目的探索人参皂甙Rb1是否通过影响ghrelin表达分泌保护内皮细胞的作用。方法取新生胎儿脐带行脐静脉内皮细胞培养,实验分为正常组(Control),同型半胱氨酸诱导的内皮细胞损伤模型组(50μmol/LHey、100μmol/L Hey、200μmol/L Hey、300μmol/L Hey、500μmol/L Hcy),人参皂甙不同剂量预处理组(0.01μmol/L Rb1、0.1μmol/L Rb1、μmol/L Rb1、10μmol/L Rb1、100μmol/L Rb1),人参皂甙不同预处理时间组(5minRb1、15 min Rb1、30 min Rb1、60 min Rb1)。药物干预48 h收集培养上清,用硝酸还原法检测上清中NO,选取最佳时间剂量,用细胞免疫组化观察ghrelin及eNOS蛋白表达;ELISA法检ghrelin及vWF水平并行直线相关回归分析。结果与Control组比较,200μmol/L Hey组、300μmol/L Hey组NO的含量明显减少(P<0.05),以200μmol/L Hcy组减少最为明显,选取200μmol/L Hcy作为模型组剂量;10μmol/L Rb1组NO含量较模型组明显增多(P<0.05);30 min Rb1组、60 min Rb1组NO含量较模型组明显增多(P<0.05),以30 min Rb1组增多最为明显;选取10μmol/L Rb1预处理30 min为最佳时间剂量。与Control组比较,Hcy组上清中的NO及ghrelin水平均显著下降(P<0.01),vWF水平显著升高(P<0.01);与Hcy组比较,Rb1组NO及ghrelin水平显著升高(P<0.01,P<0.05),vWF水平显著下降(P<0.05);直线相关分析表明ghrelin与NO水平呈显著正相关(r=0.71,P<0.01),而与vWF水平同时呈显著负相关(r=-0.55,P<0.05);细胞免疫组化分析发现Rb1可明显增强Hcy诱导降低的ghrelin及eNOS蛋白表达。结论人参皂甙Rb1可通过上调Hcy诱导降低的eNOS/NO途径来保护内皮细胞,且这种作用很可能是其通过影响内皮细胞表达自分泌ghrelin多肽介导的。
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