检索结果-内蒙古大学图书馆

目的构建大肠埃希菌（Escherichia coli）嘌呤核苷磷酸化酶（purine nucleoside phosphorylase，PNP）基因表达载体，研究其生物活性，为肿瘤的基因治疗奠定基础。方法PCR扩增大肠埃希菌K12的PNP基因，T4连接酶将PNP连接人pMSCV逆转录... 详细信息

目的构建大肠埃希菌（Escherichia coli）嘌呤核苷磷酸化酶（purine nucleoside phosphorylase，PNP）基因表达载体，研究其生物活性，为肿瘤的基因治疗奠定基础。方法PCR扩增大肠埃希菌K12的PNP基因，T4连接酶将PNP连接人pMSCV逆转录病毒载体，构建重组逆转录病毒载体pMSCV／PNP。pM—SCV／PNP转化感受态大肠埃希菌XLI-Blue，提取pMSCV／PNP，酶切、PCR和测序鉴定。病毒包装细胞293产生重组逆转录病毒pMSCV／PNP，流式细胞仪测病毒滴度。pMSCV／PNP转染胰腺癌细胞BXPC-3，倒置荧光显微镜观察，FACS分离转染阳性细胞（GFP阳性）。RT—PCR检测PNPmRNA在胰腺癌细胞BXPC-3细胞中的表达，MTT法检测PNP基因的生物活性。结果PCR扩增出大肠埃希菌PNP基因（738bp），酶切和PCR的电泳条带显示pMSCV／PNP，测序结果正常。293包装细胞产生高滴度（3．6×10^7U／m1）重组逆转录病毒pMSCV／PNP。RT—PCR实验结果表明，pMSCV／PNP转染的胰腺癌细胞BXPC-3表达PNPmRNA。前药6-甲基嘌呤-2’-脱氧核苷（MePdR）作用72h浓度达1．00mg／L，BXPC-3／PNP细胞存活率为10．09％，随着MePdR浓度加大，BXPC-3／PNP细胞存活率继续下降直至为0。结论构建了pMSCV／PNP载体，获得了表达大肠埃希菌PNP基因的BXPC-3细胞克隆，PNP／MePdR自杀基因系统对胰腺癌细胞BXPC-3有较强的抑杀作用。

关键词：大肠埃希菌嘌呤核苷磷酸化酶自杀基因载体胰腺癌

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护理专业技能理论教学中开展早期接触临床+PBL教学的效果观察

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护理学报 2014年第2期21卷 12-14页

作者：顾丽华王韧于异男王莉萍刘建伟马伟红郭爱军李稻上海立达职业技术学院护理与健康学院上海201609 上海市松江区叶榭镇社区卫生服务中心上海201609 上海交通大学医学院基础医学院病理生理学教研室上海200025

目的探讨在高职护理专业技能理论课学习期间开展"早期接触临床+PBL"教学的方法与效果。方法在护理专业技能课程理论教学中,对照班学生采用传统的理论课教学,上课时展示1个小案例,并带着问题进行理论课的讲授;实验班学生除了... 详细信息

目的探讨在高职护理专业技能理论课学习期间开展"早期接触临床+PBL"教学的方法与效果。方法在护理专业技能课程理论教学中,对照班学生采用传统的理论课教学,上课时展示1个小案例,并带着问题进行理论课的讲授;实验班学生除了完成理论课教学外,以小组为单位分别进入临床接触不同的患者,进行问诊、健康评估和整理案例,随后结合案例开展PBL教学活动和完成个案分析报告。并对两组学生进行学习效能问卷调查和期末成绩比较。结果实验班学生在对所学知识的理解有帮助、提高自主学习的积极性、能积极查阅文献的能力、勇于提出问题和质疑、不懂知识能主动寻找答案、能分享自己的知识和观点、积极开展小组内交流与学习、能做出合理的护理评价的得分上显著低于对照班,差异均有统计学意义(P<0.01)。实验班第2学期内科护理学期末成绩明显高于对照班(P<0.01)。结论开展"早期接触临床+PBL"教学提高了学生的学习效能和综合能力;并且能克服传统教育中理论与实践脱节的弊端,值得在高职护理专业教学中推广使用。

关键词：护理教学早期接触临床 PBL教学

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下丘脑Nesfatin-1/NUCB2对糖尿病小鼠摄食的影响

引用

现代生物医学进展 2015年第8期15卷 1440-1443页

作者：张玮王巧玲逄明杰祝海郭菲菲孙向荣公衍玲徐珞青岛大学医学院病理生理学教研室山东青岛266021 菏泽鄄城县人民医院山东菏泽274031 青岛市立医院山东青岛266011 青岛科技大学化工学院山东青岛266042

目的：探讨下丘脑神经肽NUCB2与Tsumura Suzuki（TS）多基因突变2型糖尿病（T2DM）小鼠摄食过多的关系。方法：将动物分为Tsumura Suzuki糖尿病（TSD）小鼠、正常小鼠;监视器监测小鼠摄食量;分析血生化指标;定量RT-PCR分析摄食相关神经... 详细信息

目的：探讨下丘脑神经肽NUCB2与Tsumura Suzuki（TS）多基因突变2型糖尿病（T2DM）小鼠摄食过多的关系。方法：将动物分为Tsumura Suzuki糖尿病（TSD）小鼠、正常小鼠;监视器监测小鼠摄食量;分析血生化指标;定量RT-PCR分析摄食相关神经肽m RNA表达水平;放射免疫分析法检测nesfatin-1蛋白水平。结果：与年龄匹配的TSN小鼠相比,TSD小鼠在1月龄就存在体重增加（P〈0.05）和高瘦素血症（P〈0.05）,3-12月龄出现贪食（P〈0.05）、高血糖（P〈0.05）、高血脂（P〈0.05）和高胰岛素血症（P〈0.05）,且3-12月龄时厌食肽nesfatin-1前体核连蛋白2（NUCB2）m RNA和nesfatin-1蛋白水平均显著降低（P〈0.05~0.01）;TSD小鼠下丘脑甘丙肽、黑色素浓集素、神经肽Y及前黑素细胞皮质素原m RNA水平也有显著改变（P〈0.05）。结论：下丘脑NUCB2介导信号通路破坏可能导致TSD小鼠摄食过多。

关键词：摄食过多 Nesfatin-1/NUCB2 下丘脑糖尿病小鼠

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