检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2004年第10期24卷 807-811页

作者：曾焱华吴移谋余敏君朱翠明曾铁兵刘安元南华大学医学院微生物学与免疫学教研室衡阳421001

目的　了解穿透支原体潜在的致病性和穿透支原体脂质相关膜蛋白诱导小鼠巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶 (iNOS)的分子机制。方法　用从穿透支原体提取的脂质相关膜蛋白刺激小鼠巨噬细胞 ,以RT PCR和Westernblot等方法分析诱导性一氧化... 详细信息

目的　了解穿透支原体潜在的致病性和穿透支原体脂质相关膜蛋白诱导小鼠巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶 (iNOS)的分子机制。方法　用从穿透支原体提取的脂质相关膜蛋白刺激小鼠巨噬细胞 ,以RT PCR和Westernblot等方法分析诱导性一氧化氮合酶的表达和NO的产生。用间接免疫荧光和Westernblot检测经穿透支原体脂质相关膜蛋白处理的小鼠巨噬细胞中NF κB的激活和NF κB抑制剂PDTC(吡咯啉烷二甲基硫脲 )对iNOS的表达和NO产生的影响。结果　穿透支原体脂质相关膜蛋白以时间和剂量依赖方式刺激小鼠巨噬细胞产生NO ,且能激活NF κB诱导巨噬细胞表达i NOS的mRNA和蛋白 ,其mRNA和蛋白的表达水平能被PDTC所抑制。结论　由于穿透支原体脂质相关膜蛋白能通过激活NF κB诱导巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶 ,因而可能是一个重要的致病因素。

关键词：巨噬细胞支原体脂质表达小鼠一氧化氮合酶膜蛋白 RNA 体脂 NF-κB

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促进乳头状瘤病毒L1蛋白表达和DNA疫苗免疫效应的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第6期26卷 516-520页

作者：王红赵蔚明齐眉周亚滨栾怡程轶喆于修平山东大学医学院医学微生物学教研室济南250012

目的探讨促进乳头状瘤病毒(PV)晚期基因L1的蛋白表达和DNA疫苗免疫效应的途径及可能的机制。方法分别将含人源化优化密码BPVL1-GFP融合基因(HL1-GFP)和野生型BPVL1-GFP融合基因(WL1-GFP)的真核表达质粒体外单独转染或与tRNAser真核表达... 详细信息

目的探讨促进乳头状瘤病毒(PV)晚期基因L1的蛋白表达和DNA疫苗免疫效应的途径及可能的机制。方法分别将含人源化优化密码BPVL1-GFP融合基因(HL1-GFP)和野生型BPVL1-GFP融合基因(WL1-GFP)的真核表达质粒体外单独转染或与tRNAser真核表达质粒共转染人角质形成细胞HaCAT,荧光显微镜及Western blot方法观察L1-GFP融合蛋白的瞬时表达情况。半定量RT-PCR分析不同PV L1基因mRNA的表达。BALB／c小鼠股四头肌内分别接种野生型、优化密码L1 DNA疫苗,同时将L1 DNA疫苗与tRNAser真核表达质粒混合后接种小鼠,观察诱导产生的体液免疫反应。结果野生型WL1-GFP融合基因在HaCAT细胞中未能有效表达,优化密码HL1-GFP基因在HaCAT细胞中的蛋白表达水平明显增强;但两者在mRNA水平差异无统计学意义。WL1-GFP与tRNAser真核表达质粒共转染细胞中L1蛋白的表达较单独转染WL1-GFP基因时增强。动物DNA免疫结果表明,优化密码HL1 DNA疫苗接种可使小鼠特异性L1中和抗体水平明显升高;而野生型WL1 DNA疫苗接种组小鼠仅产生低滴度的L1抗体,WL1 DNA疫苗与tRNAser真核表达质粒混合接种使小鼠的L1抗体水平增加。结论优化密码能显著促进乳头状瘤病毒晚期基因L1在哺乳动物细胞中的表达和DNA疫苗的免疫反应;补充外源tRNAser基因能够提高野生型L1基因的蛋白表达和DNA疫苗诱导的体液免疫应答。

关键词：乳头状瘤病毒 L1基因 tRNA 蛋白表达 DNA免疫

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幽门螺杆菌CagA基因及其与致病性关系的研究进展

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中国人兽共患病杂志 1999年第4期15卷 98-100页

作者：叶少菁方平楚浙江大学医学院微生物学教研室

自本世纪８０年代初，Ｗａｒｒｅｎ和Ｍａｒｓｈａｌ［１，２］最先从胃炎及胃溃疡患者的胃粘膜活检标本中发现并分离到幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，ＨＰ）以来，开创了感染与胃部疾病发生有关的新领域。随后，... 详细信息

自本世纪８０年代初，Ｗａｒｒｅｎ和Ｍａｒｓｈａｌ［１，２］最先从胃炎及胃溃疡患者的胃粘膜活检标本中发现并分离到幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，ＨＰ）以来，开创了感染与胃部疾病发生有关的新领域。随后，大量研究资料确证ＨＰ与慢性胃炎、消...

关键词：幽门螺杆菌 CagA基因致病性

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HSV－I感染人单核细胞诱生肿瘤坏死因子α

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免疫学杂志 1994年第1期10卷 24-27,32页

作者：季明春扬州大学医学院微生物学教研室

以纯化ＨＳＶ－Ｉ感染人外周血单个核细胞，发现ＨＳＶ－Ｉ可感染粘附活化的单核细胞和经ＰＨＡ活化的淋巴细胞，并诱导细胞毒因子分泌。ＬＰＳ诱导ＴＮＦ抑制剂多粘菌素Ｂ不能阻断ＨＳＶ－Ｉ感染单核细胞分泌细胞毒因子，但紫外线灭活... 详细信息

以纯化ＨＳＶ－Ｉ感染人外周血单个核细胞，发现ＨＳＶ－Ｉ可感染粘附活化的单核细胞和经ＰＨＡ活化的淋巴细胞，并诱导细胞毒因子分泌。ＬＰＳ诱导ＴＮＦ抑制剂多粘菌素Ｂ不能阻断ＨＳＶ－Ｉ感染单核细胞分泌细胞毒因子，但紫外线灭活的ＨＳＶ－Ｉ不能诱导单核细胞分泌细胞毒因子。用重组人ＴＮＦａ中和抗体能完全中和ＨＳＶ－Ｉ感染单核细胞培养上清中的细胞毒活性，表明其中含有的细胞毒因子为ＴＮＦａ。而重组人ＴＮＦａ中和抗体对ＨＳＶ－Ｉ感染的ＰＨＡ活化淋巴细胞上清中的细胞毒活性无明显影响，其细胞毒因子可能大多为淋巴毒素（ＴＮＦβ）。

关键词：单核细胞肿瘤坏死因子疱疹病毒

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幽门螺杆菌形成空泡细胞毒素的提纯与特征分析

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中国人兽共患病杂志 1996年第4期12卷 18-20页

作者：王正祥陈红菊申厚凤扬州大学医学院微生物学教研室

运用水油提、盐析及凝胶过滤色谱法对幽门螺杆菌ＹＣ－１１株所分泌的形成空泡细胞毒素进行了提取。纯化的形成空泡细胞毒素在ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳中表现为单一条带，分子量约为８７０００，在ＰＨ２．４～６．４的环境中表现高... 详细信息

运用水油提、盐析及凝胶过滤色谱法对幽门螺杆菌ＹＣ－１１株所分泌的形成空泡细胞毒素进行了提取。纯化的形成空泡细胞毒素在ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳中表现为单一条带，分子量约为８７０００，在ＰＨ２．４～６．４的环境中表现高细胞毒性。

关键词：幽门螺杆菌空泡细胞毒素提纯

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幽门螺旋菌的分子生物学研究现状

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微生物学通报 1996年第4期23卷 224-227页

作者：王正祥扬州大学医学院微生物学教研室

幽门螺旋菌的分子生物学研究现状王正祥（扬州大学医学院微生物学教研室，江苏扬州２２５００１）自从Ｗａｒｒｅｎ和Ｍａｒｓｈａｌｌ［１］于１９８２年成功分离出幽门螺旋菌（ＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒＰｙｌｏｒｉ）以来，国内外大... 详细信息

幽门螺旋菌的分子生物学研究现状王正祥（扬州大学医学院微生物学教研室，江苏扬州２２５００１）自从Ｗａｒｒｅｎ和Ｍａｒｓｈａｌｌ［１］于１９８２年成功分离出幽门螺旋菌（ＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒＰｙｌｏｒｉ）以来，国内外大量的研究结果［２，４］已确定Ｈ．ｐ...

关键词：幽门螺旋菌分子生物学病原细菌

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结核分枝杆菌Hsp65-Esat6与hGM-CSF联合DNA疫苗的构建与体外研究

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2016年第1期37卷 29-35页

作者：王森林张梦媛王学坤周曙光江振友暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632

目的:应用分子生物学技术,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并在真核细胞中表达.方法:以p EGHsp65Esat-6为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65-Esat6基因,同时从质粒p ORF-h GM-CSF中扩增出基因佐剂h GM-CSF,分别克隆到真核表达载体p I... 详细信息

目的:应用分子生物学技术,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并在真核细胞中表达.方法:以p EGHsp65Esat-6为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65-Esat6基因,同时从质粒p ORF-h GM-CSF中扩增出基因佐剂h GM-CSF,分别克隆到真核表达载体p IRES的多克隆位点A(MCSA)和B(MCSB)中,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并转染Hep G-2细胞中表达和检测.结果:酶切鉴定提示插入的基因片段大小分别为1.93 kb和0.47kb,测序分析表明克隆的Hsp65-Esat6和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(h GM-CSF)序列与Gen Bank上公布序列完全一致;Western-bolt检测到Hsp65-Esat6融合蛋白相对分子质量(Mr)为75 000 k Da;RT-PCR方法检测出p IGM,p IHsp65GM和p IHsp65-Esat6GM转染组细胞均有h GM-CSF mRNA表达,三组细胞中h GM-CSF基因mRNA的表达量差异无统计学意义(P>0.05).ELISA方法检测到p IHsp65-Esat6GM转染组细胞培养上清中h GM-CSF的表达,且与空载体对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:成功构建和表达了p IHsp65-Esat6GM质粒,为研制优于卡介苗(BCG)的新型抗结核病的DNA疫苗奠定了基础.

关键词：热休克蛋白65kd-早期分泌性抗原靶6kd 人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子双顺反子基因佐剂

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AChR单抗(A7)诱导大鼠了实验性重症肌无力的分子基础

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中华微生物学和免疫学杂志 1996年第1期16卷 45-48页

作者：孟繁平杨康鹃 Y.Graus M.deBaets 延边医学院微生物学教研室延吉133000 生物学教研室荷兰林堡大学医学院免疫学系

乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）抗体在重症肌无力（ＭＧ）和实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）患者体内可诱导ＡＣｈＲ丢失和肌力减退。通过对小鼠抗电鳐电器官的ＡＣｈＲ单抗Ａ７的致病性测定和可变区基因克隆与序列分析，　探讨致病... 详细信息

乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）抗体在重症肌无力（ＭＧ）和实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）患者体内可诱导ＡＣｈＲ丢失和肌力减退。通过对小鼠抗电鳐电器官的ＡＣｈＲ单抗Ａ７的致病性测定和可变区基因克隆与序列分析，　探讨致病性抗体介导的ＭＧ和ＥＡＭＧ的发病机制。Ａ７被动注射大鼠后可诱导出严重的ＥＡＭＧ，ＡＣｈＲ损失串达３８．４％±７．２％。Ａ７的Ｈ链Ｖ区由小鼠ＰＣ７１８３胚系基因编码与Ｄ和ＪＨ４连接，与ＤＦＬ１６．２胚系Ｖ_Ｈ基因具有９３．７％的同源性。Ｌ链Ｖ区由小鼠Ｖ_Ｋ３组基因编码，与Ｊｋ２连接，与Ｖｋ２１Ｅ胚系基因具有９８．１％的同源性。

关键词：自身抗体乙酰胆碱受体重症肌无力 EAMG

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幽门螺杆菌对人上皮细胞的吸附

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中国人兽共患病杂志 1996年第2期12卷 20-22页

作者：王正祥申厚凤陈红菊扬州大学医学院微生物学教研室

幽门螺杆菌对人胃粘膜的吸附是实现其感染的第一步。本研究以人上皮细胞株ＨＥｐ—２为材料对幽门螺杆菌吸附上皮细胞的性能进行了探讨，结果显示，幽门螺杆菌ＹＣ—１１Ａ株具有特异吸附于ＨＥｐ—２细胞表面的性能，其吸附能力在与Ｈ... 详细信息

幽门螺杆菌对人胃粘膜的吸附是实现其感染的第一步。本研究以人上皮细胞株ＨＥｐ—２为材料对幽门螺杆菌吸附上皮细胞的性能进行了探讨，结果显示，幽门螺杆菌ＹＣ—１１Ａ株具有特异吸附于ＨＥｐ—２细胞表面的性能，其吸附能力在与ＨＥｐ—２细胞共孵育３ｈ后达到高峰，吸附率达８１％，此后吸附率虽无显著提高，但单个ＨＥｐ—２细胞吸附的幽门螺杆菌数量却随孵育时间的延长而有明显增加。在大气环境中与在含５％氧气的微氧环境中幽门螺杆菌对ＨＥｐ—２的吸附无显著差异。抗幽门螺杆菌优势抗原单克隆抗体不能有效阻断幽门螺杆菌对ＨＥｐ—２的吸附。

关键词：幽门螺杆菌吸附 HEp-2细胞

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登革病毒对人树突状细胞感染性的研究

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微生物学报 2005年第4期45卷 598-600,i003页

作者：江振友史毓杰孙晗笑暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 暨南大学基因组药物研究所广州510632

探讨登革病毒对人树突状细胞(DC)的感染性。人外周新鲜血常规分离单核细胞,经细胞因子GMCSF、IL4诱导培养成DC,通过形态学特征、细胞表型和淋巴细胞刺激能力鉴定。用登革病毒2型(DV2)感染DC,于作用后6h、24h、48h、72h、96h分别收集上... 详细信息

探讨登革病毒对人树突状细胞(DC)的感染性。人外周新鲜血常规分离单核细胞,经细胞因子GMCSF、IL4诱导培养成DC,通过形态学特征、细胞表型和淋巴细胞刺激能力鉴定。用登革病毒2型(DV2)感染DC,于作用后6h、24h、48h、72h、96h分别收集上清液和细胞,甲基纤维素微量空斑试验测定病毒滴度,间接免疫荧光法检测细胞上病毒抗原表达,透射电镜观察病毒在细胞内的定位。病毒感染后6h即可在培养上清中测出病毒,病毒滴度在48h达到高峰,以后逐渐下降。间接免疫荧光法证明感染的DC胞浆及胞膜上携带病毒抗原。透射电镜下在病毒感染48h后DC胞浆内可见大量病毒颗粒。树突状细胞是登革病毒感染的靶细胞,病毒可感染DC并产生大量病毒颗粒,可能在其发病机制中起重要作用。

关键词：登革病毒,人树突状细胞,感染

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