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第八届中国酶工程学术研讨会

作者：唐玮黄鹤陶荣盛蒋宇姜卫红杨晟中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所中国科学院合成生物学重点实验室中国科学院上海生命科学研究院湖州工业生物技术中心上海工业生物技术研发中心

D-海因酶(EC3.5.2.2,简称DHase)是海因法制备D-氨基酸的关键酶,在生产上,需要高比活和高稳定性的D-海因酶,以降低D-氨基酸生产中的酶成本。来源于热葡糖苷芽孢杆菌的D-海因酶具有高比活和耐高温的性质,我们利用染色体步移的方法从野生... 详细信息

D-海因酶(EC3.5.2.2,简称DHase)是海因法制备D-氨基酸的关键酶,在生产上,需要高比活和高稳定性的D-海因酶,以降低D-氨基酸生产中的酶成本。来源于热葡糖苷芽孢杆菌的D-海因酶具有高比活和耐高温的性质,我们利用染色体步移的方法从野生型热葡糖苷芽孢杆菌中得到海因酶的ORF编码序列,然后将该序列和改造后的序列克隆到三种不同的表达载体pTrc99A、pTrcHisA和pKK223-3中,并在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和高效液相色谱检测蛋白表达情况和酶活,结果表明野生型基因的蛋白表达量低于改造基因,但是比活无明显差别。锰二价离子对该海因酶具有较强的激活作用,通过加入氯化锰后酶活提高了近l0倍。

关键词：海因酶克隆与表达糖苷酶

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肿瘤溶解综合征伴急性肾衰竭一例并文献复习

肿瘤溶解综合征伴急性肾衰竭一例并文献复习

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中华医学会第五次全国重症医学大会

作者：安欣朱然章志丹马晓春中国医科大学附属第一医院重症医学科

目的通过对一例肿瘤溶解综合征(Tumorlysis syndrome,TLS)患者临床过程与相关资料进行分析比较,探讨TLS的病理生理基础以及诊治原则,提高重症医学医师提高对此类疾病的诊治水平。方法对我科室经治的一例TLS临床治疗过程进行回顾总结,并... 详细信息

目的通过对一例肿瘤溶解综合征(Tumorlysis syndrome,TLS)患者临床过程与相关资料进行分析比较,探讨TLS的病理生理基础以及诊治原则,提高重症医学医师提高对此类疾病的诊治水平。方法对我科室经治的一例TLS临床治疗过程进行回顾总结,并对相关国内外文献进行分析总结,深入讨论TLS的发病机制、病理生理改变、临床表现、诊断标准、治疗原则等,同时结合重症医学相关专业知识,试行探讨重症TLS(需ICU生命支持治疗的)患者于ICU中治疗的理论基础以及技术要求等。结果 TLS是肿瘤治疗过程中出现的一种具有潜在致命风险的急性并发症,是由于肿瘤细胞大量溶解,快速释放细胞内物质,超过肾脏排泄的能力,导致代谢异常和电解质紊乱,引起以高尿酸血症、高钾血症、高磷血症和肾功能不全为主要表现的症候群;其发病率为1%～7%,死亡率最高可达36%。本病例原发病经病理证实为Burkitt淋巴瘤,该患无明显诱因出现自发性TLS,发病5天内迅速出现内环境紊乱、肾功能衰竭、肺水肿、休克、弥散性血管内凝血(DIC)、多器官功能紊乱综合征(MODS)等,即使CRRT、机械通气等强化治疗,患者病情仍进行性恶化,其严重程度罕见,未见国内外报道。广义上讲,TLS符合多器官功能障碍综合征(MODS)的概念。高危患者应置于ICU内进行治疗,至少是位于可以迅速转移至ICU的区域内。密切观察患者生命体征以及实验室检查数据变化,给予患者包括扩容、纠正离子紊乱、高尿酸血症等在内的综合治疗;当患者出现重度高磷酸血症、血钾>7mmol/L以及出现肾功能障碍时,即可开始血液净化治疗。应需根据患者具体状况选择恰当的CRRT治疗模式并确定足够治疗剂量,维持患者内环境稳定以及液体平衡,稳定生命体征,降低此类患者的病死率。结论肿瘤溶解综合征(TLS)是肿瘤治疗过程中出现的一种具有潜在致命风险的急性并发症,其病死率较高。如果病情进展迅速,则很快发生AKI、心率失常、肺水肿甚至猝死等并发症。TLS符合多器官功能障碍综合征(MODS)的概念范畴,应该给予强化的、综合的管理和治疗。重症医学医师应加强对此组症候群的认识,对病情进行及时准确的判断与评估,降低患者死亡率,改善预后,在此类疾病的诊治过程中,承担更加重大的责任。

关键词：肿瘤溶解综合征肿瘤治疗 TLS 多器官功能障碍综合征急性肾衰竭文献复习

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“全国商品性小蚕饲养规程与病害防控学术研讨会”在广州召开

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广东蚕业 2011年第3期45卷 47-48页

作者：刘吉平华南农业大学动物科学学院

2011年8月22～24日,“全国商品性小蚕饲养规程与病害防控学术研讨会”在广州顺利召开。此次研讨会由中国蚕学会生理病理学专业委员会和国家蚕桑产业技术体系主办,华南农业大学蚕丝科学系和农业部热带亚热带蚕业研究室承办,广东省蚕学会... 详细信息

2011年8月22～24日,“全国商品性小蚕饲养规程与病害防控学术研讨会”在广州顺利召开。此次研讨会由中国蚕学会生理病理学专业委员会和国家蚕桑产业技术体系主办,华南农业大学蚕丝科学系和农业部热带亚热带蚕业研究室承办,广东省蚕学会、广东省蚕业技术推广中心、广东省农科院蚕业与农产品加工研究所等单位参与承办。

关键词：学术研讨会饲养规程商品性小蚕广州防控病害广东省农科院

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维生素C糖基衍生物的研究进展

维生素C糖基衍生物的研究进展

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第八届中国酶工程学术研讨会

作者：李江华刘龙周景文堵国成陈坚江南大学生物工程学院

L-抗坏血酸(L-AA,维生素C)是水溶性维生素,参与很多体内的生理活动,在保持和促进人体健康中起到重要的作用。由于人的肝脏中缺少古洛内酯氧化酶,因此不能在体内合成L-AA,只能靠食物或药物提供。所以,它被列为人体必需的营养元素,在保护... 详细信息

L-抗坏血酸(L-AA,维生素C)是水溶性维生素,参与很多体内的生理活动,在保持和促进人体健康中起到重要的作用。由于人的肝脏中缺少古洛内酯氧化酶,因此不能在体内合成L-AA,只能靠食物或药物提供。所以,它被列为人体必需的营养元素,在保护人类健康过程中起着不可代替的作用。

关键词：生物转化糖基转移酶底物特异性环糊精抗坏血酸酶催化合成维生素

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乌司他丁对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用

乌司他丁对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用

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中华医学会第五次全国重症医学大会

作者：陈晨吴大玮吴玉霞彭苗苗卢海宁赵乐康山东大学齐鲁医院加强医疗科山东大学齐鲁医院心血管重构研究卫生部和教育部重点实室

目的研究乌司他丁（UTI）对脓毒症肺组织的保护作用,为临床治疗提供依据。方法将健康Wistar大鼠随机分为三组,对照组（假手术组,n=10）、模型组（n=30）、UTI治疗组（n=30）,利用盲肠结扎穿刺（CLP）法制造脓毒症模型,与术后0h、12h静... 详细信息

目的研究乌司他丁（UTI）对脓毒症肺组织的保护作用,为临床治疗提供依据。方法将健康Wistar大鼠随机分为三组,对照组（假手术组,n=10）、模型组（n=30）、UTI治疗组（n=30）,利用盲肠结扎穿刺（CLP）法制造脓毒症模型,与术后0h、12h静脉注射UTI 5万u/kg（UTI组）或等量生理盐水（模型组）,观察存活率,术后24h各组分别取存活大鼠10只,行腹主动脉血气及乳酸（Lac）分析,留取血浆和肺组织,利用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆细胞因子TNF-α、IL-1β含量,苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病理改变,化学比色法测定肺组织超氧化物歧化酶（SOD）的活性、丙二醇（MDA）的含量,DNA断端末端标记（TUNEL）法测肺细胞凋亡,实时荧光定量PCR检测肺组织NF-κB mRNA的表达。结果①UTI组24h存活率较模型组增多,但无统计学差异。②与对照组比较,其余两组PaO、PaCO2均显著降低（P<0.01）,Lac均显著升高（P<0.01）;UTI组PaO2、PaCO较模型组增高明显,有统计学差异。③HE染色显示UTI组肺组织病理改变较模型组减轻,ALI评分显著降低（P<0.01）。④ELISA结果示UTI组和模型组血浆TNF-α、IL-1β含量均较对照组增高,存在统计学差异;与模型组比较,UTI组含量降低（P<0.05）。⑤模型组大鼠肺组织SOD活性低于对照组（P<0.01）,UTI组SOD活性高于模型组（P<0.01）,仍低于对照组（P<0.05）;对照组肺组织MDA含量最低,UTI组MDA的含量高于对照组（P<0.01）,但低于模型组（P<0.05）;⑥CLP术后肺组织细胞凋亡数量显著增加,其余两组与对照组相比均存在统计学差异;但UTI组凋亡指数较模型组有降低（P<0.01）。⑦模型组大鼠肺组织中NF-κB mRNA的表达较对照组升高（P<0.05）;UTI组NF-κB mRNA表达略高于对照组,略低于ALI组,但均无统计学差异。结论乌司他丁可以通过调控NF-κB信号转导通路的活性,减轻炎症级联放大效应,改善氧化应激水平,减少肺细胞凋亡,进而减轻肺脏的损伤,改善氧代谢以及组织灌注,发挥其保护作用。

关键词：模型组 UTI 统计学乌司他丁肺组织病理保护作用急性肺损伤

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MicroRNA与血液系统肿瘤发生、诊断和治疗

MicroRNA与血液系统肿瘤发生、诊断和治疗

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2009年国际病理生理学教学研讨会

作者：李育敏费嘉暨南大学医学院生化与分子生物学教研室

动植物中广泛存在着一种大小约19-24个碱基的非编码单链小分子RNA,即microRNA(miRNA),随着生物信息学和基因克隆技术的迅猛发展,现已在人类发现541个miRNA,记录于miRNA数据库(http://***)。miRNA在物种进化中高度保守,其表达具有组织特... 详细信息

动植物中广泛存在着一种大小约19-24个碱基的非编码单链小分子RNA,即microRNA(miRNA),随着生物信息学和基因克隆技术的迅猛发展,现已在人类发现541个miRNA,记录于miRNA数据库(http://***)。miRNA在物种进化中高度保守,其表达具有组织特异性和时序特异性。研究表明,miRNA参与生命过程中一系列的重要进程,包括早期发育、细胞增殖、分化、凋亡、死

关键词： MicroRNA 血液肿瘤

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脓毒症大鼠肺组织糖皮质激素受体-α的表达及乌司他丁的干预作用

脓毒症大鼠肺组织糖皮质激素受体-α的表达及乌司他丁的干预作用

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中华医学会第五次全国重症医学大会

作者：陈晨吴大玮吴玉霞彭苗苗卢海宁赵乐康山东大学齐鲁医院加强医疗科山东大学齐鲁医院心血管重构研究卫生部和教育部重点实验室

目的研究脓毒症急性肺损伤肺组织糖皮质激素受体(GR)的变化情况,以及乌司他丁(UTI)治疗对GR的影响。方法将Wistar大鼠随机分为三组,对照组(假手术组,n=6)、模型组、UTI治疗组,后两组按观察时间点又分为6h、12h和24h亚组(n=6)。利用盲肠... 详细信息

目的研究脓毒症急性肺损伤肺组织糖皮质激素受体(GR)的变化情况,以及乌司他丁(UTI)治疗对GR的影响。方法将Wistar大鼠随机分为三组,对照组(假手术组,n=6)、模型组、UTI治疗组,后两组按观察时间点又分为6h、12h和24h亚组(n=6)。利用盲肠结扎穿刺(CLP)法制造脓毒症模型,术后0h、12h静脉注射UTI 5万u/kg(UTI组)或等量生理盐水(模型组)。各个时间点处死大鼠,留取血浆和肺组织,利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆细胞因子TNF-α、IL-6含量,苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理改变,化学比色法测定肺组织MDA的含量,免疫组织化学法检测肺组织中GR-α蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测肺组织GRmRNA的含量。结果①ELISA结占果示UTI组和模型组血浆TNF-α、IL-6含量均较对照组呈不同程度升高(P<0.05或P<0.01);而UTI组均明显低于模型组(P<0.05)。②HE染色显示各个时间点UTI组肺组织病理改变均较模型组减轻,12h、24h亚组肺损伤评分显著降低(P<0.05)。③模型组、UTI组MDA含量均高于对照组(P<0.01、P<0.05);UTI组MDA含量与6h出现下降趋势,12h和24h亚组较模型组明显降低(P<0.05)。④GR-α在对照组肺组织中表达最多(P<0.01);脓毒症组GR-α的表达随术后时间变化呈下降趋势;UTI治台疗12h后GR-α开始出现上升趋势,24h组表达最多,各亚组GR-α表达均较脓毒症组高,但无统计学差异。⑤脓毒症、UTI各组肺组织中GR-αmRNA的表达均较对照组显著降低(P<0.01);UTI治疗24h组GR-αmRNA的含量高于ALI组,存在统计学差异(P<0.05)。结论糖皮质激素受体参与了脓毒症所的发生发展过程;乌司他丁可能可以通过抑制氧化应激、减轻炎症反应的环节来调节糖皮质激素受体的表达,降低肺组织的损伤。

关键词：肺组织 UTI 糖皮质激素受体乌司他丁模型组干预作用

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心肌淀粉样变性1例报道

心肌淀粉样变性1例报道

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第14届中国南方国际心血管病学术会议(南方会)

作者：鄢晓平陈良龙彭亚飞郑行春黄煜福建医科大学附属协和医院心内科福建省冠心病研究所

目的通过对心肌淀粉样变性(cardiac amyloidosis)的临床分析,探讨该病的早期诊断方法和治疗措施。方法与结果男性,67岁。发现皮疹3年,反复气促1年,加剧1个半月入院。3年无明显原因发现双侧眼睑皮肤变黑,伴有皮肤隆起增厚,伴疼痛,皮肤极... 详细信息

目的通过对心肌淀粉样变性(cardiac amyloidosis)的临床分析,探讨该病的早期诊断方法和治疗措施。方法与结果男性,67岁。发现皮疹3年,反复气促1年,加剧1个半月入院。3年无明显原因发现双侧眼睑皮肤变黑,伴有皮肤隆起增厚,伴疼痛,皮肤极易破损。外院曾行眼睑皮肤的活检,尿常规,血皮质醇,甲状腺功能及血液等多种项目的检查,排除肿瘤,病人自诉诊断"慢性肾炎(蛋白尿,氮质血症)"。1年前活动后气喘,无夜间阵发性呼吸困难。半年前上述症状加重,静息时亦气促,伴下肢浮肿。1个半月前,于劳力后突发气促,端坐位时缓解,平卧气促加重,伴乏力明显,纳差,急诊入院。发病以来,体重减轻5 kg。既往史:无特殊。体格检查:BP:80/40 mm Hg,消瘦;全身皮肤色泽晦暗,前额部、颈部及下腹部皮肤可见皮下瘀点及瘀斑,双眼睑皮肤增厚,可见黑色素沉积;双肺可闻及湿性罗音,少许干性罗音;心率120次/分,律不齐,可闻及早搏,未闻及杂音;腹部稍膨隆,肝脾肋下未触及,移动性浊音阴性,双下肢轻度凹陷性水肿,四肢肌力及肌张力正常,病理征阴性。实验室检查:血常规:WBC11.8×10～9/L↑;尿常规:尿蛋白(+);肝肾功能轻度异常、心肌酶正常;血沉:21mm/h;抗结核抗体:阴性;甲状腺3项:FT3 2.76 pmol/L↓;C-反应蛋白:131.00 mg/L↑;胸水常规:李凡他试验1+,红细胞3+,白细胞1+;胸水生化:正常;胸水查瘤标:CEA1.2 ng/mL,Cyfra21-1 268.00 ng/mL;血清瘤标:CEA4.1 ng/mL,Cyfra21-1 2.79 ng/ml;ANA+ENA:阴性;cANCA:阴性,pANCA:阴性;24小时尿蛋白定量:24小时尿蛋白500.4 mg/24 h;NT-proBNP(8.23):22057 pg/mL;NT-proBNP(8.29):13712 pg/mL;血清蛋白电泳(9.6):白蛋白56.3,α1球蛋白7.3↑,α2球蛋白18.4↑,β1球蛋白5.4,γ球蛋白8.8↓,β2球蛋白3.8。心电图:窦性心动过速,完全性右束支传导阻滞,肢导联低电压。心脏彩超:左室壁增厚,左室整体收缩功能及舒张功能减退(EF35.9%),三尖瓣反流度伴肺动脉高压(中度),少量心包积液,右侧少量胸腔积液,左侧少-中量胸腔积液。腹部皮肤及皮下脂肪活检:送检组织表皮变薄,真皮深层、皮下脂肪及部分血管壁可见淡伊红色的淀粉样物沉积。最终诊断:心肌淀粉样变。给予利尿、纠正心力衰竭、对症支持等治疗,并且使用强的松,患者仍感心悸、气促,头晕,乏力,放弃治疗自动出院。结论心肌淀粉样变性是由于淀粉样物质沉积于心脏,造成心功能受损和心律失常的一种少见继发性心肌病。由于此病常合并其他系统疾病,同时在临床症状和体征上常缺乏特征性,故易被临床医生所忽略或误诊。由于心肌淀粉样变病临床表现不典型,因此当患者有以下特征应高度怀疑心肌淀粉样变病:1、心室腔不大伴进行性难治性心力衰竭2、左心室肥厚伴心电图低电压3、既往有高血压伴进行性低血压及类似陈旧性心肌梗死图形4、左室壁均匀肥厚伴室壁活动弥漫性减低;5、舌体宽大肥厚,如怀疑该病应及时进行病理组织检查明确诊断。

关键词：心肌淀粉样变性胸腔积液球蛋白

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活血温阳益气中药复方对大鼠充血性心力衰竭的影响及机制研究

活血温阳益气中药复方对大鼠充血性心力衰竭的影响及机制研究

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2009年国际病理生理学教学研讨会

作者：马民张桂娟莫宏波马义李德辉暨南大学医学院中医系暨南大学附属第一医院校门诊部暨南大学医学院生化教研室暨南大学生物工程研究所

目的:研究补气温阳、活血化瘀中药复方（组成:人参、黄芪、车前子、苏木、川芎、丹参、制附子、枳壳、桂枝）对大鼠充血性心力衰竭的影响机制。方法:以大鼠腹腔注射盐酸阿霉素（ADR）制造充血性心衰动物模型,分为对照组、ADR心力衰竭模... 详细信息

目的:研究补气温阳、活血化瘀中药复方（组成:人参、黄芪、车前子、苏木、川芎、丹参、制附子、枳壳、桂枝）对大鼠充血性心力衰竭的影响机制。方法:以大鼠腹腔注射盐酸阿霉素（ADR）制造充血性心衰动物模型,分为对照组、ADR心力衰竭模型组、心宝治疗组、活血温阳益气复方治疗组,并分别以生理盐水、心宝药液、活血温阳益气复方药液灌胃干预治疗,使用放免法、半定量逆转录-聚合酶链反应法（RT-PCR）及流式细胞技术测定心衰大鼠治疗前后血浆心钠素（ANP）、肾髓质精氨酸血管加压素依赖性水通道蛋白-2（AQP2）及热休克蛋白70（HSP70）的表达水平差异。结果:活血温阳益气复方可显著提高心衰大鼠的心输出量、左室收缩内压,降低左心室舒张末压,改善左室内压最大变化速率,从而有效地改善了心衰大鼠的血流动力学;同时,该方能够显著降低心衰大鼠血浆ANP的水平和纠正心衰大鼠肾髓质AQP2蛋白的异常表达,并可提高白细胞中HSP70的转录和翻译水平。结论:该活血温阳益气复方能有效减轻大鼠充血性心力衰竭的程度,其机制可能与其减少血浆ANP水平、矫正肾脏AQP2异常表达和增强HSP70表达有关。

关键词：活血温阳益气心力衰竭,充血性水通道蛋白2 热休克蛋白质70

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糖类制备相关酶制剂的开发与应用

糖类制备相关酶制剂的开发与应用

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第八届中国酶工程学术研讨会

作者：李磊王鹏南开大学药学院天津尚德药缘科技有限公司

糖类是生命体中重要的活性大分子之一,在许多关键生物过程中发挥着不可替代的作用[1]。糖型的改变与特定病理状态,如癌症和炎症密切相关,显示出其在临床诊断中的应用潜力以及作为药物开发靶点的可能性。生物活性糖类获得是现代医学中糖... 详细信息

糖类是生命体中重要的活性大分子之一,在许多关键生物过程中发挥着不可替代的作用[1]。糖型的改变与特定病理状态,如癌症和炎症密切相关,显示出其在临床诊断中的应用潜力以及作为药物开发靶点的可能性。生物活性糖类获得是现代医学中糖类应用和研究的前提。然而由于结构的复杂性,糖类特别是具有生物活性的寡糖还很难得到大量制备。

关键词：核苷酸生物活性开发与应用糖基转移酶酶制剂

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