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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：闫银侠杜泳溟王革非李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东省感染病与分子免疫病理重点实验室

非结构蛋白1 (nonstructural protein 1,NS1)是甲型流感病毒一种非常重要的多功能调控蛋白,与病毒毒力密切相关.它能够和细胞内的多种蛋白分子相互作用从而产生多种不同的生物学效应,引起宿主细胞的病变反应,其中一个重要的致病机制就... 详细信息

非结构蛋白1 (nonstructural protein 1,NS1)是甲型流感病毒一种非常重要的多功能调控蛋白,与病毒毒力密切相关.它能够和细胞内的多种蛋白分子相互作用从而产生多种不同的生物学效应,引起宿主细胞的病变反应,其中一个重要的致病机制就是调节宿主细胞的凋亡.凋亡过程最初被认为是被感染的宿主细胞限制病毒复制的一种机制,然而越来越多证据显示NS1在宿主细胞凋亡中的作用具有显著的毒株差异性和细胞差异性.一些H5亚型的流感病毒NS1能够通过caspase依赖途径诱导细胞凋亡,而H1型流感病毒NS1则通过激活PI3K/Akt途径抑制细胞凋亡.本研究旨在揭示H3N2型流感病毒NS1在细胞凋亡中的作用机制.

关键词：流感病毒 H3N2 NS1 核仁素细胞凋亡

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益生菌对肠易激综合征小鼠肠道黏膜CRF-R1表达及肠道屏障功能的影响

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中国微生态学杂志 2014年第9期26卷 993-997,1001页

作者：刘思濛于泳黄煌丁一芮白利梅李付广郑鹏远郑州大学第二附属医院消化内科郑州大学医学微生态及临床营养研究所河南郑州450014 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室河南郑州450001

目的通过观察肠易激综合征（IBS）小鼠模型结肠黏膜肥大细胞上CRF-R1及结肠黏膜PAR-2、Claudin1~4等的表达变化,探讨IBS中应激通过肥大细胞引起肠道屏障功能障碍的可能机制并观察婴儿双歧杆菌的治疗作用。方法 30只雄性Balb/c小鼠随机... 详细信息

目的通过观察肠易激综合征（IBS）小鼠模型结肠黏膜肥大细胞上CRF-R1及结肠黏膜PAR-2、Claudin1~4等的表达变化,探讨IBS中应激通过肥大细胞引起肠道屏障功能障碍的可能机制并观察婴儿双歧杆菌的治疗作用。方法 30只雄性Balb/c小鼠随机分为对照组、模型组及婴儿双歧杆菌组。以束缚应激法建立IBS小鼠模型。婴儿双歧杆菌组给予婴儿双歧杆菌灌胃,而对照组及模型组给予等体积生理盐水灌胃。观测腹肌收缩反射（AWR）后处死小鼠。ELISA检测外周血中类胰蛋白酶的表达变化。免疫组织化学分析结肠黏膜CRF、PAR-2、Claudin1、Claudin2、Claudin3、Claudin4的表达情况。免疫荧光双标分析结肠黏膜CRF-R1在肥大细胞的表达情况。RT-PCR检测结肠CRF-R1mRNA的表达情况。结果与对照组相比,模型组小鼠外周血类胰蛋白酶表达量增加;结肠黏膜中CRF、PAR-2、Claudin2表达量、CRF-R1＋肥大细胞数目及CRF-R1 mRNA表达量增加,结肠黏膜Claudin1、Claudin3、Claudin4表达量降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）。婴儿双歧杆菌干预后,该组小鼠外周血中类胰蛋白酶表达量降低;结肠黏膜中CRF、PAR-2、Claudin2表达量、CRF-R1＋肥大细胞数目及CRF-R1 mRNA表达量降低,结肠黏膜Claudin1、Claudin3、Claudin4表达量增高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 IBS小鼠模型中,婴儿双歧杆菌可以减轻肠道屏障功能障碍,其机制可能与抑制结肠黏膜肥大细胞上CRF-R1的表达而抑制肥大细胞的激活及其免疫因子的释放,从而降低结肠黏膜PAR-2的表达有关。

关键词：肠易激综合征益生菌肥大细胞肠道屏障功能

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淋病奈瑟菌rmp基因缺失突变株的构建及其抗体杀菌作用研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2013年第8期33卷 578-582页

作者：李国才解如山冒艳丽刘双喜焦红梅陈红菊严华季明春扬州大学医学院微生物学与免疫学教研室 225001 菏泽医学专科学校

目的研究淋病奈瑟菌的外膜蛋白Rmp在免疫阻抑中的作用及其消除策略。方法PCR扩增淋病奈瑟菌rmp基因，将rmp中间200个核苷酸残基用卡那霉素抗性基因Kan取代，含rmp两侧侧翼区和Kan的DNA片段△rmp：Kan转化淋病奈瑟菌WHO—A菌株，PCR和Wes... 详细信息

目的研究淋病奈瑟菌的外膜蛋白Rmp在免疫阻抑中的作用及其消除策略。方法PCR扩增淋病奈瑟菌rmp基因，将rmp中间200个核苷酸残基用卡那霉素抗性基因Kan取代，含rmp两侧侧翼区和Kan的DNA片段△rmp：Kan转化淋病奈瑟菌WHO—A菌株，PCR和Westernblot鉴定野生rmp被突变基因（△rmp：：Kan）取代并不能表达Rmp的突变株。突变株免疫小鼠，并用抗体介导的补体杀菌作用研究免疫血清的抗菌活性。结果构建了珊p基因缺失的淋病奈瑟菌突变株，突变株诱生的抗体具有更强的杀伤淋病奈瑟菌活性。结论淋病奈瑟菌丌印基因缺失突变株可能消除了野生株中Rmp的免疫阻抑作用，在新型全细胞减毒活疫苗研制中具有潜在应用价值。

关键词：淋病奈瑟菌同源重组 rmp基因缺失突变株减毒活疫苗

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沙眼衣原体pORF5质粒蛋白诱发小鼠生殖道免疫损伤初步研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2013年第2期33卷 107-111页

作者：邓红玉李忠玉吴移谋周辉马康康陆春雪钟光明南华大学医学院微生物学与免疫学教研室衡阳421001 美国德州大学圣安东尼奥健康科学中心

目的研究沙眼衣原体（Ch／amyd／atrachomatis，ct）pORt5质粒蛋白对小鼠生殖道组织的免疫损伤作用，并初步探讨其损伤机制。方法表达纯化GST-pORF5融合蛋白，融合蛋白经PreScissionProtease酶切和去内毒素处理后分别在第1、3、6天接种... 详细信息

目的研究沙眼衣原体（Ch／amyd／atrachomatis，ct）pORt5质粒蛋白对小鼠生殖道组织的免疫损伤作用，并初步探讨其损伤机制。方法表达纯化GST-pORF5融合蛋白，融合蛋白经PreScissionProtease酶切和去内毒素处理后分别在第1、3、6天接种于BALB／c小鼠阴道后穹窿，第7天处死小鼠，分离小鼠生殖道组织，肉眼大体观察并进行炎症病理评分；ELISA方法检测血清、阴道灌洗液和小鼠脾细胞培养上清中的TNF-a、IL-1β和IL石细胞因子水平。结果pORF5蛋白接种组小鼠输卵管壶腹部与峡部出现不同程度的肿胀，周围结缔组织发生黏连，并出现了不同程度的扭曲与积水，而PBS和csr（谷胱甘肽S-转移酶）蛋白对照组输卵管组织未出现明显改变；同时生殖道组织炎症病理积分明显高于PBS对照组（P〈0．01）和GST对照组（P〈0．01）；pOaF5蛋白接种组小鼠脾细胞培养上清、阴道分泌物中TNF-a、IL-IB、Ib6水平均显著高于PBS和GST蛋白对照组（P〈0．05）；血清中TNF-a、IL-1B水平显著高于PBS和GST蛋白对照组（P〈0．01）。结论pOaF5蛋白能引起BAIB/c小鼠生殖道组织免疫损伤，该损伤机制可能与TNF-a、IL-115、IL石等炎症因子水平升高有关。

关键词：沙眼衣原体 pORF5质粒蛋白免疫损伤细胞因子

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热休克预处理对对乙酰氨基酚所致小鼠急性肝损伤的保护作用

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中国药理学与毒理学杂志 2013年第3期27卷 391-397页

作者：李三强杜景霞朱沙河南科技大学肝损伤与修复分子医学重点实验室河南郑州450001 河南科技大学医学院生化与分子生物学教研室河南郑州450001 河南科技大学医学院药理学教研室河南洛阳471003 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室河南郑州450001

目的探讨热休克预处理对对乙酰氨基酚(AAP)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法40℃分别热休克(HS)处理小鼠10min(HS10组)、20min(HS20组)和30min(HS30组),室温恢复8h后,小鼠ip给予AAP 550mg·kg-1诱导急性肝损伤,分别于AAP后0,6,... 详细信息

目的探讨热休克预处理对对乙酰氨基酚(AAP)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法40℃分别热休克(HS)处理小鼠10min(HS10组)、20min(HS20组)和30min(HS30组),室温恢复8h后,小鼠ip给予AAP 550mg·kg-1诱导急性肝损伤,分别于AAP后0,6,24,42和72h进行相关指标检测。赖氏法检测小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性,HE染色进行病理学分析,免疫组化法检测给予AAP后0 h,小鼠肝热休克蛋白70(HSP70),细胞色素P4501A2(CYP1A2)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,Western印迹法检测给予AAP后0,6,24,42和72h时小鼠PCNA的表达。结果与AAP对照组相比,HS20组小鼠血清中AST和ALT酶活水平显著降低(P<0.05),而HS10组和HS30组小鼠无显著差异。与AAP对照组相比,HS20显著降低了AAP诱导的小鼠肝损伤程度(P<0.05),而HS10和HS30未显著降低肝损伤的程度。HS20显著诱导了小鼠肝HSP70(P<0.01),CYP1A2(P<0.01)和PCNA(P<0.05)的表达,而HS10和HS30显著诱导了小鼠肝HSP70和CYP1A2(P<0.05)的表达,但未明显诱导PCNA的表达。与HS10和HS30相比,HS20更加显著地诱导了HSP70和CYP1A2的表达(P<0.05)。HS20组小鼠在注射AAP后0,6,24,42和72h,小鼠肝PCNA的表达均显著高于AAP对照组(P<0.05)、HS10和HS30组(P<0.05)。结论 40℃热休克预处理20min可以有效降低AAP诱导的小鼠急性肝损伤程度,加速肝损伤后的修复。

关键词：热休克对乙酰氨基酚急性肝损伤保护作用

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高通量测序筛选结核分枝杆菌耐药株差异基因

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热带医学杂志 2014年第5期14卷 547-550页

作者：李劭源张国良文玉欣毛冬婷曹开源陈心春曾谷城中山大学中山医学院微生物学教研室广东广州510080 中山大学热带病防治研究教育部重点实验室广东广州510080 广东医学院附属深圳市第三人民医院肝病研究所广东深圳518112 暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院胸外科广东深圳518020

目的比较结核分枝杆菌中敏感株、多耐药株、广泛耐药株三者间基因表达的差异,为进一步针对耐药菌株的研究提供方向。方法从深圳市第三人民医院收集敏感株、多耐药株、广泛耐药株各1株,提取菌株RNA,然后构建cDNA文库,使用Genome Analyzer... 详细信息

目的比较结核分枝杆菌中敏感株、多耐药株、广泛耐药株三者间基因表达的差异,为进一步针对耐药菌株的研究提供方向。方法从深圳市第三人民医院收集敏感株、多耐药株、广泛耐药株各1株,提取菌株RNA,然后构建cDNA文库,使用Genome Analyzer IIx高通量测序仪进行全基因组测序,经过筛选比对后得到测序结果 ,再比较3个菌株间的基因表达差异。结果高通量测序后共得到基因3 968个。将耐药株与敏感株的基因进行比较,选取表达差异高于10倍的基因,筛选得到多耐药株差异基因16个、广泛耐药株差异基因10个。这些表达差异基因大部分与毒素-抗毒素系统、PE/PPE家族蛋白、金属转运蛋白相关。还在多耐药株中发现了一系列高表达的前噬菌体基因及噬菌体整合相关的基因。结论通过高通量测序筛选得到一系列耐药株差异表达基因,为未来对耐药菌株的研究提供依据。

关键词：结核分枝杆菌耐药株高通量测序

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IL-2基因佐剂强化梅毒螺旋体外膜蛋白Tp92 DNA疫苗的免疫保护性研究

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中国病原生物学杂志 2013年第3期8卷 220-224页

作者：赵飞骏张晓红吴华曾铁兵刘双全曹训宇陈曦余坚南华大学医学院微生物学与免疫学教研室湖南衡阳421001 南华大学医学院组织学与胚胎学教研室衡阳市中心医院南华大学附属第一医院湖南省疾病预防控制中心南华大学实验动物学部

目的观察IL-2基因佐剂与梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)膜蛋白Tp92抗原编码基因DNA疫苗联合免疫新西兰兔后对Tp皮肤感染的免疫保护效果。方法将体重约3kg的新西兰兔随机分为pcDNA3.1(+)/IL-2+pcDNA3.1(+)/Tp92联合免疫组,pcDNA3.1(+... 详细信息

目的观察IL-2基因佐剂与梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)膜蛋白Tp92抗原编码基因DNA疫苗联合免疫新西兰兔后对Tp皮肤感染的免疫保护效果。方法将体重约3kg的新西兰兔随机分为pcDNA3.1(+)/IL-2+pcDNA3.1(+)/Tp92联合免疫组,pcDNA3.1(+)/Tp92免疫组,pcDNA3.1(+)空质粒组及PBS空白组共4组,每组18只,每隔2周免疫一次,共免疫3次,初次免疫后第10周进行Tp皮肤感染,观察并记录感染早期各组家兔皮损情况;ELISA检测感染后不同时间点免疫兔血清特异性抗体水平和脾细胞IL-2及IFN-γ水平;MTT法检测感染后不同时间点兔脾淋巴细胞增殖水平。结果 IL-2+Tp92DNA疫苗联合免疫组在Tp感染后0～224d期间的不同时间点均检测到高滴度的特异性IgG,与Tp92DNA疫苗组及各对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);感染后第14d联合免疫组兔脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-2水平均显著高于Tp92单独免疫组(P<0.05)及空质粒对照组和空白对照组(P<0.01),感染后不同时间点兔脾细胞均有明显增殖反应,SI值显著高于同期Tp92单独免疫组(P<0.05)及空质粒对照组和空白对照组(P<0.01)。Tp感染早期联合免疫组家兔皮损Tp阳性率为20%,溃疡病灶形成率为10%,皮损愈合时间为48d。结论 IL-2基因佐剂和Tp92DNA联合免疫能有效地诱导新西兰兔在Tp感染期间产生稳定持久保护性免疫应答,并能阻止Tp皮肤感染部位病损的发展。

关键词：梅毒螺旋体 IL-2 Tp92 联合免疫免疫保护

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心力衰竭患者Copeptin、BNP、NT-proBNP、ANP分子的检测及其临床意义

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热带病与寄生虫学 2013年第4期11卷 193-196页

作者：刘鹏蔡淑玉唐小龙安徽理工大学医学院安徽理工大学医学院微生物学与免疫学教研室

目的观察心力衰竭患者血浆和肽素（Copeptin）、ANP、BNP与NT-proBNP水平变化,探讨检测指标与心功能的关系。方法连续选择2012年3月1日;013年3月31日本院心内科收治的102例心力衰竭患者（心衰组）,根据纽约心脏协会（NYHA）心功能分级标... 详细信息

目的观察心力衰竭患者血浆和肽素（Copeptin）、ANP、BNP与NT-proBNP水平变化,探讨检测指标与心功能的关系。方法连续选择2012年3月1日;013年3月31日本院心内科收治的102例心力衰竭患者（心衰组）,根据纽约心脏协会（NYHA）心功能分级标准,分为心功能Ⅱ级31例,Ⅲ级36例,Ⅳ级35例,以同期住院心功能正常的患者50例作为对照组。所有患者均空腹抽取静脉血,采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定血清CRP;自动生化仪测定总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、空腹血糖（FPG）等相关生化指标;Copeptin、BNP、NT-proBNP与ANP等水平应用化学发光法检测;应用SPSS 13.0统计软件分析各指标间的关系。结果①心衰患者血浆Copeptin、BNP、NT-proBNP、ANP水平显著高于对照组（P<0.01）。在心衰组中,血浆Copeptin水平在心功能Ⅳ级明显高于心功能Ⅲ级患者,心功能Ⅲ级高于心功能Ⅱ级,各组间差异均有统计学意义（P<0.05）。②心衰患者血浆Copeptin与BNP、NT-proBNP、ANP呈明显正相关。结论心衰患者血浆Copeptin、BNP、NTproBNP、ANP水平随NYHA分级逐级增高,且与心衰严重程度有良好的相关性,Copeptin、BNP、NT-proBNP和ANP水平均可作为临床诊断心衰、评估心功能的敏感检测指标。

关键词：和肽素脑钠肽心力衰竭

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丹参活性成分抑制口腔纤维化药效药理研究

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汕头大学医学院学报 2013年第4期26卷 209-213页

作者：陈小璇代剑平朱丹霞万倩英王革非李卫中李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东汕头515041 马里兰大学帕克分校兽医学院

目的:研究丹参酮(Tan)-ⅡA、丹酚酸(Sal)-A、-B抑制槟榔提取物(ANE)诱导的口腔黏膜纤维化(OSF)的效应和作用机制。方法:小鼠口腔黏膜成纤维细胞(mOMF)培养,人胶原基因启动子报告质粒构建,羟脯氨酸测定,明胶酶谱分析,qRT-PCR,ELISA和West... 详细信息

目的:研究丹参酮(Tan)-ⅡA、丹酚酸(Sal)-A、-B抑制槟榔提取物(ANE)诱导的口腔黏膜纤维化(OSF)的效应和作用机制。方法:小鼠口腔黏膜成纤维细胞(mOMF)培养,人胶原基因启动子报告质粒构建,羟脯氨酸测定,明胶酶谱分析,qRT-PCR,ELISA和Western blot测定等。结果:Tan-ⅡA、Sal-A、-B可显著抑制ANE诱导的mOMF增殖和胶原沉积,抑制人胶原基因COL1A1、3A1启动子转录活性,拮抗ANE诱导的MMP-2/-9活性降低和TIMP-1/-2表达升高;抑制CTGF、TGFβ1、IL-6和TNFα的转录和释放,抑制ANE诱导的AKT、ERK MAPK和TGFβ/Smads信号通路激活。结论:Tan-ⅡA、Sal-A、-B可显著抑制ANE诱导的OSF。

关键词：丹参酮ⅡA 丹酚酸A 丹酚酸B 槟榔口腔黏膜纤维化

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布鲁菌致病特点和疫苗的研究新进展

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微生物学杂志 2013年第3期33卷 81-85页

作者：白旭华吕昌龙内蒙古民族大学医学院微生物学与免疫学教研室内蒙古通辽028000 中国医科大学免疫研究所辽宁沈阳110001

布鲁菌能够干扰宿主细胞发挥固有和适应性免疫应答,这是布鲁菌突出的致病特点。布鲁菌通过减少、修饰或隐藏病原相关分子模式,经由脂筏进入巨噬细胞后形成布氏小体,实现胞内生存复制,从而导致机体的持续性感染。深入了解布鲁菌逃避机体... 详细信息

布鲁菌能够干扰宿主细胞发挥固有和适应性免疫应答,这是布鲁菌突出的致病特点。布鲁菌通过减少、修饰或隐藏病原相关分子模式,经由脂筏进入巨噬细胞后形成布氏小体,实现胞内生存复制,从而导致机体的持续性感染。深入了解布鲁菌逃避机体免疫应答的机制有助于研制新型有效的疫苗,如DNA疫苗、重组蛋白疫苗等。

关键词：布鲁菌布鲁菌病致病机制疫苗

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