检索结果-内蒙古大学图书馆

中国微生态学杂志 2013年第11期25卷 1255-1258页

作者：朱忠生王立生曾位森张定国付丹深圳市儿童医院儿内科广东深圳518026 暨南大学第二临床医学院消化科广东深圳518020 南方医科大学细胞生物学教研室广东广州510515

目的构建可以在双歧杆菌表达外源性基因的系统。方法 PCR扩增双歧杆菌质粒聚合酶基因(BPP)并连接至质粒pBS-T以形成重组质粒pBS-BPP。PCR扩增双歧杆菌内源性阿拉伯糖苷酶的启动子及分泌性信号肽DNA序列(ara)并连接至质粒pBAD-A以形成重... 详细信息

目的构建可以在双歧杆菌表达外源性基因的系统。方法 PCR扩增双歧杆菌质粒聚合酶基因(BPP)并连接至质粒pBS-T以形成重组质粒pBS-BPP。PCR扩增双歧杆菌内源性阿拉伯糖苷酶的启动子及分泌性信号肽DNA序列(ara)并连接至质粒pBAD-A以形成重组质粒pBAD-ara,然后将增强绿色荧光蛋白(eGFP)基因连接至质粒pBAD-ara以形成重组质粒pBAD-ara-GFP。采用基因重组技术重组含有ara、BPP、eGFP基因序列并可将外源性基因分泌表达于菌体外及锚定表达于细胞壁的质粒pBS-BPP-ara-GFP,激光共聚焦显微镜下观察含有pBS-BPP-ara-GFP质粒及对照质粒的***,验证eGFP定位表达情况。结果所构建的表达系统可以在***中表达eGFP基因。结论通过基因重组方法成功构建了双歧杆菌表达系统,其可将外源基因分泌表达于菌体外。

关键词：双歧杆菌双歧杆菌质粒聚合酶基因(BPP) ara eGFP外源性基因表达系统

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纳米金-表阿霉素复合体的体外抗肿瘤作用

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中山大学学报（医学科学版） 2012年第2期33卷 172-177页

作者：赵晓旭潘运龙胡杨志覃莉丁晖巫青暨南大学附属第一医院普外科广东广州510630 暨南大学医学院组织胚胎学教研室广东广州510632

【目的】观察纳米金-表阿霉素复合体(EPI-AuNP)能否抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、人肝癌细胞(HepG2)的增殖。【方法】采用化学合成法制备EPI-AuNP,通过紫外-可见吸收光谱、荧光淬灭实验、动态光散射及Zeta电位变化对其进行鉴定。体外... 详细信息

【目的】观察纳米金-表阿霉素复合体(EPI-AuNP)能否抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、人肝癌细胞(HepG2)的增殖。【方法】采用化学合成法制备EPI-AuNP,通过紫外-可见吸收光谱、荧光淬灭实验、动态光散射及Zeta电位变化对其进行鉴定。体外实验分为AuNP处理组、EPI处理组、EPI-AuNP处理组和空白对照组。将HUVEC、HepG2细胞分别接种于96孔板,培养24 h后各组分别加入AuNP溶液、EPI溶液、EPI-AuNP溶液和无血清培养液200μL,继续培养24 h后:MTT比色法检测HUVEC、HepG2细胞生存率;紫外-可见分光光度法检测各细胞内EPI的积聚量。【结果】紫外-可见吸收光谱显示:AuNP的最大吸收峰在520 nm处,而EPI-AuNP在525 nm处。EPI(100 mg/L)荧光强度为195.2±7.5;EPI-AuNP为16.4±5.0,P=0.000。AuNP的平均粒径及Zeta电位分别为:(14.34±0.75)nm、(-21.19±0.64)mV;EPI-AuNP为:(18.54±1.84)nm、(-15.34±0.72)mV,P<0.01。体外实验:MTT比色法结果显示EPI处理组HUVEC、HepG2细胞的生存率分别为(29.25±1.59)%、(71.10±4.16)%;EPI-AuNP处理组:(21.29±1.51)%、(43.82±2.21)%,P=0.000。【结论】成功合成EPI-AuNP复合体,体外实验证实其对HUVEC、HepG2细胞均具有增殖抑制作用。

关键词：纳米金-表阿霉素复合体 HUVEC HepG2细胞

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慢性心理应激对大鼠实验性牙周炎及血清乳酸脱氢酶1的影响

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中国病理生理杂志 2012年第5期28卷 924-928页

作者：黄世光王晓歌潘倩茹黄博吕芳丽叶秀华杨云珍郭柳婷练楚文暨南大学医学院口腔医学系广东广州510632 中山大学医学院寄生虫学教研室广东广州510080

目的:通过建立大鼠实验性牙周炎模型,探讨慢性心理应激影响牙周炎的致病机制。方法:清洁级4周龄雌性Wistar大鼠80只,随机分为4组:(1)正常对照组;(2)实验性牙周炎组:用浸有牙周致病菌的丝线结扎左侧上颌第二磨牙牙颈部复制牙周炎模型;(3... 详细信息

目的:通过建立大鼠实验性牙周炎模型,探讨慢性心理应激影响牙周炎的致病机制。方法:清洁级4周龄雌性Wistar大鼠80只,随机分为4组:(1)正常对照组;(2)实验性牙周炎组:用浸有牙周致病菌的丝线结扎左侧上颌第二磨牙牙颈部复制牙周炎模型;(3)单纯应激组:牙周不作特殊处理,给予应激刺激;(4)牙周炎+应激组:按上法复制牙周炎模型,并予以应激刺激。各组动物分别于实验后第2、4、6和8周分批处死,各时点每组处死动物5只。大鼠处死前尾静脉采血检测血糖浓度、心脏采血检测血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、乳酸脱氢酶(LDH)及其同工酶LDH1。制作组织切片,HE染色观察大鼠左侧上颌第二磨牙牙周组织的炎性变化及牙槽骨的吸收情况。结果:(1)单纯应激组及牙周炎+应激组血糖及血清ACTH水平在2和4周时明显高于正常对照组和实验性牙周炎组(P<0.01),牙周炎+应激组在6和8周时血糖及血清ACTH水平仍较正常对照组和实验性牙周炎组高(P<0.01);(2)牙周炎+应激组血清LDH水平在各时点明显高于正常对照组和实验性牙周炎组(P<0.01),牙周炎+应激组血清LDH1水平在各时点均明显低于正常对照组和实验性牙周炎组(P<0.01);(3)组织学观察显示与正常对照组和单纯应激组牙龈及牙槽骨均无明显改变;牙周炎+应激组牙龈组织的炎症及牙槽骨破坏程度在4、6和8周时明显高于牙周炎组。结论:应激刺激可能通过降低牙周组织氧代谢水平加重大鼠牙周炎症程度。

关键词：牙周炎模型,动物心理应激乳酸脱氢酶

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标记滞留细胞技术结合干细胞标记物检测小鼠子宫内膜干细胞

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中国组织化学与细胞化学杂志 2012年第3期21卷 245-249页

作者：卢晓晔耿江涛杨雪松覃莉暨南大学医学院组织胚胎学教研室广州510632

目的通过标记滞留细胞技术检测昆明小鼠子宫内膜干细胞的存在及其分布情况;观察P63和Musashi-1在不同周龄小鼠子宫内膜的表达以及两者与标记滞留细胞的关系,探讨P63和Musashi-1作为子宫内膜干细胞特异性标记物的可能性。方法出生3天雌... 详细信息

目的通过标记滞留细胞技术检测昆明小鼠子宫内膜干细胞的存在及其分布情况;观察P63和Musashi-1在不同周龄小鼠子宫内膜的表达以及两者与标记滞留细胞的关系,探讨P63和Musashi-1作为子宫内膜干细胞特异性标记物的可能性。方法出生3天雌性昆明小鼠皮下注射BrdU,分别在1w、2w、3w、4w、6w、8w和10w处死小鼠取其子宫。采用免疫组化法分别检测BrdU、P63和Musashi-1在各周龄小鼠子宫内膜的表达情况。结果标记后1w的小鼠,子宫内膜绝大部分的上皮和基质细胞都被BrdU标记。随着小鼠周龄的增加,子宫内膜BrdU阳性细胞百分率逐渐降低。至第8w时,仅在基质中有极少量的BrdU阳性细胞,主要位于基质与肌层交界处。早期小鼠子宫内膜组织中P63和Musashi-1阳性细胞数量较多,随着子宫内膜的逐渐发育成熟,P63和Musashi-1的表达逐渐减少,其表达规律及分布与标记滞留细胞基本一致。结论 (1)小鼠子宫内膜标记滞留细胞主要位于基质内膜与肌层交界处,这些细胞的分布与推测的子宫内膜干细胞的分布部位相符。(2)P63和Musashi-1是较特异的干细胞标记物。

关键词：子宫内膜干细胞标记滞留细胞技术 P63 Musashi-1 免疫组织化学

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PDCD4基因小干扰RNA的筛选及其对人白血病细胞药物敏感性的研究

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2012年第6期33卷 553-558页

作者：谷景义朱雪娇费嘉暨南大学医学院生物化学与分子生物学教研室广东广州510632 暨南大学医学院中心实验室广东广州510632

目的:筛选出PDCD4 siRNA的有效序列,并研究其对白血病K562细胞药物敏感性的影响。方法:利用生物信息学的方法设计并合成3条PDCD4 siRNA候选序列,将PDCD4 siRNA候选序列分别转染K562细胞,用实时定量RT-PCR的方法(Real-time RT-PCR)筛选... 详细信息

目的:筛选出PDCD4 siRNA的有效序列,并研究其对白血病K562细胞药物敏感性的影响。方法:利用生物信息学的方法设计并合成3条PDCD4 siRNA候选序列,将PDCD4 siRNA候选序列分别转染K562细胞,用实时定量RT-PCR的方法(Real-time RT-PCR)筛选出能有效沉默PDCD4基因mRNA表达的序列,并用蛋白印迹法(Western blotting)检测该有效序列对细胞内PDCD4蛋白表达水平的影响。将有效序列转染k562细胞6 h后,分别与常用的抗白血病药物三氧化二砷(As2O3)、阿糖胞苷(Ara-c)、小檗碱(BB)联合作用72 h,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测PDCD4 siRNA对细胞药物敏感性的影响。结果:用实时定量PCR成功筛选出一条有效干扰PDCD4mRNA表达的序列,用Western blotting法检测该序列可显著降低PDCD4蛋白的表达水平(P<0.05);与ATO,Ara-c,BB联合作用72 h后,PDCD4表达的下调降低了细胞的药物敏感性(P<0.05)。结论:沉默PDCD4能够显著降低白血病细胞的药物敏感性,PDCD4 siRNA能够显著挽救药物作用后的细胞活性。

关键词： PDCD4 siRNA 白血病K562细胞三氧化二砷阿糖胞苷小檗碱药物敏感性

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哮喘小鼠肺组织TRPM8与TRPA1 mRNA的表达

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广东医学 2012年第6期33卷 750-752页

作者：马洪明刘升明陈万群吴艳玲刘晓妍陈丽暨南大学附属第一医院呼吸内科广州510630 暨南大学医学院生化教研室广州510632

目的观察哮喘小鼠肺组织TRPM8与TRPA1 mRNA的表达。方法 SPF级雌性Balb/c小鼠16只,随机分为哮喘组和对照组,每组8只。哮喘组应用卵蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型,末次激发后留取肺组织,采用荧光实时定量RT-PCR技术检测支气管肺组织中TRPM8... 详细信息

目的观察哮喘小鼠肺组织TRPM8与TRPA1 mRNA的表达。方法 SPF级雌性Balb/c小鼠16只,随机分为哮喘组和对照组,每组8只。哮喘组应用卵蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型,末次激发后留取肺组织,采用荧光实时定量RT-PCR技术检测支气管肺组织中TRPM8与TRPA1的mRNA表达水平。结果哮喘组肺组织中TRPM8与TRPA1 mRNA水平分别为(0.619 1±0.213 1)和(0.272 2±0.167 1),明显高于对照组(0.347 1±0.221 1和0.107 9±0.041 5),差异有统计学意义(P<0.05)。结论哮喘小鼠肺组织TRPM8与TRPA1 mRNA的表达上调,可能是冷刺激诱发哮喘发作的分子机制。

关键词：哮喘瞬时受体电位 TRPM8 TRPA1

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全氟碳纳米粒载体靶向诊断治疗的研究

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生物医学工程学杂志 2012年第6期29卷 1217-1220页

作者：彭雪梅谢娟华王华东暨南大学附属第一医院麻醉科广州510632 暨南大学第一临床医学院病理生理教研室广州510632

全氟碳纳米粒是近年来出现的一种新型药物载体,它具有很多独特的性能,如化学稳定性好、生物相容性好、携氧能力高、靶向性组织细胞作用等。现综述全氟碳纳米粒的理化性质和应用研究,总结其作为一种靶向载体在心血管系统、神经系统疾病... 详细信息

全氟碳纳米粒是近年来出现的一种新型药物载体,它具有很多独特的性能,如化学稳定性好、生物相容性好、携氧能力高、靶向性组织细胞作用等。现综述全氟碳纳米粒的理化性质和应用研究,总结其作为一种靶向载体在心血管系统、神经系统疾病及肿瘤的诊断和治疗方面的研究进展,进一步阐述其可以选择性作用于靶细胞、组织,快速释放药物,从而达到满意的治疗效果,并认为全氟碳纳米粒作为载体靶向诊断治疗具有较好的前景和临床应用价值。

关键词：全氟碳纳米粒载体靶向诊断治疗应用

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直流电碘离子导入联合氩激光光凝术治疗增殖前期糖尿病视网膜病变的疗效观察

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中华物理医学与康复杂志 2012年第12期34卷 949-950页

作者：孟晶张旭陈青山张日佳洪其生王勋国暨南大学附属第一医院眼科广州510630 暨南大学医学院流行病学教研室暨南大学附属第一医院康复科

目的观察氩激光全视网膜光凝（PRP）联合直流电碘离子导人治疗增殖前期糖尿病视网膜病变（PPDR）的疗效。方法选取PPDR患者58例（102眼），按照随机数字表法分为单一治疗组和联合治疗组，单一治疗组29例（50眼），联合治疗组29例（52眼... 详细信息

目的观察氩激光全视网膜光凝（PRP）联合直流电碘离子导人治疗增殖前期糖尿病视网膜病变（PPDR）的疗效。方法选取PPDR患者58例（102眼），按照随机数字表法分为单一治疗组和联合治疗组，单一治疗组29例（50眼），联合治疗组29例（52眼）。单一治疗组采用氩激光进行PRP治疗，联合治疗组在此基础上增加直流电碘离子导人治疗。分别于治疗前、治疗后3个月利用视力表、间接检眼镜、眼底荧光血管造影（FFA）及光学相干断层成像（OCT）对患者的视力、眼底改变、眼底新生血管情况、无灌注区变化及视乳头旁视网膜神经纤维层（RNFL）厚度进行评定。结果治疗后3个月，2组患者视力、眼底改变、眼底新生血管情况、无灌注区变化及RNFL厚度均较治疗前明显改善（P〈0．05），联合治疗组视力、眼底改变及RNFL厚度的改善幅度较单一治疗组明显，差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论直流电碘离子导人可增强PRP的治疗效果，减轻激光光凝的副作用，改善视功能并修复视神经损伤。

关键词：激光疗法碘离子导入糖尿病视网膜病变视网膜神经纤维层

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共聚焦显微镜下观察糖尿病兔角膜细胞改变

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实用医学杂志 2012年第8期28卷 1253-1255页

作者：何艳花陈剑王彦平周清张婷杨筱曦张静辉暨南大学附属第一医院眼科广州市510630 暨南大学医学院病理生理教研室 510632

目的:通过对糖尿病兔角膜连续活体观察,研究糖尿病角膜病理变化。方法:四氧嘧啶静脉注射12只新西兰大白兔,复制糖尿病疾病模型;另外3只为空白对照。用共聚焦显微镜在四氧嘧啶给药前和糖尿病模型建成后4、8、12周对角膜进行观察。结果:... 详细信息

目的:通过对糖尿病兔角膜连续活体观察,研究糖尿病角膜病理变化。方法:四氧嘧啶静脉注射12只新西兰大白兔,复制糖尿病疾病模型;另外3只为空白对照。用共聚焦显微镜在四氧嘧啶给药前和糖尿病模型建成后4、8、12周对角膜进行观察。结果:随疾病模型建立时间的延长,糖尿病兔角膜出现上皮细胞脱落增多,前、后基质细胞数目减少,内皮多形性细胞增加,内皮数目减少。结论:糖尿病兔角膜病变,上皮细胞、基质细胞、内皮细胞随病程时间延长而减少。

关键词：糖尿病角膜共聚焦显微镜

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小鼠睁眼前后角膜神经纤维长度与密度的变化及其意义

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中华实验眼科杂志 2012年第7期30卷 581-585页

作者：王存傅婷李志杰夏潮涌暨南大学一香港中文大学再生医学教育部重点实验室广州510600 暨南大学医学院组织学与胚胎学教研室广州510632

背景目前已有许多关于哺乳动物发育阶段角膜神经分布的研究，但是尚无对睁眼前后这几个时间段角膜神经分布的研究。目的了解小鼠睁眼前后角膜神经纤维长度与密度随着年龄增长的变化规律，为进一步的实验和临床研究提供依据。方法SPF级C5... 详细信息

背景目前已有许多关于哺乳动物发育阶段角膜神经分布的研究，但是尚无对睁眼前后这几个时间段角膜神经分布的研究。目的了解小鼠睁眼前后角膜神经纤维长度与密度随着年龄增长的变化规律，为进一步的实验和临床研究提供依据。方法SPF级C57BL／6小鼠分为出生后1d（P1d）、P7d、P13d（睁眼前1d）、P14d（半睁眼）、P17d（完全睁眼后1d）和P23d（完全睁眼后7d），各组均5只鼠10只眼。采用β-微管蛋白Ⅲ抗体进行整张角膜铺片免疫荧光染色，使用Delta Vision Core拍摄角膜背鼻侧、背颞侧、腹鼻侧和腹颞侧的神经纤维图像，根据体视学测量线性结构的原理，运用Image—Pro Plus5．1软件中的“手动测量-建立多边形特征”计算角膜面积，并且使用***曲线（间距为53μm）分别计算各组小鼠的角膜面积、神经纤维总长度以及各分区的神经纤维密度。结果C57／BL6小鼠P1、P7、P13、P14、P17、P23d的角膜面积分别为（0．404±O．007）、（1．362±0．154）、（1．573±O．080）、（1．603±0．046）、（1．8474±0．052）、（2．445±O．798）mm^2，神经纤维总长度值分别为（3．718±1．044）、（19．065±3．350）、（23．687±0．907）、（27．309±2．477）、（31．989±3．976）、（41．214±1．573）mm，神经纤维密度分别为（9．592±1．138）、（14．506±1．908）、（15．088±1．241）、（16．772±1．897）、（16．8214±2．102）、（17．660±1．216）mm／mm^2，均随鼠龄的增长而增加，差异均有统计学意义（F=22．906、0．424、2．375，P=0．000），角膜面积和神经纤维长度之间呈正相关（r=0．983，P〈0．01）。角膜4个分区的神经纤维密度随年龄的增长而增加（背鼻侧区：F=0．159，P=0．000；背颞侧区：F=2．172，P=0．001；腹鼻侧区：F=1．998，P=0．000；腹颞侧区：F=2．352，P=0．000）。其中从P13d到P14d，背鼻侧区的神经纤维密度减少了6．O％，差异无统计学意义（t=0．589，P=0．572）；而且从P14d到P17d，背颞侧区、腹鼻侧区和腹颞侧区的神经纤维密度分别减少了4．6％、5．5％和0．1％，差异均无统计学意义（t=0．549，P=0．596；t=0．701，P=0．501；t=-0．100，P=0．919）。结论小鼠睁眼过程对整个角膜或角膜各分区神经纤维的发育都有不同程度的影响。从P17d开始，小鼠角膜神经纤维呈追赶性增长，恢复增长趋势。

关键词：角膜神经纤维长度神经纤维密度 C57/BL6小鼠

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