检索结果-内蒙古大学图书馆

广州医学院学报 2011年第5期39卷 16-19页

作者：崔凤金沈伟哉郭国庆惠州市第三人民医院骨一科广东惠州516002 暨南大学医学院人体解剖学教研室广东广州510632

目的:观察大鼠脑缺血再灌注后大脑皮质第一躯体感觉运动区(S I区)、视上核神经元型一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,nNOS)免疫阳性神经元形态、数量变化以探讨nNOS在缺血性脑损伤中的变化规律和作用。方法:健康SD大鼠84只,体重220～... 详细信息

目的:观察大鼠脑缺血再灌注后大脑皮质第一躯体感觉运动区(S I区)、视上核神经元型一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,nNOS)免疫阳性神经元形态、数量变化以探讨nNOS在缺血性脑损伤中的变化规律和作用。方法:健康SD大鼠84只,体重220～250 g,随机分为2组:(1)脑缺血再灌注损伤模型组:用双侧颈总动脉阻塞法建立脑缺血再灌注损伤模型。(2)假手术组:只分离双侧颈总动脉而不阻断血流。分别于术后即刻、1、2、3 d、1、2、4周灌注取脑,nNOS免疫细胞化学染色,观察大脑皮质S I区、视上核内nNOS免疫阳性神经元形态及数量变化。结果:结扎双侧颈总动脉后1、2 d和2周,S I区nNOS免疫阳性神经元数量显著低于假手术组(P<0.05);结扎双侧颈总动脉后1周,视上核nNOS免疫阳性神经元数量显著低于假手术组(P<0.05)。结论:脑缺血再灌注损伤后,S I区、视上核内nNOS免疫阳性神经元数量的减少可能参与了再灌注损伤的保护机制。

关键词：脑缺血再灌注第一躯体感觉运动区视上核神经元型一氧化氮合酶

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细胞周期蛋白D1重组质粒的构建及其在鼻咽癌细胞中的表达

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南方医科大学学报 2010年第2期30卷 202-205页

作者：柏志全张海峰陈丽新朱林燕左婉红和树同王立伟暨南大学医学院生理学教研室广东广州510632 暨南大学医学院药理教研室广东广州510632

目的克隆人细胞周期蛋白D1基因,构建真核表达载体,诱导并鉴定其表达。方法利用RT-PCR法,以低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞mRNA为模板,扩增周期蛋白D1基因,构建重组表达载体pIRES2-EGFP-D1和pEGFP-C2-D1,用脂质体LipofectamineTM 2000将重组质... 详细信息

目的克隆人细胞周期蛋白D1基因,构建真核表达载体,诱导并鉴定其表达。方法利用RT-PCR法,以低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞mRNA为模板,扩增周期蛋白D1基因,构建重组表达载体pIRES2-EGFP-D1和pEGFP-C2-D1,用脂质体LipofectamineTM 2000将重组质粒转染到低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞,诱导其表达,免疫荧光、Western blotting等鉴定其表达。结果电泳获得918bp预期片段,重组质粒经酶切、PCR和测序分析证实含有周期蛋白D1完整读码框,将重组质粒导入CNE-2Z细胞并成功表达,目的蛋白经免疫荧光和Western blotting鉴定具有生物学活性。结论成功克隆并构建含周期蛋白D1基因的真核表达GFP质粒,为进一步研究周期蛋白D1在鼻咽癌CNE-2Z细胞中的作用奠定基础。

关键词：细胞周期蛋白D1 绿色荧光蛋白质粒构建免疫荧光免疫印迹

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口腔扁平苔藓固有层淋巴细胞中Fas及Fas配体的表达变化

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中华口腔医学杂志 2010年第4期45卷 219-222页

作者：雷蕾谭为霞周序珑郑佩娥暨南大学医学院口腔系广州510632 暨南大学医学院病理教研室广州510632

目的检测Fas及Fas配体（Fasligand，FasL）在口腔扁平苔藓（oral lichen planus，OLP）固有层淋巴细胞中的蛋白表达，探讨Fas、FasL和活化诱导的细胞死亡（activation—induced cell death，AICD）与OLP发病的关系。方法采用脱氧核糖核... 详细信息

目的检测Fas及Fas配体（Fasligand，FasL）在口腔扁平苔藓（oral lichen planus，OLP）固有层淋巴细胞中的蛋白表达，探讨Fas、FasL和活化诱导的细胞死亡（activation—induced cell death，AICD）与OLP发病的关系。方法采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法检测31例OLP和10例正常口腔黏膜（normal oral mucosa，NOM）中淋巴细胞凋亡情况；分别使用免疫组化法检测组织总淋巴细胞及CD8＋、CD4＋T细胞Fas、FasL的表达。结果OLP与NOM固有层淋巴细胞凋亡率[分别为（1．9±1．8）％、（11．5±9．0）％]差异有统计学意义（P=0．013）。OLP淋巴细胞Fas、FasL表达与NOM组相比明显增强[阳性表达率分别为52％（16／31）、71％（22／31），P值分别为0．005、0．000]。OLP中CD8＋与Fas＋细胞双阳性表达率为10％，与NOM组相比无明显升高（P=0．313），而CD8＋与FasL＋细胞双阳性表达率[58％（3／31）]显著升高（P=0．002）。CD4＋与Fas＋细胞双阳性表达率为35％（11／31），较NOM组显著升高（P=0．031），其中网纹型的表达明显升高（阳性表达为8／19，P=0．019），但糜烂、萎缩型的表达无显著升高（阳性表达为3／12，P=0．097）。CD4＋与Fas L＋表达率为16％（5／31），与NOM组相比无明显增强（P=0．182）。结论OLP淋巴细胞凋亡低下；OLP中T细胞亚群Fas、FasL表达不均衡，CD8＋细胞和萎缩、糜烂型OLP中CD4＋细胞可能逃逸AICD，与炎症的持续和进展有关；网纹型OLP中部分CD4＋T细胞可能经历AICD。

关键词：扁平苔藓,口腔 Fas配体蛋白质激活诱导细胞死亡

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单纯生物学制剂诱导人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞快速分化

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生理学报 2010年第1期62卷 73-78页

作者：王跃春张洹段阿林林伟霞郑乔丹徐文璐暨南大学医学院生理学教研室暨南大学医学院血液病研究所

为探讨用单纯生物学制剂诱导人脐带间充质干细胞(mesenchymal stem cells derived from human umbilical cord,hUC-MSCs)向胰岛素分泌细胞分化的可行性,本研究用胶原酶Ⅱ、胰蛋白酶次序消化及两步离心法从人胎儿完整脐带中分离、纯化出h... 详细信息

为探讨用单纯生物学制剂诱导人脐带间充质干细胞(mesenchymal stem cells derived from human umbilical cord,hUC-MSCs)向胰岛素分泌细胞分化的可行性,本研究用胶原酶Ⅱ、胰蛋白酶次序消化及两步离心法从人胎儿完整脐带中分离、纯化出hUC-MSCs;用表皮生长因子、碱性成纤维生长因子、银杏提取液和高糖培养基IMDM诱导hUC-MSCs向胰岛素分泌细胞分化。在hUC-MSCs诱导前后,用倒置显微镜观察其形态变化,RT-PCR检测其胰岛相关基因的表达;双硫腙染色鉴定胰岛样细胞团(islet-like clusters,ILCs);细胞免疫荧光染色检测ILCs中PDX-1和免疫活性胰岛素(immunoreactive insulin,IRI)的表达;化学发光法检测ILCs的IRI分泌量;Western blot鉴定IRI的性质。结果显示:纯化的hUC-MSCs呈间充质干细胞特有的形态特征:长梭形,平行或螺旋形排列;在上述单纯生物学制剂的诱导下,hUC-MSCs逐渐变圆并聚集成团;在25cm2培养瓶的细胞生长面可见上百个ILCs;ILCs表达胰岛特异性基因pdx-1、insulin;ILCs呈PDX-1和IRI免疫染色阳性反应,双硫腙染色呈阳性;ILCs可分泌IRI,但多为胰岛素原(proinsulin,PI)。以上结果提示,用表皮生长因子、碱性成纤维生长因子、银杏提取液和高糖培养基IMDM可诱导hUC-MSCs快速分化为胰岛素分泌细胞,但ILCs功能不够成熟,难以产生足量真胰岛素。

关键词：脐带间充质干细胞胰岛素分泌细胞细胞分化生物学制剂

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广州地区猴腺病毒7型血清流行病学初步调查

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分子诊断与治疗杂志 2011年第5期3卷 306-308页

作者：卢建溪梅明珠钱师宇李刚中山大学附属第三医院疫苗研究所广东广州510630 暨南大学医学院医学信息教研室广东广州510632 中山大学附属第三医院感染科广东广州510630

目的评估广州地区猴腺病毒7型(SAdV-7)先存中和抗体阳性率情况。方法首先构建以β-半乳糖苷酶(LacZ)为报告基因,结合CMV启动子的猴重组腺病毒7型载体SAdV7-CMV-LacZ。然后使用化学发光法,检测209份免疫功能正常的成人的血清样本中SAdV-... 详细信息

目的评估广州地区猴腺病毒7型(SAdV-7)先存中和抗体阳性率情况。方法首先构建以β-半乳糖苷酶(LacZ)为报告基因,结合CMV启动子的猴重组腺病毒7型载体SAdV7-CMV-LacZ。然后使用化学发光法,检测209份免疫功能正常的成人的血清样本中SAdV-7中和抗体阳性率情况。结果我们发现SAdV-7中和抗体的阳性率为27.8%(58/209)。SAdV-7中和抗体在低滴度时阳性率最高,并且随着滴度的升高,阳性血清分布率逐渐降低。在20～40岁人群中,SAdV-7中和抗体阳性率最高,在<20岁人群中未检测到SAdV-7中和抗体。结论广州地区人群中针对SAdV-7的先存中和抗体阳性率低。因此,SAdV-7在基因治疗及基因疫苗的应用上是一个具有吸引力的候选载体。

关键词：人腺病毒猴腺病毒中和抗体

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左旋肉碱抗疲劳实验研究

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热带医学杂志 2011年第7期11卷 740-742页

作者：周筱燕陈静刘常秀李伟吴伟青刘超群南方医科大学珠江医院广东广州510280 暨南大学医学院营养学教研室广东广州510632 佛山市禅城区澜石医院妇产科广东佛山528000

目的研究左旋肉碱抗疲劳的效果。方法将健康雄性昆明小鼠80只随机分入四个组:实验前肌糖原和肝糖原测定组、负重游泳组、血乳酸测定组、尿素氮测定组,每个实验各20只小鼠。每个组再随机分成对照组和实验组,每组10只。对照组每天以蒸馏... 详细信息

目的研究左旋肉碱抗疲劳的效果。方法将健康雄性昆明小鼠80只随机分入四个组:实验前肌糖原和肝糖原测定组、负重游泳组、血乳酸测定组、尿素氮测定组,每个实验各20只小鼠。每个组再随机分成对照组和实验组,每组10只。对照组每天以蒸馏水灌胃,实验组以600mg/kg左旋肉碱灌胃,连续6周后分别测定肝糖原、肌糖原、游泳时间、血乳酸、血清尿素氮含量等指标,观察左旋肉碱抗疲劳效果。结果左旋肉碱组小鼠游泳时间和运动前肌肝糖原含量较对照组明显增加(P<0.05),游泳30min和游泳60min的肌肝糖原消耗均较对照组明显减少(P<0.05),力竭游泳后肝糖原消耗较对照组显著减少(P<0.05),但肌糖原消耗与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);运动后左旋肉碱组乳酸增加较对照组明显降低(P<0.05),休息30mim后血乳酸含量较对照组降低,恢复率明显增加(P<0.05);运动结束休息60min后左旋肉碱组血清尿素氮增量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),但休息120min后,左旋肉碱组血清尿素氮含量较对照组明显降低,恢复率显著增高(P<0.05)。结论左旋肉碱具有抗疲劳作用,其抗疲劳作用机理主要与左旋肉碱增加肌肝糖原储备,减少运动后肌肝糖原消耗,抑制乳酸生成,加速乳酸和尿素氮清除有关。

关键词：左旋肉碱抗疲劳糖原乳酸尿素氮

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H2O2促进子痫前期外周免疫细胞活化

H2O2促进子痫前期外周免疫细胞活化

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2011中国妇产科学术会议暨浙江省计划生育与生殖医学学术年会暨生殖健康讲习班

作者：钱中清曾耀英王才智汪洪涛姚春艳蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染免疫重点实验室暨南大学组织移植与免疫实验中心蚌埠医学院第一附属医院产科

目的探讨子痫前期患者血清中HO与中性粒细胞及T淋巴细胞活化的关系。方法①荧光标记抗体全血染色后,流式细胞仪分别检测正常非孕妇组,正常孕妇组及子痫前期患者组外周血CD3/HLA-D,CD3/CD62L细胞百分率,及粒细胞区CD62L细胞百分率;②40μ... 详细信息

目的探讨子痫前期患者血清中HO与中性粒细胞及T淋巴细胞活化的关系。方法①荧光标记抗体全血染色后,流式细胞仪分别检测正常非孕妇组,正常孕妇组及子痫前期患者组外周血CD3/HLA-D,CD3/CD62L细胞百分率,及粒细胞区CD62L细胞百分率;②40μmol/L HO体外刺激正常孕妇PBMCs 24h,流式细胞仪检测CD3/HLA-DR,CD3/CD62L细胞百分率;③40μmol/L HO体外刺激正常孕妇外周血来源中性粒细胞6h,HDCFDA荧光探针染色,流式细胞仪检测平均荧光强度水平;④贴壁分离法去除贴壁细胞的正常孕妇外周血来源PBMCs,与经40μmol/L HO体外刺激6h的中性粒细胞继续共培养24h,流式细胞仪检测CD3/HLA-DR细胞百分率。结果①子痫前期患者组外周血CD3/HLA-DR细胞百分率（61.64±10.48,n=16）,与正常非孕妇组（10.37±6.01,n=12）及正常孕妇组（25.26±11.72,n=19）比较均显著升高,具有统计学意义（P<0.01）;子痫前期患者组CD3/CD62细胞百分率（63.04±14.34,n=16）与正常非孕妇组（48.46±13.03,n=12）或正常孕妇组（80.58±17.89,n=19）比较均显著降低,具有统计学意义（P<0.01）;②与正常非孕妇外周血粒细胞区高表达CD62L细胞区的平均荧光强度值（213.46±10.24,n=19）比较,正常孕妇（363.86±11.31,n=12）及子痫前期患者（288.51±8.76,n=16）均显著升高,具有统计学意义（P<0.01）;③40μmol/L HO体外刺激正常孕妇PBMCs 24h后,CD3/CD62L细胞百分率分别为（16.57±2.11）和（69.11±6.72）,分别与空白对照组（17.19±1.93）及（73.19±5.77）比较,均无统计学意义（P>0.05,n=12）。④40μmol/L HO体外刺激正常孕妇中性粒细胞6h后,其胞内ROS探针平均荧光强度为（86.42±5.13）,与对照组（54.23±3.57）比较有统计学意义（P<0.01,n=12）;⑤正常孕妇PBMCs与经40μmol/L HO预处理的正常孕妇中性粒细胞共培养24h后,CD3/HLA-DR细胞百分率明显升高（P<0.01,n=12）,去除贴壁细胞可显著降低这一效应（P<0.01,n=12）。结论子痫前期患者血清高水平HO可通过活化中性粒细胞促进外周T淋巴细胞的活化,并需贴壁细胞的参与。

关键词：子痫前期过氧化氢中性粒细胞 T淋巴细胞

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天麻素对乙醇诱导肝细胞株L02细胞损伤的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第3期26卷 211-213页

作者：柏志全胡巢凤孙丽萍暨南大学医学院生理学教研室广东广州510632 暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

目的:探讨天麻素对乙醇诱导肝细胞株L02损伤的影响。方法:将人肝细胞株L02培养,加入不同浓度的乙醇,采用MTT比色法确定乙醇作用的浓度。用流式细胞仪测定细胞活性氧簇(ROS)及线粒体膜电位的改变;采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)分析法检... 详细信息

目的:探讨天麻素对乙醇诱导肝细胞株L02损伤的影响。方法:将人肝细胞株L02培养,加入不同浓度的乙醇,采用MTT比色法确定乙醇作用的浓度。用流式细胞仪测定细胞活性氧簇(ROS)及线粒体膜电位的改变;采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)分析法检测细胞ATP含量。结果:乙醇(25 mL/L)作用36 h可损伤肝细胞,细胞内ROS的水平明显增加;而细胞线粒体膜电位及肝细胞中ATP的含量则显著降低(P<0.01)。天麻素具有减轻细胞损伤的作用,并可降低损伤的肝细胞内ROS的含量,增加细胞线粒体膜电位和ATP的水平。结论:天麻素可抑制乙醇诱导的肝细胞损伤及脂质过氧化反应,改善线粒体功能,增加能量合成,发挥保护肝细胞的作用。

关键词：肝细胞活性氧簇线粒体膜电位能量代谢天麻素

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卡维地洛对大鼠心脏成纤维细胞白介素-6（IL-6）表达的影响

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浙江临床医学 2011年第9期13卷 961-963页

作者：叶芬吴少威李冀高原石理暨南大学附属珠海医院珠海市人民医院心血管内科 519000 遵义医学院珠海校区生理教研室广东珠海519000

目的探讨不同剂量卡维地洛对大鼠心脏成纤维细胞IL-6表达的影响。方法通过体外培养大鼠心脏成纤维细胞（CFs），应用不同剂量卡维地洛干预细胞，MTT法检测细胞增殖，ELISA法检测IL-6的表达，并进行对比研究。结果卡维地洛有抑制心脏成... 详细信息

目的探讨不同剂量卡维地洛对大鼠心脏成纤维细胞IL-6表达的影响。方法通过体外培养大鼠心脏成纤维细胞（CFs），应用不同剂量卡维地洛干预细胞，MTT法检测细胞增殖，ELISA法检测IL-6的表达，并进行对比研究。结果卡维地洛有抑制心脏成纤维细胞增殖的作用，并对IL-6的表达有抑制作用，随着卡维地洛浓度的增加，这种作用亦随之增加，且具有统计学意义。结论卡维地洛有抑制大鼠心脏成纤维细胞增殖及IL-6表达的作用，而且存在剂量依赖效应。

关键词：卡维地洛心脏成纤维细胞 IL-6

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高胆红素血症新生大鼠脑干听觉诱发电位快慢成分的变化

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中国应用生理学杂志 2010年第1期26卷 77-81页

作者：何斯纯陈中婕马宁暨南大学医学院生理学教研室广东广州510632

目的:探讨高胆红素血症新生大鼠脑干听觉诱发电位快成分(FC-BAEP)和慢成分(SC-BAEP)及脑干神经元线粒体超微结构的异常变化。方法:生后7天SD大鼠随机分为对照组(C组,17只)和两个实验组(T1和T2组,各17只)。T1和T2组大鼠生后7天和10天腹... 详细信息

目的:探讨高胆红素血症新生大鼠脑干听觉诱发电位快成分(FC-BAEP)和慢成分(SC-BAEP)及脑干神经元线粒体超微结构的异常变化。方法:生后7天SD大鼠随机分为对照组(C组,17只)和两个实验组(T1和T2组,各17只)。T1和T2组大鼠生后7天和10天腹腔注射2g/L胆红素溶液,第二次腹腔注射6h后随机抽出7只断头取血用微量胆红素仪检测血清胆红素,其余大鼠生后17天和20天用诱发电位仪检测FC-BAEP和SC-BAEP,生后20天灌注固定、取耳蜗核进行透射电镜观察。结果:T1和T2组大鼠于生后10天腹腔注射6h后,血清胆红素浓度明显升高;T1和T2组大鼠生后17天三种刺激重复率(10/s,40/s,80/s)引导的FC-BAEP,除Ⅱ-Ⅳ波峰间潜伏期(IPL)外,各波波峰潜伏期(PL)和IPL显著延长,且T2组大鼠各波PL较T1组显著延长;T1和T2组大鼠生后20天三种刺激重复率引导的FC-BAEP,除刺激重复率10/s和40/s引导的Ⅱ-ⅣIPL外,各波PL和IPL显著延长;T1和T2组大鼠生后17天与20天刺激重复率10/s引导的SC-BAEP的PL显著延长,且T2组大鼠生后17天SC-BAEP的PL较T1组显著延长;T1和T2组大鼠耳蜗核电镜观察可见神经元线粒体肿胀变形、膜模糊不清和嵴断裂等。结论:高胆红素血症新生大鼠FC-BAEP和SC-BAEP及脑干神经元线粒体超微结构有显著异常变化,FC-BAEP与SC-BAEP的PL和IPL是早期监测胆红素诱发的听觉和脑损伤的客观灵敏指标。

关键词：高胆红素血症大鼠脑干听觉诱发电位快成分慢成分线粒体

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