检索结果-内蒙古大学图书馆

生命科学研究 2011年第4期15卷 317-322页

作者：朱雪姣李育敏谷景义郭敏费嘉暨南大学医学院生物化学与分子生物学教研室中国广东广州510632 广西壮族自治区民族医院中国广西南宁530001 暨南大学医学院血液病研究所中国广东广州510632

为研究以miRNA-21为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)提高白血病K562细胞对阿糖胞苷(Ara-C)的敏感性及可能的作用机制,在LipofectamineTM2000介导下,将化学合成的AMO-miR-21转染K562细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测单独使用AMO-miR-21、Ara-C以及两者联合使用对细胞增殖抑制作用,并计算抑制率和IC50;流式细胞仪检测细胞凋亡;实时定量PCR(Real-time PCR)检测miRNA-21及其候选靶基因Pdcd4 mRNA的表达水平;免疫印迹(Western blot)检测Pdcd4蛋白的表达水平.结果显示Ara-C与AMO-miR-21联合使用后,IC50从1.95μmol/L降低到0.84μmol/L,敏感性提高到单用Ara-C的2.3倍.AMO-miR-21联合Ara-C组细胞凋亡明显增加(P<0.05).AMO-miR-21显著抑制K562细胞中miRNA-21的表达水平(P<0.05),同时Pdcd4的表达明显增加(P<0.05).提示AMO-miR-21可以提高K562细胞对Ara-C的敏感性,其作用机制与靶向抑制miRNA-21,进而诱导细胞凋亡有关.

关键词： miRNA-21 反义寡核苷酸阿糖胞苷 K562细胞化疗敏感性

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白英水提物对肺癌SPC-A-1细胞的凋亡及bcl-xl、bid表达的影响

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南昌大学学报（医学版） 2011年第6期51卷 8-12页

作者：王美凤余乐涵万慧芳涂硕南昌市第一医院呼吸内科南昌330008 南昌大学医学院实验教学部南昌330088 南昌大学基础医学院生化与分子生物学教研室南昌330006

目的观察白英水提物(extracts of solanun lyratum thumb,ESL)对肺癌SPC-A-1细胞凋亡及基因bcl-xl、bid表达的影响。方法常规法制备ESL,实验分为正常对照组、白英处理组。白英处理组加入ESL,终质量浓度分别为12.5、25.0和50.0 ***-1;正... 详细信息

目的观察白英水提物(extracts of solanun lyratum thumb,ESL)对肺癌SPC-A-1细胞凋亡及基因bcl-xl、bid表达的影响。方法常规法制备ESL,实验分为正常对照组、白英处理组。白英处理组加入ESL,终质量浓度分别为12.5、25.0和50.0 ***-1;正常对照组的培养细胞不加药物处理。采用流式细胞仪检测细胞凋亡、半定量RT-PCR和免疫组织化学法分析细胞中bcl-xl、bid基因表达。结果与正常对照组比较,白英处理组SPC-A-1细胞增殖有显著性下降,细胞凋亡显著性增多(P<0.05);bcl-xl mRNA和Bcl-xl蛋白表达降低、bid mR-NA和Bid蛋白表达升高(P<0.05),并随ESL质量浓度的增加而加强。结论 ESL能诱导人肺癌SPC-A-1细胞上调bcl-xl基因表达,下调bid基因表达,且作用有一定的量效关系,这可能是白英诱导细胞凋亡的重要作用机制。

关键词：白英肺癌SPC-A-1细胞凋亡 bcl-xl bid 基因表达

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靶向抑制微小RNA-21提高白血病细胞对三氧化二砷的敏感性研究

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中国中西医结合杂志 2010年第2期30卷 170-173页

作者：李育敏谷景义朱雪娇陈万群郭敏姚君琳林春燕费嘉暨南大学医学院生物化学与分子生物学教研室广州510632 暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院临床医学系

目的探讨以微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21)为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)提高白血病K562细胞对三氧化二砷(As2O3)的敏感性及可能的作用机制。方法利用LipofectamineTM 2000将化学合成的反义核酸转染K562细胞。MTT法检测单独使用AMO-m... 详细信息

目的探讨以微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21)为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)提高白血病K562细胞对三氧化二砷(As2O3)的敏感性及可能的作用机制。方法利用LipofectamineTM 2000将化学合成的反义核酸转染K562细胞。MTT法检测单独使用AMO-miR-21、As2O3以及两者联合使用对细胞增殖的抑制作用,并计算抑制率和IC50;PI单染检测细胞周期及凋亡;实时定量PCR检测miRNA-21表达水平的改变;免疫荧光法检测miRNA-21候选靶基因PDCD4蛋白表达的改变。结果AMO-miR-21与As2O3联合使用后,IC50从2.10μmol/L降低到1.23μmol/L,敏感性提高到单用As2O3的1.78倍;AMO-miR-21联合As2O3组细胞凋亡明显增加(P<0.05);单独转染AMO-miR-21可显著抑制K562细胞中miRNA-21的表达水平(P<0.01),同时抑癌基因PDCD4蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论AMO-miR-21与As2O3联合使用可提高K562细胞对As2O3的敏感性,为白血病的治疗提供了新的方法。AMO-miR-21通过靶向抑制miRNA-21,进而上调抑癌基因PDCD4的表达而发挥抗肿瘤作用。

关键词：微小RNA-21 反义寡核苷酸三氧化二砷白血病化疗敏感性

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细胞膜上稳定表达融合蛋白CRT/vGPCR A549细胞株的建立

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第三军医大学学报 2010年第15期32卷 1684-1686页

作者：秦烨韩钰任玉珊王艳林三峡大学分子生物学研究所湖北宜昌443002 三峡大学医学院生化教研室湖北宜昌443002

目的将人钙网蛋白(calreticulin,CRT)基因与病毒G蛋白偶联受体(virus G-protein couple receptor,vGPCR)基因进行基因重组,用此重组基因建立细胞膜上稳定高表达CRT/vGPCR融合蛋白的人肺癌A549细胞株。方法从pSG5-vGPCR质粒中获得全长vG... 详细信息

目的将人钙网蛋白(calreticulin,CRT)基因与病毒G蛋白偶联受体(virus G-protein couple receptor,vGPCR)基因进行基因重组,用此重组基因建立细胞膜上稳定高表达CRT/vGPCR融合蛋白的人肺癌A549细胞株。方法从pSG5-vGPCR质粒中获得全长vGPCR基因片段并与CRT全长编码序列的3′端连接形成融合基因,然后将融合基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中。用此质粒转染人A549肺癌细胞,通过G418筛选建立稳定转染的A549细胞株,用RT-PCR检测重组融合基因的表达,用细胞免疫荧光分析鉴定融合蛋白的表达及其在细胞膜上的定位。结果成功获得重组融合质粒pcDNA3.1(+)-CRT/vGPCR,经DNA序列测定证实融合基因两阅读框(ORF)对接无误。将上述质粒转染A549细胞后,建立了稳定转染CRT/vGPCR的A549细胞株,融合基因在A549细胞中表达并定位到细胞膜上。结论通过与CRT基因融合重组,具有膜定位能力的vGPCR能将CRT蛋白高效包被到肿瘤细胞膜上。

关键词： CRT基因 vGPCR基因 A549细胞株

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融合基因CRT/vGPCR的构建及其在真核细胞膜上的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第6期26卷 605-607,610页

作者：秦烨韩钰曹春雨任玉珊王艳林三峡大学分子生物学研究所湖北宜昌443002 三峡大学医学院生化教研室湖北宜昌443002

目的:将人钙网蛋白(CRT)基因与病毒G蛋白偶联受体(vGPCR)基因进行基因重组融合,由此将CRT携带到肿瘤细胞膜表面。方法:从pSG5-vGPCR质粒中获得全长vG-PCR基因片段并与CRT全长编码序列的3′端连接形成融合基因,然后将融合基因克隆到真核... 详细信息

目的:将人钙网蛋白(CRT)基因与病毒G蛋白偶联受体(vGPCR)基因进行基因重组融合,由此将CRT携带到肿瘤细胞膜表面。方法:从pSG5-vGPCR质粒中获得全长vG-PCR基因片段并与CRT全长编码序列的3′端连接形成融合基因,然后将融合基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中。用此质粒转染人A549肺癌细胞后,用RT-PCR检测重组融合基因的表达,用免疫荧光细胞化学和流式细胞术分析鉴定融合蛋白的表达及其在细胞膜上的定位。结果:成功获得重组融合质粒pcDNA3.1(+)-CRT/vGPCR,经DNA序列测定证实融合基因两阅读框(ORF)对接无误。将上述质粒转染A549细胞后,融合基因可在A549细胞中表达并定位到细胞膜上。结论:通过与CRT基因融合重组,具有膜定位能力的vGPCR能将CRT蛋白高效包被到肿瘤细胞膜上。

关键词：融合基因 CRT vGPCR 细胞膜

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牛磺酸对肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤的保护及其机制

牛磺酸对肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤的保护及其机制

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华东六省一市生物化学与分子生物学会2010年学术交流会

作者：龚慧万福生南昌大学医学院生化与分子生物学教研室

目的探讨牛磺酸（Tau）对肾小管上皮细胞缺氧复氧（H/R）的保护作用及其作用机制。方法以NRK-52E细胞为研究对象,实验分正常对照组、H/R组和H/R+Tau组。H/R组为细胞缺氧8小时复氧12小时（H8/R12）;H/R+Tau组:于培养基中加入牛磺酸液（... 详细信息

目的探讨牛磺酸（Tau）对肾小管上皮细胞缺氧复氧（H/R）的保护作用及其作用机制。方法以NRK-52E细胞为研究对象,实验分正常对照组、H/R组和H/R+Tau组。H/R组为细胞缺氧8小时复氧12小时（H8/R12）;H/R+Tau组:于培养基中加入牛磺酸液（终浓度为10、20、40、80mmol/L）,余操作同H/R组。计算细胞存活率、流式细胞仪检测肾小管上皮细胞胞浆Ca浓度和细胞凋亡率;RT-PCR检测GRP78、Caspase-12、Caspase-3的mRNA表达;Western-blotting

关键词：肾小管上皮细胞牛磺酸 Caspase

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山东汉族人群DBP基因多态性与多发性硬化的相关性

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山东大学学报（医学版） 2010年第4期48卷 67-69,73页

作者：李晓红李芸王班琴刘师莲山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所济南250012 山东省济南卫生学校生化教研室济南250023

目的初步探讨山东汉族人群中DBP基因416和420位点基因多态性与多发性硬化(MS)疾病发生的关系。方法经临床诊断为MS患者46例为MS患病组,同期健康体检者43例为对照组,检测其DBP基因416位点(HaeⅢ酶切位点)和420位点(StyⅠ酶切位点)基因多... 详细信息

目的初步探讨山东汉族人群中DBP基因416和420位点基因多态性与多发性硬化(MS)疾病发生的关系。方法经临床诊断为MS患者46例为MS患病组,同期健康体检者43例为对照组,检测其DBP基因416位点(HaeⅢ酶切位点)和420位点(StyⅠ酶切位点)基因多态性,并进行统计学分析。结果MS患病组和对照组比较,DBP基因416位点和420位点基因型频率、等位基因频率和表现型频率分布差异均不显著。结论山东汉族人群中DBP基因416位点和420位点基因多态性与MS疾病发生无显著相关性。

关键词：多发性硬化维生素D结合蛋白质多态性,单核苷酸

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生物化学综合性、设计性实验教学的尝试与分析

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2010年第4期12卷 401-403页

作者：刘洋丁建中何小兵长江大学医学院分子生物学部生化教研室荆州434023 长江大学医学院病原生物学部免疫学教研室

以"质粒的提取、酶切和电泳鉴定"为例,从综合性、设计性实验方案的内容及框架,组织实施,成效分析等方面进行了详细的阐述,就生物化学综合性、设计性实验教学对学生创新及实践能力的培养和实验教学的初步成效进行了分析。

关键词：生物化学教学方法综合性实验分析

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白藜芦醇对K562/ADM细胞促凋亡作用研究

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中药药理与临床 2010年第1期26卷 25-27页

作者：温志震魏虎来苏海翔郝春燕甘肃省第二人民医院血液肿瘤科兰州730000 兰州大学医学实验中心兰州730000 兰州大学基础医学院生化与分子生物学教研室兰州730000

目的:探讨白藜芦醇诱导K562/ADM细胞凋亡的效应与细胞活性氧水平的关系。方法:应用噻唑蓝(MTT)比色法、光镜、电镜和流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡;FCM测定细胞内活性氧(ROS)水平。结果:白藜芦醇显著抑制K562/ADM细胞增殖,形态学呈现典... 详细信息

目的:探讨白藜芦醇诱导K562/ADM细胞凋亡的效应与细胞活性氧水平的关系。方法:应用噻唑蓝(MTT)比色法、光镜、电镜和流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡;FCM测定细胞内活性氧(ROS)水平。结果:白藜芦醇显著抑制K562/ADM细胞增殖,形态学呈现典型的凋亡改变;FCM分析显示S期细胞数明显增多,出现S/G2期阻滞;ROS水平升高。结论:白藜芦醇诱导K562/ADM胞凋亡与细胞内活性氧水平升高有关。

关键词：白藜芦醇白血病细胞凋亡活性氧

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牛磺酸对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

牛磺酸对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

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华东六省一市生物化学与分子生物学会2010年学术交流会

作者：龚慧万福生许宝华谢宪兵郑双艳南昌大学医学院生化与分子生物学教研室南昌大学实验动物科学部

目的探讨牛磺酸(Tau)对大鼠急性肾缺血再灌注损伤(RIRI)的保护作用及其具体作用机制。方法以SD大鼠为研究对象,动物随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注(I/R)组和I/R+Tau组。夹闭双侧肾蒂45min再灌注24h制备急性RIRI动物模型。I/R+Tau...

目的探讨牛磺酸(Tau)对大鼠急性肾缺血再灌注损伤(RIRI)的保护作用及其具体作用机制。方法以SD大鼠为研究对象,动物随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注(I/R)组和I/R+Tau组。夹闭双侧肾蒂45min再灌注24h制备急性RIRI动物模型。I/R+Tau组:在手术前3h按400mg/kg腹腔注射Tau液,余操作同I/R组。检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr);电镜观察肾小管上皮细胞超微结构改变;HE染色观察肾小管组织学变化;RT-PCR检测GRP78、

关键词：

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