检索结果-内蒙古大学图书馆

眼科研究 2009年第10期27卷 839-843页

作者：李燕陈建苏李晓霞王伟暨南大学眼科研究室再生医学教育部重点实验室暨南大学附属第一临床医学院眼科广州510632

目的检测转谷氨酰胺酶交联胶原凝胶对三维培养的角膜基质细胞的影响,探讨可提高机械性能的组织工程角膜基质层新途径。方法胶原酶消化法获取原代兔角膜基质细胞,以加入转谷氨酰胺酶与胶原凝胶交联为实验组,不加酶交联为对照组。倒置显... 详细信息

目的检测转谷氨酰胺酶交联胶原凝胶对三维培养的角膜基质细胞的影响,探讨可提高机械性能的组织工程角膜基质层新途径。方法胶原酶消化法获取原代兔角膜基质细胞,以加入转谷氨酰胺酶与胶原凝胶交联为实验组,不加酶交联为对照组。倒置显微镜下每日观察细胞生长情况、Alamar-Blue试剂检测细胞增生、免疫荧光法检测凝胶内细胞波形蛋白、检测透光度、酶消化法检测胶原凝胶抗消化能力。结果实验组细胞胶原凝胶内附着和生长优于对照组,细胞在凝胶内呈树枝状生长。2组细胞均随培养时间延长明显增生(P=0.000)。共焦显微镜下见2组细胞胞浆波形蛋白均阳性表达,实验组细胞伪足更丰富。实验组透光度稍差于对照组。实验组抵抗胶原酶消化的能力显著增强。结论酶交联的胶原凝胶对角膜基质细胞无毒性作用,重构的基质层结构更加稳定,有利于组织工程角膜基质层的构建。

关键词：转谷氨酰胺酶交联胶原凝胶组织工程角膜

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异种全厚板层角膜和前板层角膜植片板层移植术后拆线时间探讨

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眼科新进展 2009年第3期29卷 165-169页

作者：吴连胜陈建苏徐锦堂丁勇郑佩娥暨南大学医学院眼科研究室再生医学教育部重点实验室广东省广州市510630 暨南大学附属第一临床医学院眼科暨南大学医学院病理教研室东莞市凤岗镇雁田广济医院眼科

目的研究全厚板层和前板层角膜移植后不同的角膜缝线拆除时间对植片的影响。方法将32只健康新西兰白兔随机分成4组,每组各8只:A组、B组(A、B2组又合为M组)为猫→兔异种全厚板层移植组。C组、D组(C、D2组又合为N组)为猫→兔异种前板层移... 详细信息

目的研究全厚板层和前板层角膜移植后不同的角膜缝线拆除时间对植片的影响。方法将32只健康新西兰白兔随机分成4组,每组各8只:A组、B组(A、B2组又合为M组)为猫→兔异种全厚板层移植组。C组、D组(C、D2组又合为N组)为猫→兔异种前板层移植组。术眼为右眼,植片直径为9.0mm,植床直径为8.0mm。A、C2组拆线时间为10d(A、C2组又合为G组),B、D2组拆线时间为1个月(B、D2组又合为H组)。观察时间为3个月。结果用两因素方差分析法分析3个月时的炎性反应指数:(1)角膜植片M组(2.560±2.065)与N组(5.250±2.887)比较差异有显著统计学意义(F=15.427,P=0.001<0.05),即M组炎性反应较轻;(2)拆线时间G组(2.560±2.128)与H组(5.250±2.840)比较差异有显著统计学意义(F=15.427,P=0.001<0.05),即G组炎性反应较轻;(3)角膜植片差异联合拆线时间差异:F=7.017,P=0.013<0.05,差异有统计学意义,即角膜植片差异和拆线时间之间存在交互影响角膜移植炎性反应作用。结论角膜植片差异和拆线时间差异均存在影响异种角膜移植炎性反应的作用,并且二者存在交互作用。

关键词：炎性反应指数异种角膜移植全厚板层角膜移植前板层角膜移植高渗葡萄糖角膜水肿兔猫

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兔眼结膜上皮细胞和成纤维细胞的培养及冻存

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广东医学 2009年第2期30卷 171-173页

作者：苗晓晴陈剑吴静徐锦堂王彦平暨南大学附属第一医院眼科广州510632 暨南大学医学院眼科研究室广州510632 暨南大学病理生理学教研室再生医学国家重点研究室广州510632

目的探讨体外培养兔眼结膜上皮细胞和成纤维细胞的最佳方法,为进一步研究结膜的生物学特性和结膜重建提供基础。方法分别用组织块法培养结膜上皮细胞和混合消化法培养结膜基质细胞,用倒置显微镜观察其生长方式和形态特征;收集第2代细胞,... 详细信息

目的探讨体外培养兔眼结膜上皮细胞和成纤维细胞的最佳方法,为进一步研究结膜的生物学特性和结膜重建提供基础。方法分别用组织块法培养结膜上皮细胞和混合消化法培养结膜基质细胞,用倒置显微镜观察其生长方式和形态特征;收集第2代细胞,-80℃冻存。结果兔眼结膜上皮细胞和上皮下成纤维细胞可以在体外成功培养,结膜上皮细胞呈圆形或多角形,成纤维细胞呈长梭形;冻存细胞1个月后复苏成功率达80%。结论组织块法和混合消化法培养可成功获得结膜上皮细胞和上皮下成纤维细胞。

关键词：结膜上皮细胞成纤维细胞细胞培养冻存复苏

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肾纤维囊作为载体培养角膜基质细胞的研究

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广东医学 2009年第1期30卷 23-25页

作者：唐光霞陈建苏徐锦堂夏潮涌丁勇暨南大学附属第一医院眼科广州510630 暨南大学医学院眼科研究室再生医学教育部重点实验室广州510632 暨南大学医学院组织学与胚胎学教研室广州510632

目的探索以脱细胞的肾纤维囊作为载体培养角膜基质细胞并研究培养角膜基质细胞特性。方法将培养扩增的兔角膜基质细胞分别接种到培养板和肾纤维囊上进行体外培养,采用倒置显微镜、免疫组化(波形蛋白)和免疫荧光(AO、PI和Hoechst)的方法... 详细信息

目的探索以脱细胞的肾纤维囊作为载体培养角膜基质细胞并研究培养角膜基质细胞特性。方法将培养扩增的兔角膜基质细胞分别接种到培养板和肾纤维囊上进行体外培养,采用倒置显微镜、免疫组化(波形蛋白)和免疫荧光(AO、PI和Hoechst)的方法进行检测,观察兔角膜基质细胞在培养板和肾纤维囊上的生长情况。结果倒置显微镜和免疫荧光显微镜观察结果显示角膜基质细胞在肾纤维囊上快速贴壁生长并增殖,细胞形态呈多角形树枝状,多次传代后细胞仍维持原有的形态和功能,细胞能长期培养。在培养板上培养的细胞呈长梭形,细胞贴壁生长和增殖情况稍差。在肾纤维囊上的活细胞较在培养板上培养的细胞多。结论角膜基质细胞在脱细胞的肾纤维囊载体上生长良好,细胞形态结构明显。本研究为角膜基质细胞的体外培养,提供了简单和高效的方法。

关键词：肾纤维囊角膜基质细胞细胞培养

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脱细胞角膜材料的生物相容性研究

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眼科研究 2009年第5期27卷 359-363页

作者：吴连胜陈建苏徐锦堂丁勇郑佩娥徐国风黄慧研暨南大学医学院眼科研究室再生医学教育部重点实验室广州510632 东莞市凤岗镇雁田广济医院 523690 暨南大学附属第一临床医学院眼科广州510632 暨南大学医学院病理教研室广州510632 广东冠昊生物科技有限公司广州510632

目的研究异种脱细胞猫角膜板层角膜移植术后的组织相容性。方法24只18周龄的健康新西兰白兔随机平均分成3组:A组为脱细胞猫角膜材料→兔板层移植组,B组为猫→兔异种新鲜角膜植片板层移植组,C组为兔→兔同种异体新鲜角膜植片板层移植组... 详细信息

目的研究异种脱细胞猫角膜板层角膜移植术后的组织相容性。方法24只18周龄的健康新西兰白兔随机平均分成3组:A组为脱细胞猫角膜材料→兔板层移植组,B组为猫→兔异种新鲜角膜植片板层移植组,C组为兔→兔同种异体新鲜角膜植片板层移植组。用扫描电镜观察术后不同时期术眼角膜的组织病理学改变,抽取兔血测定CD4+/CD8+T细胞百分比。结果术后1个月3个组间角膜植片炎症反应指数组间比较差异均无统计学意义;2个月A组与B组、A组与C组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。3个月A组与B组、A组与C组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。3个组间术后同期7、15、30d兔外周血CD4+T细胞和CD8+T细胞活化率差异均无统计学意义(P>0.05)。组织切片显示术后3个月内,B、C两组角膜植片炎症反应轻,植片内皮细胞吸收,组织结构基本正常。A组角膜植片炎症反应显著,结构较紊乱,新生血管增生。扫描电镜可见B、C2组角膜上皮结构基本正常,细胞连接较好。A组扫描电镜可见有上皮缺损。结论脱细胞处理的异种猫角膜移植后生物相容性较新鲜角膜差,免疫反应无显著差异。

关键词：角膜脱细胞生物材料板层角膜移植异种角膜移植免疫反应

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在旋转培养系统中构建组织工程角膜基质

在旋转培养系统中构建组织工程角膜基质

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中华医学会第十四次全国眼科学术大会

作者：李晓霞陈建苏暨南大学医学院眼科研究室暨南大学第一临床医学院暨南大学教育部再生医学重点实验室 510630

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纤维蛋白胶对眼表的作用

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眼外伤职业眼病杂志 2009年第4期31卷 260-263页

作者：陈建苏王伟梁晓东佘国荣沈闲茹戴本启刘晓霞丁勇郑佩娥赵松滨暨南大学医学院眼科研究室再生医学教育部重点实验室广东广州510632 湛江市第二人民医院眼科广东湛江524006 暨南大学第一附属医院眼科广东广州510632 暨南大学医学院病理解剖学教研室广东广州5106323

目的观察以纤维蛋白胶(FG)为载体构建兔角膜上皮、基质和内皮细胞片,以及FG对兔结膜和角膜的黏合作用。方法在培养板孔底制作薄层和厚层FG,将培养兔角膜3种细胞分别接种于FG表面,观察细胞生长情况。FG对兔结膜的黏合研究:分为A组(结膜... 详细信息

目的观察以纤维蛋白胶(FG)为载体构建兔角膜上皮、基质和内皮细胞片,以及FG对兔结膜和角膜的黏合作用。方法在培养板孔底制作薄层和厚层FG,将培养兔角膜3种细胞分别接种于FG表面,观察细胞生长情况。FG对兔结膜的黏合研究:分为A组(结膜原位粘合组),B组(结膜移位粘合组),对照组(单纯切除结膜植片),每组5只眼,观察结膜组织黏合情况。FG对兔角膜的黏合研究:3例兔前板层角膜移植术,先用10-0尼龙线间断缝合4针固定植片,再用FG黏合,将植片固定于植床。结果角膜3种细胞在薄层和厚层FG表面生长良好:角膜上皮细胞可形成单层和复层;角膜基质细胞间网状连接;角膜内皮细胞排列紧密。对兔结膜的黏合研究:A组和B组植片与植床对位良好,紧密黏合。组织切片显示术后第4周A组和B组结膜上皮完整,炎症基本消退。对照组结膜上皮有局部脱落区,纤维层局部显示瘢痕组织结构特征。兔前板层角膜移植术后3个月,植片与受体角膜愈合良好。结论FG可作为角膜3种细胞的生长载体构建细胞片。FG对兔结膜和角膜组织有良好的黏合作用。

关键词：纤维蛋白组织黏着剂眼表细胞培养组织工程

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模拟微重力条件下兔角膜基质细胞在复合材料上的三维培养

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眼科研究 2008年第4期26卷 241-244页

作者：李晓霞陈建苏李沁华郑佩娥吴连胜暨南大学医学院眼科研究室第一临床医学院眼科广州510632

目的探讨在模拟微重力条件下兔角膜基质细胞在复合材料上的三维生长特性,为构建组织工程角膜提供新的途径。方法Ⅱ型胶原酶消化法获取原代兔角膜基质细胞,以密度为1×105/mL将第5代细胞种植于无菌复合载体材料上。以模拟微重力条件... 详细信息

目的探讨在模拟微重力条件下兔角膜基质细胞在复合材料上的三维生长特性,为构建组织工程角膜提供新的途径。方法Ⅱ型胶原酶消化法获取原代兔角膜基质细胞,以密度为1×105/mL将第5代细胞种植于无菌复合载体材料上。以模拟微重力条件下培养兔角膜基质细胞为实验组与传统静态培养系统进行细胞培养作对照。分别在6、12、18d取细胞和载体行苏木精-伊红染色光镜观察和扫描电镜观察;在3、6、9、12、15、18d取出行CCK-8法检测细胞增生功能。结果对照组只在材料表面可见单层细胞;实验组大量细胞与载体黏附紧密且生长入载体内部,载体材料降解显著。扫描电镜下实验组可见细胞胞体小且突触丰富,培养第18d细胞在材料表面分泌大量胶原膜样物;模拟微重力系统促进了细胞增生(P=0.004)。结论模拟微重力环境中在复合材料上培养的兔角膜基质细胞接近生理状态,更适用于组织工程三维构建,为构建更接近生理状态的组织工程角膜提供了依据。

关键词：模拟微重力基质细胞组织工程角膜

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纤维蛋白胶为载体构建人羊膜上皮细胞植片的实验研究

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中国病理生理杂志 2008年第6期24卷 1199-1204页

作者：赵芳陈剑吴静徐锦堂周清王彦平金玲赵松滨暨南大学附属第一医院眼科广东广州516032 暨南大学医学院眼科研究室广东广州516032 暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州516032

目的:探讨利用纤维蛋白胶作为支架构建组织工程人羊膜上皮细胞(HAECs)植片重建眼表的可行性。方法:取足月剖宫产胎盘羊膜,经胶原酶和胰蛋白酶消化后,获得HAECs。在体外构建的纤维蛋白胶片上培养HAECs,细胞融合成片后,利用气液界面复层化... 详细信息

目的:探讨利用纤维蛋白胶作为支架构建组织工程人羊膜上皮细胞(HAECs)植片重建眼表的可行性。方法:取足月剖宫产胎盘羊膜,经胶原酶和胰蛋白酶消化后,获得HAECs。在体外构建的纤维蛋白胶片上培养HAECs,细胞融合成片后,利用气液界面复层化,采用倒置显微镜、组织切片、HE染色、细胞角蛋白免疫组织化学染色和扫描电子显微镜观察HAECs的生长情况。结果:HAECs在纤维蛋白胶表面生长良好,细胞呈圆形或多角形,长满后呈上皮细胞特有的铺路石样外观,扫描电镜观察细胞表面有丰富的微绒毛,细胞广谱角蛋白单克隆抗体染色阳性。细胞有复层生长趋势,植片较为透明。结论:以纤维蛋白胶为载体构建组织工程人HAECs植片,具有眼表重建的潜在运用价值。

关键词：羊膜上皮细胞人纤维蛋白组织黏着剂细胞培养

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异种全厚板层角膜移植术后局部应用高渗葡萄糖的研究

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眼外伤职业眼病杂志 2008年第1期30卷 5-8页

作者：吴连胜陈建苏徐锦堂赵滨松李晓霞暨南大学医学院眼科研究室暨南大学附属第一医院广东广州510632

目的研究局部应用50%葡萄糖降低异种全厚板层角膜移植术后炎性反应的作用。方法18周龄的健康雄性新西兰白兔16只随机分成两组,每组各8只。两组均进行猫兔异种全厚板层移植术:A组(实验组)手术后给予50%葡萄糖滴眼每日2次,复方氯霉素滴眼... 详细信息

目的研究局部应用50%葡萄糖降低异种全厚板层角膜移植术后炎性反应的作用。方法18周龄的健康雄性新西兰白兔16只随机分成两组,每组各8只。两组均进行猫兔异种全厚板层移植术:A组(实验组)手术后给予50%葡萄糖滴眼每日2次,复方氯霉素滴眼液滴眼每日3次;B组(对照组)术后仅给复方氯霉素滴眼液滴眼。每日3次。术后每日在裂隙灯显微镜下观察植片存活情况,治疗及观察时间均为3个月。各组于术后1,2,3月各取2只兔的术眼角膜进行病理学检查。结果术后半个月内,A、B两组植片透明、无明显浑浊。术后20 d部分植片开始出现排斥反应,在3个月内,A、B两组全厚角膜植片的排斥反应指数差异显著。在无排斥反应的正常兔角膜中组织学及电子显微镜下的结构特征清晰;但在出现排斥反应的兔角膜中有明显的角膜水肿和炎性细胞浸润。结论异种全厚板层角膜移植术后局部应用50%葡萄糖滴眼能减少术眼水肿,降低炎性反应,延长角膜植片成活时间。

关键词：异种角膜移植角膜水肿免疫排斥反应高渗葡萄糖

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