检索结果-内蒙古大学图书馆

青岛大学医学院学报 2011年第5期47卷 413-415页

作者：扈新花陈维忠许成芳吴仕杰罗兵青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266021 莒县中医医院检验科莒县人民医院城阳分院

目的了解医院重症监护病房（ICU）产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药性及β-内酰胺酶基因型分布特点。方法采用BD Phoenix 100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,聚合酶链反应检测β-内酰胺类耐药相关基因,包括... 详细信息

目的了解医院重症监护病房（ICU）产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药性及β-内酰胺酶基因型分布特点。方法采用BD Phoenix 100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,聚合酶链反应检测β-内酰胺类耐药相关基因,包括TEM、CTX-M-1群、DHA、SHV、oprD2、GES、OXA和VIM。结果 51株产ESBLs大肠埃希菌呈现多重耐药,对亚胺培南、哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星的耐药率分别为2.0%、8.0%和11.8%,其余14种抗生素的耐药率为54.9%~100.0%。51株产ESBLs大肠埃希菌共检出TEM、CTX-M-1群、SHV和oprD2等4种β-内酰胺酶基因,其阳性率分别为76.50%、37.3%、5.9%和31.4%。结论 ICU分离的产ESBLs大肠埃希菌多重耐药严重,携带的β-内酰胺酶基因以TEM为主。

关键词：重症监护病房大肠埃希菌耐药基因 β内酰胺酶类

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重组腺病毒Ad5-RbAp48调控HPV感染的宫颈癌放射敏感性的研究

重组腺病毒Ad5-RbAp48调控HPV感染的宫颈癌放射敏感性的研究

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第九届全国病毒学学术研讨会

作者：郑琳魏凡华王红唐伟齐眉程玉峰于修平赵蔚明山东大学医学院微生物学教研室济南250012 山东大学齐鲁医院肿瘤防治中心济南250012

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人胸腺和脐血造血干/祖细胞联合移植对裸鼠细胞免疫功能的影响(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2011年第23期15卷 4199-4202页

作者：赵庆杰李倩如杜英张清勇李国喜胡祥郑州大学医学院基础医学院微生物学与免疫学教研室河南省郑州市450001 郑州人民医院中心实验室河南省郑州市450000 郑州大学第二附属医院胸外科河南省郑州市450014 深圳市北科细胞工程研究所广东省深圳市518000

背景:T细胞在抗感染、抗肿瘤和免疫调节等中起重要作用,但T细胞分化发育机制尚未完全阐明。目的:观察人胸腺、人脐血联合移植后裸鼠体内T细胞分布及免疫功能的重建。方法:Balb/cnu/nu裸鼠30只,随机分为2组:实验组肾被膜下移植胸腺组织,... 详细信息

背景:T细胞在抗感染、抗肿瘤和免疫调节等中起重要作用,但T细胞分化发育机制尚未完全阐明。目的:观察人胸腺、人脐血联合移植后裸鼠体内T细胞分布及免疫功能的重建。方法:Balb/cnu/nu裸鼠30只,随机分为2组:实验组肾被膜下移植胸腺组织,2周后将新鲜分离的脐血CD34+细胞悬液经小鼠静脉输入,对照组不经胸腺移植直接给予CD34+细胞移植,两组小鼠饲养至60d时检测免疫功能。结果与结论:人胸腺在裸鼠肾被膜下存活并且表达CD3、HLA-DR分子,胸腺与CD34+细胞联合移植组小鼠脾脏可见点块状分布的CD3+细胞。实验组CD3+细胞、CD4+细胞、CD8+细胞及CD4+CD25+细胞比例均显著高于对照组。实验组裸鼠对移植人胃癌BGC823细胞有排斥作用,而对照组没有。结果显示胸腺和CD34+细胞联合移植能使裸鼠获得T细胞介导的细胞免疫功能,具有抗肿瘤能力。

关键词：胸腺脐血裸鼠细胞免疫造血干细胞

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EB病毒早期基因BHRF1转基因模型鼠的建立

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青岛大学医学院学报 2011年第1期47卷 14-17,22页

作者：李欣贾玉平王笑峰王云罗兵青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266021 上海市松江区疾病预防控制中心

目的构建稳定表达EB病毒早期基因BHRF1蛋白的重组载体,通过显微注射法建立BHRF1转基因鼠模型。方法自EBV阳性细胞系B95-8提取总RNA,应用RT-PCR扩增BHRF1基因,然后与pcDNA3.1(+)连接,构建pcDNA3.1-BHRF1重组载体。重组载体用NruⅠ和Dra... 详细信息

目的构建稳定表达EB病毒早期基因BHRF1蛋白的重组载体,通过显微注射法建立BHRF1转基因鼠模型。方法自EBV阳性细胞系B95-8提取总RNA,应用RT-PCR扩增BHRF1基因,然后与pcDNA3.1(+)连接,构建pcDNA3.1-BHRF1重组载体。重组载体用NruⅠ和DraⅢ双酶切,电泳后纯化回收长约2000 bp的目的片段溶于显微注射缓冲液。从超排小鼠取健康受精卵,通过显微注射技术,将纯化的CMV+BHRF1+polyA DNA片段注射入小鼠受精卵,短暂培养后选择健康受精卵移入假孕母鼠输卵管内。采用PCR检测子鼠鼠尾组织DNA,鉴定筛选BHRF1阳性首建鼠。结果经PCR、限制性内切酶鉴定及测序证实pcDNA3.1-BHRF1重组载体构建成功,DraⅢ和NruⅠ双酶切获得长约2 000 bp的CMV+BHRF1+polyA DNA片段。自18只见栓超排小鼠获取健康受精卵480枚,分别注入纯化的目的片段,经短暂培养后390枚受精卵仍健康,移入14只假孕母鼠输卵管内,11只受孕,产下74只子鼠。PCR检测子鼠鼠尾DNA获得16只阳性首建鼠,阳性率为21.6%(16/74)。结论本实验首次建立了BHRF1转基因鼠模型,为深入研究BHRF1的生物学特性及其在EBV相关肿瘤发生发展中的作用提供了理想的动物模型。

关键词：疱疹病毒4型,人早期基因BHRF1 小鼠,转基因

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嗜麦芽寡养单胞菌蛋白酶纤溶活性及其机制的研究

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医学研究生学报 2011年第2期24卷 135-138页

作者：毕春霞宋广辉闫志勇辛晓妮罗玮王斌青岛大学医学院附属市立医院(青岛市立医院)检验科青岛266071 青岛大学医学院附属医院检验科青岛266003 青岛大学医学院微生物学教研室青岛266071

目的自双齿围沙蚕消化道内分离得到1株嗜麦芽寡养单胞菌,前期研究发现该菌株可大量胞外分泌一种具有纤溶活性的蛋白酶。文中旨在观察嗜麦芽寡养单胞菌蛋白酶(***,SMP)在体内外的纤维蛋白溶解活性,并探讨其纤溶机制。方法试管凝块法和纤... 详细信息

目的自双齿围沙蚕消化道内分离得到1株嗜麦芽寡养单胞菌,前期研究发现该菌株可大量胞外分泌一种具有纤溶活性的蛋白酶。文中旨在观察嗜麦芽寡养单胞菌蛋白酶(***,SMP)在体内外的纤维蛋白溶解活性,并探讨其纤溶机制。方法试管凝块法和纤维蛋白平板法体外观察SMP对纤维蛋白和纤维蛋白原的溶解作用,计算其比活性;建立SD大鼠动-静脉旁路血栓模型,分别给予不同剂量的SMP、等渗盐水和蚓激酶,观察各组血栓重量及表面情况,检测血浆优球蛋白溶解时间(euglobulin lysis time,ELT)、纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)、纤维蛋白降解产物(fibrin degradation prod-uct,FDP)和D-二聚体等指标,并比较血浆中组织型纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,t-PA)和血浆纤溶酶原激活物抑制物-1(plasminogen activator inhibitor type-1,PAI-1)的变化。结果 SMP同时具有溶解纤维蛋白原和纤维蛋白的活性,且活性呈一定的量效关系;SMP不依赖纤溶酶原的激活而直接溶解纤维蛋白,并可在动物体内迅速发挥溶栓活性,溶解已经形成的血栓;其溶栓活性发挥不依赖t-PA,也不抑制PAI-1的活性。结论 SMP具有良好的溶栓活性,有望开发成为一种新型的溶栓药物。

关键词：嗜麦芽寡养单胞菌蛋白酶纤溶活性溶栓

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甲型流感病毒核蛋白的表达与鉴定及其B细胞表位的预测

甲型流感病毒核蛋白的表达与鉴定及其B细胞表位的预测

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第二届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学三江论坛

作者：刘冯欢张菁王欢左斌李婉宜王保宁李明远李燕四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都中医药大学医学技术学院

目的:构建甲型流感病毒核蛋白(nucleoprotein,NP)的原核表达表达载体,诱导NP融合蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定;预测人NP蛋白的B细胞抗原表位。方法:以pcDNA3.1(+)/NP为模板,利用PCR方法扩增目的片段NP,再将此片段插入原核表达载体pET32... 详细信息

目的:构建甲型流感病毒核蛋白(nucleoprotein,NP)的原核表达表达载体,诱导NP融合蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定;预测人NP蛋白的B细胞抗原表位。方法:以pcDNA3.1(+)/NP为模板,利用PCR方法扩增目的片段NP,再将此片段插入原核表达载体pET32a(+),并进行PCR鉴定、酶切鉴定和测序鉴定,将鉴定正确的质粒转入表达菌Rosetta-gami(2)中,用异丙基-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白的表达,用SDS-PAGE和Western Blot检测表达产物。按Chou-Fasman和Gami er-Robson方法预测其编码蛋白的二级结构,采用Karplns-Schulz方法预测蛋白骨架区的柔韧性;用KyteDoolittle方法预测其亲水性、Emini方法预测蛋白质表面可能性及Jameson-Wolf方法预测抗原性指数。结果:成功构建了流感病毒核蛋白(NP)的原核表达载体,经SDSPAGE检测NP蛋白得到了表达,Western Blot证明表达的重组蛋白具有免疫活性。在蛋白质第6-11、79-91、241-248和319-326区段附近很可能为B细胞表位优势区域。结论:流感病毒核蛋白的表达及B细胞表位的预测为流感病毒的快速诊断试剂的研发工作提供了基础。

关键词：甲型流感病毒核蛋白细胞表位流感病毒

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医院内铜绿假单胞菌耐药基因分布特点的研究

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青岛大学医学院学报 2011年第3期47卷 216-218页

作者：李岩岩晁艳李慧何宏曲彦青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266021 淄博市中心医院检验科青岛大学医学院附属医院检验科青岛大学医学院附属青岛市市立医院

目的分析山东省两所三级甲等医院铜绿假单胞菌药物敏感性以及耐药基因分布特点。方法采用ATB系统进行细菌分离鉴定及药物敏感试验;聚合酶链反应检测三类耐药基因分布情况。结果 A医院菌株对哌拉西林-他唑巴坦和亚胺培南耐药性较高,B医... 详细信息

目的分析山东省两所三级甲等医院铜绿假单胞菌药物敏感性以及耐药基因分布特点。方法采用ATB系统进行细菌分离鉴定及药物敏感试验;聚合酶链反应检测三类耐药基因分布情况。结果 A医院菌株对哌拉西林-他唑巴坦和亚胺培南耐药性较高,B医院菌株对阿米卡星和妥布霉素耐药性较高。两所医院铜绿假单胞菌aac（3）-Ⅱa、ac（6′）-Ⅰa、ac（6′）-Ⅱ和parC耐药基因检出率差异有显著性（χ2=7.57~10.27,P〈0.05）;oprD2耐药基因缺失率均较高,差异无显著性（P〉0.05）。黏液型和非黏液型菌株耐药基因检出率差异无显著性（P〉0.05）。结论不同医院铜绿假单胞菌临床分离菌株均表现出多重耐药,但其耐药基因分布以及耐药情况有所不同。

关键词：假单胞菌感染抗药性,细菌基因,细菌微生物敏感性试验

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EGFR激活对头颈部鳞癌细胞SCC10A抗失巢凋亡的影响

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中南医学科学杂志 2011年第4期39卷 376-379页

作者：左建宏吕冬李金成南华大学医学院微生物学与免疫学教研室湖南衡阳421001 中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室邵阳医学高等专科学校

目的探讨表皮生长因子(EGF)对头颈部鳞癌细胞SCC10A失巢凋亡的影响及其机理。方法运用悬浮诱导凋亡试验检测EGF受体(EGFR)激活后对头颈部鳞癌细胞SCC10A抗失巢凋亡能力的影响;Real-time PCR和West blotting检测Bcl-2和Bcl-xl表达情况。... 详细信息

目的探讨表皮生长因子(EGF)对头颈部鳞癌细胞SCC10A失巢凋亡的影响及其机理。方法运用悬浮诱导凋亡试验检测EGF受体(EGFR)激活后对头颈部鳞癌细胞SCC10A抗失巢凋亡能力的影响;Real-time PCR和West blotting检测Bcl-2和Bcl-xl表达情况。结果 EGFR激活后提高了头颈部鳞癌细胞SCC10A抗失巢凋亡的能力;诱导了Bcl-2和Bcl-xl的表达。结论 EGF能提高头颈部鳞癌细胞SCC10A抗失巢凋亡能力。

关键词：表皮生长因子受体肿瘤微环境头颈部鳞癌细胞失巢凋亡

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CVB3 VP1基因真核质粒的构建及其表达

CVB3 VP1基因真核质粒的构建及其表达

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第九届全国病毒学学术研讨会

作者：刘昕赵颖洁徐秋芳刘发娣金桂林莫冰应颖罗军黄孝天南昌大学医学院微生物学教研室南昌330006 上海市青浦区疾病预防控制中心上海201700 江西省儿童医院检验科南昌330006 南昌大学医学院病理生理学教研室南昌330006

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CVB3损伤Hela细胞高尔基体结构的机制研究

CVB3损伤Hela细胞高尔基体结构的机制研究

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第九届全国病毒学学术研讨会

作者：金桂林莫冰刘发娣徐秋芳刘昕应颖赵颖洁罗军黄孝天南昌大学医学院微生物学教研室南昌330006 江西省儿童医院检验科南昌330006 上海市青浦区疾病预防控制中心上海201700 南昌大学医学院病理生理学教研室南昌 330006

目的研究CVB3损伤Hela细胞高尔基体结构的机制,为进一步探讨CVB3的致病机制奠定基础。方法采用MOI为5的CVB3感染Hela细胞,免疫荧光双标法检测病毒感染后不同时间点VP1和GM130在细胞中的定位情况,观察细胞高尔基带的变化;同时,选择CVB... 详细信息

目的研究CVB3损伤Hela细胞高尔基体结构的机制,为进一步探讨CVB3的致病机制奠定基础。方法采用MOI为5的CVB3感染Hela细胞,免疫荧光双标法检测病毒感染后不同时间点VP1和GM130在细胞中的定位情况,观察细胞高尔基带的变化;同时,选择CVB3感染后不同时间点收集细胞,Bradford法蛋白定量后,Western blot测定VP1、GM130和GRASP65蛋白的表达变化。结果正常Hela细胞中GM130和GRASP65免疫荧光呈带状分布,高尔基体结构正常;而CVB3病毒感染Hela细胞3h后,GM130的荧光呈现散点状分布,高尔基体结构损伤。与此同时,GM130和GRASP65蛋白表达量逐渐下降;而VP1蛋白表达量持续上升,且6h后一直维持在较高水平。结论 CVB3感染引起Hela细胞蛋白GM130和GRASP65表达量下调,导致GM130和GRASP65荧光带弥散,高尔基带断裂,这可能是CVB3感染导致宿主细胞高尔基体结构损伤的机制之一。

关键词： CVB3 高尔基体 GM130 GRASP65 VP1

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