检索结果-内蒙古大学图书馆

应用猪主动脉脱细胞基质制备新型组织工程血管支架：生物相容性及力学性能评价(英文)

中国组织工程研究与临床康复 2010年第47期14卷 8921-8926页

作者：吕玉明黄华梅王秋玲谢德明广州医学院附属第三医院骨科广东省广州市510150 暨南大学医学院形态学实验中心广东省广州市510632 暨南大学生物医学工程系广东省广州市510632

背景:组织工程血管构建的关键依赖于理想的支架。猪血管作为组织工程血管构建材料已有广泛应用,但其较高的免疫原性及较差的力学强度限制了该材料作为组织工程支架的应用。目的:应用猪主动脉脱细胞基质制备一种新的具有良好机械性能及... 详细信息

背景:组织工程血管构建的关键依赖于理想的支架。猪血管作为组织工程血管构建材料已有广泛应用,但其较高的免疫原性及较差的力学强度限制了该材料作为组织工程支架的应用。目的:应用猪主动脉脱细胞基质制备一种新的具有良好机械性能及生物相容性的组织工程血管支架。方法:对猪主动脉进行脱细胞处理和热交联改性制备脱细胞血管基质支架,采用苏木精-伊红染色及生物力学分析评估其脱细胞效果及血管基质的力学性能。将人脐静脉血管内皮细胞接种于脱细胞血管基质支架中进行体外培养,评估其生物相容性。结果与结论:用1%的TritonX-100溶液处理猪主动脉84h可完全脱除血管细胞,同时不破坏血管基质结构;经真空下120℃热交联处理12h,脱细胞基质的拉伸断裂强度得到明显提高,达到1.70MPa。在该改性血管基质支架上接种人脐带静脉内皮细胞体外培养7d,扫描电镜显示内皮细胞呈现典型的血管内皮层状结构。表明猪主动脉经过脱细胞处理能够维持血管基质完整,冷冻干燥和真空热交联处理可有效提高其拉伸强度,且对血管内皮细胞具有良好的相容性。

关键词：猪主动脉脱细胞基质热交联血管内皮细胞组织工程血管

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冷保存对大鼠供肾结缔组织生长因子表达的影响

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中国修复重建外科杂志 2009年第7期23卷 873-876页

作者：何文芳丁泓文苏泽轩暨南大学医学院形态学实验中心广州510630 暨南大学附属第一医院泌尿外科

目的探讨大鼠供肾在不同冷保存时间,其肾小管近端上皮细胞结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的表达。方法健康SPF级Wistar雄性大鼠40只,体重230～250g。采取原位灌注切取整块双侧肾脏,置于0～4℃高渗枸橼酸盐嘌... 详细信息

目的探讨大鼠供肾在不同冷保存时间,其肾小管近端上皮细胞结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的表达。方法健康SPF级Wistar雄性大鼠40只,体重230～250g。采取原位灌注切取整块双侧肾脏,置于0～4℃高渗枸橼酸盐嘌呤肾保存液中保存。根据保存时间不同,分为0、12、24、36、48h组(n=8)。采用免疫组织化学、原位杂交方法分别检测肾小管近端上皮细胞CTGF表达水平。结果在0、12h组大鼠供肾肾小管近端上皮细胞中CTGF极少表达,经图像分析两组CTGF蛋白阳性单位值(positive unit,PU)分别为5.91±2.30、5.57±2.40;CTGF mRNA PU值分别6.24±2.79、6.51±2.43,差异均无统计学意义(P>0.05)。随着冷缺血时间延长,24、36、48h组CTGF蛋白和CTGF mRNA表达均逐渐增加,24h组PU值分别为10.25±2.92、15.24±3.95;36h组分别为14.31±2.83、19.20±4.73;48h组分别为18.11±3.94、23.09±4.40;各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05),与0、12h组比较差异亦均有统计学意义(P<0.05)。结论冷缺血损伤促进大鼠肾脏CTGF表达增加,可能在肾小管上皮细胞损伤再生与修复中起重要作用。

关键词：冷保存结缔组织生长因子肾小管近端上皮细胞大鼠

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医学院显微形态学实验中心的优势及不足探讨

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2009年第2期11卷 247-249页

作者：何文芳夏潮涌黄华梅暨南大学医学院显微形态学实验中心

医学院显微形态学实验中心成立以来，在其建设和运行当中，充分发挥了许多中心成立以后的优势，但也发现了许多不足的方面，值得提出来探讨和思考，期待形态中心能有更好的发展，以适应现代教育发展的需要。

关键词：显微形态学实验中心优势不足

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组织工程血管基质的制备与改性

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中国临床解剖学杂志 2008年第1期26卷 73-77页

作者：黄华梅谢德明暨南大学医学院形态学实验中心广州510632 暨南大学生物医学工程系广州510632

目的:完全脱除猪胸主动脉细胞,对脱细胞血管基质进行改性,增强基质的力学强度,制备组织工程血管支架材料。方法:取家猪的新鲜去除外膜胸主动脉20根,随机分成4组,分别采用胰蛋白酶、TritonX-100及十二烷基硫酸钠(SDS)作为脱细胞试剂对猪... 详细信息

目的:完全脱除猪胸主动脉细胞,对脱细胞血管基质进行改性,增强基质的力学强度,制备组织工程血管支架材料。方法:取家猪的新鲜去除外膜胸主动脉20根,随机分成4组,分别采用胰蛋白酶、TritonX-100及十二烷基硫酸钠(SDS)作为脱细胞试剂对猪胸主动脉进行脱细胞处理,并对脱细胞后的血管基质进行改性,采用HE染色、弹力纤维染色、力学性能测试,以评价脱细胞效果以及材料的力学性能。结果:采用1%TritonX-100单独作用84h既能完全脱除细胞,同时又可完整保留血管基质的三维结构,对胶原纤维、弹力纤维的损伤小,是一种较理想的脱细胞方法。对脱细胞后的基质进行冷冻干燥及真空热交联处理,能有效提高材料的机械强度,冷冻干燥24h后真空120℃下热交联处理12h所获得的材料的机械强度最好,断裂强度可达到1.70MPa。结论:以脱细胞血管基质经冷冻干燥和真空热交联处理后,可以作为血管组织工程的支架材料。

关键词：组织工程血管脱细胞基质改性

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应用脱细胞血管基质构建组织工程血管的初步研究

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中国病理生理杂志 2008年第4期24卷 792-796页

作者：黄华梅谢德明罗洁芳暨南大学医学院形态学实验中心广东广州510632 暨南大学生物医学工程系广东广州510632 暨南大学第一临床学院广东广州510632

目的:采用脱细胞处理的猪胸主动脉血管基质作为支架材料,接种人脐带血管内皮细胞,构建组织工程血管。方法:以新鲜猪胸主动脉为原材料,1% Triton X-100为脱细胞试剂,制备脱细胞血管基质;采用冷冻干燥和热交联法对脱细胞血管基质进行改性... 详细信息

目的:采用脱细胞处理的猪胸主动脉血管基质作为支架材料,接种人脐带血管内皮细胞,构建组织工程血管。方法:以新鲜猪胸主动脉为原材料,1% Triton X-100为脱细胞试剂,制备脱细胞血管基质;采用冷冻干燥和热交联法对脱细胞血管基质进行改性,并进行组织学观察及力学性能测定。用人脐带内皮细胞经培养和扩增后,再与所制备的脱细胞血管基质进行复合培养,光学显微镜及扫描电镜观察内皮细胞生长状况。结果:1%TritonX-100处理84h的猪胸主动脉,既能完全脱除血管中细胞,同时又完整保留血管基质的三维结构;对脱细胞血管基质冷冻干燥24h,120℃下热交联12h,能有效提高材料的机械强度,断裂强度可达到1.70MPa。扫描电镜下可见,脱细胞血管基质与内皮细胞复合培养7d,已形成典型血管内膜样结构。结论:经改性后的脱细胞血管基质与内皮细胞具有良好的相容性,用其作为支架材料与内皮细胞复合培养,有望应用于构建组织工程化血管。

关键词：脱细胞基质内皮细胞组织工程血管

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人脐带内皮细胞与平滑肌细胞的分离培养特征

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第37期11卷 7397-7400页

作者：黄华梅罗洁芳谢德明暨南大学医学院形态学实验中心广东省广州市510632 暨南大学第一临床学院手术室广东省广州市510632 暨南大学生物医学工程系广东省广州市510632

目的:如何便捷有效地获取种子细胞是构建组织工程皮肤、角膜、血管等成功与否的关键,实验对人胎儿脐带内皮细胞和平滑肌细胞的分离、纯化、培养扩增技术进行探讨。方法:实验于2006-11在暨南大学医学院完成。①实验材料:剖宫产正常胎儿... 详细信息

目的:如何便捷有效地获取种子细胞是构建组织工程皮肤、角膜、血管等成功与否的关键,实验对人胎儿脐带内皮细胞和平滑肌细胞的分离、纯化、培养扩增技术进行探讨。方法:实验于2006-11在暨南大学医学院完成。①实验材料:剖宫产正常胎儿脐带由暨南大学第一临床学院提供,产妇均知情同意。②实验方法:配制培养液,A液为在M199培养液中加入20%胎牛血清、20mg/L肝素、10μg/L碱性成纤维细胞生长因子,B液为在M199培养基中加入10%胎牛血清、250mg/LG418。取脐带15～20cm,采用胶原酶"灌注消化法"获取脐带内皮细胞制成悬液,静置0.5h后利用成纤维细胞短时间内贴壁的特点,把尚未贴壁细胞吸出重新接种于含有A液的培养瓶,初步去除部分成纤维细胞,细胞贴壁24h后将培养液换为B液,继续培养3d,去除成纤维细胞,然后再用A液扩大培养。从消化完脐静脉内皮细胞的脐带中剥取脐动脉,刮除内皮细胞,将血管条剪成小块均匀贴于培养瓶底,培养瓶内加入含20%小牛血清的DMEM培养液2mL,缓慢竖直培养瓶,以培养液刚未浸没培养块为最佳,放入37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱内干涸8h后,将培养瓶轻轻翻转,使植块刚浸入培养液中,绝对静置3d,以后每3d换液1次,待植块周围生长晕的细胞融合成片时,即可传代,传代后DMEM培养液的血清浓度由原来的20%改为5%,且在培养液中加入0.2L肝素。③实验评估:通过倒置相差显微镜观察细胞生长情况,分别以第Ⅷ因子、α-肌动蛋白免疫组织化学染色法鉴定内皮细胞和平滑肌细胞。结果:①内皮细胞的生长观察:接种24h后,镜下可见刚贴壁的细胞呈圆形,逐渐转变为多角形或梭形,胞间可见有成纤维细胞混杂,加入B液3d后成纤维细胞逐渐死亡。传代细胞呈"铺路石"样,细胞周围特别是近胞核处可见明显光晕,为典型的内皮细胞生长特点。②内皮细胞第Ⅷ因子相关抗原的检测:胞浆丰富且有棕黄色颗粒,细胞核不着色,呈阳性反应。③平滑肌细胞的生长观察:镜下组织块贴壁后5～7d可见有少数细胞从植块边缘游出,第10～15天植块周围形成明显的细胞生长晕,细胞呈长梭形、带状或三角状,有1～4个细胞核,可见半透明颗粒,第20～25天细胞密集、平行排列,形成"峰谷样"结构,是平滑肌细胞的特征性生长表现。④平滑肌细胞特异性α-肌动蛋白单克隆抗体检测:胞浆内可见棕黄色细丝,为特异性α-平滑肌肌动蛋白,细胞核不着色。结论:以胎儿脐带作为种子细胞的来源,成功分离后通过调节培养液的成分,既能排除成纤维细胞的污染又可以令内皮细胞和平滑肌细胞快速增殖。

关键词：内皮细胞平滑肌细胞优化培养组织工程血管

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多媒体技术对医学形态学科实验教学的影响

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2007年第4期9卷 463-464页

作者：黄华梅曾靖容暨南大学医学院形态学实验中心广州510632 暨南大学医学院教学科研办公室

随着计算机信息技术的迅猛发展,必然促使计算机多媒体技术在医学形态学科实验教学中的应用和发展。介绍了实验中心利用TIGER多媒体教学系统对相关医学形态学科的影响探讨。

关键词：形态学教学多媒体技术影响

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