检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2012年第8期32卷 706-710页

作者：朱翠明汪世平吴移谋高顺利余敏君陈曦中南大学湘雅医学院病原生物学系长沙410078 南华大学医学院微生物学与免疫学教研室南华大学第一附属医院儿科湖南省疾病预防控制中心

目的了解肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniace，Mp）P1蛋白第1125～1395氨基酸片段（P1C蛋白）的免疫学活性及其细胞黏附作用。方法构建用于表达重组P1C片段（rP1C）的原核表达载体pGEX6p-2／p1c，采用SDS-PAGE和Westernblot鉴定rP1C。... 详细信息

目的了解肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniace，Mp）P1蛋白第1125～1395氨基酸片段（P1C蛋白）的免疫学活性及其细胞黏附作用。方法构建用于表达重组P1C片段（rP1C）的原核表达载体pGEX6p-2／p1c，采用SDS-PAGE和Westernblot鉴定rP1C。采用基于GST的亲和层析法提纯rPIC，提纯的rPC免疫BALB／c小鼠，ELISA检测小鼠抗rP1C血清的效价。采用Westernblot检测rPIC对Mp感染患者血清的免疫反应性。采用间接免疫荧光法检测rP1C黏附HeLa细胞及其免疫血清黏附抑制作用。结果所构建的原核表达系统能有效表达相对分子质量约为66×10^3的可溶性rP1C。rP1C免疫小鼠后，其抗血清ELISA效价高达1：64000。rPIC能被Mp感染者血清及小鼠抗rPIC血清识别并与之结合。rP1C能黏附HeLa细胞，其抗血清可阻断Mp对HeLa细胞的黏附，该黏附阻断作用随抗血清浓度增高而增强。结论rP1C具有良好的免疫原性和免疫反应性及黏附细胞功能，可作为Mp疫苗及血清学检测的候选抗原。

关键词：肺炎支原体 P1蛋白片段免疫学活性黏附

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医学微生物学实验教学中大学生创新能力培养探讨

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基础医学教育 2012年第11期14卷 822-823页

作者：黄红莹许国强刘英杰娄强河南大学医学院微生物学教研室开封475004

传统的实验教学中学生往往处于被动的地位,如何提高其教学效果、提高大学生的科研创新能力是实验教学改革的目的。通过对教材内容进行重组和修订,将实验内容分解为基本技能实验、综合实验和研究型实验三个层次进行教学,提高了学生的学... 详细信息

传统的实验教学中学生往往处于被动的地位,如何提高其教学效果、提高大学生的科研创新能力是实验教学改革的目的。通过对教材内容进行重组和修订,将实验内容分解为基本技能实验、综合实验和研究型实验三个层次进行教学,提高了学生的学习积极性及科研创新能力,有利于对学生进行科学方法、科学思维及创新能力的培养。

关键词：微生物实验教学改革创新能力

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58型人乳头瘤病毒早期蛋白E7对细胞周期蛋白的调控作用研究

58型人乳头瘤病毒早期蛋白E7对细胞周期蛋白的调控作用研究

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2012全国临床微生物与感染免疫学术研讨会

作者：张魏芳赵蔚明于修平山东大学医学院微生物学教研室

目的宫颈癌是仅次于乳腺癌的女性第二大常见恶性肿瘤,而高危型人乳头瘤病毒（Human papillomavirus,HPV）感染与宫颈癌的发生高度相关。继HPV16、18之后,HPV58是亚洲地区引发宫颈癌的第三大高危型HPV型别,但与HPV16、18不同的是,目前尚... 详细信息

目的宫颈癌是仅次于乳腺癌的女性第二大常见恶性肿瘤,而高危型人乳头瘤病毒（Human papillomavirus,HPV）感染与宫颈癌的发生高度相关。继HPV16、18之后,HPV58是亚洲地区引发宫颈癌的第三大高危型HPV型别,但与HPV16、18不同的是,目前尚没有针对HPV58的疫苗,其致癌的具体机制也不甚清楚。方法以在亚洲地区流行的58型HPV E7蛋白为研究目标,利用分子克隆技术构建质粒pBabe-HPV58 E7,以原代角化上皮细胞为靶细胞,利用逆转录病毒包装系统获得表达58 E7的细胞系。研究发现HPV58 E7的表达能显著促进原代角化上皮细胞增殖,并延长原代细胞的生命周期。G1期细胞周期依赖蛋白激酶（Cyclin-dependent kinase,Cdks）是促进细胞增殖的关键,因此检测了激酶Cdk2及其催化亚基cyclin A和cyclin E的蛋白水平,结果显示58 E7表达细胞中Cdk2及cyclin A和cyclin E的表达显著上调,同时激酶活性分析证实Cdk2的活性显著升高。p53作为抑癌蛋白,其功能主要是通过激活p21实现的,p21作为细胞周期蛋白激酶抑制因子（Cyclin-dependent kinase inhibitors,CKIs）,可以抑制激酶Cdk2的活性从而阻断细胞周期的进程。检测p53和p21的蛋白表达水平,结果表明58 E7表达细胞中,p53和p21的蛋白水平显著升高,说明58 E7能逃避或者干扰p21的抑制功能,激活Cdk2,从而使细胞增殖。结果细胞周期分为1、S、G和M 4期,在各期分别存在对应的细胞周期检测点,当细胞受到紫外线照射等DNA损伤时,检测点激活,细胞周期暂时停滞,直至修复完成才进入下一时期。为了验证58 E7是否能逃避G检测点,用DNA破坏药物处理细胞,用流式细胞术进行检测,结果发现更多的对照细胞停滞在G期,进入S期的细胞减少,说明DNA损伤激活了G检测点;而58 E7表达细胞则能逃避G检测点,使更多的细胞进入S期。结论本课题的工作是国际上首次对高危型HPV58 E7致癌的分子机制进行研究,可为发现治疗性靶位或者研制治疗性疫苗提供理论基础。

关键词：人乳头瘤病毒 E7蛋白 Cdk2

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microRNA调控基因表达作用及其对病原微生物致病性的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2012年第1期32卷 91-94页

作者：李小余程东庆孙爱华严杰浙江中医药大学生命科学学院微生物学与免疫学教研室杭州310053 浙江医学高等专科学校浙江大学医学院病原生物学系 310058

微小RNA（microRNA或miRNA）是近年来新发现的一类小RNA分子。自1993年Lee等用经典的定位克隆方法在线虫（Celegans）体内发现首个microRNA（Lin4）以来，迄今已发现约16772个microRNA（miRBase数据库17版，http：／／***。／sequences），成为目前已知最大的基因表达调控家族。microRNA广泛存在于脊椎动物、果蝇、线虫、植物、细菌甚至病毒中，在进化上具有保守性，但在序列、结构、表达和功能上具有多样性。

关键词： microRNA 病原微生物表达作用调控基因致病性 microrna 基因表达调控 RNA分子

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PBL与LBL教学法相结合运用于医学微生物学教学的探索

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科技信息 2012年第33期 14-15页

作者：邵晓轶孙晓雷季玉红汪晓莺程纯南通大学医学院微生物学与免疫学教研室江苏南通226001

医学微生物学是一门重要的基础医学课程,交叉渗透于其他学科。为提高教学质量,适应当代医学教育的要求,需要探索新的教学方法。在教学实践中发现,LBL(Lecture-based learning)结合PBL(Problem-based learning)教学法在医学微生物学理论... 详细信息

医学微生物学是一门重要的基础医学课程,交叉渗透于其他学科。为提高教学质量,适应当代医学教育的要求,需要探索新的教学方法。在教学实践中发现,LBL(Lecture-based learning)结合PBL(Problem-based learning)教学法在医学微生物学理论授课中可让学生在扎实掌握基本理论的同时,激发学生学习的主动性,提高学生独立思考及分析问题能力,培养团队合作精神。

关键词：医学微生物学 LBL PBL 教学改革

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形成性评价在医学全英教学中的应用

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中国医学教育技术 2012年第1期26卷 23-25页

作者：辛岗苏芸陈小璇杨棉华李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东汕头515041

在分析现存考试评价模式的基础上,介绍了医学全英教学采用形成性评价的必要性,并对其实施过程中的有关问题进行了讨论,指出采用形成性评价不仅能客观反映学生的学习效果,更能促进学生的学习。

关键词：形成性评价医学全英教学

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流感病毒感染小鼠星形胶质细胞诱导GDNF转录水平上调

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中国热带医学 2012年第6期12卷 649-651,655页

作者：蒋治武王革非周健祥陈小璇许燕璇苏芸李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东汕头515041

目的探讨星形胶质细胞感染流感病毒后的神经保护效应,检测流感病毒H3N2和H9N2体外感染小鼠星形胶质细胞是否会诱导胶质细胞神经营养因子转录水平的改变。方法从新生小鼠大脑皮质分离培养神经胶质细胞,并进一步纯化星形胶质细胞,经纯度... 详细信息

目的探讨星形胶质细胞感染流感病毒后的神经保护效应,检测流感病毒H3N2和H9N2体外感染小鼠星形胶质细胞是否会诱导胶质细胞神经营养因子转录水平的改变。方法从新生小鼠大脑皮质分离培养神经胶质细胞,并进一步纯化星形胶质细胞,经纯度鉴定后,用感染复数为2的流感病毒H3N2和H9N2进行体外感染。在感染早期(6h)和感染中后期(24h)分别提取细胞RNA,real-time PCR检测神经营养因子转录水平的变化。结果病毒感染后的星形胶质细胞显著上调GDNF转录水平的表达,NGF,BDNF,NT-3转录水平变化不明显。H3N2和H9N2感染星形胶质细胞表达的细胞因子变化情况一致。结论流感病毒H3N2和H9N2感染星形胶质细胞可诱导神经营养因子GDNF转录水平的上调。

关键词：星形胶质细胞流感病毒神经营养因子 GDNF

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LPS预激对大脑皮质星形胶质细胞免疫功能的影响

LPS预激对大脑皮质星形胶质细胞免疫功能的影响

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第八届全国免疫学学术大会

作者：苏芸辛岗谢泽锋李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室

研究背景:在一些中枢神经系统疾病中,体内先采用小剂量LPS预处理,诱导的LPS耐受可减低脑内免疫相关的炎症反应,由此发挥一定程度的保护作用。星形胶质细胞是中枢神经系统介导免疫反应的关键细胞群之一,参与许多脑部疾病的发生发展,并表... 详细信息

研究背景:在一些中枢神经系统疾病中,体内先采用小剂量LPS预处理,诱导的LPS耐受可减低脑内免疫相关的炎症反应,由此发挥一定程度的保护作用。星形胶质细胞是中枢神经系统介导免疫反应的关键细胞群之一,参与许多脑部疾病的发生发展,并表现出多种炎性介质以及信号分子的表达改变。在体内诱导的LPS耐受现象是否也能在体外培养的大脑星形胶质细胞中诱导?其产生耐受的表现及调节机制如何?相关研究表明LPS耐受在减轻疾病炎症反应中有积极的作用,而这些问题的探讨将有助于阐明LPS耐受在脑部疾病中的细胞及分子调节机制,为LPS耐受在神经系统疾患中的实际应用提供更多有潜在价值的思路。目的:探讨星形胶质细胞中是否存在LPS耐受现象以及其功能的变化规律,如分泌某些炎性因子(HMGB-1)的改变,以及某些信号通路如PI3K/Akt通路在耐受诱导中的作用和重新调配机制。方法:体外分离纯化鉴定星形胶质细胞,采用小剂量(0.01ug/ml)预处理胶质细胞18小时后用较大剂量1ug/ml LPS再刺激24小时。分别经过CCK-8试剂盒、ELISA、免疫荧光、western blotting检测神经胶质细胞毒性作用、分泌细胞因子功能、NF-κB活性;通过ELISA、免疫荧光以及western blotting检测LPS预处理后HMGB-1的转位与蛋白表达情况,PI3K/Akt通路的活化情况;同时检测了采用PI3K/Akt抑制剂处理后LPS预激星形胶质细胞HMGB-1的变化情况。结果:1.在体外采用小剂量LPS预激星形胶质细胞,可减低这些细胞细胞毒作用,能明显下调分泌其TNF-α水平(P<0.05);而且,NF-κB激活程度下降;另外,星形胶质细胞经预激后分泌NO、IL-6的水平增加(P<0.05),出现了活化反应表现。LPS预激星形胶质细胞其HMGB-1蛋白表达及胞浆中转位增加;PI3K/Akt通路活化增强;采用LY294002先将PI3K/Akt通路抑制后,LPS预激星形胶质细胞HMGB-1蛋白表达及胞浆转位减少。结论:星形胶质细胞可以成为LPS耐受效应的靶细胞之一,但LPS预处理后,诱导靶细胞反应性降低的效应,并非是全面的抑制,不同分子有可能表现为耐受或是活化效应。LPS预刺激对神经胶质细胞中炎性因子的释放以及信号分子进行了重新调配,炎症因子HMGB-1表达和转位与PI3K/Akt通路活化情况表现一致;PI3K/Akt通路对LPS耐受诱导的效应未表现明显负向调节作用。

关键词： LPS耐受星形胶质细胞 HMGB-1 PI3K/Akt通路

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CVB3损伤HeLa细胞高尔基体结构的机制研究

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中国人兽共患病学报 2012年第6期28卷 539-543页

作者：金桂林莫冰刘发娣徐秋芳刘昕应颖赵颖洁罗军黄孝天南昌大学医学院微生物学教研室南昌330006 江西省儿童医院检验科南昌330006 上海市青浦区疾病预防控制中心上海201700 南昌大学医学院病理生理学教研室南昌330006

目的研究CVB3损伤HeLa细胞高尔基体结构的机制,为进一步探讨CVB3的致病机制奠定基础。方法采用MOI为5的CVB3感染HeLa细胞,免疫荧光双标法检测病毒感染后不同时间点VP1和GM130在细胞中的定位情况,观察细胞高尔基带的变化;同时,选择CVB3... 详细信息

目的研究CVB3损伤HeLa细胞高尔基体结构的机制,为进一步探讨CVB3的致病机制奠定基础。方法采用MOI为5的CVB3感染HeLa细胞,免疫荧光双标法检测病毒感染后不同时间点VP1和GM130在细胞中的定位情况,观察细胞高尔基带的变化;同时,选择CVB3感染后不同时间点收集细胞,Bradford法蛋白定量后,Western blot测定VP1、GM130和GRASP65蛋白的表达变化。结果正常HeLa细胞中GM130和GRASP65免疫荧光呈带状分布,高尔基体结构正常;而CVB3病毒感染HeLa细胞3h后,GM130的荧光呈现散点状分布,高尔基体结构损伤。与此同时,GM130和GRASP65蛋白表达量逐渐下降;而VP1蛋白表达量持续上升,且6h后一直维持在较高水平。结论 CVB3感染引起HeLa细胞蛋白GM130和GRASP65表达量下调,导致GM130和GRASP65荧光带弥散,高尔基带断裂,这可能是CVB3感染导致宿主细胞高尔基体结构损伤的机制之一。

关键词： CVB3 高尔基体 GM130 GRASP65 VP1

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C/EBPα基因对子宫颈癌HeLa细胞增殖和迁移能力的作用分析

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中国妇幼保健 2012年第23期27卷 3644-3646页

作者：张鑫芝王红英郑威楠刘引引康华丽李星潘泽民石河子大学新疆地方与民族高发病教育部重点实验室石河子大学医学院生物化学教研室新疆石河子832002 新疆医科大学基础医学院微生物学教研室

目的:探索CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)基因对HeLa细胞增殖和定向迁移的影响。方法:用MTT方法检测C/EBPα基因重组质粒转染组、空质粒转染组和未转染组对HeLa细胞增殖的影响。用Transwell侵袭转移模型评价He-La细胞的迁移情况。其中... 详细信息

目的:探索CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)基因对HeLa细胞增殖和定向迁移的影响。方法:用MTT方法检测C/EBPα基因重组质粒转染组、空质粒转染组和未转染组对HeLa细胞增殖的影响。用Transwell侵袭转移模型评价He-La细胞的迁移情况。其中,不同上室中分别加入C/EBPα基因重组质粒转染组、空质粒转染组和未转染组的HeLa细胞,下室中加入含20%FBS的培养基。结果:C/EBPα基因重组质粒转染组、转染空质粒组和未转染HeLa细胞组的吸光度值分别为0.21±0.01、0.24±0.01和0.24±0.02,重组质粒转染组与空质粒转染组和未转染HeLa细胞组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验发现重组质粒转染组与空质粒转染组和未转染HeLa细胞组相比,细胞迁移能力减弱,细胞穿膜数分别为12.0±2.2、39.0±3.2和39.6±2.6,重组质粒转染组与空质粒转染组和未转染HeLa细胞组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:C/EBPα基因能抑制子宫颈癌HeLa细胞的增殖和迁移能力。

关键词： C/EBPα基因 HeLa细胞增殖迁移

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