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中华物理医学与康复杂志 2007年第12期29卷 801-805页

作者：李莉孙俊英徐岚吴士良苏州大学附属第一医院康复医学科苏州215006 苏州大学附属第一医院骨科苏州215006 苏州大学医学院生化与分子生物学教研室

目的研究不同时间氦-氖(He-Ne)激光照射对跟腱损伤兔的组织形态以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白含量的影响,探讨He-Ne激光照射促进跟腱愈合的最佳时间。方法选取20只新西兰雄兔,兔龄10～12周,分为对照组5只和激光照射组15只。对照组跟腱切断缝... 详细信息

目的研究不同时间氦-氖(He-Ne)激光照射对跟腱损伤兔的组织形态以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白含量的影响,探讨He-Ne激光照射促进跟腱愈合的最佳时间。方法选取20只新西兰雄兔,兔龄10～12周,分为对照组5只和激光照射组15只。对照组跟腱切断缝合手术后不进行激光照射;激光照射组于术后第1天即用低功率He-Ne激光(波长为632.8nm、功率为18.9 mW)经皮损伤部位行光斑扩束照射,每日照射1次,共照射14d。激光照射组再根据每次照射时间的长短分为激光照射10min,20min和30min组,每亚组各5只。于实验第28天处死各组兔,采集跟腱标本,采用HE染色和胶原纤维的Van Geison染色法观察跟腱组织形态学的变化,采用SDS-PAGE电泳法及光密度扫描法检测各组跟腱组织的Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白含量。结果HE染色显示,激光照射20min组胶原纤维致密、增粗,并含有血管和功能活跃的腱细胞、巨噬细胞。激光照射20min组Van Geison染色可见较成熟的粗大胶原纤维间质,排列层次接近正常跟腱组织。各激光照射组Ⅲ型胶原蛋白含量均高于对照组(P<0.05),激光照射20min组与激光照射10min组比较,差异有统计学意义(P<0.05),与激光照射30min组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论每日He-Ne激光照射20min,连续28d能促进跟腱损伤兔组织胶原蛋白的合成,加速跟腱组织的愈合。

关键词：跟腱氦-氖激光组织形态学胶原蛋白

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膜型基质金属蛋白酶亚家族和基质金属蛋白酶-2在人恶性造血细胞株中的表达谱及其相关性

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中国生物化学与分子生物学报 2007年第7期23卷 574-580页

作者：蒋菊香马珍妮胡晓慧董宁征白霞吴士良阮长耿江苏省血液研究所苏州大学附属第一医院苏州215006 苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室苏州大学医学院生化工程研究所苏州215123

为探讨不同恶性血液病中膜型基质金属蛋白酶(memberane-type matrix metalloproteinases,MT-MMPs)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达差异,用半定量RT-PCR检测了13株不同谱系恶性造血细胞株中MT-MMPs和MMP-2的mRNA表达差异.明胶酶谱法分析各细胞株MMP-2的酶活,并用流式细胞术检测了MT1-MMP蛋白的表达,用SPSS10.0分析了各基因的表达与细胞来源的相关性和各基因相互间表达的相关性.结果提示,各种MT-MMPs和MMP-2在13株细胞中呈现不同的表达谱,其中MT2-、MT4-、MT1-MMP和MMP-2表达较广泛,而MT3-、MT5-、MT6-MMP在检测的细胞株中较少表达.统计分析显示,MT-MMPs和MMP-2的表达与细胞的来源无明显的相关性(P>0.1),而MT1-MMP和MMP-2的表达有相关性(P<0.05).同时也发现,MT3-MMP和MT5-MMP的表达有相关性(P<0.05).MT-MMPs在恶性造血细胞中的表达差异,提示它们在不同类型的血液系统肿瘤发展中发挥各自独特的作用.另外,MT1-MMP和MMP-2,MT3-MMP和MT5-MMP之间表达的相关性提示,它们在功能上密切相关.

关键词： MT—MMPs MMP-2 恶性造血细胞株表达

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系统生物学时代生物化学教学面临的新挑战

系统生物学时代生物化学教学面临的新挑战

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首届全国生物化学与分子生物学教学研讨会

作者：费嘉刘誉暨南大学医学院生物化学与分子生物学教研室

随着后基因组时代的到来,系统生物学已经成为当前生物学研究热点,系统生物学的发展必将对医学基础课生物化学的教学产生新的挑战:更注重整体和系统的思维方法;加强定量和高通量分析的实验技术;重视交叉学科的学习和团队合作的研究模式。

关键词：系统生物学生物医学工程高等教育医学基础课生物化学技术教学法

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膜型基质金属蛋白酶-1在不同内皮细胞株中的表达差异

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中国生物化学与分子生物学报 2007年第11期23卷 916-920页

作者：蒋菊香马珍妮胡晓慧董宁征吴士良阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所苏州215006 苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室苏州大学医学院生化工程研究所苏州215123

为研究膜型基质金属蛋白酶-1(membrane-type matrix metalloproteinase-1,MT1-MMP)在血管生物学中的作用机制,比较了3株常用的内皮细胞株:人微血管内皮细胞株HMEC-1、人脐静脉内皮细胞株ECV304和EAhy926中MT1-MMP及与其功能相关的MMP-2,TIMP-2的表达差异.实时PCR和流式细胞术检测HMEC-1、EAhy926和ECV304中MT1-MMP/MMP-2/TIMP-2的表达,明胶酶谱法分析各细胞株上清中MMP-2的酶活.实时PCR结果显示,3株细胞均表达MT1-MMP与TIMP-2,MT1-MMP在EAhy926中表达最高,TIMP-2在ECV304中表达最高,而仅在EAhy926中检测到MMP-2的表达.流式细胞术和酶谱的结果与PCR结果基本一致.MT1-MMP和MMP-2在典型的大血管内皮细胞株EAhy926中高表达可能与该细胞独特的来源、表型特点和功能有关.

关键词： MT1-MMP 内皮细胞株表达差异

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南亚留学生生物化学教学初探

南亚留学生生物化学教学初探

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首届全国生物化学与分子生物学教学研讨会

作者：周迎会徐岚蒋菊香范雁吴士良苏州大学医学院生化与分子生物学教研室江苏苏州 215123

执教印度、尼泊尔等南亚国家留学生的几点心得体会。雄厚的师资力量、适当的教学用书、灵活的教学方式、现代化的教学手段与方式、教学过程中以学生为主体是必须注意的。

关键词：高等教育南亚留学生外国留学生生物化学技术教学法

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浅论医学特色生物化学及分子生物学实验教学改革与建设

浅论医学特色生物化学及分子生物学实验教学改革与建设

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首届全国生物化学与分子生物学教学研讨会

作者：徐岚周迎会顾范博姜智吴士良苏州大学医学院生化与分子生物学教研室江苏苏州 215123

论述医学特色生物化学及分子生物学实验教学改革与建设及实验教学改革的必要性,并提出实验教学改革的内容及具体目标。

关键词：生物医学工程分子生物学生物化学技术高等教育教学法实验教学教学改革

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蛋白质芯片与ELISA在人IgG定量分析中的比较

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2007年第3期28卷 312-316页

作者：向征马文丽费嘉郑文岭周烨南方医科大学基因工程研究所广东广州510515 暨南大学医学院生物化学与分子生物学教研室广东广州510632 华南基因组研究中心广东广州510800

建立定量检测人血清IgG(immunoglobulin,IgG)蛋白质芯片,并与酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测的结果进行比较.将纯化的羊抗人IgG 0.5 mg/mL 30%甘油/PBS,点样在经硝酸纤维素修饰的片基上,以人血清白蛋... 详细信息

建立定量检测人血清IgG(immunoglobulin,IgG)蛋白质芯片,并与酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测的结果进行比较.将纯化的羊抗人IgG 0.5 mg/mL 30%甘油/PBS,点样在经硝酸纤维素修饰的片基上,以人血清白蛋白为阴性对照,用1%BSA封闭,制备定量检测人血清IgG的蛋白质芯片;同时用ELISA检测人血清*** 10.0软件分析蛋白质芯片和ELISA的试验结果,采用单因素方差分析两组间相关性.结果显示蛋白质芯片和ELISA校准曲线的R2值分别是0.996和0.994.两种方法检测的10例人血清IgG含量,其检测限均在1.56μg/100μL.用单因素方差分析结果显示f=0.188,P=0.670>0.05,表明两组间差异无显著性意义,具有很好的一致性.

关键词：蛋白质芯片抗体芯片免疫球蛋白G 酶联免疫吸附测定

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微R-181a对人白血病K562细胞株的抑制作用及其机制的初步探讨

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中国现代医学杂志 2007年第7期17卷 796-799,802页

作者：周珏宇马文丽费嘉丁大鹏石嵘姜立郑文岭南方医科大学基因工程研究所广东广州510515 暨南大学医学院生物化学与分子生物学教研室广东广州510632 华南基因组研究中心广东广州510800

目的探讨miR-181a对白血病K562细胞生长的抑制作用及其机制。方法利用Oligofectamine脂质体法将化学合成的miR-181a转染K562细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和台盼蓝拒染法检测其对K562生长抑制的作用,结合基因芯片技术检测miR-181a对K... 详细信息

目的探讨miR-181a对白血病K562细胞生长的抑制作用及其机制。方法利用Oligofectamine脂质体法将化学合成的miR-181a转染K562细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和台盼蓝拒染法检测其对K562生长抑制的作用,结合基因芯片技术检测miR-181a对K562细胞基因表达谱的影响,筛选肿瘤相关差异基因。结果MTT法和台盼蓝拒染法结果显示,转染后各时间点转染组K562细胞的生长均受到了明显地抑制。瑞氏-吉姆萨染色显示,转染组细胞表现出典型的生长抑制的变化。基因芯片筛出肿瘤相关差异基因30个,其中20个表达下调,10个表达上调。结论miR-181a可能通过增强抑癌基因的表达,削弱癌基因的表达,从而抑制白血病细胞的增殖和生长。因此,其抗癌效应可应用于肿瘤的治疗。

关键词：微RNA 白血病癌基因抑癌基因基因芯片

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螺杆菌感染与NF—κB p65蛋白表达相关性在人食管癌发生中的意义

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第3期27卷 234-239页

作者：张丽叶嗣颖 Ulrich Bohr 陈新山田拥军张小兵华中科技大学同济医学院基础医学院病原生物系武汉430030 华中科技大学同济医学院基础医学院法医病理学系武汉430030 华中科技大学同济医学院基础医学院附属同济医院分子生物学实验中心武汉430030 华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科武汉430030 暨南大学医学院微生物学和免疫学教研室广州510632 德国马格德堡大学医学院胃肠病学肝病学和传染病学系

目的研究人食管癌是否存在螺杆菌感染及其与NF-κB p65蛋白的关系，从而探讨在人食管癌发生中的意义。方法随机收集食管癌标本40例和正常食管标本10例，采用聚合酶链反应（PCR）扩增螺杆菌16SrRNA，随机选4例测序及同源比较。阳性者再... 详细信息

目的研究人食管癌是否存在螺杆菌感染及其与NF-κB p65蛋白的关系，从而探讨在人食管癌发生中的意义。方法随机收集食管癌标本40例和正常食管标本10例，采用聚合酶链反应（PCR）扩增螺杆菌16SrRNA，随机选4例测序及同源比较。阳性者再扩增幽门螺杆菌（***,Hp）的特异基因相对分子质量（Mr）26×10^3的种特异性抗原和相关功能基因（GagA，VacA）。并采用免疫组化法检测食管癌组织中NF-κB p65蛋白的表达情况。结果32．5％（13／40）的食管癌组织中发现有螺杆菌16SrRNA基因存在，正常人食管组织无一例阳性。4例测序及同源比较，食管癌组织中螺杆菌序列与***的16SrRNA序列有99％～100％同源性。阳性标本均扩增出脚特异基因M，26×10^3种特异性抗原，但仅2例扩增出G田弘基因，3例扩增出VacA基因。免疫组化法染色显示，16SrRNA阳性的食管癌组织中NF-κB p65蛋白表达率为100％（13／13），而16SrRNA阴性食管癌组织表达率仅占18．5％（5／27），二者差异有统计学意义（P〈0．01）。结论食管癌患者食管组织存在螺杆菌感染，该螺杆菌可能为脚。螺杆菌感染导致食管黏膜NF-κB p65蛋白表达的增加，可能在食管癌生成中作为信号传导机制之一。

关键词：食管癌螺杆菌 PCR NF-κB p65蛋白免疫组化染色

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rhBMP-2在诱导C3H10T1/2干细胞成骨中对MMP-13、Collagen-2 mRNA表达的影响

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实验动物与比较医学 2007年第1期27卷 29-31,36页

作者：徐岚范雁周迎会吴士良苏州大学医学院生化与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州215123

目的研究基质金属蛋白酶13(MMP13)、II型胶原(collagen2)在C3H10T1/2细胞中的相互关系,探讨rhBMP-2在诱导C3H10T1/2成骨的同时对MMP13以及Collagen2 mRNA表达水平的影响。方法取C3H10T1/2细胞加入rhBMP-2诱导成骨细胞的产生,Von Kossa染色观察细胞形态,同时在不同时间段抽取总RNA,利用Real-time PCR检测MMP13、Collagen2的表达情况。结果未加rhBMP-2的细胞中MMP13、Collagen2前10d表达呈负相关;而rhBMP-2处理后的细胞中MMP-13表达水平受抑制,且MMP13和collagen2前14d表达呈明显负相关。结论MMP-13和Collagen-2 mRNA表达水平具明显相关性,rhBMP-2在诱导成骨的同时,具有抑制MMP-13表达的作用。

关键词： MMP-13 Collagen 2 rhBMP-2 Real-time PCR

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