泳溟王革非李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东省感染病与分子免疫病理重点实验室

非结构蛋白1(nonstructural protein 1,NSl)是甲型流感病毒一种非常重要的多功能调控蛋白,与病毒毒力密切相关。它能够和细胞内的多种蛋白分子相互作用从而产生多种不同的生物学效应,引起宿主细胞的病变反应,其中一个重要的致病机制就... 详细信息

非结构蛋白1(nonstructural protein 1,NSl)是甲型流感病毒一种非常重要的多功能调控蛋白,与病毒毒力密切相关。它能够和细胞内的多种蛋白分子相互作用从而产生多种不同的生物学效应,引起宿主细胞的病变反应,其中一个重要的致病机制就是调节宿主细胞的凋亡。凋亡过程最初被认为是被感染的宿主细胞限制病毒复制的一种机制,然而越来越多证据显示NS1在宿主细胞凋亡中的作用具有显著的毒株差异性和细胞差异性。一些H5亚型的流感病毒NS1能够通过caspase依赖途径诱导细胞凋亡,而H1型流感病毒NS1则通过激活PI3K/Akt途径抑制细胞凋亡。本研究旨在揭示H3N2型流感病毒NS1在细胞凋亡中的作用机制。本研究中,我们从流感病毒A/Shantou/602/2006(H3N2)中克隆得到NS1基因(H3N2/NS1)并在HEK293T细胞中表达,通过测定caspase3/7活性和cleavage PRAP的表达量,我们发现H3N2/NS1能够引起HEK293T细胞的凋亡。免疫荧光显示H3N2/NS1主要在细胞核中表达并且大量定位于细胞核仁区,免疫共沉淀结果显示H3N2/NS1可以与宿主细胞核仁素相互作用,引起rRNA启动子上UCE高甲基化,染色质免疫沉淀结果显示rRNA启动子区域的高甲基化使得UCE与RNA聚合酶I的大亚单位结合减少,定量PCR检测到pre-45S rRNA的表达受到显著抑制。进一步的免疫共沉淀显示,H3N2/NS1表达的HEK293T细胞中MDM2与细胞中游离的多种核糖体核蛋白相互作用,使得p53的泛素化过程受到抑制从而引起细胞内p53的积累,进而诱导p53介导的细胞凋亡过程,引起核仁应激反应。本研究揭示了流感病毒引起细胞凋亡的一个新的途径即通过NS1蛋白与核仁素的相互作用引起p53介导的细胞凋亡过程。

关键词：流感病毒 H3N2 NS1 核仁素细胞凋亡

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