目的探索人参皂甙Rb1是否通过影响ghrelin表达分泌保护内皮细胞的作用。方法取新生胎儿脐带行脐静脉内皮细胞培养,实验分为正常组(Control),同型半胱氨酸诱导的内皮细胞损伤模型组(50μmol/LHey、100μmol/L Hey、200μmol/L Hey、300μmol/L Hey、500μmol/L Hcy),人参皂甙不同剂量预处理组(0.01μmol/L Rb1、0.1μmol/L Rb1、μmol/L Rb1、10μmol/L Rb1、100μmol/L Rb1),人参皂甙不同预处理时间组(5minRb1、15 min Rb1、30 min Rb1、60 min Rb1)。药物干预48 h收集培养上清,用硝酸还原法检测上清中NO,选取最佳时间剂量,用细胞免疫组化观察ghrelin及eNOS蛋白表达;ELISA法检ghrelin及vWF水平并行直线相关回归分析。结果与Control组比较,200μmol/L Hey组、300μmol/L Hey组NO的含量明显减少(P<0.05),以200μmol/L Hcy组减少最为明显,选取200μmol/L Hcy作为模型组剂量;10μmol/L Rb1组NO含量较模型组明显增多(P<0.05);30 min Rb1组、60 min Rb1组NO含量较模型组明显增多(P<0.05),以30 min Rb1组增多最为明显;选取10μmol/L Rb1预处理30 min为最佳时间剂量。与Control组比较,Hcy组上清中的NO及ghrelin水平均显著下降(P<0.01),vWF水平显著升高(P<0.01);与Hcy组比较,Rb1组NO及ghrelin水平显著升高(P<0.01,P<0.05),vWF水平显著下降(P<0.05);直线相关分析表明ghrelin与NO水平呈显著正相关(r=0.71,P<0.01),而与vWF水平同时呈显著负相关(r=-0.55,P<0.05);细胞免疫组化分析发现Rb1可明显增强Hcy诱导降低的ghrelin及eNOS蛋白表达。结论人参皂甙Rb1可通过上调Hcy诱导降低的eNOS/NO途径来保护内皮细胞,且这种作用很可能是其通过影响内皮细胞表达自分泌ghrelin多肽介导的。
目的观察125I粒子植入后不同时间家兔坐骨神经组织形态及功能的变化。方法选健康新西兰家兔30只,每组10只,使用信封法随机分为2周、2个月及4个月3组,直视下在兔的实验侧坐骨神经旁植入125I粒子10粒,对照侧植入无放射活性空粒子10粒。按计算机三维治疗计划系统(Treatment Plan System,TPS)计划设计布源,90%处方剂量集中在所研究的坐骨神经局部。术后2周、2个月及4个月行双侧坐骨神经神经电生理测定及大体观察、光镜观察和电镜观察。结果 2周、2月、4月组兔实验侧坐骨神经的近心端动作电位强度分别为0.52+0.26(v),0.60+0.19(v),0.48+0.17(v),对照侧分别为0.59+0.19(v),0.60+0.15(v),0.53+0.135(v),各组内之间比较,无统计学意义(P>0.05),2周、2月、4月组兔实验侧坐骨神经远心端动作电位强度分别为0.51+0.15(v),0.52+0.11(v),0.53+0.15(v),对照侧分别为0.52+0.10(v),0.56+0.12(v),0.54+0.10(v),各组内之间比较,无统计学意义(P>0.05);2周、2月、4月组兔实验侧坐骨神经近心端动作电位最大振幅分别为13.18+4.09(mv),12.78+4.42(mv),12.09+1.20(mv),对照侧分别为10.55+4.21(mv),10.31+4.22(mv),12.88+3.54(mv),各组内之间比较,无统计学意义(P>0.05),2周、2月、4月组兔实验侧坐骨神经的远心端动作电位最大振幅分别为11.18+3.38(mv),11.68+3.21(mv),12.52+3.09(mv),对照侧分别为11.56+4.80(mv),10.71+3.40(mv),11.67+2.48(mv),各组内之间比较无统计学意义(P>0.05);2周、2月、4月组兔实验侧坐骨神经神经传导速度分别为40.56+9.46(m/v),38.79+5.78(m/v),39.44+8.64(m/v),实验侧为42.56+6.59(m/v),44.64+7.53(m/v),43.33+6.05(m/v),各组内之间比较,无统计学意义(P>0.05)。大体学观察和光镜观察实验侧坐骨神经病理学改变不明显;电镜观察可见到有髓神经鞘分层、塌陷、崩解等变性改变;神经鞘膜细胞和神经轴突内可见线粒体肿胀、空泡化。将同为4000放大倍数的电镜照片分为100(10×10)个方格,出现非特异性改变占1个方格则计数为1%,这种非特异性变化2周组在60%-70%,2月组在50%左右,而到了4月组,这项比例下降到30%左右,三组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论该实验剂量下放射性125I粒子对家兔坐骨神经的组织影响以超微病理下的非特异性变化为主,对神经的生理功能影响微小。
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