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Ad-HIF-1α-Trip肌肉注射对大鼠缺血肢体血管新生和血液灌注的影响

第三军医大学学报 2012年第15期34卷 1518-1522页

作者：李明琰何文凯陈建威王月刚吴平生广州医学院第一附属医院心内科广州510120 南方医科大学附属南方医院心内科广州510512 暨南大学附属华侨医院心内科广州510630

目的研究重组腺病毒低氧诱导因子-1α三突变体(the recombinant adenovirus containing the triple-pointmutants HIF1-αgene,Ad-HIF-1α-trip)基因对大鼠缺血后肢血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达、血管新生及血流灌注的影响。方法 48只2月龄雄性Wistar大鼠(体质量0.200～0.250 kg)建立急性左后肢缺血模型,应用随机数字表法随机分成4组(n=12):生理盐水组(Saline组),腺病毒空载体组(Ad-Null组)、重组腺病毒低氧诱导因子-1α组(Ad-HIF-1α)、Ad-HIF-1α-trip组。分别在建模后即刻肌注生理盐水、Ad-Null、Ad-HIF-1α、Ad-HIF-1α-trip0.5 ml,病毒滴度4×109PFU。术后7 d,行Real-time PCR检测缺血组织HIF-1α及VEGF的表达情况。术前及基因转染后即刻、7、14、28 d对大鼠后肢进行对比超声(contrast enhanced ultrasound,CEU)检查,基因转染后28 d处死动物行病理切片CD31免疫组化微血管密度(microvascular density,MVD)计数。结果基因转染后7 d,在mRNA水平HIF-1α及VEGF在Ad-HIF-1α-trip组大鼠缺血后肢肌肉组织中表达最强[HIF-1α:(2.576±0.019);VEGF:(2.498±0.031),P<0.05];CEU结果显示:Ad-HIF-1α-trip组基因转染后大鼠缺血后肢血流灌注改善明显优于其他各组{基因转染28 d A×β标化值:Saline vs Ad-Null vs Ad-HIF-1αvs Ad-HIF-1α-trip:[(0.529±0.045)vs(0.535±0.062)vs(0.642±0.056)vs(0.895±0.049),P<0.05];CD31免疫组化示:转染后28 d,Ad-HIF-1α-trip组缺血后肢肌肉组织MVD计数明显优于其他各组[Saline vs Ad-Null vs Ad-HIF-1αvs Ad-HIF-1α-trip:(82.316±19.258)vs(89.662±21.374)vs(175.248±31.736)vs(213.426±48.073),P<0.05]}。结论 Ad-HIF-1α-Trip在大鼠缺血肢体肌肉组织能有效表达,促进缺血肢体的血管新生及血流灌注。

关键词： Ad-HIF-1α-trip 血管新生血流灌注

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原儿茶酸对M146L细胞APP mRNA表达的抑制作用

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中药材 2012年第11期35卷 1813-1816页

作者：薛小燕章正周晓雯周星罗焕敏赣州市人民医院江西赣州341000 暨南大学-香港大学脑功能与健康联合实验室广东广州510632 暨南大学医学院药理学系广东广州510632 暨南大学附属第一医院广东广州510632

目的:探讨原儿茶酸对M146L细胞APP mRNA表达的影响,寻找潜在的具有抑制Aβ分泌的中药单体,以达到治疗阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的目的。方法:体外培养稳定转染人类阿尔茨海默病β淀粉样蛋白前体(amyloidβ-protein prec... 详细信息

目的:探讨原儿茶酸对M146L细胞APP mRNA表达的影响,寻找潜在的具有抑制Aβ分泌的中药单体,以达到治疗阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的目的。方法:体外培养稳定转染人类阿尔茨海默病β淀粉样蛋白前体(amyloidβ-protein precursor,APP)基因及突变型早老素1(prsenilin-1,PS1)基因的CHO(Chinese hamsterovary cells)细胞系(M146L),使之高效产生β淀粉样蛋白42(amyloidβ-protein,Aβ42),建立Aβ42过度表达的细胞模型。加入待筛选的药物原儿茶酸,用MTT比色法检测不同浓度的原儿茶酸(0.25、0.5、1.0、2.0 mmol/L)对M146L细胞的毒性作用,应用RT-PCR法检测原儿茶酸对M146L细胞APP mRNA表达的影响。结果:浓度0.25、0.5、1.0mmol/L的原儿茶酸对M146L细胞存活率无明显影响,不具有细胞毒性作用,对M146L细胞APP mRNA表达有抑制作用,并呈剂量依赖性。结论:一定剂量的原儿茶酸对M146L细胞APP mRNA表达有明显的抑制作用,其机制有待进一步研究。

关键词：原儿茶酸阿尔茨海默病 APP β淀粉样蛋白

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纳米金增强顺铂对肝癌HepG2细胞的细胞毒作用

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肿瘤 2012年第9期32卷 675-680页

作者：巫青潘运龙覃莉赵晓旭丁晖皮江傅岳武胡杨志蔡继业暨南大学附属第一医院普外科广东广州510630 暨南大学医学院组织胚胎学教研室广东广州510632 暨南大学生命科学技术学院纳米生物技术实验室广东广州510632

目的:观察纳米金(gold nanoparticles,GNPs)是否能够增强顺铂(cisplatin,DDP)对肝癌HepG2细胞的细胞毒作用。方法:实验分成GNPs、DDP、GNPs+DDP和不加药对照组。采用上述各组药物处理HepG2细胞后,MTT法检测各组细胞的增殖抑制率,FCM检... 详细信息

目的:观察纳米金(gold nanoparticles,GNPs)是否能够增强顺铂(cisplatin,DDP)对肝癌HepG2细胞的细胞毒作用。方法:实验分成GNPs、DDP、GNPs+DDP和不加药对照组。采用上述各组药物处理HepG2细胞后,MTT法检测各组细胞的增殖抑制率,FCM检测细胞凋亡率和细胞周期分布情况,电感耦合等离子体原子发射光谱仪定量检测各组细胞内的铂含量,原子力显微镜下观察细胞表面超微结构的变化。结果:GNPs(1.0nmol/L)与DDP(0.5、1.0或2.0μg/mL)联合作用后,HepG2细胞的增殖抑制率[(26.19±0.87)%、(36.17±1.33)%和(39.86±1.38)%]均明显高于相应浓度的单纯DDP(0.5、1.0或2.0μg/mL)组[(20.82±0.76)%、(23.76±1.04)%和(25.66±1.16)%],差异有统计学意义(P<0.01)。GNPs(1.0nmol/L)联合DDP(2.0μg/mL)组(GNPs+DDP组)的细胞凋亡率[(22.43±3.24)%]明显高于单纯DDP(2.0μg/mL)组(DDP组)[(14.17±2.48)%](P<0.05),S期细胞百分比[(59.05±6.02)%]也较单纯DDP(2.0μg/mL)组[(40.37±2.83)%]明显增加(P<0.01)。GNPs+DDP组HepG2细胞内的DDP含量[(212.21±12.3)μg/L]较DDP组[(108.67±7.74)μg/L]明显增加(P<0.01)。原子力显微镜下观察发现GNPs+DDP组HepG2细胞与DDP组相比,细胞膜表面孔径增大、粗糙度增加,细胞核饱满程度下降。结论:GNPs可增加DDP在HepG2细胞内的积聚,使细胞阻滞于S期,增强DDP对细胞增殖的抑制作用,诱导细胞凋亡。

关键词：肝肿瘤肿瘤治疗方案顺铂纳米金细胞,HepG2

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诱导多能干细胞在眼科的研究进展

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中华实验眼科杂志 2012年第7期30卷 662-666页

作者：招志毅(综述) 陈建苏(审校) 暨南大学附属第一医院眼科、暨南大学医学院眼科研究所、再生医学教育部重点实验室广州510632

2006年诱导多能干细胞（iPSCs）的建立被誉为是干细胞研究领域的重大突破，使得进行患者体细胞来源的干细胞治疗成为可能。近年的研究表明，动物和人的成纤维细胞、B淋巴细胞、神经干细胞、头发角质细胞、胰腺细胞、脐带基质和羊膜的间... 详细信息

2006年诱导多能干细胞（iPSCs）的建立被誉为是干细胞研究领域的重大突破，使得进行患者体细胞来源的干细胞治疗成为可能。近年的研究表明，动物和人的成纤维细胞、B淋巴细胞、神经干细胞、头发角质细胞、胰腺细胞、脐带基质和羊膜的间充质细胞均可重编程成为iPSCs并可通过一定的诱导分化为特定类型的细胞，为多种疾病的特异性治疗提供了新的方法。而iPSCs研究在眼科领域的研究也取得了长足进展。在眼科，iPSCs诱导后可分化为视网膜色素上皮（RPE）细胞、感光细胞和其他视网膜细胞，从而为治疗视网膜退行性病变奠定了基础。与传统的干细胞治疗不同，iPSCs移植治疗相应的疾病避免了传统干细胞治疗所存在的道德伦理及免疫排斥等限制，具有较好的应用前景。就iPSCs的概念、诱导策略及方法、在眼科领域的研究现状、研究中存在的问题及应用前景等方面进行综述。

关键词：诱导多能干细胞视网膜变性性疾病眼科

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共聚焦显微镜下观察糖尿病兔角膜细胞改变

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实用医学杂志 2012年第8期28卷 1253-1255页

作者：何艳花陈剑王彦平周清张婷杨筱曦张静辉暨南大学附属第一医院眼科广州市510630 暨南大学医学院病理生理教研室 510632

目的:通过对糖尿病兔角膜连续活体观察,研究糖尿病角膜病理变化。方法:四氧嘧啶静脉注射12只新西兰大白兔,复制糖尿病疾病模型;另外3只为空白对照。用共聚焦显微镜在四氧嘧啶给药前和糖尿病模型建成后4、8、12周对角膜进行观察。结果:... 详细信息

目的:通过对糖尿病兔角膜连续活体观察,研究糖尿病角膜病理变化。方法:四氧嘧啶静脉注射12只新西兰大白兔,复制糖尿病疾病模型;另外3只为空白对照。用共聚焦显微镜在四氧嘧啶给药前和糖尿病模型建成后4、8、12周对角膜进行观察。结果:随疾病模型建立时间的延长,糖尿病兔角膜出现上皮细胞脱落增多,前、后基质细胞数目减少,内皮多形性细胞增加,内皮数目减少。结论:糖尿病兔角膜病变,上皮细胞、基质细胞、内皮细胞随病程时间延长而减少。

关键词：糖尿病角膜共聚焦显微镜

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小环肽C＊HSDGIC＊对中波紫外线诱导的视网膜色素人上皮细胞凋亡的影响

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中国病理生理杂志 2012年第5期28卷 914-918页

作者：丁勇程欢欢余榕捷陈建苏暨南大学附属第一医院眼科广东广州510632 暨南大学生物工程研究所广东广州510632 暨南大学医学院眼科研究室广东广州510632

目的:探讨垂体腺苷酸环化酶激活多肽(PACAP)的衍生物小环肽C*HSDGIC*(CHC)对中波紫外线(UVB)诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡的影响。方法:Western blotting检测人RPE细胞PACAP 1型受体(PAC1受体)表达;RPE细胞接受0.2 J/cm2UVB照射... 详细信息

目的:探讨垂体腺苷酸环化酶激活多肽(PACAP)的衍生物小环肽C*HSDGIC*(CHC)对中波紫外线(UVB)诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡的影响。方法:Western blotting检测人RPE细胞PACAP 1型受体(PAC1受体)表达;RPE细胞接受0.2 J/cm2UVB照射,随后实验组给予含不同浓度CHC的无血清培养基培养,对照组给予无血清培养基培养;CCK-8法检测CHC对RPE细胞活性的影响;流式细胞术Annexin-V/PI双染检测RPE细胞凋亡情况,JC-1染色检测线粒体膜电位。结果:Western blotting显示RPE细胞表达PAC1受体,CCK-8法显示CHC促细胞活性的最佳浓度为100μmol/L,细胞活性比对照组增加(34.23±3.39)%(P<0.05),抗凋亡最佳浓度也为100μmol/L,细胞活性比对照组增加(20.10±1.48)%(P<0.05)。流式细胞仪分析显示,100μmol/L CHC能使UVB照射后凋亡细胞比例下降(5.63±1.49)%,线粒体去极化细胞比例下降(5.2±0.5)%(P<0.05)。结论:人RPE细胞存在PAC1受体,小环肽C*HSDGIC*对人RPE细胞有促进活性和拮抗凋亡的作用。

关键词： C＊HSDGIC＊紫外线B 细胞凋亡视网膜色素上皮

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左肾原发性滑膜肉瘤1例

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重庆医学 2012年第26期41卷 2791-2791,F0003页

作者：李立梁蔚波赖彩永钟红兴广州医学院第四附属医院泌尿外科广州511447 暨南大学附属第一医院泌尿外科广州510632

1临床资料患者,女,44岁,反复无痛性全程肉眼血尿2个月,加重1d,无寒战、发热、尿频、尿急、尿痛、腰痛、腹痛及会阴放射痛,无眼睑及全身水肿。一般情况可。查体：生命体征平稳,心、肺、腹部无异常,双肾区无隆起,压痛及叩痛（-）,双输尿... 详细信息

1临床资料患者,女,44岁,反复无痛性全程肉眼血尿2个月,加重1d,无寒战、发热、尿频、尿急、尿痛、腰痛、腹痛及会阴放射痛,无眼睑及全身水肿。一般情况可。查体：生命体征平稳,心、肺、腹部无异常,双肾区无隆起,压痛及叩痛（-）,双输尿管行程压痛（-）,膀胱区不隆起,外生殖器未见异常。血、尿常规检查未见明显异常。超声检查：左肾形态失常,下极见一个囊实性光团,

关键词：滑膜肉瘤原发性左肾肉眼血尿尿常规检查临床资料全身水肿生命体征

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纳米HA／CS支架穿“靴”复合软骨样细胞修复兔关节软骨和软骨下骨缺损

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中山大学学报（医学科学版） 2012年第3期33卷 281-286页

作者：李劼若查振刚郇松玮刘宁张国威吴昊林宏生姚平张嘉晴屠美郑力恒谭文成暨南大学附属第一医院骨科广东广州510630 暨南大学骨科疾病研究所广东广州510630 暨南大学医学院广东广州510630 暨南大学理工学院广东广州510630 澳门仁伯爵综合医院澳门仁和医疗中心澳门999078

【目的】观察把骨髓间质干细胞(BMSCs)诱导成的软骨细胞与纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架(nano-HA/CSscaffold)通过特殊的穿"靴"结构复合构建而成组织工程软骨复合体的可行性,并观察此复合体修复兔膝关节软骨及软骨下骨缺损的能... 详细信息

【目的】观察把骨髓间质干细胞(BMSCs)诱导成的软骨细胞与纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架(nano-HA/CSscaffold)通过特殊的穿"靴"结构复合构建而成组织工程软骨复合体的可行性,并观察此复合体修复兔膝关节软骨及软骨下骨缺损的能力。【方法】原位复合和冷冻干燥相结合的方法制备nano-HA/CS支架,用聚四氟乙烯制作成圆柱形"靴"结构。把BMSCs经软骨诱导液诱导成软骨细胞后,接种于穿"靴"的nano-HA/CS支架底部,把细胞-支架复合物置入成软骨条件培养液中培养2周。扫描电镜观察nano-HA/CS支架结构及细胞-支架复合体结构。30只新西兰大白兔的股骨髁制造直径4 mm、深8 mm的骨软骨缺损,随机分为实验组、对照组、空白组,于缺损处分别植入经穿"靴"结构复合的软骨支架复合体、不经穿"靴"结构复合的软骨支架复合体,空白组仅造缺损,4、12周后取材初步观察修复情况。【结果】BMSCs经软骨诱导液诱导后转化成软骨细胞;制备的nano-HA/CS支架支架孔隙率为92%,平均孔径为125μm,与软骨细胞有较好的粘附性。大体观察实验组和对照组缺损均有类软骨样组织生长,空白组缺损明显,见纤维组织生长。苏木精-伊红染色切片观察实验组软骨缺损部分软骨细胞修复,成骨区部分骨样细胞修复,两者耦合处部分交叉,修复缺损程度及成骨区和成软骨区界面耦合情况明显优于对照组和空白组。3组的大体评分和软骨组织学评分统计分析,实验组优于对照组和空白组。【结论】BMSCs具有成软骨潜能,nano-HA/CS支架具有较好的细胞相容性;软骨细胞与nano-HA/CS支架经过穿"靴"结构可成为组织工程软骨复合体,并初步证实有修复兔软骨及软骨下骨缺损的能力。

关键词：纳米羟基磷灰石/壳聚糖软骨细胞软骨和软骨下骨缺损

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EN2蛋白在前列腺癌组织的表达及其意义

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中华实验外科杂志 2012年第6期29卷 1053-1055页

作者：赖彩永蒋光瑜李立梁蔚波陈洁黄伟佳苏泽轩南方医科大学研究生院广州510515 暨南大学附属第一医院临床病理科暨南大学附属第一医院泌尿外科广州医学院第三附属医院泌尿外科

目的探讨同源异型盒蛋白EN2在前列腺癌的表达差异及其意义。方法选取48例前列腺癌、22例高级别前列腺内瘤病（HGPIN）及48例前列腺增生症（BPH），采用免疫组织化学法检测上述组织中的EN2蛋白表达差异。选取其中14例前列腺癌及15例BPH... 详细信息

目的探讨同源异型盒蛋白EN2在前列腺癌的表达差异及其意义。方法选取48例前列腺癌、22例高级别前列腺内瘤病（HGPIN）及48例前列腺增生症（BPH），采用免疫组织化学法检测上述组织中的EN2蛋白表达差异。选取其中14例前列腺癌及15例BPH，采用Westernblot法检测EN2蛋白表达差异。结果免疫组织化学法显示EN2蛋白在前列腺癌中表达增高，主要见于前列腺腺上皮细胞质内及部分细胞核。前列腺癌、HGPIN和BPH组织中EN2蛋白表达阳性率分别为87．50％、31．81％和27．08％，采用Kruskal—WallisH检验，差异有统计学意义（P〈0．05）。EN2在高、中、低分化前列腺癌患者中阳性率分别为75．00％、88．24％和88．90％。Westernblot法检测显示EN2蛋白在前列腺癌组织的表达比BPH组织增高3倍。结论同源异型盒蛋白EN2在前列腺癌表达增高，其中以中、低分化腺癌中明显，并能为前列腺上皮细胞分泌。

关键词：同源异型盒 EN2 前列腺癌免疫组织化学

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下颌后牙单端桥基牙骨支持组织应力的动力学分析

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中国病理生理杂志 2012年第3期28卷 524-527页

作者：黄珊唐亮潘燕环殷仲达暨南大学附属第一医院口腔科广东广州510632 暨南大学医学院口腔医学系广东广州510632 暨南大学理工学院土木工程系广东广州510632

目的:建立下颌后牙单端固定桥及其支持组织的三维有限元模型,采用瞬态动力学分析,比较单端桥修复前后基牙骨支持组织的应力分布规律。方法:用ANSYS 10.0软件对模型施以不同部位和方向的冲击载荷,分析单端桥基牙骨支持组织的应力大小、... 详细信息

目的:建立下颌后牙单端固定桥及其支持组织的三维有限元模型,采用瞬态动力学分析,比较单端桥修复前后基牙骨支持组织的应力分布规律。方法:用ANSYS 10.0软件对模型施以不同部位和方向的冲击载荷,分析单端桥基牙骨支持组织的应力大小、分布及变化规律。结果:斜向载荷下,基牙骨支持组织存在明显应力集中;单端桥修复后,应力峰值77.676 MPa位于近缺隙侧基牙的皮质骨颈部;一个咀嚼周期末存在应力残余,其值不显著。结论:单端桥近缺隙侧基牙承受主要应力,载荷方向影响应力大小及分布,应力峰值小于下颌骨应变极限强度。

关键词：单端桥牙槽骨动态载荷三维有限元法应力

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