目的观察小檗碱对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织p38MAPK-STAT3信号通路相关基因及蛋白表达的调控作用,探讨小檗碱防治NAFLD的作用机制。方法取SPF级雄性SD大鼠24只,适应性喂养1周后,随机分为正常组、模型组和小檗碱组(100 mg·kg^(-1)),每组8只。除正常组给予基础饲料外,其余两组均采用高脂饮食喂养,建立大鼠NAFLD模型,在施以造模因素的同时,小檗碱组灌胃给药,8周后对肝组织行HE染色和油红O染色。全自动生化仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST);ELISA法检测血清及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量RT-PCR法检测肝组织p38MAPK、STAT3 m RNA表达量;Western Blotting法检测肝组织蛋白p38MAPK、STAT3及p-p38MAPK、p-STAT3表达水平。结果 8周高脂饮食成功诱导建立了NAFLD实验动物模型,HE染色和油红O染色证实大鼠模型肝组织脂质蓄积严重。与正常组比较,模型组大鼠血清TG、TC含量明显升高(P<0.05),肝组织及血清SOD活力明显降低(P<0.01),MDA水平明显升高(P<0.01),p38MAPK、STAT3 m RNA及p38MAPK、p-p38MAPK、STAT3、p-STAT3蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,小檗碱组大鼠血清TG、TC含量明显降低(P<0.05),肝组织及血清SOD活力明显升高(P<0.05,P<0.01),MDA水平明显降低(P<0.05,P<0.01),p38MAPK、STAT3 m RNA及p-p38MAPK、p-STAT3蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。结论小檗碱可以改善NAFLD模型大鼠肝脏脂肪变性,降低其血清及肝组织氧化应激因子水平,其机制可能是通过激活肝脏p38MAPK-STAT3信号通路相关基因及其蛋白磷酸化水平,改善氧化应激而发挥作用。
目的应用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)蛋白组学技术分析2型糖尿病脾虚证的差异蛋白质谱,从唾液蛋白质水平上阐释2型糖尿病脾虚证的证候本质和生物学机制。方法收集糖尿病脾虚...
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目的应用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)蛋白组学技术分析2型糖尿病脾虚证的差异蛋白质谱,从唾液蛋白质水平上阐释2型糖尿病脾虚证的证候本质和生物学机制。方法收集糖尿病脾虚证34例和正常健康组45例唾液样本,分离、鉴定两组的差异蛋白质,并利用生物信息学软件进行分析。结果两组共鉴定到1757个蛋白。以差异倍数≥1.5或≤0.67为筛选标准,共筛选出有意义的差异蛋白155个,其中上调蛋白107个,下调蛋白48个,基于本体论(Gene Ontology,GO)分析显示差异蛋白主要富集在免疫反应、物质代谢、氧气运输等功能分类上;KEGG(Kyoto Encycl-opedia of Genes and Genomes)通路分析差异蛋白主要涉及补体系统代谢通路、脂肪降解和吸收通路、维生素降解和吸收通路等。结论应用iTRAQ技术筛选出可能与2型糖尿病脾虚证发生发展相关的多个差异蛋白,且表明主要与机体免疫系统功能和物质代谢途径有密切关系,为从脾论治2型糖尿病脾虚证的相关机理和本质研究提供重要参考依据。
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