检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验眼科杂志 2012年第5期30卷 408-413页

作者：李彬斌杨筱曦周清何艳花陈剑暨南大学附属第一医院眼科暨南大学医学院眼科研究室广州510630

背景角膜新生血管（CNV）是一种常见的眼部病变，研究其发病机制及其抑制剂是眼科研究的热点和难点。目的研究人羊膜上皮细胞（AECs）培养液对CNV的抑制作用及机制。方法消化法培养及鉴定人AECs，并收集培养液，酶联免疫吸附试验（ELIS... 详细信息

背景角膜新生血管（CNV）是一种常见的眼部病变，研究其发病机制及其抑制剂是眼科研究的热点和难点。目的研究人羊膜上皮细胞（AECs）培养液对CNV的抑制作用及机制。方法消化法培养及鉴定人AECs，并收集培养液，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测色素上皮衍生因子（PEDF）和白细胞介素1受体拮抗剂（IL-1Ra）在培养液中的质量浓度。兔角膜上皮细胞分离后分别用无血清DMEM培养基、人AECs培养液、混合培养液（DMEM＋人AECs培养液）培养48h，采用实时定量聚合酶链反应（QRT—PCR）法检测不同培养液培养的角膜上皮细胞中血管内皮生长因子（VEGF）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的表达。用含质量分数10％胎牛血清的DMEM培养基培养人脐静脉血管内皮细胞（UVECs），并分别加入无血清DMEM、混合培养液和人AECs培养液，划痕法和细胞计数试剂盒8（CCK8）法检测各组培养液对人UVECs迁移的影响。分别在上述3种培养基中加入终质量浓度为50txg／L的bFGF，CCK8法检测各培养液中人UVECs的增生情况。在原子力显微镜（AFM）下观察人AECs培养液对人UVECs超微结构的影响。结果人羊膜培养和传代细胞角蛋白免疫组织化学染色阳性证实为人AECs。与无血清DMEM组相比，人AECs培养液组的兔角膜上皮细胞VEGFmRNA（1．00＋0．22VS．2．98_＋0．46）及bFGFmRNA（1．00＋0．36VS．2．55-＋0．48）的表达均明显下降，差异均有统计学意义（p_-0．001、0．002）；培养后不同时间人AECs培养液组人UVECs的增生吸光度（A）值明显下降，差异均有统计学意义（P〈0．05），人UVECs的迁移率下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。AFM观察见人AECs培养液组的血管内皮细胞膜粗糙、表面颗粒紊乱，细胞间连接及伪足减少。ELISA法检测人AECs培养液中PEDF的质量浓度为（70．41±0．68）Ixg／L，IL-1Ra的质量浓度为（153．56±0．36）-s／L，无血清DMEM组中未检出。结论人AECs培养液可抑制角膜上皮VEGF及bFGF的表达，抑制血管内皮细胞的增生和迁移，细胞结构和功能改变，这可能是其抑制CNV的机制之一。

关键词：人羊膜上皮细胞角膜新生血管血管内皮生长因子人脐静脉血管内皮细胞碱性成纤维细胞生长因子超微结构

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丝裂霉素C对翼状胬肉成纤维细胞膜通透性及超微结构的影响

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中华实验眼科杂志 2012年第6期30卷 490-494页

作者：杨筱曦蔡小芳陈剑李彬斌何艳花张静辉暨南大学附属第一医院眼科暨南大学医学院眼科研究室广州510630 暨南大学化学系广州510630

背景丝裂霉素C（MMC）对人翼状胬肉成纤维细胞的生长和增生有明显的抑制作用，但关于其对细胞膜影响的研究很少。目的探讨MMC对翼状胬肉成纤维细胞膜理化特性及超微结构改变的干预。方法收集翼状胬肉手术切除标本15例，用组织块培养法... 详细信息

背景丝裂霉素C（MMC）对人翼状胬肉成纤维细胞的生长和增生有明显的抑制作用，但关于其对细胞膜影响的研究很少。目的探讨MMC对翼状胬肉成纤维细胞膜理化特性及超微结构改变的干预。方法收集翼状胬肉手术切除标本15例，用组织块培养法培养人成纤维细胞，以波形蛋白免疫组织化学染色法对培养细胞进行鉴定。取传3代后对数生长期细胞以5×10^3个／孔的密度接种于96孔板，将不同质量浓度0、50、100、200、300、400mg／LMMC加入培养孔中处理翼状胬肉成纤维细胞12h，用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测培养细胞的活力，应用Annexin V—FICT／碘化丙啶（PI）法检测细胞凋亡的情况；利用原子力显微镜（AFM）观察不同质量浓度MMC作用后人成纤维细胞膜超微结构的改变；检测细胞上清液中丙二醛（MDA）的浓度以评价细胞的脂质过氧化程度；检测细胞外液中漏出的乳酸脱氢酶（LDH）含量以评估细胞膜的通透性变化；用Fluo-3／AM标记和流式细胞术检测培养细胞内游离钙离子的变化。结果组织块法原代培养贴壁1～2周可见大量长梭形细胞爬出，波形蛋白检测呈阳性反应。用MMC处理培养细胞12h后，人成纤维细胞的活力减弱，MMC对细胞增生的抑制作用呈剂量依赖性。0、50、100、200、300mg／LMMC处理组细胞凋亡百分比分别为4．2％、4．2％、5．4％、19．3％和25．8％。AFM下可见不同质量浓度MMC作用后人成纤维细胞膜超微结构的异常，不同质量浓度MMC处理组细胞外液中LDH活性及细胞上清液中MDA浓度明显高于对照组，且均随着MMC质量浓度的增加，LDH活性及细胞上清液中MDA浓度逐渐增加，组间两两比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。Fluo-3／AM标记和流式细胞术检测表明，培养细胞内游离钙离子增多。结论MMC能引起翼状胬肉成纤维细胞膜的理化性质改变，其作用呈剂量依赖性，细胞膜是其药效和毒性的作用靶点之一。

关键词：丝裂霉素C 翼状胬肉细胞毒性超微结构

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益寿调脂片对衰老模型小鼠自由基代谢作用的实验研究

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中国中西医结合杂志 1999年第11期19卷 675-677页

作者：朱秉匡孙立郑仕富张荣华暨南大学医学院第一附属医院中西医结合气血研究室广州510632 暨南大学医学院暨南大学医学院第一附属医院

目的:观察益寿调脂片对衰老模型小鼠自由基代谢调整作用。方法:利用5%D半乳糖皮下注射40天所致亚急性衰老模型小鼠,造模同时分别给予1%淀粉溶液(空白对照组、衰老模型组)、益寿调脂片溶液(低剂抗衰组、高剂抗衰组)及绞股蓝总甙片(阳性... 详细信息

目的:观察益寿调脂片对衰老模型小鼠自由基代谢调整作用。方法:利用5%D半乳糖皮下注射40天所致亚急性衰老模型小鼠,造模同时分别给予1%淀粉溶液(空白对照组、衰老模型组)、益寿调脂片溶液(低剂抗衰组、高剂抗衰组)及绞股蓝总甙片(阳性抗衰组)40天后,观察自由基代谢指标如血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSHPx)及大脑B型单胺氧化酶(MAOB)、Na+K+ATP酶改善情况。并观察益寿调脂片对不造模小鼠体能及应激能力的影响。结果:与衰老模型组比较,益寿调脂片能显著降低衰老模型小鼠的血清MDA含量及脑组织MAOB活性(P<001),而使血清SOD、GSHPx及脑组织中Na+K+ATP酶活性明显提高(P<001)。并与正常组比较,益寿调脂片能显著提高小鼠抗疲劳及耐缺氧能力,且具一定的量效关系。结论:益寿调脂片能有效的改善衰老机体自由基代谢,是理想而有效的延缓衰老的药物;并为衰老的“脾肾两虚、夹瘀夹痰”的理论提供了有力的实验依据。

关键词：益寿调脂片衰老模型自由基中药药理

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培养的兔羊膜上皮细胞构建角膜表层移植片的研究

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眼科研究 2009年第4期27卷 265-268页

作者：金玲陈剑吴静徐锦堂周清赵松滨暨南大学附属第一医院眼科广州510632 暨南大学医学院眼科研究室

目的应用培养的兔羊膜上皮细胞(AECs)体外构建复层上皮细胞-角膜基质移植材料,探讨利用AECs重建角膜表层的可行性。方法取妊娠晚期新西兰大白兔(27～28孕周)的羊膜,制成AECs单细胞悬液,用含血清和表皮生长因子(EGF)的DMEM/F12培养液培... 详细信息

目的应用培养的兔羊膜上皮细胞(AECs)体外构建复层上皮细胞-角膜基质移植材料,探讨利用AECs重建角膜表层的可行性。方法取妊娠晚期新西兰大白兔(27～28孕周)的羊膜,制成AECs单细胞悬液,用含血清和表皮生长因子(EGF)的DMEM/F12培养液培养、传代,利用免疫组织化学单克隆抗体AE1/AE3、AE5检测培养的AECs中细胞角蛋白ck3/12的表达;将体外培养的2～3代兔AECs种植在新鲜兔角膜基质上,利用气-液界面培养法使之复层化,体外构建复层上皮细胞-角膜基质移植材料,进行光学显微镜和扫描电镜观察,并进行免疫组织化学测定。结果体外培养的兔AECs呈现单克隆抗体AE1/AE3、AE5表达阳性,AECs在新鲜兔角膜基质上能形成形态类似于正常角膜上皮细胞的3～5层复层结构,且复层化后的上皮细胞单克隆抗体AE5表达阳性。结论应用培养的AECs能成功构建类似角膜表层的复层上皮细胞-角膜基质移植材料,AECs可能成为重建角膜表层的一种新的细胞来源。

关键词：羊膜上皮细胞角膜上皮细胞细胞培养气-液界面培养法

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纤维蛋白胶在眼科应用的新进展

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中国实用眼科杂志 2006年第10期24卷 1001-1004页

作者：梁晓东陈建苏徐锦堂暨南大学第一临床学院广州510632 暨南大学医学院眼科研究室

纤维蛋白胶(fibrin glue FG),又称纤维蛋白黏合剂(fibrin sealant FS),是一种生物蛋白制剂,主要成分是纤维蛋白和凝血酶,各成分混合后模拟体内凝血的最后阶段,最终形成稳定的纤维蛋白聚体,最早应用于伤口止血,FG对机体不产生毒副作用,... 详细信息

纤维蛋白胶(fibrin glue FG),又称纤维蛋白黏合剂(fibrin sealant FS),是一种生物蛋白制剂,主要成分是纤维蛋白和凝血酶,各成分混合后模拟体内凝血的最后阶段,最终形成稳定的纤维蛋白聚体,最早应用于伤口止血,FG对机体不产生毒副作用,不引起炎症反应,组织反应性极小,在促进伤口愈合、封闭组织缺损等方面有着良好的作用。

关键词：纤维蛋白胶眼科应用纤维蛋白黏合剂生物蛋白制剂促进伤口愈合组织工程角膜组织反应性伤口止血

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白细胞介素-1基因的多态性与白塞病易感关联性的Meta分析

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中华实验眼科杂志 2014年第8期32卷 743-747页

作者：吴静崔裕波侯光辉王超张日佳祁冰暨南大学医学院眼科研究所广州510630 暨南大学附属第一医院眼科广州510632 暨南大学附属珠海医院眼科珠海519000

背景白细胞介素-1（IL-1）α-889C／T、IL-1B-511C／T、＋3962C／T和IL-1Ra-2是IL-1基因的不同位点。IL-1基因的多态性与白塞病之间的潜在相关性已经在不同的人群中进行了研究，但研究结果存在一定的争议。目的对已发表的关于IL-1基因... 详细信息

背景白细胞介素-1（IL-1）α-889C／T、IL-1B-511C／T、＋3962C／T和IL-1Ra-2是IL-1基因的不同位点。IL-1基因的多态性与白塞病之间的潜在相关性已经在不同的人群中进行了研究，但研究结果存在一定的争议。目的对已发表的关于IL-1基因多态性与白塞病之间关联性的文献进行二次分析，探讨儿IL-1基因多态性是否增加白塞病的易感性。方法按照检索策略检索2013年5月31日之前公开发表的关于 IL-1基因多态性与白塞病之间关联性的研究文献，检索途径包括Medline、EMBASE、CochraneLibrary、Webofknowledge、GoogleScholar、中国知网和万方数据库，发表语种限于英文和中文，研究设计包括病例对照研究。筛选出符合标准的文献，根据Newcastle-OttawaScale（NOS）量表（共9分）评价纳入文献的研究质量。分析IL-1α-889TT基因型、IL-1β-3962C等位基因、IL-1p-511T表型基因和IL-1Ra-2等位基因与白塞病易感性间的关联性，用RevMan5．0统计学软件进行统计学分析。对7篇研究中异质性低（12〈50％）的指标采用固定效应模型评价各指标的合并效应量，异质性高（12〉50％）的指标用随机效应模型评价合并效应量。结果共检索到相关文献370篇，经过阅读摘要和全文共纳入7篇符合纳入标准的研究文献，NOS量表评分均≥8分。7篇文献共包括白塞病患者499例和正常人708名，结果发现IL-1β-3962C等位基因多态性增加白塞病的风险（OR=1．41，95％CI：1．06～1．88，P=0．02），IL-1α-889TT表型基因的多态性降低白塞病的风险（OR=0．61，95％CI：0．40～0．92，P=0．02），而IL-1B-511T等位基因（OR=0．84，95％CI：0．58～1．23，P=0．38）和IL-1Ra-2等位基因（OR=1．25，95％CI：0．50～3．14，p=0．63）与白塞病之间均无明显关联。结论儿IL-1基因多态性与白塞病易感性之间可能具有一定的相关性，但还需要大样本量的临床研究进一步验证。

关键词：白塞病白细胞介素-1 基因多态性 Meta分析

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异种全厚板层角膜移植术后局部应用高渗葡萄糖的研究

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眼外伤职业眼病杂志 2008年第1期30卷 5-8页

作者：吴连胜陈建苏徐锦堂赵滨松李晓霞暨南大学医学院眼科研究室暨南大学附属第一医院广东广州510632

目的研究局部应用50%葡萄糖降低异种全厚板层角膜移植术后炎性反应的作用。方法18周龄的健康雄性新西兰白兔16只随机分成两组,每组各8只。两组均进行猫兔异种全厚板层移植术:A组(实验组)手术后给予50%葡萄糖滴眼每日2次,复方氯霉素滴眼... 详细信息

目的研究局部应用50%葡萄糖降低异种全厚板层角膜移植术后炎性反应的作用。方法18周龄的健康雄性新西兰白兔16只随机分成两组,每组各8只。两组均进行猫兔异种全厚板层移植术:A组(实验组)手术后给予50%葡萄糖滴眼每日2次,复方氯霉素滴眼液滴眼每日3次;B组(对照组)术后仅给复方氯霉素滴眼液滴眼。每日3次。术后每日在裂隙灯显微镜下观察植片存活情况,治疗及观察时间均为3个月。各组于术后1,2,3月各取2只兔的术眼角膜进行病理学检查。结果术后半个月内,A、B两组植片透明、无明显浑浊。术后20 d部分植片开始出现排斥反应,在3个月内,A、B两组全厚角膜植片的排斥反应指数差异显著。在无排斥反应的正常兔角膜中组织学及电子显微镜下的结构特征清晰;但在出现排斥反应的兔角膜中有明显的角膜水肿和炎性细胞浸润。结论异种全厚板层角膜移植术后局部应用50%葡萄糖滴眼能减少术眼水肿,降低炎性反应,延长角膜植片成活时间。

关键词：异种角膜移植角膜水肿免疫排斥反应高渗葡萄糖

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组织工程角膜支架材料

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广东医学 2005年第9期26卷 1293-1295页

作者：刘晓霞陈建苏暨南大学附属第一医院眼科广州510630 暨南大学医学院眼科研究室广州510632

组织工程学是一门新兴交叉学科，组织工程的核心是建立细胞与生物支架复合体，在生物支架所形成的三维空间中，细胞摄取营养，交换气体，排泄废物，在新陈代谢活动中，支架逐渐降解，细胞分泌基质，形成组织。生物材料是对培养细胞的生... 详细信息

组织工程学是一门新兴交叉学科，组织工程的核心是建立细胞与生物支架复合体，在生物支架所形成的三维空间中，细胞摄取营养，交换气体，排泄废物，在新陈代谢活动中，支架逐渐降解，细胞分泌基质，形成组织。生物材料是对培养细胞的生长、形态形成、黏附和分化起重要作用的细胞外基质（extracellular matrix，ECM）或其替代物。

关键词：组织工程角膜支架材料细胞外基质聚羟基乙酸聚乳酸

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纤维蛋白胶为载体构建人羊膜上皮细胞植片的实验研究

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中国病理生理杂志 2008年第6期24卷 1199-1204页

作者：赵芳陈剑吴静徐锦堂周清王彦平金玲赵松滨暨南大学附属第一医院眼科广东广州516032 暨南大学医学院眼科研究室广东广州516032 暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州516032

目的:探讨利用纤维蛋白胶作为支架构建组织工程人羊膜上皮细胞(HAECs)植片重建眼表的可行性。方法:取足月剖宫产胎盘羊膜,经胶原酶和胰蛋白酶消化后,获得HAECs。在体外构建的纤维蛋白胶片上培养HAECs,细胞融合成片后,利用气液界面复层化... 详细信息

目的:探讨利用纤维蛋白胶作为支架构建组织工程人羊膜上皮细胞(HAECs)植片重建眼表的可行性。方法:取足月剖宫产胎盘羊膜,经胶原酶和胰蛋白酶消化后,获得HAECs。在体外构建的纤维蛋白胶片上培养HAECs,细胞融合成片后,利用气液界面复层化,采用倒置显微镜、组织切片、HE染色、细胞角蛋白免疫组织化学染色和扫描电子显微镜观察HAECs的生长情况。结果:HAECs在纤维蛋白胶表面生长良好,细胞呈圆形或多角形,长满后呈上皮细胞特有的铺路石样外观,扫描电镜观察细胞表面有丰富的微绒毛,细胞广谱角蛋白单克隆抗体染色阳性。细胞有复层生长趋势,植片较为透明。结论:以纤维蛋白胶为载体构建组织工程人HAECs植片,具有眼表重建的潜在运用价值。

关键词：羊膜上皮细胞人纤维蛋白组织黏着剂细胞培养

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角膜内皮细胞高表达TGF-β_1的免疫学作用

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眼科研究 2007年第7期25卷 489-493页

作者：马慧香徐锦堂姜振友赵松滨陈建苏暨南大学医学院附属第一医院眼科暨南大学医学院眼科研究室广州510632 暨南大学医学院免疫教研室广州510632

目的探讨TGF-β1基因转染角膜内皮细胞后表达产物的免疫学活性。方法分别用RT-PCR、Western blot、免疫组织化学法检测pSecTag2-TGF-β1MP质粒转染角膜内皮细胞48h后TGF-β1基因的表达,ELISA法检测TGF-β1浓度;MTT法检测其对ConA诱导的... 详细信息

目的探讨TGF-β1基因转染角膜内皮细胞后表达产物的免疫学活性。方法分别用RT-PCR、Western blot、免疫组织化学法检测pSecTag2-TGF-β1MP质粒转染角膜内皮细胞48h后TGF-β1基因的表达,ELISA法检测TGF-β1浓度;MTT法检测其对ConA诱导的淋巴细胞转化反应的影响;用流式细胞仪法检测其对淋巴细胞凋亡以及淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+、CD25+、CD69+、CD71+亚群分化的影响。结果从mRNA转录和蛋白质水平均证实TGF-β1基因在角膜内皮细胞获得高效表达。瞬时转染48h角膜内皮细胞培养上清中TGF-β1的表达为(98±3)pg/ml,高于对照组。在其作用下淋巴细胞活化增生受抑制;出现明显的亚二倍体峰;CD25+、CD69+、CD71+阳性细胞比率下降。结论基因转染角膜内皮细胞高表达TGF-β1,可抑制淋巴细胞的活化增生,促使淋巴细胞凋亡。

关键词：转化生长因子-β1 基因转染淋巴细胞免疫

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