检索结果-内蒙古大学图书馆

NLRP3炎症小体在甲型流感病毒肺炎小鼠肺组织的表达水平及其介导的炎症反应

中国免疫学杂志 2021年第14期37卷 1677-1681页

作者：石云锋师小函梁晶晶陈健宁江振友吴本权中山大学附属第三医院广州510630 暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632

目的:探索NLRP3炎症小体在甲型流感病毒H1N1(甲流病毒H1N1)肺炎小鼠肺组织的表达水平及其介导的炎症反应。方法:以甲流病毒H1N1/FM1株滴鼻感染C57BL/6小鼠,建立甲流病毒肺炎模型。分别感染24 h及1周后,观察小鼠肺组织病理,用荧光定量PC... 详细信息

目的:探索NLRP3炎症小体在甲型流感病毒H1N1(甲流病毒H1N1)肺炎小鼠肺组织的表达水平及其介导的炎症反应。方法:以甲流病毒H1N1/FM1株滴鼻感染C57BL/6小鼠,建立甲流病毒肺炎模型。分别感染24 h及1周后,观察小鼠肺组织病理,用荧光定量PCR法检测各组小鼠肺组织NLRP3、caspase-1、IL-1β的mRNA表达水平,用蛋白免疫印迹法检测各组小鼠肺组织NLRP3、caspase-1的蛋白表达水平,用ELISA法检测血清IL-1β的浓度。结果:甲流病毒肺炎小鼠模型建立成功。24 h组小鼠肺组织病理呈炎症改变,肺组织NLRP3的mRNA表达水平及蛋白表达水平均高于空白对照组(P均<0.05),肺组织caspase-1的蛋白表达水平高于空白对照组(P<0.01),肺组织IL-1β的mRNA表达水平高于空白对照组(P<0.01),血清IL-1β浓度高于空白对照(P<0.01)。1周组小鼠肺组织病理示炎症反应加重,肺组织NLRP3、caspase-1的mRNA表达水平及蛋白表达水平均高于24 h组(P均<0.05),肺组织IL-1β的mRNA表达水平高于24 h组(P<0.01),血清IL-1β浓度高于24 h组(P<0.01)。结论:甲流病毒感染激活NLRP3炎症小体并引起小鼠病毒性肺炎,炎症反应强度与感染时间呈正相关。甲流病毒感染1周,NLRP3炎症小体表达明显增强,该效应可能是甲流病毒肺炎在感染1周时进展为重症病毒性肺炎的机制之一。

关键词： NLRP3炎症小体甲型流感病毒小鼠炎症重症肺炎

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Ⅰ型登革病毒感染前后血管内皮细胞长链非编码RNA表达谱分析

引用

中山大学学报（医学版） 2019年第2期40卷 228-236页

作者：郑宝嘉江振友司露露郭前方江丽芳周俊梅王辉暨南大学基础医学院微生物与免疫学系教研室广东广州510632 中山大学热带病防治研究教育部重点实验室//中山医学院微生物学教研室广东广州510080

【目的】运用高通量测序技术检测Ι型登革病毒(DENV-1)感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)后长链非编码RNA(lncRNA)的差异表达,分析以探讨导致血管内皮细胞功能改变或受损的可能分子机制。【方法】DENV-1感染人脐静脉内皮细胞24 h后,分别... 详细信息

【目的】运用高通量测序技术检测Ι型登革病毒(DENV-1)感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)后长链非编码RNA(lncRNA)的差异表达,分析以探讨导致血管内皮细胞功能改变或受损的可能分子机制。【方法】DENV-1感染人脐静脉内皮细胞24 h后,分别提取对照组和病毒感染组的RNA样本进行测序,筛选差异表达的lncRNA,进行GO和KEGG富集分析,构建共表达网络图。【结果】共筛查到2 623个显著差异表达的lncRNA,其中1 441个为表达上调,1 182个为表达下调。发现表达差异lncRNA及其预测靶基因主要富集于影响抗原提呈、干扰素合成、细胞凋亡、细胞粘附等生物过程。【结论】DENV-1感染HUVEC后,lncRNA表达谱发生明显变化,与登革出血热/登革休克综合征的发生发展密切相关。

关键词： Ⅰ型登革病毒人脐静脉血管内皮细胞长链非编码RNA

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结核分枝杆菌Hsp65-Esat6与hGM-CSF联合DNA疫苗的构建与体外研究

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2016年第1期37卷 29-35页

作者：王森林张梦媛王学坤周曙光江振友暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632

目的:应用分子生物学技术,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并在真核细胞中表达.方法:以p EGHsp65Esat-6为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65-Esat6基因,同时从质粒p ORF-h GM-CSF中扩增出基因佐剂h GM-CSF,分别克隆到真核表达载体p I... 详细信息

目的:应用分子生物学技术,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并在真核细胞中表达.方法:以p EGHsp65Esat-6为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65-Esat6基因,同时从质粒p ORF-h GM-CSF中扩增出基因佐剂h GM-CSF,分别克隆到真核表达载体p IRES的多克隆位点A(MCSA)和B(MCSB)中,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并转染Hep G-2细胞中表达和检测.结果:酶切鉴定提示插入的基因片段大小分别为1.93 kb和0.47kb,测序分析表明克隆的Hsp65-Esat6和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(h GM-CSF)序列与Gen Bank上公布序列完全一致;Western-bolt检测到Hsp65-Esat6融合蛋白相对分子质量(Mr)为75 000 k Da;RT-PCR方法检测出p IGM,p IHsp65GM和p IHsp65-Esat6GM转染组细胞均有h GM-CSF mRNA表达,三组细胞中h GM-CSF基因mRNA的表达量差异无统计学意义(P>0.05).ELISA方法检测到p IHsp65-Esat6GM转染组细胞培养上清中h GM-CSF的表达,且与空载体对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:成功构建和表达了p IHsp65-Esat6GM质粒,为研制优于卡介苗(BCG)的新型抗结核病的DNA疫苗奠定了基础.

关键词：热休克蛋白65kd-早期分泌性抗原靶6kd 人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子双顺反子基因佐剂

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家蝇抗菌肽Sarcotoxin Ⅱ家族基因的克隆及原核表达条件优化

家蝇抗菌肽Sarcotoxin Ⅱ家族基因的克隆及原核表达条件优化

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中国昆虫学会2017年学术年会

作者：王兵田川张雪婷黄伟康石玉玲杨丽萍覃海姚杨修江帆彭建朱贵明尚小丽王涛吴建伟贵州医科大学生物与工程学院生物技术教研室贵阳 550025 贵州医科大学医药生物技术工程研究中心资源昆虫研究室贵阳 550025 贵州医科大学生物与工程学院生物技术教研室贵阳 550025 贵州医科大学基础医学院生物学教研室贵阳 550025 贵州医科大学医药生物技术工程研究中心资源昆虫研究室贵阳 550025 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵阳 550025 贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵阳 550025

[目的]克隆家蝇抗菌肽sarcotoxin Ⅱ 家族基因S50、S52、S88、S90,对其进行原核表达并优化表达条件.[方法]1.从家蝇转录组库中克隆差异表达基因sarcotoxin Ⅱ 家族基因S50、S52、S88、S90;2.采用原核表达法,表达并处理包涵体蛋白,通过Hi... 详细信息

[目的]克隆家蝇抗菌肽sarcotoxin Ⅱ 家族基因S50、S52、S88、S90,对其进行原核表达并优化表达条件.[方法]1.从家蝇转录组库中克隆差异表达基因sarcotoxin Ⅱ 家族基因S50、S52、S88、S90;2.采用原核表达法,表达并处理包涵体蛋白,通过His·Bind？纯化试剂盒获得原核表达蛋白;3.通过改变不同的诱导时间、诱导温度、IPTG 浓度、表达菌宿主、培养基种类等,尽量使其表达在上清中,然后通过His·Bind？纯化试剂盒获得原核表达蛋白.

关键词：家蝇抗菌肽 sarcotoxin 原核表达条件优化

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家蝇U93原核表达、多克隆抗体制备及功能初探

家蝇U93原核表达、多克隆抗体制备及功能初探

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中国昆虫学会2017年学术年会

作者：王兵黄伟康马素贞姚杨覃海修江帆王涛彭建朱贵明尚小丽吴建伟贵州医科大学生物与工程学院生物技术教研室贵阳 550025 贵州医科大学医药生物技术工程研究中心资源昆虫研究室贵阳 550025 贵州医科大学生物与工程学院生物技术教研室贵阳 550025 贵州医科大学基础医学院生物学教研室贵阳 550025 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵阳 550025 贵州医科大学医药生物技术工程研究中心资源昆虫研究室贵阳 550025 贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵阳 550025

[目的]原核表达家蝇SVWC 超家族基因U93,探究其功能.[方法]1.从家蝇转录组库中克隆差异表达基因U93;采用原核表达法,表达并处理包涵体蛋白,通过His·Bind 纯化试剂盒获得原核表达蛋白.2.将原核表达蛋白加佐剂免疫家兔后,取血清制备... 详细信息

[目的]原核表达家蝇SVWC 超家族基因U93,探究其功能.[方法]1.从家蝇转录组库中克隆差异表达基因U93;采用原核表达法,表达并处理包涵体蛋白,通过His·Bind 纯化试剂盒获得原核表达蛋白.2.将原核表达蛋白加佐剂免疫家兔后,取血清制备多克隆抗体.

关键词：家蝇抗菌肽 U93 原核表达抑菌活性

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基于卓越医生培养模式的病原生物学课程教学优化实践

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医学研究与教育 2016年第6期33卷 74-77,80页

作者：周洲张新华唐志晗曾国姜志胜南华大学医学院医学微生物学教研室湖南衡阳421001 南华大学医学部医学教育与医院发展研究室湖南衡阳421001 南华大学医学院医学人文教研室湖南衡阳421001

目的探索教学资源整合及优化在病原生物学课程改革中的效果。方法以传统病原生物学课程教学方法为基础,在医学卓越班中采取病原生物学课程内容整合与优化、网络教学建设等一系列改革措施。结果改革后的病原生物学课程教学受到学生的好... 详细信息

目的探索教学资源整合及优化在病原生物学课程改革中的效果。方法以传统病原生物学课程教学方法为基础,在医学卓越班中采取病原生物学课程内容整合与优化、网络教学建设等一系列改革措施。结果改革后的病原生物学课程教学受到学生的好评。结论病原生物学课程教学优化实践不仅有效增强学生课堂学习的主动性,并提高了学生自主学习能力和创新发展能力。

关键词：卓越医生病原生物学教学优化

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携带脑组织特异性microRNA靶序列的重组日本脑炎病毒的构建与鉴定

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解放军医学杂志 2014年第6期39卷 429-432页

作者：曹文媛叶青李晓峰王洪江朱舜亚秦鄂德江振友秦成峰暨南大学医学院微生物学与免疫学系广州510632 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的构建携带脑组织特异性miRNA靶序列的重组日本脑炎病毒株。方法利用反向遗传学技术将脑组织特异性的miR-124和miR-125靶序列引入日本脑炎病毒cDNA全长感染性克隆,将重组质粒用XhoⅠ线性化后采用SP6转录试剂盒进行体外转录,以获得的RN... 详细信息

目的构建携带脑组织特异性miRNA靶序列的重组日本脑炎病毒株。方法利用反向遗传学技术将脑组织特异性的miR-124和miR-125靶序列引入日本脑炎病毒cDNA全长感染性克隆,将重组质粒用XhoⅠ线性化后采用SP6转录试剂盒进行体外转录,以获得的RNA转染BHK-21细胞,37℃、5%CO2孵箱培养3d后取上清盲传1代观察细胞病变,并通过RT-PCR、细胞蚀斑形成实验和病毒生长曲线等方法对恢复病毒的生物学特性进行鉴定。结果成功在BHK-21细胞中拯救获得了携带miRNA靶序列的重组病毒,与野生型病毒株具有相似的蚀斑形态和生长特性。结论通过反向遗传学技术获得了携带脑组织特异性miRNA靶序列的重组日本脑炎病毒,为miRNA介导的组织特异性减毒机制研究奠定了基础。

关键词：微RNAs 脑炎病毒,日本感染性克隆疫苗

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非小细胞肺癌中TRA2B表达意义的初探

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交通医学 2014年第1期28卷 24-26页

作者：季俐俐倪婷婷张冬梅刘益飞沈雁波王颖颖南通大学医学院病理解剖学教研室江苏226001 南通大学医学院病原微生物学系江苏226001 南通大学医学院基础医学研究室江苏226001 南通大学附属医院病理科南通大学附属医院急诊科

目的:探讨TRA2B在非小细胞肺癌中的表达情况,并分析其与肺癌临床病理特征之间的关系。方法:Western blot检测6对肺癌组织和癌旁非肿瘤组织中TRA2B的蛋白表达水平,免疫组织化学染色分析93例非小细胞肺癌组织中TRA2B的表达。结果:TRA2B在... 详细信息

目的:探讨TRA2B在非小细胞肺癌中的表达情况,并分析其与肺癌临床病理特征之间的关系。方法:Western blot检测6对肺癌组织和癌旁非肿瘤组织中TRA2B的蛋白表达水平,免疫组织化学染色分析93例非小细胞肺癌组织中TRA2B的表达。结果:TRA2B在肺癌组织中表达水平高于癌旁非肿瘤组织,TRA2B的表达情况与肺癌的分化程度以及临床分级相关(P<0.05)。结论:TRA2B在非小细胞肺癌中表达上调,提示TRA2B可能可以作为诊断肺癌的潜在标记物以及治疗的潜在靶点。

关键词： TRA2B 肺癌免疫组化预后

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高通量测序筛选结核分枝杆菌耐药株差异基因

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热带医学杂志 2014年第5期14卷 547-550页

作者：李劭源张国良文玉欣毛冬婷曹开源陈心春曾谷城中山大学中山医学院微生物学教研室广东广州510080 中山大学热带病防治研究教育部重点实验室广东广州510080 广东医学院附属深圳市第三人民医院肝病研究所广东深圳518112 暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院胸外科广东深圳518020

目的比较结核分枝杆菌中敏感株、多耐药株、广泛耐药株三者间基因表达的差异,为进一步针对耐药菌株的研究提供方向。方法从深圳市第三人民医院收集敏感株、多耐药株、广泛耐药株各1株,提取菌株RNA,然后构建cDNA文库,使用Genome Analyzer... 详细信息

目的比较结核分枝杆菌中敏感株、多耐药株、广泛耐药株三者间基因表达的差异,为进一步针对耐药菌株的研究提供方向。方法从深圳市第三人民医院收集敏感株、多耐药株、广泛耐药株各1株,提取菌株RNA,然后构建cDNA文库,使用Genome Analyzer IIx高通量测序仪进行全基因组测序,经过筛选比对后得到测序结果 ,再比较3个菌株间的基因表达差异。结果高通量测序后共得到基因3 968个。将耐药株与敏感株的基因进行比较,选取表达差异高于10倍的基因,筛选得到多耐药株差异基因16个、广泛耐药株差异基因10个。这些表达差异基因大部分与毒素-抗毒素系统、PE/PPE家族蛋白、金属转运蛋白相关。还在多耐药株中发现了一系列高表达的前噬菌体基因及噬菌体整合相关的基因。结论通过高通量测序筛选得到一系列耐药株差异表达基因,为未来对耐药菌株的研究提供依据。

关键词：结核分枝杆菌耐药株高通量测序

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重症肌无力患者胸腺组织抑制性消减cDNA文库的构建及分析

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郑州大学学报（医学版） 2012年第3期47卷 295-299页

作者：杨俊红崔新征方华关兵峰赵国强张清勇高峰河南中医学院第一附属医院脑病1区郑州450003 郑州大学第二附属医院胸外科郑州450014 郑州大学生物医学工程研究所郑州450014 郑州大学医药科学研究院免疫学研究室神经免疫实验室郑州450052 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001

目的:构建重症肌无力(MG)患者胸腺组织抑制性消减cDNA文库,分析MG胸腺差异表达基因。方法:分别从6例正常和6例MG患者胸腺组织中分离出mRNA,逆转录合成cDNA,行抑制性消减杂交,将得到的差异表达基因进行T-A克隆,构建cDNA文库,并进行序列... 详细信息

目的:构建重症肌无力(MG)患者胸腺组织抑制性消减cDNA文库,分析MG胸腺差异表达基因。方法:分别从6例正常和6例MG患者胸腺组织中分离出mRNA,逆转录合成cDNA,行抑制性消减杂交,将得到的差异表达基因进行T-A克隆,构建cDNA文库,并进行序列分析。应用实时荧光定量PCR检测20例MG患者、10例正常对照胸腺组织中GSTM3和KPNA5 mRNA的表达。结果:共获得125个阳性克隆;Blast同源性检索共得到27个差异表达基因;MG患者GSTM3、KPNA5基因表达量(0.671±0.097和0.712±0.080)高于正常对照胸腺(0.582±0.047和0.571±0.018),差异有统计学意义(tGSTM3=5.458,P<0.001;tKPNA5=2.755,P=0.010),与消减文库结果一致。结论:成功建立了MG胸腺组织抑制性消减cDNA文库。

关键词：抑制性消减重症肌无力差异基因 cDNA文库胸腺

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