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广东省医学会第十九次血液病学学术会议

作者：曹长姝吴琼杨力建李扬秋暨南大学血液病研究所暨南大学医学院解剖学教研室暨南大学血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室暨南大学血液病研究所暨南大学血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室暨南大学第一附属医院血液科

目的急性T细胞白血病(T-acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是一类生物学特征异质性非常大的疾病,南T系前体细胞发生恶性转化致使造血系统病变的恶性肿瘤.临床应用标准的化疗方案治疗后,由于化疗药物的副作用和复发患者产生抗药性,...

目的急性T细胞白血病(T-acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是一类生物学特征异质性非常大的疾病,南T系前体细胞发生恶性转化致使造血系统病变的恶性肿瘤.临床应用标准的化疗方案治疗后,由于化疗药物的副作用和复发患者产生抗药性,均使得治疗效果不甚理想.3,5-二羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮(3,5-hydroxy-6,7,3',4'-tetrameth-oxyflavone,DHTMF)是从中草药臭灵丹中提取的具有抗肿瘤活性的多甲氧基黄酮类化合物.在前期的研究中,我们发现DHTMF可以通过内源性的线粒体凋亡通路抑制伊马替尼耐药的K562R细胞增殖和诱导细胞凋亡.

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利巴韦林抗白血病细胞株K562和U937增殖、凋亡的机制的研究

利巴韦林抗白血病细胞株K562和U937增殖、凋亡的机制的研究

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广东省医学会第十九次血液病学学术会议

作者：秦恋岸卢育洪杨力建朱锦灿李扬秋暨南大学附属第一医院血液科暨南大学医学院血液病研究所暨南大学附属第一医院血液科暨南大学医学院血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室

目的通过体外实验研究利巴韦林对白血病细胞株K562和U937增殖、凋亡以及eIF4E、cyclinD1 (CCND1)、c-myc等基因表达水平的影响，探讨利巴韦林抗白血病作用的相关机制。方法 (1)在K562、U937白血病细胞株培养液中加入不同浓度的利巴韦...

目的通过体外实验研究利巴韦林对白血病细胞株K562和U937增殖、凋亡以及eIF4E、cyclinD1 (CCND1)、c-myc等基因表达水平的影响，探讨利巴韦林抗白血病作用的相关机制。方法 (1)在K562、U937白血病细胞株培养液中加入不同浓度的利巴韦林作为实验组，药物空白及细胞空白分别作为对照。培养24 h、48 h、72 h时收集各组细胞，用CCK8法检测细胞的OD值，各组不同时间点的生长抑制率按公式计算：GS％=[1-(As-Ab)/(Ac-Ab)]×100％ (As、Ac、Ab分别为实验、药物空白及细胞空白组的OD值)。用SPSS软件计算72 h IC50值。(2)白光显微镜观察72h IC50利巴韦林浓度下白血病细胞的生长状态。(3) AnnexinV/PI双染法流式细胞仪检测72 h各组细胞凋亡率。

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急淋白血病患者PHTF1及相关基因的表达特点

急淋白血病患者PHTF1及相关基因的表达特点

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第十五届全国实验血液学学术会议

作者：黄欣翁建宇耿素霞陆泽生曾令基钟立业万长春李敏明邓程新廖鹏军杜欣吴秀丽李扬秋广东省人民医院血液科广东省医学科学院暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室

背景我们的前期研究中,揭示BCL11B基因异常表达与人类T细胞肿瘤发生密切相关.BCL11B-siRNA可以诱导白血病T细胞株发生凋亡,并通过基因表达谱分析发现其作用相关的PHTF1(预测同源域转录因子1)基因上调16倍.PHTF1是近年新发现的一个从果... 详细信息

背景我们的前期研究中,揭示BCL11B基因异常表达与人类T细胞肿瘤发生密切相关.BCL11B-siRNA可以诱导白血病T细胞株发生凋亡,并通过基因表达谱分析发现其作用相关的PHTF1(预测同源域转录因子1)基因上调16倍.PHTF1是近年新发现的一个从果蝇到哺乳类动物高度进化保守的基因,作为核转录因子主要参与转录、调控转录和DNA依赖等生命过程.FEM1b是新近鉴定的PHTF1的靶基因,也是一个促凋亡蛋白,其可以通过与Apaf-1(凋亡蛋白酶激活因子-1)相互作用调控凋亡家族.

关键词：急性淋巴细胞白血病 PHTF1基因 FEM1b基因 Apaf-1基因

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急淋白血病患者PHTF1及相关基因的表达特点

急淋白血病患者PHTF1及相关基因的表达特点

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广东省医学会第十九次血液病学学术会议

作者：黄欣翁建宇耿素霞陆泽生曾令基钟立业万长春李敏明邓程新廖鹏军吴秀丽李扬秋杜欣广东省人民医院血液科广东省医学科学院暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室

背景我们的前期研究中，揭示BCL11B基因异常表达与人类T细胞肿瘤发生密切相关.BCL11B-siRNA可以诱导白血病T细胞株发生凋亡，并通过基因表达谱分析发现其作用相关的PHTF1(预测同源域转录因子1)基因上调16倍.PHTF1是近年新发现的一个从...

背景我们的前期研究中，揭示BCL11B基因异常表达与人类T细胞肿瘤发生密切相关.BCL11B-siRNA可以诱导白血病T细胞株发生凋亡，并通过基因表达谱分析发现其作用相关的PHTF1(预测同源域转录因子1)基因上调16倍.PHTF1是近年新发现的一个从果蝇到哺乳类动物高度进化保守的基因，作为核转录因子主要参与转录、调控转录和DNA依赖等生命过程.FEM1b是新近鉴定的PHTF1的靶基因，也是一个促凋亡蛋白，其可以通过与Apaf-1(凋亡蛋白酶激活因子-1)相互作用调控凋亡家族.

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命运分子cNumb在原肠期胚胎的表达及其生物信息学分析

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广东药学院学报 2015年第3期31卷 383-387页

作者：顾取良陈佳园王广徐涛郐一贺杨雪松王丽京广东药学院基础学院广东广州510006 广东药学院血管生物学研究所广东广州510006 暨南大学医学院组织与胚胎学教研室/再生医学教育部重点实验室广东广州510632

目的探讨命运分子c Numb在原肠期胚胎中的表达情况及其基因和编码蛋白的基本生物学特征。方法利用原位杂交技术检测c Numb基因在原肠期鸡胚中的表达情况,同时应用生物学软件和在线平台对c Numb基因及其编码蛋白进行生物信息学分析。结果... 详细信息

目的探讨命运分子c Numb在原肠期胚胎中的表达情况及其基因和编码蛋白的基本生物学特征。方法利用原位杂交技术检测c Numb基因在原肠期鸡胚中的表达情况,同时应用生物学软件和在线平台对c Numb基因及其编码蛋白进行生物信息学分析。结果 c Numb mRNA在鸡胚4期开始表达于原条顶端,随发育过程逐渐扩展至亨氏节、头突和神经管,但表达区域仍相对集中。Numb基因在不同物种中具有较高保守性,c Numb编码的蛋白属于胞内蛋白,包含磷酸酪氨酸相互作用结构域和多个潜在磷酸化位点,可参与调节多种细胞生物学过程。结论通过生物信息学分析获得了c Numb基因及其蛋白的生物学特征,为进一步研究Numb在胚胎神经发育中的调控机制奠定了基础。

关键词： Numb 胚胎发育生物信息学分析

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Transwell 接触共培养促进单散iPSCs 生长及分化

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中国病理生理杂志 2014年第8期30卷 1404-1409页

作者：刘庆郭永龙郭晓令连瑞玲陈建苏暨南大学附属第一医院眼科广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 医学院眼科研究所广东广州510632

目的：观察Transwell接触共培养促进单散人诱导多能干细胞（inducedpluripotentstemcells， iPSCs）生长及分化的作用。方法：将1～2代牛角膜内皮细胞（corneal endothelial cells， CECs）接种在Transwell 小室底面培养8 h后，应用Accu... 详细信息

目的：观察Transwell接触共培养促进单散人诱导多能干细胞（inducedpluripotentstemcells， iPSCs）生长及分化的作用。方法：将1～2代牛角膜内皮细胞（corneal endothelial cells， CECs）接种在Transwell 小室底面培养8 h后，应用Accutase消化及40μm过滤处理获得单散iPSCs，将其接种到已有CECs的Transwell小室内共培养14 d，前3 d使用mTeSR1培养基，第4天开始用含10％胎牛血清的低糖DMEM培养基。分别进行实时荧光定量聚合酶链式反应（ real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction ， qPCR ）、免疫荧光、死活细胞染色及碱性磷酸酶（ alkaline phosphatase ， ALP）染色，对iPSCs多能特性表达及分化进行鉴定。设定单散iPSCs共培养组为实验组，常规培养iPSCs组为对照组（一），非共培养单散iPSCs组为对照组（二）。结果：培养牛CECs形态呈典型的六边形铺路石样外观。人iPSCs呈克隆样生长，共培养3 d后iPSCs贴壁呈单散细胞生长，免疫荧光检测未分化标志Nanog和Oct4呈阳性。 qPCR检测Nanog、Oct4和Sox2 mRNA表达，实验组与对照组（一）比较差异无统计学意义（P＞0.05）。死活细胞染色显示，实验组死细胞明显减少，与对照组（二）比较差异有统计学意义（P＜0.01）。共培养14 d后，人iPSCs形态比较均一，呈多边形，体积增大，无明显克隆团块；ALP染色阴性；免疫荧光染色ZO-1、AQP1和CD31表达阳性，CD34和CD133表达阴性。 qPCR检测Oct4、Nanog和Sox2 mRNA表达明显下调，与对照组（一）比较差异有统计学意义（P＜0．01）。结论：与牛CECs共培养可增强人单散iPSCs活性，使iPSCs形态上向内皮样细胞转化，表达部分CECs的标志。 Transwell接触共培养模型可以促进单散iPSCs生长及分化。

关键词：诱导多能干细胞角膜内皮细胞 Transwell接触共培养

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脂肪干细胞的三维球形培养

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中国组织工程研究 2014年第6期18卷 872-879页

作者：王婵戴应郭永龙杨艳刘庆陈建苏暨南大学再生医学教育部重点实验室广东省广州市510632 暨南大学医学院眼科研究所广东省广州市510632

背景:大多哺乳类细胞在正常生理状态下多以三维结构存在,为还原细胞本身在体内的自然状态,很多研究者开始尝试在体外对细胞进行三维培养,球形培养是一种常见的三维培养模式。目的:尝试用3种不同的方法在体外对人脂肪干细胞进行球形培养... 详细信息

背景:大多哺乳类细胞在正常生理状态下多以三维结构存在,为还原细胞本身在体内的自然状态,很多研究者开始尝试在体外对细胞进行三维培养,球形培养是一种常见的三维培养模式。目的:尝试用3种不同的方法在体外对人脂肪干细胞进行球形培养,并观察其生物学特征。方法:对提取的脂肪来源细胞进行表面Marker流式检测以及成脂成骨诱导鉴定后,证实为脂肪干细胞。先后用低黏附培养法、hanging-drop培养法和Eppendorf管培养法3种方法在体外对脂肪干细胞进行球形培养,对3种方法形成球形的特点进行比较分析,并通过Imagej软件计算出3组多细胞球体的平均面积,利用Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Live&Dead Cells试剂盒对3组多细胞球体进行活力检测。结果与结论:①通过流式细胞术鉴定细胞表型标志物,其中CD29,CD44,CD59完全阳性,同时成脂成骨诱导也为阳性,证实提取的细胞为脂肪干细胞。3代以内脂肪干细胞多呈长梭形,并克隆状生长。②低黏附培养法、hanging-drop培养法、Eppendorf管培养法均可使脂肪干细胞聚集成球形生长,但所成多细胞球形有所差异。低黏附培养法所形成的细胞球形大小不一,不易控制;而hanging-drop培养法和Eppendorf管培养法均可使脂肪干细胞形成大小均一的球形,但在大小和形成时间上有所不同。③3种不同方法所形成的球形细胞均保持较好的细胞活力。

关键词：干细胞脂肪干细胞诱导分化球形培养活力低黏附培养 hanging-drop培养 Eppendorf管培养国家自然科学基金

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兔角膜内皮细胞球形培养的活性和细胞表型

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中华实验眼科杂志 2014年第9期32卷 786-790页

作者：杨艳刘庆郭永龙王婵傅婷陈建苏暨南大学第一临床医学院眼科广州510632 暨南大学第一临床医学院再生医学教育部重点实验室广州510632 暨南大学第一临床医学院眼科研究所广州510632

背景组织工程角膜内皮层的构建和细胞注射疗法需要足够数量的角膜内皮细胞（CECs）,因此如何在体外培养大量高活性的角膜内皮种子细胞是当前亟需解决的问题. 目的建立兔CECs高活性三维（3D）球形培养方法,探索培养细胞的生物学特性. ... 详细信息

背景组织工程角膜内皮层的构建和细胞注射疗法需要足够数量的角膜内皮细胞（CECs）,因此如何在体外培养大量高活性的角膜内皮种子细胞是当前亟需解决的问题. 目的建立兔CECs高活性三维（3D）球形培养方法,探索培养细胞的生物学特性. 方法酶消化法分离和培养兔CECs并进行传代,经低黏附振动培养法产生兔CECs球,倒置相差显微镜下观察培养细胞的形态;采用扫描电子显微镜观察CECs球的表面超微结构;用吖啶橙染色法鉴定CECs球中细胞的活性;采用CCK-8试剂盒检测细胞的吸光度（A450）值,判断细胞的增生情况.将CECs球接种到6孔细胞培养板贴壁培养1周,球形培养的细胞为球形培养组,常规培养的细胞为常规培养组.采用免疫荧光法检测闭锁小带蛋白1（ZO-1）和Na＋/K＋-ATP酶在细胞中的表达.结果经球形培养的CECs呈聚集生长,培养1周细胞形态为六角形或多边形,融合成单层,呈铺路石状排列;扫描电子显微镜下可见兔CECs球体周围有细胞爬出,未长散的细胞球中细胞与细胞之间结合紧密,球体表面凹凸不平.吖啶橙染色表明,细胞球中90％细胞呈绿色荧光;球形培养组细胞平均A450值为1.524±0.013,常规培养组细胞平均A450值为1.265±0.021,球形培养组细胞增生值明显增加,2个组间差异有统计学意义（t=-3.436,P=0.010）.免疫荧光检测表明,培养的细胞中ZO-1和Na＋/K＋-ATP酶阳性细胞膜对FITC呈绿色荧光,细胞核DAPI染色呈蓝色荧光.结论 CECs的3D球形培养方法培养的细胞可保持细胞的高活性、高增生能力和细胞表型,为构建组织工程角膜内皮及细胞疗法提供了更好的角膜内皮种子细朐.

关键词：角膜内皮细胞球形培养三维细胞活性细胞表型

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实时定量PCR检测慢性粒细胞白血病患者Shh、Smo基因的表达水平

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第三军医大学学报 2014年第3期36卷 267-269页

作者：朱华民李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广州510632 广东医学院附属医院急救中心广东湛江524001 暨南大学再生医学教育部重点实验室广州510632

目的建立Hedgehog信号通路功能性基因Shh和功能性受体蛋白Smo基因的定量检测方法,并分析其在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者中的表达水平。方法利用实时定量PCR检测20例CML患者和作为正常对照(8例)的健康人外周血... 详细信息

目的建立Hedgehog信号通路功能性基因Shh和功能性受体蛋白Smo基因的定量检测方法,并分析其在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者中的表达水平。方法利用实时定量PCR检测20例CML患者和作为正常对照(8例)的健康人外周血细胞中Shh、Smo基因的表达水平,以β2微球蛋白(β2-M)基因作为内对照。结果 CML组Shh、Smo表达水平均明显高于正常对照组(P<0.05)。结论成功建立Shh、Smo基因的定量检测方法;Shh、Smo基因在CML中高表达。

关键词： Shh Smo基因慢性粒细胞白血病实时定量PCR 基因表达

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CARMA1-BCL10-MALT1调节T细胞增殖分化作用及其在T细胞肿瘤中的改变情况

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免疫学杂志 2014年第9期30卷 837-841页

作者：王旭胡峻岩李扬秋暨南大学再生医学教育部重点实验室广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广州510632 广州医学院第三附属医院急诊科 510150

由CARMA1、BCL10和MALT1 3种蛋白分子形成的CBM复合物,是活化NF-κB的信号转导通路中的重要信号分子,在调控淋巴细胞增殖和分化的过程中具有重要作用。本文主要综述了该信号通路分子的结构和主要在T细胞增殖和分化中的功能的研究新进展... 详细信息

由CARMA1、BCL10和MALT1 3种蛋白分子形成的CBM复合物,是活化NF-κB的信号转导通路中的重要信号分子,在调控淋巴细胞增殖和分化的过程中具有重要作用。本文主要综述了该信号通路分子的结构和主要在T细胞增殖和分化中的功能的研究新进展以及在T细胞肿瘤中的异常改变和相关分子机制。

关键词： CARMA1 BCL10 MALT1 分化 T细胞肿瘤

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