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复旦学报（医学版） 2002年第5期29卷 410-413页

作者：严英钱利生王文风复旦大学医学院微生物学教研室上海200032

目的　比较几种诊断幽门螺杆菌 (H .pylori)感染的快速检测方法 ,并探讨其临床应用价值。方法　131份胃黏膜活检标本 ,依次应用快速尿素酶试验、直接涂片镜检、聚合酶链反应 (PCR)扩增ureA基因片段等 4种方法检测H .pylori。用配对资料... 详细信息

目的　比较几种诊断幽门螺杆菌 (H .pylori)感染的快速检测方法 ,并探讨其临床应用价值。方法　131份胃黏膜活检标本 ,依次应用快速尿素酶试验、直接涂片镜检、聚合酶链反应 (PCR)扩增ureA基因片段等 4种方法检测H .pylori。用配对资料的 χ2 检验对各方法的检出阳性率进行两两比较。结果　 4种方法的检出阳性率分别为 :快速尿素酶试验 76 .6 % ,分离培养 71% ,直接涂片 4 8.1% ,PCR 78.5 %。相关 χ2 检验结果表明PCR的阳性率高于分离培养 ,但其与尿素酶试验无差别。结论　PCR的敏感性和特异性均高于其他检测方法 ;可作为H .pylori感染的可靠分子诊断方法 :快速尿素酶试验虽特异性较差 ,但其具有简便和敏感的特点 ,仍可作为常规检查H .pylori感染的初筛试验 ;直接涂片染色阳性率过低 ,一般不适合单独作为H .

关键词：幽门螺杆菌快速尿素酶试验聚合酶链反应感染诊断

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登革2型病毒调控血管内皮细胞纤溶系统相关蛋白的表达

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第7期25卷 523-528页

作者：江振友肖瑞唐小龙江丽芳暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室安徽理工大学医学院中山大学医学院微生物学教研室

目的观察登革2型病毒(DV2)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)表达组织纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)的影响. 方法应用胰酶消化分离HUVEC并进行传代培养,用生长良好的第2、3代细胞进行试验.用cell counting kit-8(CCK... 详细信息

目的观察登革2型病毒(DV2)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)表达组织纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)的影响. 方法应用胰酶消化分离HUVEC并进行传代培养,用生长良好的第2、3代细胞进行试验.用cell counting kit-8(CCK-8)测定DV2感染后细胞活性变化;发色底物法测定感染DV2组和对照组培养液中tPA、PAI-1活性;RT-PCR检测细胞内tPA和PAI-1 mRNA水平. 结果 DV2感染对细胞活力的影响与对照组相比差异无统计学意义.感染DV2组培养液中tPA活性在12～72 h显著升高(P＜0.05);DV2诱导HUVEC表达tPA mRNA的水平显著上调,12 h达到峰值,以后渐降,72 h mRNA表达水平仍高于对照组(P＜0.01).而DV2感染组培养液中PAI-1活性和PAI-1 mRNA的表达与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 DV2感染可显著上调HUVEC的tPA mRNA转录,增强内皮细胞tPA蛋白的分泌,而不影响PAI-1 mRNA的转录或改变内皮细胞PAI-1的分泌.结果提示DV2可活化但并不损伤内皮细胞,诱发内皮细胞增强表达纤溶酶原激活物而致使纤溶系统失衡,引起纤溶亢进,这可能是诱发DHF/DSS患者急性期出血、低血容量性休克等体征的主要因素之一.

关键词：登革病毒血管内皮细胞组织纤溶酶原激活物纤溶酶原激活物抑制物1 人脐静脉血管内皮细胞登革2型病毒纤溶系统纤溶酶原激活物抑制物相关蛋白 PAI-1活性

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细胞因子在登革病毒感染人皮肤成纤维细胞中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第7期25卷 583-587页

作者：江振友温筱芸暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632

目的探讨登革病毒(denguevirus,DV)对人皮肤成纤维细胞(HSF)的感染性和细胞因子在DV感染HSF中的作用。方法采用微量病毒空斑法检测登革Ⅱ型病毒(denguetype-2virus,DV2)感染HSF后病毒繁殖动态变化,间接免疫荧光法检测HSF内DV抗原。透射... 详细信息

目的探讨登革病毒(denguevirus,DV)对人皮肤成纤维细胞(HSF)的感染性和细胞因子在DV感染HSF中的作用。方法采用微量病毒空斑法检测登革Ⅱ型病毒(denguetype-2virus,DV2)感染HSF后病毒繁殖动态变化,间接免疫荧光法检测HSF内DV抗原。透射电镜观察病毒感染细胞的超微结构改变。用不同浓度的IL-6、TNF-α、GM-CSF分别作用于DV2感染HSF的不同环节(病毒吸附时和病毒吸附后),于感染后48h收集感染上清,测病毒滴度;用DV2感染HSF后,于不同时间收集感染上清,用ELISA法定量测定IL-6、TNF-α的含量。结果病毒感染后24h即可在培养上清中测出病毒,病毒滴度在48h达到高峰,以后逐渐下降。用间接免疫荧光法证明感染的HSF胞浆及胞膜上携带DV抗原。在光镜和电镜下,感染细胞均未见明显的形态和结构改变。在病毒吸附时10ng/ml浓度的IL-6能显著提高病毒产量;在病毒吸附时和吸附后100ng/ml浓度的TNF-α能抑制病毒的产量。GM-CSF对DV感染HSF无明显影响。DV感染能促进HSF分泌IL-6;对TNF-α的分泌无明显影响。结论HSF是DV的允许性细胞。HSF可能是蚊叮咬后在原位组织中首先支持DV感染的细胞之一;细胞因子在DV感染HSF的致病和免疫过程中起重要作用。

关键词：登革病毒人皮肤成纤维细胞细胞因子免疫学登革病毒感染间接免疫荧光法 GM-CSF TNF-α 超微结构改变病毒感染细胞

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登革病毒感染对人血管内皮细胞PGIS表达及PGI_2分泌的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第1期23卷 48-51页

作者：江振友肖瑞暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632

目的:研究登革病毒感染对人血管内皮细胞分泌血管活性物质前列环素(PGI2)的影响,以了解登革出血热/登革休克综合征(DHF/DSS)的发病机制。方法:用登革病毒Ⅱ型感染人脐静脉内皮细胞(HUVEC),于感染后6、12、24、48、72、96h,分别收集病毒... 详细信息

目的:研究登革病毒感染对人血管内皮细胞分泌血管活性物质前列环素(PGI2)的影响,以了解登革出血热/登革休克综合征(DHF/DSS)的发病机制。方法:用登革病毒Ⅱ型感染人脐静脉内皮细胞(HUVEC),于感染后6、12、24、48、72、96h,分别收集病毒感染的HUVEC,用RT-PCR检测细胞内前列环素合酶(PGIS)mRNA的水平;分别收集病毒感染的上清液,用放射免疫检测法测定PGI2的含量。结果:登革病毒感染可使PGISmRNA的水平增高,导致HUVEC分泌PGI2的量明显升高。在病毒感染后48、72、96h,与对照组比较HUVEC表达PGISmRNA的水平和HUVEC分泌PGI2的量明显升高(P<0.05)。结论:DV2感染可显著上调HUVEC中PGISmRNA转录及PGI2的分泌,导致登革病毒所致血管内皮细胞的功能障碍,可能与DHF/DSS的发病机制有关。

关键词：登革病毒血管内皮细胞前列环素合酶前列环素

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IL-6对血管内皮细胞活性及TFmRNA表达的影响

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四川大学学报（医学版） 2006年第2期37卷 234-237页

作者：唐小龙江振友董军刘小澄蔡淑玉肖瑞卢燕茹暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室暨南大学医学院病理生理学教研室安徽理工大学医学院暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室(广州510632)

目的研究IL-6对脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)组织因子(TF)的mRNA水平的影响。方法应用胰酶消化HUVECs并进行传代培养,用第二、三代细胞进行试验。测定IL-6(0.5ng/mL)处理前后细胞活性,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞内TFmRNA水平... 详细信息

目的研究IL-6对脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)组织因子(TF)的mRNA水平的影响。方法应用胰酶消化HUVECs并进行传代培养,用第二、三代细胞进行试验。测定IL-6(0.5ng/mL)处理前后细胞活性,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞内TFmRNA水平。结果72h内,IL-6对HUVECs的活性的影响与正常对照组相比差异无统计学意义。IL-6作用HUVECs6h即诱导TFmRNA表达,12h达到高峰,以后表达减弱,72h不能检测到mRNA;对照组TFmRNA不表达或表达极弱。结论IL-6(0.5ng/mL)对HUVECs的活性不造成直接的影响,同时在24～48h内IL-6(0.5ng/mL)可诱导HUVECsTF表达,这可能与IL-6作为前炎症因子诱导急性炎症反应时相的血液循环障碍相关。

关键词：白细胞介素-6 组织因子人脐静脉血管内皮细胞反转录聚合酶链反应

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SOCS-3基因在Balb/c小鼠脑组织中的表达与脑不对称性

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生物化学与生物物理进展 2004年第8期31卷 727-730页

作者：赵丽纯苏芸李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室汕头515031

为探讨细胞因子信号传导抑制因子 3(suppressoofcytokinesignaling 3,SOCS 3)在Balb/c小鼠皮层、海马、下丘脑中的表达及其与脑不对称性的关系 .通过伸爪取食法将Balb/c小鼠分为左利组和右利组 ,取左、右侧皮层 ,左、右侧海马及下丘脑 ,... 详细信息

为探讨细胞因子信号传导抑制因子 3(suppressoofcytokinesignaling 3,SOCS 3)在Balb/c小鼠皮层、海马、下丘脑中的表达及其与脑不对称性的关系 .通过伸爪取食法将Balb/c小鼠分为左利组和右利组 ,取左、右侧皮层 ,左、右侧海马及下丘脑 ,以RT PCR法间接测定SOCS 3mRNA水平 .结果表明 :a 在左利鼠右侧皮层中 ,SOCS 3基因表达水平显著高于左侧皮层 (P <0 0 5 ) ;右利鼠左侧皮层SOCS 3表达显著高于左利鼠左侧皮层 (P <0 0 5 ) .b 海马中SOCS 3表达 :左利鼠右侧海马SOCS 3表达显著高于左侧海马 (P <0 0 5 ) ;右利鼠左侧海马SOCS 3表达显著高于左利鼠左侧海马 (P <0 0 5 ) .c 右利鼠下丘脑中SOCS 3显著高于左利鼠 (P<0 0 5 ) .上述研究结果提示 ,Balb/c小鼠脑中SOCS

关键词： SOCS-3基因小鼠脑组织表达脑不对称神经免疫内分泌细胞因子信号传导抑制因子

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天敌应激下小鼠血浆皮质酮、巨噬细胞产生NO、IL-1β水平与脑不对称性

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生物化学与生物物理进展 2004年第9期31卷 824-828页

作者：赵丽纯苏芸李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室汕头515031

为探讨天敌应激下脑不对称性对小鼠HPA轴活性及巨噬细胞功能的影响,通过伸爪取食法将Balb/c小鼠分为左利、右利、双利组,分别暴露在鼠类天敌———猫急性应激(4 5min,1次)、慢性应激(4 5min/次,每天 1次,连续 14天)刺激后,分别用EIA法... 详细信息

为探讨天敌应激下脑不对称性对小鼠HPA轴活性及巨噬细胞功能的影响,通过伸爪取食法将Balb/c小鼠分为左利、右利、双利组,分别暴露在鼠类天敌———猫急性应激(4 5min,1次)、慢性应激(4 5min/次,每天 1次,连续 14天)刺激后,分别用EIA法、硝酸还原酶法、ELISA法测定了血浆皮质酮、腹腔巨噬细胞培养上清中一氧化氮(nitricoxide,NO)、IL 1β水平.a 血浆皮质酮水平:急性应激下,右利、双利组小鼠血浆皮质酮升高,右利组更为显著,左利组呈下降趋势,右利、双利组显著高于左利组及相应正常对照组(P <0 0 5 );慢性应激下,右利、双利组显著高于相应正常对照组,左利、双利组也显著高于急性应激下相应组(P <0 0 5 ).b NO水平:急性应激下,左利组腹腔巨噬细胞培养上清中NO无显著变化,右利、双利组呈升高趋势,右利显著高于左利(P <0 0 5);慢性应激中,三组NO水平均显著高于相应正常对照组(P <0 0 5 ).c IL 1β水平:急性应激下,左利组IL 1β水平显著低于相应正常对照组,P<0 0 5;慢性应激下,左利、双利组与正常对照组相比均有所降低,但无统计学意义(P >0 0 5),右利组则显著高于相应正常对照组(P <0 0 5 ).上述研究结果提示,小鼠在暴露于天敌———猫应激下。

关键词：天敌应激,脑不对称皮质酮一氧化氮 IL-1β

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人疱疹病毒7型被膜蛋白pp85的原核表达及应用

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第1期26卷 10-13页

作者：王笑峰孙坚萍罗兵王云青岛大学医学院微生物学教研室 266021

目的构建人疱疹病毒7型（HHV7）被膜蛋白pp85编码基因（ORF U14）的原核表达载体，并进行原核表达。方法应用HHV7标准株Glasgow感染SupT1细胞，PCR技术扩增HHV7 ORF U14基因的主要抗原决定簇编码区（328～533AA），目的基因与原核表... 详细信息

目的构建人疱疹病毒7型（HHV7）被膜蛋白pp85编码基因（ORF U14）的原核表达载体，并进行原核表达。方法应用HHV7标准株Glasgow感染SupT1细胞，PCR技术扩增HHV7 ORF U14基因的主要抗原决定簇编码区（328～533AA），目的基因与原核表达载体pThioHis A连接后，转化宿主菌*** BL21，IPTG诱导融合蛋白表达，经镍-螯合物琼脂糖树脂柱亲和层析纯化获得重组抗原。重组蛋白电泳后转至PVDF膜，与HHV7阳性血清进行免疫印迹反应。结果 DNA序列分析表明，目的基因序列与HHV7标准毒株Glasgow相应序列完全一致，SDS-PAGE可观察到相对分子质量（Mr）为35．7×10^3融合蛋白的表达，免疫印迹反应显示重组抗原具有较高的特异性。结论 HHV7重组抗原具有较好的抗原性，进一步完善后可用于HHV7抗体的检测。

关键词：人疱疹病毒7型 Western blot 被膜蛋白pp85 原核表达

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蛋白激酶C在脂多糖诱导内皮细胞β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ表达中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第3期29卷 198-203页

作者：贲志云程纯孙晓雷钱佶肖锋张冬梅季玉红南通大学医学院免疫学与微生物学教研室 226001

目的研究蛋白激酶C（PKC）对脂多糖（LPS）诱导内皮细胞β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ（β-1，4-galactosyltransferase-Ⅰ，β-1，4-GaIT-Ⅰ）表达的调节作用，以及对内皮细胞骨架结构改变及其黏附能力的影响。方法分别用PKC激动剂或几种... 详细信息

目的研究蛋白激酶C（PKC）对脂多糖（LPS）诱导内皮细胞β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ（β-1，4-galactosyltransferase-Ⅰ，β-1，4-GaIT-Ⅰ）表达的调节作用，以及对内皮细胞骨架结构改变及其黏附能力的影响。方法分别用PKC激动剂或几种不同类型的PKC抑制剂预处理人脐静脉内皮细胞（HUVECs）30rain，LPS刺激HUVECs4h后，RT-PCR、Western blot方法检测β-1，4-GaIT-Ⅰ表达变化，细胞荧光染色观察β-1，4-GaIT-Ⅰ催化的糖链表达变化及细胞骨架结构的改变，通过内皮-单核细胞黏附试验观察HUVECs黏附能力的改变。结果儿种不同类型的PKC抑制剂均能不同程度地抑制LPS刺激HUVECs引起的β-1，4-GaIT-Ⅰ表达的上调，PKC激动剂能够使上调的β-1，4-GAIT-Ⅰ的表达进-步增加；在HUVECs中β-1，4-GaIT-Ⅰ与细胞骨架有共同定位，PKC抑制剂显著抑制LPS诱导的内皮细胞骨架蛋白的重构和β-1，4-GaIT-Ⅰ细胞内的再分布；PKC抑制剂显著抑制LPS诱导的内皮-单核细胞黏附能力的上调。结论PKC可能参与调节LPS诱导的HUVECs β-1，4-GaIT-Ⅰ的表达，可能多种类型的PKC参与了这一调节过程；PKC可能通过对β-1，4-GaIT-Ⅰ的调节进而影响炎症过程中内皮细胞骨架蛋白的重构及内皮细胞与单核细胞的黏附能力。

关键词： β-1 4-半乳糖基转移酶-Ⅰ 蛋白激酶C 内皮细胞脂多糖

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钩端螺旋体L型感染与钩端螺旋体脑动脉炎的关系

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中国人兽共患病杂志 1999年第5期15卷 39-40页

作者：江振友林晨蒋惠荷罗伟中李英欣暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 蚌埠医学院临床微生物学与免疫学教研室

目的　探讨钩端螺旋体Ｌ型感染与钩体脑动脉炎发病的可能关系。方法　对７４例钩体脑动脉炎患者血液及脑脊液进行钩端螺旋体普通培养、Ｌ型培养，患者血清做显微镜凝集试验，用免疫荧光染色确定钩体Ｌ型及其原菌型。结果　钩... 详细信息

目的　探讨钩端螺旋体Ｌ型感染与钩体脑动脉炎发病的可能关系。方法　对７４例钩体脑动脉炎患者血液及脑脊液进行钩端螺旋体普通培养、Ｌ型培养，患者血清做显微镜凝集试验，用免疫荧光染色确定钩体Ｌ型及其原菌型。结果　钩体脑动脉炎患者钩体Ｌ型培养、普通培养、钩体ＭＡＴ的阳性率分别为：４７３％、１８９％、７０３％。分离出的钩体Ｌ型呈多形性。结论　钩端螺旋体Ｌ型感染与钩体脑动脉炎的发病关系密切。

关键词：钩端螺旋体病 L型脑动脉炎钩端螺旋体

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