检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验诊断学 2006年第7期10卷 715-717页

作者：牛永东许丽艳韩溟方王楷沈忠英李恩民汕头大学医学院生化与分子生物学教研室广东汕头515041 汕头大学医学院肿瘤病理研究室

目的酵母单杂交系统是研究生物大分子DNA和蛋白质间相互作用的有效手段之一,酵母单杂交筛库实验是获取可以和诱饵序列相互作用的反式作用因子的关键。方法酵母单杂交诱饵质粒pHISi3NF转化YM4271;通过不同浓度3-AT实验,获得酵母单杂交用... 详细信息

目的酵母单杂交系统是研究生物大分子DNA和蛋白质间相互作用的有效手段之一,酵母单杂交筛库实验是获取可以和诱饵序列相互作用的反式作用因子的关键。方法酵母单杂交诱饵质粒pHISi3NF转化YM4271;通过不同浓度3-AT实验,获得酵母单杂交用宿主细胞YM4271pHISi3NF4;大规模筛选人食管癌细胞cDNA文库。结果经筛库后续验证实验证实得到阳性克隆。结论通过准确确定3-AT的工作浓度,有效地完成了酵母单杂交的大规模筛选人食管癌细胞cDNA文库的实验。

关键词：酵母单杂交阳性克隆 cDNA文库

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠TIM2基因真核表达载体的构建及鉴定

引用

细胞与分子免疫学杂志 2006年第6期22卷 713-715页

作者：马玲娣张彦文世宏何於娟刘小珊康格非蒋纪恺南京医科大学附属常州第二人民医院中心实验室重庆医科大学检验系临床生化教研室重庆400016 重庆医科大学检验系临床生化教研室汕头大学医学院分子生物学中心

目的:构建真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并在小鼠肝癌细胞系H22中进行表达。方法:用RT-PCR法扩增得到TIM2基因,构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并进行BamHI及BglⅡ双酶切鉴定和测序。通过脂质体法转染H22细胞,用RT-PCR法检测H2... 详细信息

目的:构建真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并在小鼠肝癌细胞系H22中进行表达。方法:用RT-PCR法扩增得到TIM2基因,构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并进行BamHI及BglⅡ双酶切鉴定和测序。通过脂质体法转染H22细胞,用RT-PCR法检测H22细胞中TIM2mRNA的表达。结果:构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,用脂质体法转染H22细胞后,用荧光显微镜观察和RT-PCR法检测,可见细胞内有EGFP及TIM2mRNA的表达。结论:成功地构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并在小鼠H22细胞中表达,为进一步研究TIM2在肿瘤生物治疗中的应用奠定了基础。

关键词： T细胞免疫球蛋白和黏蚩白结构域分子2 增强型绿色荧光蛋白真核表达载体小鼠H22肝癌细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

青风藤碱对海人酸所致神经毒性的抑制效应

引用

江西医学院学报 2006年第4期46卷 166-166,168页

作者：晏浩韩喻美南昌大学研究生院医学部南昌大学医学院生化-分子生物学教研室南昌330006

目的青风藤碱对海人酸所致神经毒性的抑制效应,用谷氨酸的受体激动剂海人酸(KA)引起的神经损伤为动物模型探讨青风滕碱的抑制效应。方法36只大白鼠随机分为6组:海人酸组,海人酸+青风滕碱20μg/μL组,海人酸+青风滕碱4μg/μL组,海人酸+... 详细信息

目的青风藤碱对海人酸所致神经毒性的抑制效应,用谷氨酸的受体激动剂海人酸(KA)引起的神经损伤为动物模型探讨青风滕碱的抑制效应。方法36只大白鼠随机分为6组:海人酸组,海人酸+青风滕碱20μg/μL组,海人酸+青风滕碱4μg/μL组,海人酸+青风滕碱0.8μg/μL组,海人酸+0.9%氯化钠注射液组和正常对照组。向前5组大白鼠深部前梨状皮层定位注射海人酸(KA)引起的神经损伤模型,施加药物,经两周的恢复后,采用从心脏上行灌注法,原位固定脑组织,冰冻切片、染色、进行病理切片,观察青风滕碱对注射区神经元的保护作用。结果Ⅰ组可使还原型辅酶Ⅱ-硫辛酰胺脱氢酶显阳性的神经元显著减少;而2、3、4组则可产生明显的神经保护作用。结论青风滕碱对海人酸所致神经毒性有抑制效应。

关键词：青风藤碱海人酸神经毒性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

电子射线局部辐照大鼠Ⅰ/Ⅲ型胶原表达及基质金属蛋白酶改变的研究

引用

实验动物与比较医学 2006年第4期26卷 227-230页

作者：周迎会仇灏徐岚姜智孙其昌马震宇吴士良苏州大学医学院生化与分子生物学教研室暨苏州大学生化工程研究所苏州215123

目的探讨电子射线(模拟β射线)局部辐照大鼠致放射损伤后胶原表达及相关基质金属蛋白酶(MMPs)变化的情况。方法采用直线加速器局部照射制作SD大鼠的辐射损伤模型,观察Ⅰ/Ⅲ型胶原表达及MMP1、MMP2、MMP9表达的变化情况。结果β射线照射... 详细信息

目的探讨电子射线(模拟β射线)局部辐照大鼠致放射损伤后胶原表达及相关基质金属蛋白酶(MMPs)变化的情况。方法采用直线加速器局部照射制作SD大鼠的辐射损伤模型,观察Ⅰ/Ⅲ型胶原表达及MMP1、MMP2、MMP9表达的变化情况。结果β射线照射引起的皮肤损伤可以引起胶原含量和分型的改变,MMP-1有不同程度的提高,MMP2与MMP9的表达随辐射剂量的增加,由强变弱再上升变强。结论β射线照射皮肤损伤引起的创面难愈合可能与胶原含量和结构的改变相关,其又与胶原的降解酶MMP1活性增强有关；MMP2与MMP9参加基底膜的溶解、血管形成和坏死组织的清除,有助于创面的重建,促进创面的愈合。

关键词：电子射线放射损伤胶原表达基质金属蛋白酶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人类多肽 N-乙酰氨基半乳糖转移酶2抗原表位分析、抗体制备及亚细胞定位

人类多肽 N-乙酰氨基半乳糖转移酶2抗原表位分析、抗体制备及亚细...

引用

华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会

作者：杭赛宇胡鹤娟朱燕马震宇闫石吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所

为了研究人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)蛋白表达的亚细胞结构定位,制备特异性抗体。我们联合应用了多种方法对多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2的二级结构和表面特性进行了细致地分析,发现其优势抗原表位均位于蓖麻样结... 详细信息

为了研究人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)蛋白表达的亚细胞结构定位,制备特异性抗体。我们联合应用了多种方法对多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2的二级结构和表面特性进行了细致地分析,发现其优势抗原表位均位于蓖麻样结构域中;进一步采用了RT-PCR方法克隆到蓖麻样结构域cDNA片段,将获得的蓖麻样结构域cDNA片段定向插入到表达载体PGEX-5X-3中,且导入大肠杆菌,诱导表达,获重组融合蛋白;将得到的重组融合蛋白免疫新西兰大白兔,我们获得了兔抗人ppGalNAc-T2的多克隆抗体,并进行ELISA法检测抗体效价,抗体滴度为1:3200,并进行了有效性检测;蛋白质印迹实验证实此多克隆抗体具有较好的反应性和特异性。通过荧光免疫细胞化学进行亚细胞定位,发现ppGalNAc-T2主要表达在细胞核旁的Golgi复合体,说明它们主要分布在Golgi复合体上,证实它们是在Golgi复合体参与蛋白质的糖链修饰。本文特异性扩增和表达蓖麻样结构域并制备了抗体,有利于进一步阐明RICIN结构域的功能,为研究多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2及其家族的结构和功能打下基础。

关键词：多肽 N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAc-T) 抗原表位抗体亚细胞定位

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

不同肿瘤细胞株三种糖基转移酶家族的差异表达谱研究

引用

肿瘤基础与临床 2006年第4期19卷 261-264页

作者：邵雪君吴士良金美芳苏州大学附属儿童医院儿研所江苏苏州215003 苏州大学医学院生化与分子生物学教研室

目的采用低密度cDNA表达阵列研究人不同肿瘤细胞中的糖基转移酶基因家族的表达谱差异。方法TOPO-TA克隆获得硫酸基(磺基)转移酶、半乳糖基转移酶和N-乙酰氨基葡萄糖转移酶三种糖基转移酶基因家族的cDNA文库,PCR获得目的基因,逆转录标记... 详细信息

目的采用低密度cDNA表达阵列研究人不同肿瘤细胞中的糖基转移酶基因家族的表达谱差异。方法TOPO-TA克隆获得硫酸基(磺基)转移酶、半乳糖基转移酶和N-乙酰氨基葡萄糖转移酶三种糖基转移酶基因家族的cDNA文库,PCR获得目的基因,逆转录标记不同肿瘤细胞株的cDNA探针,化学发光法表达阵列对人不同肿瘤细胞进行表达谱分析。结果建立了硫酸基(磺基)转移酶、半乳糖基转移酶和N-乙酰氨基葡萄糖转移酶三种糖基转移酶家族的cDNA文库,并制成低密度cDNA表达阵列。通过阵列分析发现:在不同肿瘤细胞中,除SHG44和PC12等神经细胞未检出I-GlcNAc6ST表达外,其余几种肺癌、胃癌和白血病肿瘤细胞株中均有高水平的表达;其它糖基转移酶在不同的肿瘤细胞中也存在差异表达,与目前文献报道的肿瘤细胞的糖基化特征基本一致。结论在不同肿瘤细胞中,糖基转移酶基因家族表达谱有差异,特别是磺基转移酶I-GlcNAc6ST高水平表达更值得关注,其表达差异可能与肿瘤的发生、发展有着一定的相关性。

关键词：糖基转移酶基因阵列 cDNA文库 TOPO—TA克隆

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在不同发育阶段的小鼠脑中的mRNA表达差异

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在不同发育阶段的小鼠脑中的mRN...

引用

华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会

作者：胡鹤娟杨静杭赛宇吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所

目的:为了观察三个不同发育阶段的小鼠脑中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族(polypeptide: N-acetylgalactosaminytransferase,ppGalNAc-T)的表达差异,以探讨多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在脑发育中的功能与作用;方法:取不同发育阶... 详细信息

目的:为了观察三个不同发育阶段的小鼠脑中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族(polypeptide: N-acetylgalactosaminytransferase,ppGalNAc-T)的表达差异,以探讨多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在脑发育中的功能与作用;方法:取不同发育阶段(即孕末期,新生期,4周龄)的小鼠各六只, 取脑组织后,我们采用半定量逆转录PCR方法从mRNA水平上粗略地研究了多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在三个发育阶段的表达情况,以β-actin作为内对照,计算酶家族各成员的相对表达量,从而进行半定量分析;结果:我们发现三个不同发育阶段的小鼠脑中此酶家族的表达谱是不尽相同的。 T1、T2、T3、T4、T9、T10、T13、T14稳定表达,T3、T4、T9、T10在胎鼠中表达较高,在新生鼠和4周龄鼠中表达较低,且在新生鼠和4周龄鼠中的表达基本相同,T1、T2、T14等在各发育阶段鼠脑中表达基本无变化;结论:我们初步认为在小鼠脑的发育过程中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族的表达有一定的变化,在今后的实验中,将在时间点及脑分区,即时空性表达方面,作更进一步地完善细致的研究, 进一步推动多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在神经系统发育方面的研究工作,以探讨多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在脑发育中的功能与作用

关键词： ppGalNAc-T 小鼠脑表达 RT-PCR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

全反式维甲酸对HL60细胞株三种糖基转移酶家族表达的影响

引用

中国血液流变学杂志 2006年第1期16卷 26-30,60页

作者：杨静赵凝郭向红胡鹤娟杭赛宇吴士良苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所江苏苏州215123

目的从mRNA水平检测HL60细胞株中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族(polypeptide:Nacetylgalactosaminytra -nsferases,ppGalNAcTs)、N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶家族(UDP-N-acetylglucosamine:beta-galactose betal, 3-N-acetylglucosaminyltransferases,β3GnTs)及O-连接乙酰氨基葡萄糖转移酶家族(O-linked GlcNAc transferase,OGnT)的表达情况,研究全反式维甲酸(All-transretinoic acid,ATRA)培养对不同糖基转移酶表达水平的影响。方法采用Real time RT- PCR方法从mRNA水平上研究ppGalNAcTs、β3GnTs、OGnT的表达以及加入ATRA后表达水平的变化,用3H掺入试验检测加入ATRA对细胞增殖的影响,流式细胞仪观察细胞周期情况,激光共聚焦显微镜观察细胞形态的变化。结果加入ATRA 后HL60细胞株中β3GnT1、ppGalNAcT2表达量急剧增加,细胞阻滞在G2／M期,细胞的生长增殖受到抑制,细胞向粒系分化。结论加入分化诱导剂后细胞发生显著变化,提示β3GnT1、ppGalNAcT2与白血病细胞株的分化可能有一定关系。

关键词：全反式维甲酸糖基转移酶 HL60 诱导分化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

egfr基因两个重要片段和核基质结合

引用

癌变．畸变．突变 2006年第3期18卷 198-200页

作者：李冠武王云柏素云温博贵汕头大学医学院病理系/肿瘤分子生物学开放实验室/生物化学教研室广东汕头515041 泰山医学院生化教研室山东泰安271000

背景与目的:探讨舌鳞癌细胞株TCA8113中egfr基因两个重要片段和核基质的关系。材料与方法:应用免疫组化和Western印迹对TCA8113中表皮生长因子受体(Epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)的表达进行检测,通过PCR扩增了解egfr基因的两个... 详细信息

背景与目的:探讨舌鳞癌细胞株TCA8113中egfr基因两个重要片段和核基质的关系。材料与方法:应用免疫组化和Western印迹对TCA8113中表皮生长因子受体(Epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)的表达进行检测,通过PCR扩增了解egfr基因的两个片段与核基质的结合关系。结果:TCA8113不仅表达EGFR,而且,在该细胞株中EGFR基因的两个片段(一个为由829bp长的编码区片段和110bp长的内含子构成的939bp长的片段;另一个为110bp长的非编码区片段)均与核基质紧密结合。结论:TCA8113细胞中egfr基因通过这两个片段与核基质紧密结合,并可能通过这种相互作用调控EGFR的表达。进一步分离和鉴定与egfr基因片段结合的核基质蛋白,并研究它的功能,对了解EGFR与肿瘤发生发展的关系,以及阻断EGFR治疗肿瘤有一定意义。

关键词：表皮生长因子受体核基质舌鳞癌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人类β3-半乳糖基转移酶基因β3GALT7的克隆、表达及功能的初步研究

人类β3-半乳糖基转移酶基因β3GALT7的克隆、表达及功能的初步研...

引用

华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会

作者：吴艳孙其昌周嘉良吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所

β3GALT7(AY277592,EC2．4．1-)基因是我们实验室利用TBLASTN信息途径,以β3GALT1为信息探针进行同源帅选后从人肺cDNA文库中克隆到的人类β3-半乳糖基转移酶家族的一个新成员。 Northern杂交显示其在肺、喉和回肠组织中高表达而在舌、... 详细信息

β3GALT7(AY277592,EC2．4．1-)基因是我们实验室利用TBLASTN信息途径,以β3GALT1为信息探针进行同源帅选后从人肺cDNA文库中克隆到的人类β3-半乳糖基转移酶家族的一个新成员。 Northern杂交显示其在肺、喉和回肠组织中高表达而在舌、乳房、子宫等组织中表达较低。为了进一步认知该酶的功能,我们进行了一些探索性的研究。方法:通过原核表达系统表达β3GALT7蛋白,以纯化的β3GALT7蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体并用Western Blot和免疫组化的方法分析其在多种组织和细胞中的表达情况;通过荧光免疫细胞化学的方法进行亚克隆定位;克隆β3GALT7编码区的基因并构建其真核正义和反义表达载体,并运用脂质体介导将此重组载体转染中度表达该基因的人 SGC7901细胞株,和较高表达β3GALT7的A549细胞株,并通过荧光显微镜,激光共聚焦显微镜,RTPCR, western印迹等方法对其进行了初步的功能研究。结果:获得了较纯的β3GALT7表达蛋白和高效价、高特异性的抗β3GALT7的多克隆抗体,免疫组化显示肿瘤细胞和组织中该酶有较高的表达,与正常组织比较具有一定的差异,亚克隆定位显示β3GALT7大部分位于核膜周围的胞浆。同时获得了β3GALT7的正义、反义的真核重组质粒及稳定转染了这些重组质粒的细胞株,发现转染了正义质粒的 SGC7901细胞其β3GALT7蛋白表达水平增加,MMP2、MMP14的蛋白表达水平随其亦有所上升,而转染了反义β3GALT7的A549细胞其MMP2和MMP14的蛋白表达量随着β3GALT7的被抑制而成正相关下降,提示β3GALT7可能与肿瘤的发生、发展和转移具有一定的相关性。

关键词：半乳糖基转移酶 β3GALT7 多克隆抗体免疫组化原核表达真核表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：