检索结果-内蒙古大学图书馆

基于TCR基因位点的FT-aCGH分析鉴定T-ALL中异常TCR Vβ-IgH重排

细胞与分子免疫学杂志 2012年第5期28卷 533-535页

作者：郑海涛陈少华杨力建李萡吴秀丽李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

目的:鉴定T细胞-急性淋巴母细胞白血病(T-ALL)异常基因重排。方法:利用基于T细胞受体(TCR)基因位点的精细定位的寡核苷酸阵列比较基因组杂交(FT-aCGH)技术分析1例T-ALL样本与对照组基因组DNA的差异,了解7号和14号染色体TCRβ、TCRγ和TC... 详细信息

目的:鉴定T细胞-急性淋巴母细胞白血病(T-ALL)异常基因重排。方法:利用基于T细胞受体(TCR)基因位点的精细定位的寡核苷酸阵列比较基因组杂交(FT-aCGH)技术分析1例T-ALL样本与对照组基因组DNA的差异,了解7号和14号染色体TCRβ、TCRγ和TCRαδ位点上可能的断裂点位置,根据所提供的初步结果,根据断裂点涉及的基因序列设计特异引物,采用连接介导PCR(LM-PCR)和序列分析等方法分析与之发生重排的基因序列。结果:FT-aCGH结果显示所检测T-ALL样本中,各TCR基因位点都存在断裂点,经过LM-PCR和序列分析,以及利用PCR和特异引物检测基因组DNA结果确定了T-ALL克隆为Vα8-Jα22基因重排,并发现了7号染色体在TCRβ基因位点,Vβ20-1基因片段与14号染色体位于免疫球蛋白重链区基因位点的IgHVII-26-2基因片段发生异常重排,形成t(7;14)(q34;q32)染色体易位。结论:利用FT-aCGH和LM-PCR技术在1例T-ALL中发现了一种新的Vβ20-1-IgHVII-26-2异常重排,这种异常重排有可能可以作为该肿瘤克隆的生物标记物。

关键词： TCR基因 FT-aCGH T-ALL 基因重排

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TCRζ缺陷的急性髓细胞白血病病人T细胞中Elf-1、Zap-70和FcεR Iγ基因的表达特点

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免疫学杂志 2012年第9期28卷 825-828页

作者：史丽陈少华杨力建吴秀丽李萡卢育洪郁志沈琦闫小娟李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广州510632 暨南大学医学院第一附属医院血液科广州510632 暨南大学医学院再生医学教育部重点实验室广州510632

目的了解TCRζ缺陷的急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)病人外周血T细胞中Elf-1、Zap-70和FcεR Iγ基因的表达特点。方法采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测10例TCRζ缺陷的AML病人外周血CD3+T细胞中Zap-70... 详细信息

目的了解TCRζ缺陷的急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)病人外周血T细胞中Elf-1、Zap-70和FcεR Iγ基因的表达特点。方法采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测10例TCRζ缺陷的AML病人外周血CD3+T细胞中Zap-70、Elf-1和FcεR Iγ基因的表达情况。以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,10例健康成人作为对照;采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算Zap-70、Elf-1和FcεR Iγ基因的表达水平。结果 TCRζ缺陷的AML病人外周血T细胞中Elf-1基因的表达水平(中位数8.526%)明显低于健康对照组(中位数33.237%)(P<0.001),而FcεR Iγ基因的表达水平(中位数2.571%)则高于健康对照组(中位数0.958%)(P=0.019),Zap-70基因在两组中的表达水平没有显著性差异,但均与TCRζ基因的表达水平呈正相关。结论 TCRζ缺陷的AML病人T细胞中Elf-1基因的低表达可能是导致AML病人TCRζ基因缺陷性表达的原因之一,而FcεR Iγ基因的高表达则可能是在一定程度上缓解了TCRζ基因缺陷性表达所带来的T细胞免疫异常。

关键词： TCRζ缺陷急性髓细胞白血病 Elf-1 Zap-70 FcεR Iγ

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T细胞介导炎症与血液肿瘤发生相关性研究进展

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2012年第2期33卷 111-115页

作者：李扬秋杨力建陈少华暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

慢性炎症是肿瘤发生过程中一个重要因素,越来越多的研究显示T细胞介导炎症与多种肿瘤发生密切相关。本文主要综述近期有关T细胞介导炎症与血液肿瘤发生的相关性及其分子机制的新进展。

关键词： T细胞慢性炎症自身免疫性疾病血液肿瘤肿瘤发生

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职业铅接触工人外周血中GATA-3和T-bet基因表达的变化

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中华劳动卫生职业病杂志 2012年第5期30卷 379-380页

作者：牛宇哲李萡刘薇薇杨志前杨力建陈少华刘思初李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广州510632 广州市第十二人民医院暨南大学医学院再生医学教育部重点实验室广州510632

研究表明．人体内铅蓄积过多会导致机体细胞免疫和体液免疫均受到不同程度的影响。我们前期研究也发现，职业铅接触工人胸腺输出功能明显低于健康人。辅助型T细胞依其所分泌的细胞因子类型及其功能效应可以分为Th1和Th2两种亚型。

关键词： T-bet基因表达职业铅接触 GATA-3 人外周血机体细胞免疫胸腺输出功能铅接触工人细胞因子类

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职业苯接触后外周血中T细胞FcεRIγ基因表达下调

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第7期28卷 743-744页

作者：范静婧陈云玉王婧薷李萡杨力建陈少华巫进明李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 广州市第十二人民医院广东广州510620 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

目的:了解职业苯接触及慢性苯中毒工人外周血中T细胞受体信号传导通路FcεRIγ基因的表达情况。方法:利用实时荧光定量PCR法分别检测22例职业苯接触工人、12例慢性苯中毒工人及9例正常人外周血单个核细胞(PBMC)中FcεRIγ基因表达情况... 详细信息

目的:了解职业苯接触及慢性苯中毒工人外周血中T细胞受体信号传导通路FcεRIγ基因的表达情况。方法:利用实时荧光定量PCR法分别检测22例职业苯接触工人、12例慢性苯中毒工人及9例正常人外周血单个核细胞(PBMC)中FcεRIγ基因表达情况。结果:正常人、职业苯接触及慢性苯中毒工人FcεRIγ基因表达水平的中位数分别为37.50%、12.65%、7.41%,职业苯接触及慢性苯中毒工人FcεRIγ基因表达与正常成人相比均显著下降(P<0.05);尽管慢性苯中毒工人外周血中FcεRIγ基因表达水平降低程度较职业苯接触更为明显,但二者之间无统计学意义(P>0.05)。结论:职业苯接触及慢性苯中毒工人外周血中T细胞FcεRIγ基因表达水平均下调,这种表达异常可能与接触苯后机体细胞免疫功能障碍有关。

关键词：苯 FcεRIγ基因表达实时定量PCR

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异基因免疫治疗促进移植物抗肿瘤效应的探讨

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白血病．淋巴瘤 2012年第1期21卷 3-5,12页

作者：李扬秋暨南大学医学院血液病研究所再生医学教育部重点实验室广州510632

造血干细胞移植后绌胞免疫缺陷是疾病复发的一个重要原因，同时异基因造血干细胞移植也可以认为是一种过继性免疫治疗，能克服受者细胞免疫缺陷和促进移植物抗肿瘤（GVT）效应，清除微小残留病和预防疾病复发。如何提高GVT效应仍需要进... 详细信息

造血干细胞移植后绌胞免疫缺陷是疾病复发的一个重要原因，同时异基因造血干细胞移植也可以认为是一种过继性免疫治疗，能克服受者细胞免疫缺陷和促进移植物抗肿瘤（GVT）效应，清除微小残留病和预防疾病复发。如何提高GVT效应仍需要进一步明确，重点介绍2011年美国血液学会（ASH）年会上相关的新进展。

关键词：造血干细胞移植异基因移植物抗肿瘤免疫疗法过继

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再生障碍性贫血患者外周血中Elf-1基因表达研究

再生障碍性贫血患者外周血中Elf-1基因表达研究

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第八届全国免疫学学术大会

作者：李萡方苏刘思初牛宇哲沈琦杨力建陈少华李扬秋暨南大学医学院血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室

研究背景:Elf-1(E74-like factor 1)是Ets转录因子家族中的一员,为T细胞特异的转录因子,调节T细胞受体信号通路关键分子CD3ζ等基因的表达,在多种自身免疫系统疾病表达异常。目的:本研究目的主要在于了解再生障碍性贫血(AA)患者外周血中... 详细信息

研究背景:Elf-1(E74-like factor 1)是Ets转录因子家族中的一员,为T细胞特异的转录因子,调节T细胞受体信号通路关键分子CD3ζ等基因的表达,在多种自身免疫系统疾病表达异常。目的:本研究目的主要在于了解再生障碍性贫血(AA)患者外周血中T细胞特异性转录因子Elf-1基因表达情况。方法:利用SYB R GreenⅠ荧光定量PCR分别检测21例AA患者和20例健康人外周血单个核细胞的Elf-1基因表达情况,以β2微球蛋白基因(β2m)作为内参,根据相对定量公式(2-△Ct)分别计算AA患者和健康人Elf-1基因表达水平。结果:AA患者和健康人外周血中Elf-1基因表达水平分别为3.95±3.56和2.04±1.32,与健康人相比,AA患者外周血中Elf-1基因表达水平显著高于健康人(P<0.05)。结论:本研究首次报道AA患者外周血中Elf-1基因表达水平的变化,Elf-1基因表达上调可能通过影响TCR信号传导而导致T细胞异常活化,与AA的发生有一定相关性。

关键词：再生障碍性贫血 Elf-1基因

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慢性粒细胞性白血病中TCRζ相关的基因表达研究

慢性粒细胞性白血病中TCRζ相关的基因表达研究

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第八届全国免疫学学术大会

作者：闫小娟査显丰沈琦吴秀丽陈少华李萡杨力建李扬秋暨南大学医学院血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室

研究背景和目的:慢性粒细胞性白血病(CML)病人常伴有免疫功能缺陷,前期研究发现病人T细胞亚家族谱系缺陷、胸腺输出功能低下和T细胞活化缺陷等,同时,病人T细胞中TCRζ链基因表达明显下降,本研究进一步分析调控TCRζ基因相关的3′端非编... 详细信息

研究背景和目的:慢性粒细胞性白血病(CML)病人常伴有免疫功能缺陷,前期研究发现病人T细胞亚家族谱系缺陷、胸腺输出功能低下和T细胞活化缺陷等,同时,病人T细胞中TCRζ链基因表达明显下降,本研究进一步分析调控TCRζ基因相关的3′端非编码区(3′-UT R)的选择性表达和可变剪接因子(ASF/SF-2)表达情况,探讨ASF/SF-2在TCRζ3′-UT R表达过程中的作用;以及与TCRζ存在互补关系的Fcε RIγ基因及其下游ZAP-70基因的表达情况和相关性。方法利用 RT-PCR技术扩增检测14例正常人、40例CML患者、22例缓解期CML病人(CML-CR)的外周血单个核细胞(PBMCs)的TCRζ3′-UT R的表达和不同剪接体存在情况。采用SYB R Green I实时荧光定量PCR检测各组样本TCRζ链基因、Fcε RIγ基因、ASF/SF-2和ZAP-70基因的表达情况,根据公式2-△Ct对各个基因的表达水平进行相对定量分析,并分析各基因表达水平之间的关系。结果:正常人中,均可检测到包含两种剪接体的TCRζ3′-UT R,即野生型TCRζ3′-UT R(906bp)和可变型TCRζ3′-UT R(344 bp),而在CML中,35%样本仅含906 bp的野生型TCRζ3′-UT R,与全部含有两种剪接体的正常人和CML-CR样本均有显著性差异。CML患者PBMCs的TCRζ基因表达水平明显低于正常人和CML-CR的患者,与之具有互补关系的Fcε RIγ链基因表达水平则相应增高,同时,伴随着可变剪接因子ASF/SF-2的表达水平高于正常人和CML-CR患者。根据CML病人所含有TCRζ3′-UT R类型特点,将病人分为两个亚组,仅含野生型TCRζ3′-UT R的WT+AS-CML组和同时含有两种TCRζ3′-UT R剪接体的WT+AS+CML组。与WT+AS+CML组比较,WT+ASCML组的ASF/SF-2和Fcε RIγ链基因的表达水平均明显较高,而WT+AS-CML的TCRζ链和ZAP-70基因的表达数平也较WT+AS+CML高,,但未有统计学意义。结论:CML病人TCRζ表达缺陷,可能与可变性剪接因子ASF/SF-2高表达而调控可变性TCRζ3′-UT R表达相关。Fcε RIγ基因表达上调在一定程度上可能自身调节TCRζ表达缺陷情况。

关键词：慢性粒细胞白血病 TCRζ3′-UTR ASF/SF-2基因 FcεRIγ基因 ZAP-70基因

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再生障碍性贫血患者外周血T细胞中CD3ζ基因3′-UT R剪接体表达及单核苷酸多态性研究

再生障碍性贫血患者外周血T细胞中CD3ζ基因3′-UT R剪接体表达及...

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第八届全国免疫学学术大会

作者：方苏李萡牛宇哲杨力建陈少华李扬秋暨南大学医学院血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室

研究背景:再生障碍性贫血(AA)是功异异常活化T细胞介导的以造血组织为靶器官的自身免疫性疾病。T细胞受体(TCR)和CD3分子形成的复合物将细胞外的抗原刺激通过信号传导途径转化为T细胞功能活化。CD3ζ链由于其含有3个ITAM基序,因而在整个... 详细信息

研究背景:再生障碍性贫血(AA)是功异异常活化T细胞介导的以造血组织为靶器官的自身免疫性疾病。T细胞受体(TCR)和CD3分子形成的复合物将细胞外的抗原刺激通过信号传导途径转化为T细胞功能活化。CD3ζ链由于其含有3个ITAM基序,因而在整个TCR信号传导过程中起重要作用。3′端非编码区(3′-UT R)在基因表达的转录后调控方面起了重要的作用,包括调节mRNA向胞浆中转运、控制翻译效率和mRNA的稳定性等。CD3ζ基因3′-UT R发生可变性剪切形成2种不同剪接体:344 bp大小的可变剪切型和906 bp大小的野生型剪接体。目的:基于前期研究发现AA患者中CD3ζ基因表达水平明显高于健康人,本研究进一步分析影响CD3ζ分子稳定性的3′-UT R的选择性表达及单核苷酸多态性情况。方法:利用 RT-PCR方法扩增20例AA患者和14例健康人外周血单个核细胞中CD3ζ基因3′-UT R的不同剪接体,经琼脂糖凝胶检测PCR目的片段,同时按照凝胶回收试剂盒操作说明进行PCR产物的纯化后并对目的片段进行核苷酸序列分析。结果:14例健康人中均可检测到CD3基因3′-UT R中2种不同的剪接体,而在AA患者中,有4例患者未检测到344 bp可变剪切型3’-UT R。核苷酸序列分析显示有8例AA患者外周血中CD3基因3′-UT R可检测到(1481T>A)位点基因单核苷酸多态性。结论:本研究率先提供了AA患者外周血中CD3基因3′-UT R不同类型剪接体表达以及单核苷酸位点多态性情况,研究结果提示AA患者TCR信号传导异常可能与参与调控相关信号传导分子的影响因素有关。进一步的研究将比较野生型和1481T>A型样本之间T细胞相关基因表达和病人T细胞免疫状态的异同性。

关键词：再生障碍性贫血 CD3ζ基因 3′-UTR 单核苷酸多态性

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CML抗原相关TCR Vα13/β21和Vα18/Vβ21基因修饰T细胞的研究

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第八届全国免疫学学术大会

作者：査显丰陈少华杨力建郁志卢育洪吴秀丽李萡李扬秋暨南大学医学院血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室

研究背景:肿瘤患者体内存在肿瘤相关抗原特异的CTL,鉴定和克隆其T细胞受体(TCR)基因,将其转染至正常T细胞中,能够赋予正常T细胞特异的识别和杀伤肿瘤细胞功能。前期我们从慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血中克隆出寡克隆性TCR Vα13、V... 详细信息

研究背景:肿瘤患者体内存在肿瘤相关抗原特异的CTL,鉴定和克隆其T细胞受体(TCR)基因,将其转染至正常T细胞中,能够赋予正常T细胞特异的识别和杀伤肿瘤细胞功能。前期我们从慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血中克隆出寡克隆性TCR Vα13、Vα18和Vβ21基因,并成功地构建TCR Vα13-I RES-Vβ21和TCR Vα18-I RES-Vβ21真核双基因表达载体。目的:本研究目的是分析慢性粒细胞白血病(CML)相关抗原特异性TCR基因修饰T细胞后体外特异性细胞毒活性。方法:收集HLA-A11阳性正常人外周血单个核细胞,利用磁珠分选法分选出CD3+T细胞;利用核转染技术将TCR重组质粒转染至正常人T细胞,流式细胞术检测TCR基因修饰T细胞中外源TCRα和β链基因的表达情况;利用Calein-AM释放试验检测TCR基因修饰T细胞的特异性细胞杀伤作用;利用实时荧光定量PCR技术检测与靶细胞混合培养后转基因修饰T细胞的颗粒酶和穿孔素基因的表达情况;利用ELISPOT检测INF-γ的分泌情况。结果:TCR Vα13-I RES-Vβ21和TCR Vα18-I RES-Vβ21质粒转染正常人T细胞培养24h后,流式细胞术检测结果显示TCR Vα13/Vβ21表达率为(43.4±10.3)%,TCR Vα18/Vβ21表达率为(39.6±5.0)%;细胞毒性试验结果显示TCR Vα13/Vβ21+T细胞对HLA-A11+K562细胞杀伤效率显著性高于对p EGFP-N3+K562细胞(p=0.002)和HLA-A11+K293细胞(p=0.001)的杀伤效率;对HLA-A11+K562细胞杀伤效率TCR Vα13/Vβ21+T细胞显著高于TCR Vα18/Vβ21+T细胞(p=0.005)和p I RES+T细胞(p=0.003);与HLA-A11+K562细胞混合培养后,TCR Vα13/Vβ21+T细胞颗粒酶和穿孔素基因的表达率明显高于TCR Vα18/Vβ21+T细胞和p I RES+T细胞;HLA-A11+K562细胞刺激后转染重组质粒T细胞INF-γ的分泌水平:TCR Vα13/Vβ21+T细胞(168±5.8/2×104细胞)>TCR Vα18/Vβ21+T细胞(100±12.3/2×104细胞)>p I RES+T细胞(58±1.8/2×104细胞)(p<0.05)。结论:TCR Vα13/β21基因修饰T细胞对CML细胞株HLA-A11+K562细胞显示出特异的细胞毒活性,为探讨CML相关或特异性抗原为基础的特异性TCR转基因修饰T细胞的抗CML免疫治疗提供基础资料。

关键词：慢性粒细胞白血病 T细胞受体基因转导抗白血病免疫

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