检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验和临床病毒学杂志 2002年第4期16卷 309-311页

作者：赵蔚明于修平周亚滨卞继峰贾继辉栾怡齐眉孙新六王红山东大学医学院微生物学教研室济南250012

目的　探讨优化密码对人乳头瘤病毒 6b型 (HPV 6b)基因表达及免疫原性的影响 ,为治疗性DNA疫苗的研究奠定基础。方法　设计合成含优化密码及pRB结合位点突变的HPV 6bE7(hu mE7)全长基因。测序验证无误后 ,定向克隆于pcDNA3的KpnⅠ和Eco... 详细信息

目的　探讨优化密码对人乳头瘤病毒 6b型 (HPV 6b)基因表达及免疫原性的影响 ,为治疗性DNA疫苗的研究奠定基础。方法　设计合成含优化密码及pRB结合位点突变的HPV 6bE7(hu mE7)全长基因。测序验证无误后 ,定向克隆于pcDNA3的KpnⅠ和EcoRⅠ位点 ,成功构建真核表达质粒pcDNA3 hu mE7。体外转染COS 1细胞 ,免疫荧光检测其E7蛋白表达。C57BL 6小鼠胫前肌内接种裸DNA ,观察其诱导的细胞免疫反应。结果　pcDNA3 hu mE7在COS 1细胞获得明显表达 ,表达产物主要位于细胞核中。DNA免疫结果显示 ,与含有野生型E7基因的表达质粒pcDNA3 wtE7比较 ,pcDNA3 hu mE7免疫小鼠脾细胞培养上清中IFN γ产生明显升高 ,CD8+ 和CD4 + 淋巴细胞活性增强。结论　优化密码能促进HPV 6bE7蛋白表达及DNA疫苗诱导的细胞免疫反应。

关键词：细胞免疫反应人乳头状瘤病毒 E7基因密码子 DNA疫苗免疫原性基因表达人乳头瘤病毒感染

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登革病毒感染患者血清IFN-γ和TNF-α的检测及意义

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中国人兽共患病杂志 2001年第2期17卷 19-21页

作者：江振友江丽芳方丹云郭辉玉暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 中山医科大学微生物学教研室

目的　探讨登革病毒感染患者血清IFN γ和TNF α在登革病毒感染致病中的作用。方法　应用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定广州地区 30例DV 1感染患者血清IFN γ和TNF α的水平。实验数据采用两样本均数t检验法处理。结果　 30例登革病毒感... 详细信息

目的　探讨登革病毒感染患者血清IFN γ和TNF α在登革病毒感染致病中的作用。方法　应用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定广州地区 30例DV 1感染患者血清IFN γ和TNF α的水平。实验数据采用两样本均数t检验法处理。结果　 30例登革病毒感染者血清IFN γ和TNF α水平比正常健康对照组明显增高 (P <0 .0 5、P <0 .0 1)。感染病程第一天 ,患者血清IFN γ水平开始升高 ,第二天达高峰 ,然后逐渐下降。患者血清TNF -α水平第 2天明显升高 ,第 3天达高峰 ,然后逐渐下降。结论　TNF γ和TNF α在登革病毒的致病与免疫过程中可能起重要作用。

关键词：登革病毒免疫学细胞因子 IFN-γ TNF-α

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伤寒杆菌耐药质粒pRST98介导细菌毒力的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2001年第3期21卷 302-306页

作者：黄瑞吴淑燕闻玉梅复旦大学医学院苏州大学医学院微生物学教研室 215007

目的　研究伤寒杆菌耐药质粒pRST98能否介导细菌毒力。方法　将pRST98导入鼠伤寒杆菌低毒株RIA ,经口和腹腔感染小鼠 ,测定半数致死量 (LD50 ) ;口饲细菌后检测在体内播散、繁殖及引起脏器的组织学改变 ;在体外对其进行细胞的粘附和侵... 详细信息

目的　研究伤寒杆菌耐药质粒pRST98能否介导细菌毒力。方法　将pRST98导入鼠伤寒杆菌低毒株RIA ,经口和腹腔感染小鼠 ,测定半数致死量 (LD50 ) ;口饲细菌后检测在体内播散、繁殖及引起脏器的组织学改变 ;在体外对其进行细胞的粘附和侵袭试验。分别用含pRST98的野生伤寒杆菌、消除pRST98的突变体菌株及pRST98再重新导入突变体的菌株 ,研究对人、兔及豚鼠血清杀菌的抵抗力。结果　导入pRST98的鼠伤寒杆菌口服和腹腔注射组LD50 比阴性对照分别降低约 70 0倍和75倍 ;在小鼠肠系膜淋巴结、脾和肝脏内增殖 (P <0 .0 5 )并引起脏器严重病变 ;但在体外不影响鼠伤寒杆菌对HEp 2、CHO和HeLa细胞的粘附和侵袭。携带pRST98的伤寒杆菌在血清中的抵抗力显著高于无此质粒的菌株 (P <0 .0 5 )。结论　伤寒杆菌耐药质粒pRST98不但介导对药物的抗性 ,同时还能使宿主菌的毒力增强。

关键词：伤寒杆菌耐药质粒细菌毒力 pRST98 抗生素

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小鼠血浆TNF-α、NO、NOS水平与脑不对称的关系

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生理学报 2002年第6期54卷 513-518页

作者：付清玲李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室汕头515031

研究脑不对称对单核巨噬细胞 (Mo/MФ)的影响。选用雌性 4周龄Balb/c健康小鼠 ,用伸爪取食法根据右利分将小鼠区分为左利、右利和双利三组。细菌脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)腹腔注射两小时后取血浆检测肿瘤坏死因子 α(TNF α)... 详细信息

研究脑不对称对单核巨噬细胞 (Mo/MФ)的影响。选用雌性 4周龄Balb/c健康小鼠 ,用伸爪取食法根据右利分将小鼠区分为左利、右利和双利三组。细菌脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)腹腔注射两小时后取血浆检测肿瘤坏死因子 α(TNF α)、一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)水平。结果显示 :( 1)各组间血浆TNF α和NO、NOS水平的变化 :正常生理组NO水平为双利组高于左利组 (P <0 0 5 ) ;LPS刺激后双利组和右利组血浆TNF α水平高于左利组 (P <0 0 5 ) ,NO水平为双利组高于右利组 (P <0 0 1)和左利组 (P <0 0 5 ) ,NOS水平在三组小鼠间无明显差别。 ( 2 )血浆TNF α、NO、NOS与右利分有一定的相关关系 ,各项指标随右利分的变化趋势多为双利>右利和左利 ,形成一以双利分段 (右利分为 2 1～ 2 9)为高峰的弓形向上的曲线 ,随右利分的增加或减少曲线向两侧延伸和下降。上述结果提示 ,脑不对称小鼠单核 /巨噬细胞功能存在差异。脑不对称对免疫功能的影响程度与右利分有关。

关键词：小鼠血浆TNF-α NO NOS 脑不对称关系免疫调控肿瘤坏死因子α 一氧化氮一氧化氮合酶巨噬细胞

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影响裸鼠实验性矽结节形成过程的免疫因素分析

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中国病理生理杂志 1997年第6期13卷 610-610,664页

作者：林晨司徒锐王惠华廖剑辉暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 暨南大学医学院病理学教研室广州510632

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HCV-C蛋白抗原在人肝细胞株中的表达和鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第4期22卷 423-426页

作者：李君武许小亮李科暨南大学医学院微生物与免疫学教研室广东广州510632

目的:构建HCV-C蛋白基因的真核表达载体,并在正常人肝细胞HL-7702中表达与鉴定。方法:从含有丙肝病毒全长基因的重组质粒pBRTM/HCV1-3011质粒中,扩增HCVcore基因片段,构建pcDNA3.1(-)/core重组真核表达质粒。然后采用阳离子多聚体将其... 详细信息

目的:构建HCV-C蛋白基因的真核表达载体,并在正常人肝细胞HL-7702中表达与鉴定。方法:从含有丙肝病毒全长基因的重组质粒pBRTM/HCV1-3011质粒中,扩增HCVcore基因片段,构建pcDNA3.1(-)/core重组真核表达质粒。然后采用阳离子多聚体将其转染人正常肝细胞HL-7702,用免疫组化染色(SP)法检测HCVC蛋白的表达,并通过Westernblot进行鉴定。结果:所克隆的HCV-C基因片段的大小为573bp,序列正确。成功地构建了pcDNA3.1(-)/core重组表达质粒。以其转染HL-7702细胞后,用SP免疫组化染色法检测到了C蛋白的表达。Westernblot显示,其相对分子质量(Mr)约为21000。结论:构建的真核表达载体pcD-NA3.1(-)/core在人肝细胞中能有效表达HCV-C蛋白,为以后相应抗体的制备打下了基础。

关键词： HCV C蛋白真核表达

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HCMV pp150抗原基因在蚕豆中的遗传转化及鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第12期27卷 1150-1154页

作者：严华李国才焦红梅陈红菊扬州大学医学院微生物学和免疫学教研室 225001

目的研制人巨细胞病毒(HCMV)口服疫苗。方法根据HCMV基质磷蛋白PP150基因序列设计引物,PCR法从HCMV AD169株基因组DNA中扩增出编码PP150抗原决定簇区域的基因片段。将Kozak序列插入pp150基因的起始密码子的上游,3′端引入了内质网滞留信... 详细信息

目的研制人巨细胞病毒(HCMV)口服疫苗。方法根据HCMV基质磷蛋白PP150基因序列设计引物,PCR法从HCMV AD169株基因组DNA中扩增出编码PP150抗原决定簇区域的基因片段。将Kozak序列插入pp150基因的起始密码子的上游,3′端引入了内质网滞留信号KDEL序列,将修饰后的基因片段克隆进载体pBI121,构建了带潮霉素(Hyg)选择抗性基因的植物表达载体pCAM- BIA1300/pp150和根癌农杆菌工程菌EHA105;采用叶盘法转化蚕豆,获得了5株抗性植株,通过PCR、Southern blot和RNA dot blot分析鉴定,确认了3株为转基因植株。通过ELISA和Western blot对这3株的蛋白萃取物进行分析,以鉴定其免疫学活性。结果这3株转基因植株表达的PP150蛋白具有免疫原活性。结论这些转基因植株为HCMV口服疫苗的研究提供了条件。

关键词：人巨细胞病毒 pp150 口服疫苗转基因蚕豆

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D3细胞的制备及其对几种病原体的敏感性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第4期26卷 343-347页

作者：严华李国才陈红菊龚卫娟季明春扬州大学医学院微生物学和免疫学教研室 225001

目的制备基因转染(D3)细胞并测定能引起先天性感染的几种病原体的敏感性。方法HEP-2细胞的DNA转染人胚肺细胞(HEL),得到基因转染细胞,命名为D3细胞。分析D3细胞的核型。研究丹参对D3细胞促增殖作用和丹参对病原体不同的促增殖作用。普... 详细信息

目的制备基因转染(D3)细胞并测定能引起先天性感染的几种病原体的敏感性。方法HEP-2细胞的DNA转染人胚肺细胞(HEL),得到基因转染细胞,命名为D3细胞。分析D3细胞的核型。研究丹参对D3细胞促增殖作用和丹参对病原体不同的促增殖作用。普通显微镜观察病原体感染D3细胞后的细胞病变。免疫荧光试验研究D3细胞对病原体的敏感性。电子显微镜观察由D3 细胞培养物纯化的病原体形态。在酶联免疫吸附试验(ELISA)中,分别纯化病原体制作抗原,检测 1196份孕妇血清特异性抗体(IgG、IgM)。结果传代5-100代的D3细胞的染色体数均是96。丹参 (SMB,100 μg／ml)对D3细胞和病原体有明显的促增殖作用。D3细胞感染病原体后72 h,均出现明显的细胞病变效应(CPE)和荧光阳性细胞。电镜下见到了病原体典型的形态。结论永生性的D3细胞可用于培养病原体,所培养的病原体可制备用于诊断的抗原。

关键词：先天性感染 DNA转染 HEL HEP-2 丹参

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用聚合酶链反应检测食管癌组织中人乳头瘤病毒DNA

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中华实验和临床病毒学杂志 1997年第2期11卷 150-152页

作者：庄坚余秀葵董菁黎妙娟汕头大学医学院微生物学教研室

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对汕头市区６８例食管癌的石蜡包埋标本进行人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ序列检测，结果显示，ＨＰＶＤＮＡ总阳性率为６６．１８％（４５／６８），检出型别主要为ＨＰＶ６、１１、１６，检出率分别为... 详细信息

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对汕头市区６８例食管癌的石蜡包埋标本进行人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ序列检测，结果显示，ＨＰＶＤＮＡ总阳性率为６６．１８％（４５／６８），检出型别主要为ＨＰＶ６、１１、１６，检出率分别为２７．９４％、３６．７６％和２７．９４％，经统计学处理三型间无显著性差异；ＨＰＶ－１８及未定型别各占８．８２％。值得注意的是ＨＰＶ感染中多重感染占阳性病例的５３．３３％（２４／４５）。初步结果表明，汕头市食管癌高发区有较高的ＨＰＶ感染率，此与食管癌的发生，可能有密切关系。

关键词：乳头状瘤病毒食管肿瘤病毒学聚合酶链反应

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应用抑制性消减杂交技术分析淋球菌染色体介导的耐药相关核苷酸序列

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第5期23卷 388-392页

作者：季明春陈红菊严华申厚凤扬州大学医学院微生物学及免疫学教研室 225001

目的　克隆耐药性淋病奈瑟球菌菌株与标准参考菌株之间的差异核苷酸序列。方法应用抑制性消减杂交技术构建耐药性淋球菌与标准参考菌株差异DNA消减文库。结果　成功地构建了高特异性的淋球菌耐药菌株DNA消减文库。经对消减文库初步筛选 ... 详细信息

目的　克隆耐药性淋病奈瑟球菌菌株与标准参考菌株之间的差异核苷酸序列。方法应用抑制性消减杂交技术构建耐药性淋球菌与标准参考菌株差异DNA消减文库。结果　成功地构建了高特异性的淋球菌耐药菌株DNA消减文库。经对消减文库初步筛选 ,对其中 5个克隆插入的DNA片段进行测序 ,经GenBank和淋球菌基因组序列库检索分析 ,证明 5个片段均为未知新序列。结论　淋球菌耐药性相关核苷酸序列的发现将为防治淋球菌感染和研究抗淋球菌抗生素提供新的实验工具。

关键词：淋球菌核苷酸序列耐药性抗生素抑制性消减杂交技术

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