检索结果-内蒙古大学图书馆

英国医学杂志中文版 2011年第2期14卷 112-113页

作者：周玉民胡国平王大礼王少毅王宇骏刘志刚胡锦兴石喆彭公永刘升明吕嘉春郑劲平王健钟南山冉丕鑫广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所呼吸疾病国家重点实验室广州市荔湾区第二人民医院广州市环保局广州市环境监测中心站荔湾区环保局暨南大学第一附属医院广州医学院流行病学研究室美国霍普金斯大学医学院呼吸及重症医学科

目的评价中国慢性阻塞性肺疾病（COPD）的社区综合干预的疗效。设计组群随机对照试验。地点两个社区的8个居委会。对象共1062名40-89岁居民中，872名符合入选标准和排除标准（其中101例COPD患者和771例非COPD患者）被组群随机分配到干... 详细信息

目的评价中国慢性阻塞性肺疾病（COPD）的社区综合干预的疗效。设计组群随机对照试验。地点两个社区的8个居委会。对象共1062名40-89岁居民中，872名符合入选标准和排除标准（其中101例COPD患者和771例非COPD患者）被组群随机分配到干预社区或对照社区，分别接受COPD的综合干预措施或日常的医疗卫生服务。

关键词：慢性阻塞性肺疾病社区综合干预随机对照研究疾病预防中国 COPD患者管理广东

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不同消化分离方法分离人羊膜间充质干细胞效果比较

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中国病理生理杂志 2010年第5期26卷 1033-1037页

作者：肖盼陈剑王彦平吴静郭娴吟杨筱曦刘小勇暨南大学附属第一医院眼科广东广州510632 暨南大学医学院病理生理学系广东广州510632 暨南大学医学院眼科研究室广东广州510632

目的:比较不同消化分离方法提取人羊膜间充质干细胞(HAMSCs)的分离效果,以供选择一种更有效的分离方法。方法:将新鲜羊膜组织分成4片6cm×6cm大小的组织块,采用4种不同方法进行消化分离:第1组:先刮除+胶原酶Ⅱ组;第2组:先刮除+胶原... 详细信息

目的:比较不同消化分离方法提取人羊膜间充质干细胞(HAMSCs)的分离效果,以供选择一种更有效的分离方法。方法:将新鲜羊膜组织分成4片6cm×6cm大小的组织块,采用4种不同方法进行消化分离:第1组:先刮除+胶原酶Ⅱ组;第2组:先刮除+胶原酶Ⅳ组;第3组:先剪碎+胶原酶Ⅱ组;第4组:先剪碎+胶原酶Ⅳ组。对这4组原代培养HAMSCs进行存活数、形态学观察比较,第3代HAMSCs抗原检测及成脂成骨诱导分化实验。结果:第1组和第2组的HAMSCs存活数高于第3组和第4组(P<0.05)。第1组和第2组的HAMSCs成份较第3组和第4组纯净,后2组夹杂着一些团状的人羊膜上皮细胞(HAECs)。抗原结果显示CD29、CD44、CD73、CD90、CD105表达阳性,CD31、CD34、CD45、HLA-DR表达阴性,Vimentin、SSEA-3、SSEA-4、OCT-4、telom-erase结果阳性。成脂成骨诱导分化实验成功。结论:通过先将人羊膜用胰蛋白酶+EDTA消化液消化后,再将HAECs刮除干净,然后剪碎再用胶原酶消化的改进方法对HAMSCs保护较好,较易提取,获取细胞量和纯度均较传统方法高。胶原酶Ⅱ和胶原酶Ⅳ2种消化酶对HAMSCs的提取影响不大。

关键词：羊膜间充质干细胞细胞分离

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有序排列微模板培养角膜基质细胞及其细胞生物学变化

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眼科研究 2010年第8期28卷 699-702页

作者：田振彩陈建苏周平李沁华李晓霞戴静赵秀丽暨南大学附属第一医院眼科暨南大学医学院眼科研究室再生医学教育部重点实验室广州510632 暨南大学生物医学工程系广州510632

目的探讨CO2激光打标机处理的有序排列微模板培养兔角膜基质细胞的生长特征及其细胞生物学变化。方法用CO2激光打标机刻制的聚苯乙烯有序排列微模板培养兔角膜基质细胞,模板沟槽划线间隔距离0.25mm者为窄间隔组,间隔距离1mm者为宽间隔组... 详细信息

目的探讨CO2激光打标机处理的有序排列微模板培养兔角膜基质细胞的生长特征及其细胞生物学变化。方法用CO2激光打标机刻制的聚苯乙烯有序排列微模板培养兔角膜基质细胞,模板沟槽划线间隔距离0.25mm者为窄间隔组,间隔距离1mm者为宽间隔组,平板组作为对照组。将角膜基质细胞悬液以1×105/mL细胞密度接种于培养板中,倒置显微镜下观察细胞生长情况,苏木精-伊红染色观察细胞排列的形态学差异,免疫荧光法检测培养板上细胞的波形蛋白,实时监测显微镜下观察24h窄间隔组细胞的接触指引特性及细胞的动态生长过程。结果培养第1天倒置显微镜下见3组培养细胞贴壁生长状态无明显区别,窄间隔组和宽间隔组细胞逐渐围绕沟槽接触指引生长,表现为有序排列,且窄间隔组较宽间隔组明显。苏木精-伊红染色和免疫荧光染色显示培养的细胞在窄间隔组沟槽的接触指引下呈有序排列,呈现10余层细胞排列的平行板层结构。3组细胞波形蛋白免疫荧光染色均呈阳性反应。实时监测显微镜下可见窄间隔组细胞体部首先贴壁,在接触指引下生长,而细胞在干燥环境下的凋亡始于细胞伪足突起处。结论利用CO2激光打标机制备的有序排列微模板可获得有序排列的角膜基质细胞,有利于在接近生理状态条件下角膜基质层的构建。

关键词：角膜基质细胞有序排列细胞培养微纹理细胞生物学

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PACAP38对兔角膜瓣术后三叉神经节细胞及角膜神经生长的影响

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眼科研究 2010年第8期28卷 694-698页

作者：赵秀丽陈建苏余榕捷丁勇郑佩娥李晓霞田振彩戴静暨南大学附属第一医院眼科暨南大学医学院眼科研究室再生医学教育部重点实验室广州510632 暨南大学生物医学工程系广州510632

目的观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP38)对培养的兔三叉神经节细胞及角膜瓣术后角膜神经生长的影响。方法从2周龄新西兰白兔中分离三叉神经节细胞,并在神经元基础培养液中进行培养。培养24h后在培养液中分别加入1μmol/LPACAP38(A组)... 详细信息

目的观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP38)对培养的兔三叉神经节细胞及角膜瓣术后角膜神经生长的影响。方法从2周龄新西兰白兔中分离三叉神经节细胞,并在神经元基础培养液中进行培养。培养24h后在培养液中分别加入1μmol/LPACAP38(A组)、0.1μmol/LPACAP38(B组),C组培养液中加入PBS。1周后行抗神经纤维丝蛋白(NF200)免疫荧光染色鉴别培养的三叉神经节细胞。27只新西兰白兔右眼行角膜瓣手术,并分为3组,术后1d分别以10μmol/LPACAP38、5μmol/LPACAP38或PBS点眼,共8周,行角膜敏感度测定和NF200免疫荧光染色,评价术后不同时间角膜神经的修复情况。结果 PACAP38培养的三叉神经节细胞有较多神经细胞存活,伸出突触并交织呈网状,A组神经细胞存活最多。角膜瓣手术的3个组角膜敏感度随着术后时间的延长逐渐增加(Ftime=58.196,P=0.00),10μmol/LPACAP38点眼组角膜敏感度恢复最快。10μmol/LPACAP38点眼组和5μmol/LPACAP38点眼组角膜敏感度值明显高于PBS点眼组,差异均有统计学意义(P=0.000,P=0.005)。角膜神经染色示10μmol/LPACAP38点眼组角膜神经密度较5μmol/LPACAP38点眼组和PBS点眼组高,神经干短端多膨大,以出芽方式发出细微的新生神经纤维芽。结论 PACAP38能促进兔三叉神经节细胞增生及诱导神经突形成,可促进角膜敏感性恢复及角膜神经修复再生。

关键词：垂体腺苷酸环化酶激活肽细胞增生分化神经再生角膜

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自体血小板血浆对角膜基质细胞生物学功能的影响

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眼科新进展 2010年第8期30卷 705-708,713页

作者：戴静陈建苏李晓霞田振彩赵秀丽暨南大学附属第一医院眼科暨南大学医学院眼科研究室再生医学教育部重点实验室广东省广州市510632

目的观察自体血小板血浆对体外培养的角膜基质细胞生物学功能的影响。方法采用二次离心法分离兔全血获得富血小板血浆（platelet—richplasma，PRP）和贫血小板血浆（platelet—poorplasma，PPP）；原代培养兔角膜基质细胞，取第3代细... 详细信息

目的观察自体血小板血浆对体外培养的角膜基质细胞生物学功能的影响。方法采用二次离心法分离兔全血获得富血小板血浆（platelet—richplasma，PRP）和贫血小板血浆（platelet—poorplasma，PPP）；原代培养兔角膜基质细胞，取第3代细胞用于实验。在角膜基质细胞中分别加入体积分数5．0％的PRP和PPP，倒置显微镜下观察细胞生长情况，对比PRP和PPP对角膜基质细胞的促生长情况，以确定自体血小板血浆中促增殖作用的最有效成分。采用不同浓度的PRP（体积分数分别为2．5％、5．0％、10．0％）作用于角膜基质细胞，以及采用不同浓度PRP（体积分数分别为2．5％、5．0％、20．0％）联合FBS作用于角膜基质细胞，CCK-8法检测PRP、PRP联合FBS促进角膜基质细胞增殖的作用。对不同浓度（体积分数分别为2．5％、5．0％）PRP作用的角膜基质细胞进行免疫荧光法检测其表达的平滑肌型肌动蛋白（a-smooth muscle actin，a-SMA）．结果加入体积分数5．0％PRP组促细胞增殖作用强于加入体积分数5．0％PPP组。PRP在体积分数为2．5％～10．0％时，均能促进角膜基质细胞的增殖，其中体积分数为5．0％时作用最强；体积分数5．0％PRP与FBS联合作用时的吸光度值随时间的变化均明显高于两者单独作用时的吸光度值（均为P〈0．05），而体积分数20．0％的PRP与FBS联合作用时的吸光度值随时间的变化低于FBS单独作用时的吸光度值。不同浓度PRP处理的角膜基质细胞均可见a-SMA的阳性表达。结论低浓度的PRP能有效促进角膜基质细胞的增殖及活化，有利于角膜基质损伤的快速修复，促进伤口愈合，防止严重并发症的发生。

关键词：自体血小板血浆富血小板血浆贫血小板血浆角膜基质细胞兔

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人羊膜上皮细胞的分离、纯化及其生物学特性研究

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广东医学 2010年第16期31卷 2055-2057页

作者：金玲陈剑吴静徐锦堂周清刘小勇赵松滨广东省深圳市宝安区人民医院眼科 518101 暨南大学附属第一医院眼科广州510630 暨南大学医学院眼科研究室广州510630

目的体外分离人羊膜上皮细胞并纯化,对体外培养的人羊膜上皮细胞的生物学特性进行相关研究。方法取足月剖宫产的人羊膜组织,经胰蛋白酶、胶原酶和Dnase酶消化后,采用差异黏附法获得纯度高的羊膜上皮细胞,接种于含10%胎牛血清的DMEM/F12... 详细信息

目的体外分离人羊膜上皮细胞并纯化,对体外培养的人羊膜上皮细胞的生物学特性进行相关研究。方法取足月剖宫产的人羊膜组织,经胰蛋白酶、胶原酶和Dnase酶消化后,采用差异黏附法获得纯度高的羊膜上皮细胞,接种于含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中进行原代和传代培养,用HE染色法对培养细胞进行形态学观察,并采用免疫组化法检测细胞角蛋白CK7、CK8、CK18在体外培养的人羊膜上皮细胞中的表达。结果经不同的消化酶消化和差异黏附法筛选后能获得纯度较高的人羊膜上皮细胞,在体外培养条件下人羊膜上皮细胞呈上皮细胞特有的铺路石样外观,并能连续传代8～10次,细胞角蛋白CK7、CK8、CK18在其胞浆中呈阳性表达。结论人羊膜上皮细胞能在体外成功分离、纯化、培养并增殖,为人羊膜上皮细胞的进一步研究及其在细胞移植和组织工程中的应用奠定了实验基础。

关键词：人,羊膜上皮细胞细胞培养 CK7 CK8 CK18

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兔角膜重度碱烧伤后异种猫前板层角膜移植重建角膜眼表

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眼科新进展 2010年第2期30卷 105-108,114页

作者：吴连胜陈建苏徐锦堂丁勇唐光霞郑佩娥雷自鸣暨南大学医学院眼科研究室再生医学教育部重点实验室广东省广州市510632 暨南大学附属第一临床医学院眼科广东省广州市510632 暨南大学医学院病理教研室广东省广州市510632 侏罗纪生化有限公司广东省恩平市529458 浙江省温州市龙湾区第一人民医院眼科

目的研究猫新鲜前板层角膜移植治疗兔右眼角膜重度碱烧伤的疗效。方法将16只5个月龄的健康雄性新西兰白兔右眼制作重度角膜碱烧伤模型,随机分成A、B两组,每组各8只兔,其中A组为猫(4只)→兔异种前板层角膜移植组,植片直径为11.0mm,植床... 详细信息

目的研究猫新鲜前板层角膜移植治疗兔右眼角膜重度碱烧伤的疗效。方法将16只5个月龄的健康雄性新西兰白兔右眼制作重度角膜碱烧伤模型,随机分成A、B两组,每组各8只兔,其中A组为猫(4只)→兔异种前板层角膜移植组,植片直径为11.0mm,植床直径为10.0mm;B组未行手术。A组兔术后及B组造模后用500g.L-1葡萄糖及复方氯霉素滴术眼直至处死,记录两组疗效指数,并分别于术后1个月、2个月、3个月取材进行术眼角膜病理学及扫描电镜检查。结果3个月内A组8只角膜碱烧伤兔经异种猫前板层角膜移植后,7只移植角膜保持透明,1只出现局限性角膜混浊和角膜新生血管;而B组未手术的8只兔中出现角膜白斑、新生血管4只,角膜溃疡、穿孔3只,角膜溶解穿孔1只,并且有4只发生睑球粘连等并发症。A、B两组治疗后1个月、2个月、3个月平均疗效指数差异均有统计学意义(均为P<0.05)。A组透明角膜中组织学及扫描电镜下的结构特征清晰;B组兔角膜中有明显的角膜水肿和炎性细胞浸润,组织学及扫描电镜下的结构特征显示细胞连接混乱、消失。B组扫描电镜还提示随着时间的延长,上皮细胞部分生长、增多,细胞连接差,角膜上皮排列紊乱;角膜内皮细胞数量明显减少或无,细胞连接混乱、消失。结论用异种猫新鲜前板层材料对重度兔碱烧伤角膜进行板层移植手术治疗在一定程度上可减轻伤后炎症反应,防止严重并发症的发生,维持眼表结构并可达到一定的光学治疗效果。

关键词：异种角膜移植前板层角膜移植角膜碱烧伤兔猫

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第2期25卷 136-138页

作者：陈少华李扬秋杨力建周羽竝李萡张学利罗更新暨南大学医学院血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室暨南大学医学院生化教研室暨南大学第一附属医院血液科广东广州510632

目的:分析急性早幼粒细胞白血病(APL)患者外周血TCRVα和Vβ克隆性增殖T细胞及CDR3序列特点。方法:利用RT-PCR法扩增1例APL患者外周血单个核细胞中29个TCRVα基因和24个Vβ基因CDR3,阳性PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析确定其CDR... 详细信息

目的:分析急性早幼粒细胞白血病(APL)患者外周血TCRVα和Vβ克隆性增殖T细胞及CDR3序列特点。方法:利用RT-PCR法扩增1例APL患者外周血单个核细胞中29个TCRVα基因和24个Vβ基因CDR3,阳性PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析确定其CDR3长度,了解其克隆性;寡克隆的PCR产物再进行CDR3区序列分析。结果:该例APL患者外周血T细胞分别在TCRVα6、Vα10和Vβ23亚家族中出现寡克隆性增殖T细胞,经序列分析显示TCRVα6、Vα10和Vβ23亚家族基因序列分别为Vα6NJα17、Vα10NJα35和Vβ23NDβ1NJβ2.7,其CDR3区氨基酸序列分别为CAMRENSAGNK,YLCAGDELLWECA,CASSSKWAG-GTYEQY,该3个TCR基因已被GenBank收录(登陆号:EU544946、EU544947和EU647219)。结论:APL患者外周血T细胞出现的TCRVα6、Vα10和Vβ23克隆性增殖T细胞可能是机体对抗白血病细胞所引起的抗原特异性免疫反应;这3个独特TCR重排序列将进一步作为开展APL特异性免疫治疗研究提供资料。

关键词： APL TCR CDR3 T细胞克隆

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培养的兔羊膜上皮细胞构建角膜表层移植片的研究

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眼科研究 2009年第4期27卷 265-268页

作者：金玲陈剑吴静徐锦堂周清赵松滨暨南大学附属第一医院眼科广州510632 暨南大学医学院眼科研究室

目的应用培养的兔羊膜上皮细胞(AECs)体外构建复层上皮细胞-角膜基质移植材料,探讨利用AECs重建角膜表层的可行性。方法取妊娠晚期新西兰大白兔(27～28孕周)的羊膜,制成AECs单细胞悬液,用含血清和表皮生长因子(EGF)的DMEM/F12培养液培... 详细信息

目的应用培养的兔羊膜上皮细胞(AECs)体外构建复层上皮细胞-角膜基质移植材料,探讨利用AECs重建角膜表层的可行性。方法取妊娠晚期新西兰大白兔(27～28孕周)的羊膜,制成AECs单细胞悬液,用含血清和表皮生长因子(EGF)的DMEM/F12培养液培养、传代,利用免疫组织化学单克隆抗体AE1/AE3、AE5检测培养的AECs中细胞角蛋白ck3/12的表达;将体外培养的2～3代兔AECs种植在新鲜兔角膜基质上,利用气-液界面培养法使之复层化,体外构建复层上皮细胞-角膜基质移植材料,进行光学显微镜和扫描电镜观察,并进行免疫组织化学测定。结果体外培养的兔AECs呈现单克隆抗体AE1/AE3、AE5表达阳性,AECs在新鲜兔角膜基质上能形成形态类似于正常角膜上皮细胞的3～5层复层结构,且复层化后的上皮细胞单克隆抗体AE5表达阳性。结论应用培养的AECs能成功构建类似角膜表层的复层上皮细胞-角膜基质移植材料,AECs可能成为重建角膜表层的一种新的细胞来源。

关键词：羊膜上皮细胞角膜上皮细胞细胞培养气-液界面培养法

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兔眼结膜上皮细胞和成纤维细胞的培养及冻存

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广东医学 2009年第2期30卷 171-173页

作者：苗晓晴陈剑吴静徐锦堂王彦平暨南大学附属第一医院眼科广州510632 暨南大学医学院眼科研究室广州510632 暨南大学病理生理学教研室再生医学国家重点研究室广州510632

目的探讨体外培养兔眼结膜上皮细胞和成纤维细胞的最佳方法,为进一步研究结膜的生物学特性和结膜重建提供基础。方法分别用组织块法培养结膜上皮细胞和混合消化法培养结膜基质细胞,用倒置显微镜观察其生长方式和形态特征;收集第2代细胞,... 详细信息

目的探讨体外培养兔眼结膜上皮细胞和成纤维细胞的最佳方法,为进一步研究结膜的生物学特性和结膜重建提供基础。方法分别用组织块法培养结膜上皮细胞和混合消化法培养结膜基质细胞,用倒置显微镜观察其生长方式和形态特征;收集第2代细胞,-80℃冻存。结果兔眼结膜上皮细胞和上皮下成纤维细胞可以在体外成功培养,结膜上皮细胞呈圆形或多角形,成纤维细胞呈长梭形;冻存细胞1个月后复苏成功率达80%。结论组织块法和混合消化法培养可成功获得结膜上皮细胞和上皮下成纤维细胞。

关键词：结膜上皮细胞成纤维细胞细胞培养冻存复苏

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