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第13届全国实验血液学会议

作者：查显丰陈少华杨力建闫小娟李萡翁建宇杜欣李扬秋暨南大学医学院血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室广东省人民医院血液科

目的:TCRζ链是T细胞受体(T cell receptor,TCR)信号传导中的关键分子,TCRζ链表达下调不仅影响TCR在细胞表面的表达和循环T细胞阳性信号的数量,而且还会影响T细胞的活化和增殖,最终可以导致机体免疫功能的异常。前期研究发现TCRζ表达... 详细信息

目的:TCRζ链是T细胞受体(T cell receptor,TCR)信号传导中的关键分子,TCRζ链表达下调不仅影响TCR在细胞表面的表达和循环T细胞阳性信号的数量,而且还会影响T细胞的活化和增殖,最终可以导致机体免疫功能的异常。前期研究发现TCRζ表达明显下降与慢性粒细胞白血病(CML)病人T细胞免疫缺陷相关。本研究利用转基因技术上调CML患者T细胞的TCRζ基冈表达水平,分析基因修饰后T细胞活性变化及其信号分子等基因变化特点。

关键词：慢性粒细胞白血病细胞免疫缺陷基因技术 TCR

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CD3复合物和FcεRI?基因在铅接触工人驱铅治疗前后的变化情况

CD3复合物和FcεRI?基因在铅接触工人驱铅治疗前后的变化情况

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第13届全国实验血液学会议

作者：刘思初牛宇哲李萡刘薇薇杨志前陈少华杨力建李扬秋暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院再生医学教育部重点实验室广州市第十二人民医院

目的:了解驱铅治疗前后铅接触工人外周血中T细胞受体信号传导分子CD3各组成基因及FcεRI?基因的表达特点。方法:利用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR分别检测9例健康人及16例临床上进行驱铅治疗的工人驱铅前后外周血单个核细胞中CD3各组成基因... 详细信息

目的:了解驱铅治疗前后铅接触工人外周血中T细胞受体信号传导分子CD3各组成基因及FcεRI?基因的表达特点。方法:利用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR分别检测9例健康人及16例临床上进行驱铅治疗的工人驱铅前后外周血单个核细胞中CD3各组成基因及FcεRI?基因表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参基因,根据相对定量公式2-△Ct×100%计算各基因表达水平。结果:驱铅治疗前CD3?基因表达水平与健康人相比显著升高,而CD3?和FcεRI?基因水平与健康人相

关键词：驱铅治疗铅接触 CD3 复合物

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T-ALL中Notch1基因突变和高表达特点

T-ALL中Notch1基因突变和高表达特点

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第13届全国实验血液学会议

作者：林春兰郑海涛王春燕杨力建陈少华李萡周羽竝谭获李扬秋暨南大学医学院生化教研室暨南大学医学院血液病研究所广州医学院第一附属医院肿瘤血液中心暨南大学再生医学教育部重点实验室

Notch1信号通路在T细胞的发育过程起重要作用,对T细胞发育的各个阶段进行精细调节,Notch1表达失调可使得T淋巴细胞的发育阻断在双阳性阶段。近年来,不少研究报道了T-ALL/淋巴瘤中Notch1基因突变和异常表达情况,有认为可以作为T-ALL预后... 详细信息

Notch1信号通路在T细胞的发育过程起重要作用,对T细胞发育的各个阶段进行精细调节,Notch1表达失调可使得T淋巴细胞的发育阻断在双阳性阶段。近年来,不少研究报道了T-ALL/淋巴瘤中Notch1基因突变和异常表达情况,有认为可以作为T-ALL预后的一个指标。本研究利用RT-PCR和核苷酸序列分析分析了13例T-ALL病人中Notch1基因突变及其表达水平变化特点。研究发现,3例T-ALL中出现Notch1基因突变,

关键词：基因突变高表达 Notchl T-ALL Notch1

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职业铅接触工人外周血T细胞Vβ基因谱系变化特点

职业铅接触工人外周血T细胞Vβ基因谱系变化特点

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第13届全国实验血液学会议

作者：刘思初李萡刘薇薇杨志前陈少华杨力建李扬秋暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院再生医学教育部重点实验室广州市第十二人民医院

目的:为了解职业铅接触工人T细胞免疫改变情况,以检测工人外周血中T细胞受体Vβ基因(TCRVβ)谱系的分布和克隆性特点为指标进行评价。方法:利用RT-PCR分别检测10例职业铅接触工人和10例健康体检者的外周血T细胞受体Vβ亚家族的表达情况... 详细信息

目的:为了解职业铅接触工人T细胞免疫改变情况,以检测工人外周血中T细胞受体Vβ基因(TCRVβ)谱系的分布和克隆性特点为指标进行评价。方法:利用RT-PCR分别检测10例职业铅接触工人和10例健康体检者的外周血T细胞受体Vβ亚家族的表达情况;阳性产物经荧光素标记和基因扫描分析其CDR3长度以了解T细胞克隆性。结果:健康体检者表达全部24个Vβ亚家族,而10例职业铅接触工人外周血所能检测到的TCR Vβ亚家族仅有2～7个,呈现显著缺失的状态,而且,多数V

关键词：铅接触健康体检者细胞受体亚家族外周血变化特点

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SALL4和BMI-1基因在胎盘和脐血中的表达特点

SALL4和BMI-1基因在胎盘和脐血中的表达特点

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第13届全国实验血液学会议

作者：陈少华沈琦杨力建李萡 Ma Yupo 李扬秋暨南大学医学院血液病研究所 Department of Pathology BST-9 School of MedicineThe State University of New York at Stony BrookStony BrookNY 11794 暨南大学再生医学教育部重点实验室

干细胞转录因子SALL4在胚胎干细胞和白血病干细胞中具有重要作用,而作为SALL4的靶分子BMI-1的作用与之密切相关。有关SALL4和BMI-1基因表达水平变化情况已在一些类型白血病和干细胞中有所报道。本研究进一步分析两者在胎盘和脐血中的表... 详细信息

干细胞转录因子SALL4在胚胎干细胞和白血病干细胞中具有重要作用,而作为SALL4的靶分子BMI-1的作用与之密切相关。有关SALL4和BMI-1基因表达水平变化情况已在一些类型白血病和干细胞中有所报道。本研究进一步分析两者在胎盘和脐血中的表达特点。利用SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR分别检测8例胎盘、11例脐血和11例正常人外周血中SALL4和BMI-1基因的表达水平。结果显示两基因在胎盘组织中的表达水平(32.76±24.27;72.97±55.63)显著高于健康人外周血和脐血单个核细胞中SALL4(0.82±1.

关键词： SALL4 胎盘组织 BMI-1

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Notch1基因在淋巴细胞肿瘤中的表达变化及其意义

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肿瘤防治研究 2010年第10期37卷 1140-1143页

作者：郑海涛李扬秋陈少华杨力建钟立业暨南大学医学院血液病研究所广州510632 暨南大学医学院再生医学教育部重点实验室

目的了解Notch1基因在淋巴细胞肿瘤中的表达特点。方法采用SYBRGreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测43例淋巴细胞肿瘤患者(T细胞急性淋巴细胞白血病7例、T细胞非霍奇金淋巴瘤6例、B细胞急性淋巴细胞白血病9例、B细胞慢性淋巴细胞白... 详细信息

目的了解Notch1基因在淋巴细胞肿瘤中的表达特点。方法采用SYBRGreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测43例淋巴细胞肿瘤患者(T细胞急性淋巴细胞白血病7例、T细胞非霍奇金淋巴瘤6例、B细胞急性淋巴细胞白血病9例、B细胞慢性淋巴细胞白血病5例和B细胞非霍奇金淋巴瘤16例)和20例健康人外周血单个核细胞的Notch1基因表达水平,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用公式2-ΔCt×100%计算Notch1基因表达水平。结果 T细胞肿瘤组(中位数0.897%)与B细胞肿瘤组(中位数0.726%)患者外周血单个核细胞Notch1基因表达均比健康对照组(中位数0.288%)明显上升(P<0.01,P<0.01)。T细胞肿瘤组Notch1基因表达水平与B细胞肿瘤组的差异无统计学意义(P>0.05)。但五种类型淋巴细胞肿瘤Notch1基因表达水平有所不同,其中以B细胞慢性淋巴细胞白血病组最高,其次是T细胞非霍奇金淋巴瘤组,而B细胞非霍奇金淋巴瘤组的Notch1基因表达水平最低。结论异常高表达的Notch1基因可能与参与淋巴细胞肿瘤的发生发展过程,研究结果为靶向抑制Notch1的基因治疗提供初步依据。

关键词： Notch1基因实时定量PCR 淋巴细胞肿瘤

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RNA干扰下调bcl11b基因表达对Molt-4细胞增殖和凋亡的影响

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肿瘤防治研究 2010年第3期37卷 247-250页

作者：黄欣陈思李扬秋杨力建陈少华暨南大学医学院血液病研究所广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室

目的分析下调bcl11b基因表达对人T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞增殖和凋亡的影响。方法通过核转技术将bcl11b-siRNA转染Molt-4细胞;在不同时间点分别采用荧光实时定量PCR观察其对bcl11b基因表达的影响;MTT法观察对Molt-4细胞体外增... 详细信息

目的分析下调bcl11b基因表达对人T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞增殖和凋亡的影响。方法通过核转技术将bcl11b-siRNA转染Molt-4细胞;在不同时间点分别采用荧光实时定量PCR观察其对bcl11b基因表达的影响;MTT法观察对Molt-4细胞体外增殖的抑制作用;流式细胞术及刘氏染色检测siRNA的诱导凋亡作用。结果转染后24小时开始细胞生存率均显著降低(P<0.01),细胞发生凋亡,bcl11b基因表达下调。结论bcl11b-siRNA可抑制Molt-4细胞中bcl11b基因表达,使肿瘤细胞增殖抑制和发生凋亡。

关键词：小干扰RNA bcl11b基因 Molt-4细胞

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PACAP38对兔角膜瓣术后三叉神经节细胞及角膜神经生长的影响

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眼科研究 2010年第8期28卷 694-698页

作者：赵秀丽陈建苏余榕捷丁勇郑佩娥李晓霞田振彩戴静暨南大学附属第一医院眼科暨南大学医学院眼科研究室再生医学教育部重点实验室广州510632 暨南大学生物医学工程系广州510632

目的观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP38)对培养的兔三叉神经节细胞及角膜瓣术后角膜神经生长的影响。方法从2周龄新西兰白兔中分离三叉神经节细胞,并在神经元基础培养液中进行培养。培养24h后在培养液中分别加入1μmol/LPACAP38(A组)... 详细信息

目的观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP38)对培养的兔三叉神经节细胞及角膜瓣术后角膜神经生长的影响。方法从2周龄新西兰白兔中分离三叉神经节细胞,并在神经元基础培养液中进行培养。培养24h后在培养液中分别加入1μmol/LPACAP38(A组)、0.1μmol/LPACAP38(B组),C组培养液中加入PBS。1周后行抗神经纤维丝蛋白(NF200)免疫荧光染色鉴别培养的三叉神经节细胞。27只新西兰白兔右眼行角膜瓣手术,并分为3组,术后1d分别以10μmol/LPACAP38、5μmol/LPACAP38或PBS点眼,共8周,行角膜敏感度测定和NF200免疫荧光染色,评价术后不同时间角膜神经的修复情况。结果 PACAP38培养的三叉神经节细胞有较多神经细胞存活,伸出突触并交织呈网状,A组神经细胞存活最多。角膜瓣手术的3个组角膜敏感度随着术后时间的延长逐渐增加(Ftime=58.196,P=0.00),10μmol/LPACAP38点眼组角膜敏感度恢复最快。10μmol/LPACAP38点眼组和5μmol/LPACAP38点眼组角膜敏感度值明显高于PBS点眼组,差异均有统计学意义(P=0.000,P=0.005)。角膜神经染色示10μmol/LPACAP38点眼组角膜神经密度较5μmol/LPACAP38点眼组和PBS点眼组高,神经干短端多膨大,以出芽方式发出细微的新生神经纤维芽。结论 PACAP38能促进兔三叉神经节细胞增生及诱导神经突形成,可促进角膜敏感性恢复及角膜神经修复再生。

关键词：垂体腺苷酸环化酶激活肽细胞增生分化神经再生角膜

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有序排列微模板培养角膜基质细胞及其细胞生物学变化

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眼科研究 2010年第8期28卷 699-702页

作者：田振彩陈建苏周平李沁华李晓霞戴静赵秀丽暨南大学附属第一医院眼科暨南大学医学院眼科研究室再生医学教育部重点实验室广州510632 暨南大学生物医学工程系广州510632

目的探讨CO2激光打标机处理的有序排列微模板培养兔角膜基质细胞的生长特征及其细胞生物学变化。方法用CO2激光打标机刻制的聚苯乙烯有序排列微模板培养兔角膜基质细胞,模板沟槽划线间隔距离0.25mm者为窄间隔组,间隔距离1mm者为宽间隔组... 详细信息

目的探讨CO2激光打标机处理的有序排列微模板培养兔角膜基质细胞的生长特征及其细胞生物学变化。方法用CO2激光打标机刻制的聚苯乙烯有序排列微模板培养兔角膜基质细胞,模板沟槽划线间隔距离0.25mm者为窄间隔组,间隔距离1mm者为宽间隔组,平板组作为对照组。将角膜基质细胞悬液以1×105/mL细胞密度接种于培养板中,倒置显微镜下观察细胞生长情况,苏木精-伊红染色观察细胞排列的形态学差异,免疫荧光法检测培养板上细胞的波形蛋白,实时监测显微镜下观察24h窄间隔组细胞的接触指引特性及细胞的动态生长过程。结果培养第1天倒置显微镜下见3组培养细胞贴壁生长状态无明显区别,窄间隔组和宽间隔组细胞逐渐围绕沟槽接触指引生长,表现为有序排列,且窄间隔组较宽间隔组明显。苏木精-伊红染色和免疫荧光染色显示培养的细胞在窄间隔组沟槽的接触指引下呈有序排列,呈现10余层细胞排列的平行板层结构。3组细胞波形蛋白免疫荧光染色均呈阳性反应。实时监测显微镜下可见窄间隔组细胞体部首先贴壁,在接触指引下生长,而细胞在干燥环境下的凋亡始于细胞伪足突起处。结论利用CO2激光打标机制备的有序排列微模板可获得有序排列的角膜基质细胞,有利于在接近生理状态条件下角膜基质层的构建。

关键词：角膜基质细胞有序排列细胞培养微纹理细胞生物学

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灌注动物细胞培养及其在组织工程中的应用进展

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眼科新进展 2010年第5期30卷 486-488页

作者：唐光霞陈建苏暨南大学医学院眼科研究所暨南大学-香港中文大学再生医学教育部重点实验室广东省广州市510632

灌注培养方法是在传统的培养方法基础上发展起来的新的动物细胞的培养方法。目前,组织工程方面有关灌注培养条件下细胞体外生长的研究表明,灌注培养提供的动态培养环境有利于细胞体外生长和增殖,可以得到与活体组织相似的体外组织,用灌... 详细信息

灌注培养方法是在传统的培养方法基础上发展起来的新的动物细胞的培养方法。目前,组织工程方面有关灌注培养条件下细胞体外生长的研究表明,灌注培养提供的动态培养环境有利于细胞体外生长和增殖,可以得到与活体组织相似的体外组织,用灌注培养所得的细胞或组织进行体内移植的成功率较高。灌注培养方法为组织工程的研究和应用开辟了新的前景,本文对灌注动物细胞培养及其在组织工程中的应用研究进展进行综述如下。

关键词：灌注培养组织工程细胞培养

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